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核苷化合物的化學(xué)研究及

藥理學(xué)研20XX年XX月20XX年XX月多年的企業(yè)咨詢顧問(wèn)經(jīng)驗(yàn)，經(jīng)過(guò)實(shí)戰(zhàn)驗(yàn)證可以落地執(zhí)行的卓越管理方案，值得您下載擁有蟲草屬真菌中核苷類化合物的化學(xué)研究及藥理學(xué)研究簡(jiǎn)介楊淑芳1靳向東1王麗香2王晶3(1吉林省蠶業(yè)科學(xué)研究所2永吉縣牧業(yè)管理局3永吉縣科學(xué)技術(shù)館)蟲草屬(Cordyceps)真菌為子囊菌綱麥角菌科的壹類藥用真菌。此屬真菌種類有350余種。于我國(guó)作為藥用的有冬蟲夏草(C.sinensis)、蛹蟲草(C.militaris)、亞香棒蟲草(C.hawksii)及蟬花菌(C.sobolifera)等。此外，四川涼山蟲草(C.liangshanensisZangLinetHu)、山西香棒蟲草(C.barnesii)、古尼蟲草(C.gunnii)等也有少量分布。1蟲草屬真菌中核苷類化合物的化學(xué)研究簡(jiǎn)介1.1蟲草屬真菌中核苷類化學(xué)成分關(guān)于蟲草屬真菌中核苷類化學(xué)成分的研究報(bào)道較多，主要集中于冬蟲夏草、蛹蟲草及其發(fā)酵菌絲體。其中核苷類化合物包括蟲草素、腺苷、鳥苷、尿苷、腺嘌呤、尿嘌呤、次黃嘌呤、次黃嘌呤核苷等，它們的化學(xué)結(jié)構(gòu)如下:圖1蟲草屬真菌中核苷類化合物的結(jié)構(gòu)Cunningham和Frederiksen等于50年代首次報(bào)道了從蛹蟲草的培養(yǎng)液中分離出核苷類抗菌素——蟲草素且發(fā)現(xiàn)其顯著的抗癌活性，引起了人們對(duì)蟲草屬真菌中核苷類化合物的廣泛重視，新的核苷類物質(zhì)不斷被發(fā)現(xiàn)。徐文豪等利用強(qiáng)酸性離子交換樹脂、大孔吸附樹脂和硅膠柱層析從西藏產(chǎn)冬蟲夏草的子座中分離得次黃嘌呤核苷、胸腺嘧啶、尿嘧啶和雜有鳥嘌呤的次黃嘌呤;從蟲體中得到微量次黃嘌呤、鳥嘌呤、腺嘌呤和腺苷。劉靜明等利用Dowex-I〔氯型〕樹脂柱從蛹蟲草菌絲中分離得到腺嘌呤、腺苷及蟲草素。劉柯等利用硅膠柱色譜、制備液相、制備薄層等方法從人工培養(yǎng)的蛹蟲草子實(shí)體的乙醇提取物中分離得到蟲草素、腺苷、N"壹甲基腺苷、05壹乙?；x草素、N"-[0壹（乙酰胺甲酰）氧乙基〕腺苷等5個(gè)核苷類化合物。1.2蟲草屬真菌中核苷類化合物的含量測(cè)定目前，對(duì)蟲草屬真菌中核苷類化合物的含量測(cè)定主要采用高效液相法（HPLC）法和薄層色譜法。2000年版中國(guó)藥典采用HPLC法測(cè)定冬蟲夏草中腺苷的含量。目前采用HPLC法對(duì)蛹蟲草中核苷類化合物含量進(jìn)行測(cè)定的報(bào)道主要有：蔣寧等采用正交實(shí)驗(yàn)對(duì)蟲草素和腺苷的提取方法作了考查；周洪英等對(duì)蛹蟲草九個(gè)菌株蟲草素含量進(jìn)行了測(cè)定；陳安徽等對(duì)古尼擬青霉小孢變種核苷類成分進(jìn)行了分析。自20世紀(jì)60年代薄層色譜掃描法（TLCS）問(wèn)世以來(lái),其發(fā)展更為迅速,于化學(xué)及藥學(xué)等領(lǐng)域均得到了廣泛應(yīng)用。TLCS已成為定性定量分析的有效手段。如劉靜明等將蛹蟲草菌絲和冬蟲夏草樣品各2.0g（40目）置50mL圓底燒瓶中加20%乙醇溶液40mL回流提取5h,趁熱抽濾,20%乙醇洗3次，合且濾液,濃縮至2mL拌以硅膠H1.5g,室溫干燥，干法裝柱,90%乙醇洗至80mL減壓濃縮,然后用50%乙醇定容至2.0mL作為樣品溶液。用日本島津CS-910雙波長(zhǎng)薄層掃描儀，以氯仿：乙酸己酯：異丙醇：水=8:2:6:0.5為展開(kāi)劑,經(jīng)反射法鋸齒掃描得到蛹蟲草菌絲和冬蟲夏草蟲草菌素的含量分別為0.007%~0.022%和0.007%。近來(lái)，高效毛細(xì)管電泳法也被用于冬蟲夏草的質(zhì)量控制。李紹平等用此方法測(cè)定了天然和人工冬蟲夏草中腺苷、尿苷和鳥苷的含量，且考察其變化。呂鵬等探討了不同提取方法對(duì)蛹蟲草提取液質(zhì)量的影響。研究表明，超聲波處理有利于提高提取液中多種物質(zhì)的含量，考慮到操作的簡(jiǎn)便性，于實(shí)際應(yīng)用中（尤其是樣品量較大時(shí))能夠考慮采用超微粉碎的方法制備蛹蟲草提取液。汪宇等比較了天然蛹蟲草及其培養(yǎng)物中核苷類化合物的含量。于HV-301高效毛細(xì)管電泳儀上進(jìn)行定量分析深用石英毛細(xì)管柱，以pH9.0的40mmol-L-1硼砂溶液作為電極緩沖液；分離電壓為16KV；檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。結(jié)果，天然蛹蟲草中核苷類化合物主要集中于子座部分。人工培養(yǎng)蛹蟲草子座和菌絲中蟲草素的含量分別是天然蛹蟲草子座中的5.04倍和10.85倍;液體培養(yǎng)蛹蟲草菌絲中腺嘌呤、腺苷、尿苷、鳥苷含量均高于固體培養(yǎng)蛹蟲草子座。結(jié)論：天然蛹蟲草及其培養(yǎng)物中核苷類化合物的種類和含量具有較大的差異，高效毛細(xì)管電泳法能夠用于蛹蟲草的定量分析，具有分離度高、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確,樣品消耗少等特點(diǎn)。對(duì)比研究顯示：人工培養(yǎng)的蟲草菌絲及子座中核苷類化合物的含量多數(shù)接近、有的甚至超過(guò)了天然蟲草。尤其是人工培養(yǎng)的蛹蟲草菌絲及子座中蟲草素的含量明顯高于天然蟲草,這就為把人工培養(yǎng)蟲草作為天然蟲草的代用品提供了理論依據(jù).2蟲草屬真菌中核苷類化合物的藥理學(xué)研究簡(jiǎn)介2.1蟲草素的藥理作用2.1.1抑菌作用Cuningham等第壹個(gè)報(bào)道蟲草菌素對(duì)45株枯草桿菌〔Bacillussubtilis(Ehrenberg)Cohn〕中的43株有抑制作用。對(duì)不同細(xì)菌的有效抑菌濃度有壹定差異,如對(duì)壹株枯草桿菌NCTC6752的最低抑制濃度為10Ug/mL;對(duì)鳥結(jié)核桿菌(MycobacteriumaviumChester和牛型結(jié)核分枝桿菌的最低抑制濃度則分別為100pg/mL和17pg/mLo1952年,鄭藻杰等仍觀察到,蟲草菌素能抑制鏈球菌、鼻疽桿菌、炭疽桿菌、豬出血性敗血癥桿菌及葡萄球菌等病原菌的生長(zhǎng)。此外,蟲草菌素對(duì)石膏樣小芽孢癬菌、羊毛狀小芽孢癬菌及須瘡癬菌等皮膚致病性真菌亦有抑制作用。2.1.2抗腫瘤作用現(xiàn)已報(bào)道，蟲草菌素對(duì)鼠艾氏腹水癌、人鼻咽癌KB細(xì)胞、人表皮樣疣和人宮頸癌Hela細(xì)胞等皆具有明顯的拮抗抑制作用。對(duì)KB細(xì)胞的最低致毒濃度為10~25ug/mL。有文獻(xiàn)報(bào)道，蟲草菌素對(duì)Lewis肺癌也有抑制作用,且其副作用小。2.1.3抑制病毒蟲草菌素可抑制壹種腦炎病毒(李廷寶等,1976)，對(duì)人體免疫缺陷型病毒HIVI型的侵染及其反轉(zhuǎn)錄酶的活性亦有抑制作用。2.1.4殺蚊蟲作用Bellomcik等研究報(bào)道，蟲草菌素對(duì)尖音庫(kù)蚊(Culexpipiens)、埃及伊蚊(Aedesaegypti)和另壹種伊蚊(A.atropalpus)的幼蟲有明顯致死作用。對(duì)白紋伊蚊(Aedesalbopictus)進(jìn)行組織培養(yǎng)的結(jié)果表明，蟲草菌素的作用機(jī)理是引起核變性和細(xì)胞質(zhì)崩解。2.1.5其他作用蟲草菌素能抑制蛋白質(zhì)激酶活性,抗核苷磷酸化酶對(duì)糖基的裂解。對(duì)體液免疫有調(diào)節(jié)作用,能增加脾臟重量、加速肝臟核酸和蛋白質(zhì)更新速度,具有抗缺氧、增加心肌營(yíng)養(yǎng)血流量及降低血清膽固醇和B酯蛋白的作用，能明顯增加犬冠脈血流量,降低冠脈、腦及外圍血管阻力,且對(duì)核酸的甲基化有抑制作用。Guarino等認(rèn)為,蟲草菌素作為腺苷的結(jié)構(gòu)類似物作用于腺苷參和的各種反應(yīng),尤其對(duì)嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成系統(tǒng)中的第壹步反應(yīng) PRPP(5’-磷酸核糖-1-焦磷酸)的合成抑制作用最強(qiáng),這主要是因?yàn)?’-三磷酸蟲草菌素強(qiáng)烈

地抑制了PRPP地抑制了PRPP合成的關(guān)鍵酶?磷酸核糖焦磷酸激酶的活性。2.2腺苷的藥理作用現(xiàn)代藥理研究表明，腺苷作為蟲草的主要活性成分，具有廣泛的生理活性，主要包括調(diào)節(jié)冠脈血流量和鎮(zhèn)靜。可舒張血管平滑肌，抑制心肌收縮力，抑制血小板凝聚，增加冠脈和腦血流量，降低腦耗氧量，改善冠脈和腦循環(huán)；減慢心率，防止心律失常。馮鳴國(guó)等對(duì)人工菌絲體對(duì)血管的擴(kuò)張作用進(jìn)行了研究，證實(shí)菌絲的乙醇提取物能明顯增加犬的冠脈血流量，降低冠脈、腦及外圍血管阻力的作用。蟲草醇提取物能明顯對(duì)抗烏頭堿和氯化鋇引起的麻醉大鼠的心率失常，能提高豚鼠心臟哇巴因中毒引起的耐受量，能使麻醉大鼠和豚鼠心率減慢，且能降低離體豚鼠心肌收縮力，但對(duì)右心房的自動(dòng)節(jié)律性和左心房的功能不應(yīng)期均無(wú)明顯影響。中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所對(duì)從天然青海產(chǎn)冬蟲夏草得到的c5-4菌的人工發(fā)酵菌絲體提取物和天然青海產(chǎn)冬蟲夏草做了大量的藥理研究工作，結(jié)果顯示腺苷對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)有明顯的抑制性影響，注射劑量于25mg/kg時(shí)能很快使動(dòng)物活動(dòng)減少，處于朦朧狀態(tài)，但壹般不引起睡眠，對(duì)外界刺激仍有反應(yīng)，同時(shí)降低體溫。可抑制毛果蕓香堿引起的流涎。蟲草制劑能延長(zhǎng)戊巴比妥睡眠時(shí)間，增加閾下量戊巴比妥的入睡率，可增強(qiáng)氯丙嗪等鎮(zhèn)靜劑的效果，拮抗苯丙胺、咖啡因等的興奮作用，可明顯減輕煙堿引起的強(qiáng)直性痙攣和降低小鼠死亡率，有明顯的抗缺氧、促腦組織攝取86Rb作用，有較弱的降膽固醇、促心肌攝取86Rb作用。2.3其它從蟲草屬真菌中提取得到的其它