實驗六黃連素的提取及其紫外光譜分析第一頁，共十頁，編輯于2023年，星期二目的和要求：

1.掌握從植物中提取生物堿的一般原理和方法。2.鞏固索氏提取器的操作技術；3.掌握紫外吸收光譜的原理與在有機物結構分析中的應用。第二頁，共十頁，編輯于2023年，星期二實驗原理：

黃連為我國特產(chǎn)藥材之一，對急性結膜炎、口瘡、急性細菌性痢疾、急性腸胃炎等均有很好的療效。黃連中黃連素的含量約4~10%。除黃連中含有黃連素外，黃柏、白屈菜、伏?；ā⑷w針等中草藥中也含有黃連素，其中黃連和黃柏中含量最高。

黃連素是黃色針狀晶體，微溶于水和乙醇，較易溶于熱水和熱乙醇中，黃連素存在3種互變異構體，自然界中的黃連素多以季銨堿的形式存在。第三頁，共十頁，編輯于2023年，星期二有機分子中有三種不同性質(zhì)的價電子：、n、

電子。不同分子吸收不同波長的紫外光或可見光，產(chǎn)生特征的紫外吸收光譜。所以，紫外及可見吸收光譜能用于有機化合物結構鑒定。在相同的測定條件下，指定波長處的吸光度值與物質(zhì)的濃度成正比，因此紫外吸收光譜也能用于定量分析。

一般的紫外可見分光光度計檢測范圍在190~800nm。由于→*、n→*兩種電子躍遷所需的能量較大，只能吸收波長較短（小于200nm）的遠紫外光，不能為普通的紫外可見分光光度計所檢測。但具有共軛雙鍵的化合物或芳香族化合物能產(chǎn)生強吸收，是紫外光譜主要研究對象。黃連素的分子結構中含有取代的苯環(huán)和異喹啉環(huán)，所以能用紫外光譜法測定。第四頁，共十頁，編輯于2023年，星期二試劑:黃連2g,95%乙醇,1%醋酸,濃鹽酸,丙酮,石灰乳

第五頁，共十頁，編輯于2023年，星期二實驗裝置蒸餾裝置抽濾裝置索氏提取器第六頁，共十頁，編輯于2023年，星期二實驗步驟

1．黃連素的提取將2g已磨細的黃連粉末，裝入索氏提取器的濾紙筒內(nèi)，提取器的燒瓶中加入50mL95%乙醇和幾粒沸石，裝好索氏提取器。加熱，連續(xù)抽提1~1.5h。待虹吸剛剛下去時，立即停止加熱，冷卻。改裝成蒸餾裝置，回收乙醇至殘留物呈棕紅色糖漿狀。殘留物中加入1%醋酸7mL，加熱溶解，趁熱過濾，以除去不溶物，再向溶液中滴加濃鹽酸，至溶液渾濁為止（約需2mL），冰水浴冷卻。即有黃色針狀體的黃連素鹽酸鹽析出。抽濾，冰水洗滌2次，丙酮洗滌1次，得黃連素鹽酸鹽粗品。將黃連素鹽酸鹽加熱水至剛好溶解，煮沸，石灰乳調(diào)節(jié)pH=8.5~9.8。冷卻后濾去雜質(zhì)，濾液繼續(xù)冷卻到室溫以下，有針狀體的黃連素析出。抽濾，結晶在50~60℃下干燥，稱量，測定熔點，計算收率。第七頁，共十頁，編輯于2023年，星期二2．黃連素的紫外光譜測定開啟紫外光譜儀：開啟儀器，進入“WinUV”窗口。選擇“光譜測量”方式，打開“光譜測量”工作窗口。設定參數(shù)：掃描范圍為600~200nm；掃描速度為中速；測光方式為Abs（即吸光度）等。制樣及采集樣品譜圖（以水為溶劑測定）：將去離子水注入石英吸收池，用卷筒紙輕輕擦干吸收池的外壁，然后將其插入樣品池架。單擊命令條上的“baseline”鍵，作基線校正。然后，取出吸收池，用樣品刮刀蘸取少量黃連素樣品加入，攪拌均勻。重新將吸收池插入樣品池架。單擊命令條上的“Start”鍵。采集樣品的紫外光譜圖。第八頁，共十頁，編輯于2023年，星期二注意事項

1：濾紙筒既要緊貼器壁，又能方便取放。被提取物高度不能超過虹吸管，否則被提取物不能被溶劑充分浸泡，影響提取效果。被提取物亦不能漏出濾紙筒，以免堵塞虹吸管。2：滴加濃鹽酸前，不溶物要去除干凈，否則影響產(chǎn)品的純度。3：如果晶形不好，可用水重結晶一次。4：取、放吸收池時，盡量不接觸吸收池的透光面；吸收池在插入樣品池架前，將其外壁體擦干，否則水或其他溶劑帶入樣品池室會使其腐蝕。5：在測定樣品的紫外吸收光譜之前，必須對空白樣品（即純?nèi)軇┻M行基線校正，以消除溶劑吸收紫外光的影響。用同一種溶劑連續(xù)測定若干個樣品時，只需做一次基線校正。因為校正數(shù)據(jù)能自動保存在當前內(nèi)存中，可供反復使用。6：紫外光譜的靈敏度很高，應在稀溶液中進行測定，因此測定時加樣品應盡量少。第九頁，共