第三章人源性生物制品第1頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月第三章人源性生物制品生化制品技術(shù)第2頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月一、人源性生物制品特點與種類（一）人源性生物制品特點:1.效價高、療效可靠（純化生物制品效價提高）2.安全性好、不易產(chǎn)生副反應(yīng)（防止感染）3.穩(wěn)定性好（相對原料）4.資源有限（通過現(xiàn)代生物技術(shù)解決）第四章人源性生物制品第3頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）人源性生物制品種類:目前可作為生產(chǎn)原料的人體成分限于血液、尿液、胎盤、毛發(fā)等。1.血液制品（全血、血蛋白、血細(xì)胞）2.尿液制品（尿激酶、尿抑胃素、HCG）3.胎盤制品（人胎盤丙種球蛋白、胎盤白蛋白、HCS）4.人體液體細(xì)胞中的活性成分（IFN，細(xì)胞因子、白介素）第4頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月1.血液制品血液制品：由健康人的血或血漿，特異性免疫人血漿分離、純化或由基因工程技術(shù)制備的血蛋白或血細(xì)胞等成分。（1）全血來源：采血后添加抗凝劑（枸櫞酸鹽-葡萄糖溶液）使用：主要用于補(bǔ)充紅細(xì)胞和血容量（失血超過40%），作用迅速。缺點：保存時間短，使用受限（裂解殘留物），免疫反應(yīng)，傳播疾病第5頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月主張成分采血，成分輸血：按照“缺什么，補(bǔ)什么”的原則輸用，以達(dá)到治

療病人的目的。純度高，針對性強(qiáng)，提高輸血療效并減少體循環(huán)負(fù)擔(dān)減少輸血的不良反應(yīng)和病毒的傳播一血多用，充分利用寶貴的血液資源2.血液成分制品第6頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月第7頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月

表1人血液成份及其制品----------------------------------------------------------------------------------------------- 血液有形成份血漿制品備注----------------------------------------------------------------------------------------------- 紅細(xì)胞

1、“少漿血”常用

2、濃縮紅細(xì)胞常用 4、濾過紅細(xì)胞常用

5、年輕紅細(xì)胞少用

6、照射紅細(xì)胞少用

白細(xì)胞1、白細(xì)胞

2、粒細(xì)胞去淋巴細(xì)胞

血小板1、單（機(jī)）采血小板

2、濃縮血小板---第8頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月

表1人血液成份及其制品----------------------------------------------------------------------------------------------- 血液成份（無形）血漿制品備注----------------------------------------------------------------------------------------------- ·血漿

1、普通冷凍血漿

2、新鮮冷凍血漿白蛋白1、白蛋白制品球蛋白1、靜注丙種球蛋白多用

2、肌注丙種球蛋白少用凝血因子VIII1、人凝血因子VIII濃縮劑多用

2、重組人因子VIII制劑少用

3、豬凝血因子VIII濃縮劑

---第9頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月

表1人血液成份及其制品-----------------------------------------------------------------------------------------------血液無形成份血漿制品備注-----------------------------------------------------------------------------------------------凝血因子II、VII、1、凝血酶原復(fù)合物（PCC）

2、人因子IX濃縮劑IX、X3、重組人凝血因子IX4、轉(zhuǎn)基因因子IX制劑纖維蛋白原1、纖維蛋白原制劑

2、冷沉淀（因子I）抗凝血酶1、抗凝血酶制劑其他（特殊免疫相應(yīng)制劑 球蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等）

---第10頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月①“少漿血”指紅細(xì)胞比容（Hct）在53%~60%并剩有部分血血漿的血液。適用于血容量丟失在20%~25%（1000~1500ml）的出血。慢性貧血，如再障、缺鐵性貧血、珠蛋白生成障礙性貧血、腎性貧血、消化道失血所致貧血等。②濃縮紅細(xì)胞（壓積紅細(xì)胞）指Hct在70%~80%和剩有少量血漿的血液。適應(yīng)證同“少漿血”。（1）紅細(xì)胞制劑第11頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月②濃縮紅細(xì)胞（壓積紅細(xì)胞）濃縮紅細(xì)胞可以在全血有效保存期內(nèi)任何時間分離出部分血漿制備而成，一般用二聯(lián)袋采集的全血制備濃縮紅細(xì)胞。（1）用二聯(lián)袋采集1單位或2單位全血于主袋內(nèi)；（2）將全血在4℃±2℃離心，離心力5000×g,離心7分鐘，沉淀紅細(xì)胞；（3）取出離心后全血，將部分血漿分入空的轉(zhuǎn)移袋內(nèi)（4）用熱合機(jī)切斷塑料袋間的連接管，制備成濃縮紅細(xì)胞。第12頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月③洗滌紅細(xì)胞指用生理鹽水洗滌三次的紅細(xì)胞，本品中僅含<1%的血漿蛋白和<20%的白細(xì)胞。適用于下列疾病伴貧血免疫性疾病；自身免疫性溶血性疾病；陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥（PNH）；輸血性溶血反應(yīng)；新生兒溶血病的換血療法；④照射紅細(xì)胞、凍紅細(xì)胞、年輕紅細(xì)胞第13頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月主要為濃縮白細(xì)胞適應(yīng)證：各種原因所致中性粒細(xì)胞低于0.5×109/L，雖然中性粒細(xì)胞在0.5×109/L以上，但伴有高燒或感染，特別是單用抗生素不能控制者。

新生兒敗血癥（2）白細(xì)胞制品第14頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月劑量：有效輸注量是每天至少1010個中性粒細(xì)胞。不良反應(yīng)：非溶血性輸血反應(yīng)，如寒戰(zhàn)、發(fā)熱、呼吸困難，甚至出現(xiàn)肺水腫和休克等。 注：

粒細(xì)胞離體很快失去功能，高效抗生素及細(xì)胞集落刺激因子出現(xiàn)、白細(xì)胞制品應(yīng)用減少。

白細(xì)胞還用于生產(chǎn)干擾素第15頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）制品的種類1、濃縮血小板懸液（PC）400ml新鮮全血分離制成的PC，規(guī)定內(nèi)含4.8×1010個血小板，容量50~70ml。

2、單采血血小板一般每袋含2~3×1011個血小板。（3）血小板制品第16頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月濃縮血小板：1）全血采集于三聯(lián)袋或四聯(lián)袋主袋內(nèi)；2）采后4-6小時內(nèi)，于22℃±2℃存放或輕度離心，以離心力1220×g離心5分鐘或700×g離心10分鐘，使紅細(xì)胞下沉，大部分血小板保留于血漿中為PRP層；3）將上層PRP分入第二轉(zhuǎn)移袋內(nèi)；4）把第三袋內(nèi)的紅細(xì)胞保存液加入主袋壓積紅細(xì)胞內(nèi)，用熱合機(jī)熱合切斷主袋與第3轉(zhuǎn)移袋之間的連接塑料管。在主袋與第2血袋間塑料管內(nèi)留取紅細(xì)胞與血漿為血樣品管；第17頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月5）把第2PRP袋協(xié)同第三轉(zhuǎn)移袋重度離心，溫22℃±2℃，以離心力4650×g，離心6分鐘，或3000×g，離心20分鐘，使血小板下沉于底部形成沉淀；6）分離上層少血小板血漿進(jìn)入第3轉(zhuǎn)移袋內(nèi)，留下20-30ml(1單位全血所分出的血小板）或50-70ml（2單位全血所分血小板）血漿于第二血小板袋內(nèi)；7）制備的血小板應(yīng)放入血小板保存箱內(nèi)。第18頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月血細(xì)胞分離機(jī)采集血小板

目前各種型號的血細(xì)胞分離機(jī)已廣泛應(yīng)用采供血機(jī)構(gòu)和醫(yī)院。嚴(yán)格按照細(xì)胞分離機(jī)的操作程序進(jìn)行操作，能獲得高濃度和高純度的血小板。第19頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月血小板制品輸注適應(yīng)證：再障、急性白血病和惡性腫瘤行強(qiáng)烈化療、放療后血小板低于20×109/L，或有其他危及生命的嚴(yán)重出血傾向者。心肺旁路手術(shù)行體外循環(huán)和骨髓移植患者于移植前血小板降至50×109/L以下者。第20頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月急性免疫性血小板減少，在分娩、手術(shù)、創(chuàng)傷或有危及生命的嚴(yán)重出血時。原發(fā)性或繼發(fā)性血小板功能異常癥，在有自發(fā)性出血傾向或在分娩、創(chuàng)傷、手術(shù)時。大量輸注貯存血液或藥物所致血小板減少性出血。第21頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（4）血漿制品

血漿：常用的血漿種類包括新鮮液體血漿、新鮮冷凍血漿（FFP）、普通冷凍血漿、冷沉淀這四種。

前種是從采血之日起5天內(nèi)從全血中制備的血漿，但缺少因VIII、因子V和血小板；后種是采血后6小時之內(nèi)制備的血漿，但缺乏血小板。第22頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月1）新鮮液體血漿：制備工藝：①用三聯(lián)袋采集全血，于采后6小時內(nèi)經(jīng)第一次5000×g的離心力離心7分鐘，分出上層血漿。再將血漿第二次以5000×g的離心力離心5分鐘，分出清除紅細(xì)胞成分的血漿即為新鮮液體血漿；②制備濃縮血小板后所得到的少血小板血漿和制備血小板、白膜后剩余的少血小板血漿可用作新鮮液體血漿。適用于：擴(kuò)容、補(bǔ)充凝血因子第23頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月第24頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月

2）新鮮冰凍血漿(freshfrozenplasma,FFP)制備工藝：

新鮮液體血漿立即放入-50℃的速凍箱，在最短的時間內(nèi)迅速冷凍血漿，經(jīng)完成速凍的血漿再放入-20℃以下的冰箱保存。從采血到冰凍過程應(yīng)在8-24小時之內(nèi)完成。第25頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月2)新鮮冷凍血漿適應(yīng)證:單純凝血因子缺乏、口服抗凝劑過量引起的出血肝病患者獲得性凝血障礙大量輸血伴發(fā)的凝血障礙抗凝血酶III（ATIII）缺乏免疫缺陷綜合征血栓性血小板減少性紫癜(TTP)

禁忌證:

同普通冰凍血漿第26頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月3）普通冷凍血漿FP①制備工藝：

普通液體血漿立即放入-20℃以下的冰箱內(nèi)冷凍保存

新鮮冰凍血漿保存一年后，可改為普通冰凍血漿；

制備冷沉淀后所得的血漿在-20℃以下冰箱冰凍并保存，也可作普通血漿之用。第27頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月②適應(yīng)證：嚴(yán)重肝臟疾病、凝血因子缺乏香豆素類藥物作用的逆轉(zhuǎn)、心臟直視手術(shù)、大

量輸血、彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）燒傷，抗凝血酶III（ATIII）缺乏癥、血栓性血小板減少性紫癜（TTP）、血漿置換禁忌證：

對血漿蛋白有過敏者，血容量正常的老、幼患者，心功能不全者。第28頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月3、血漿蛋白制品

血漿蛋白制品：人血漿中分離制備的有明確臨床療效和應(yīng)用意義的蛋白總稱。近年來已知的血漿蛋白質(zhì)有二百多種，有些蛋白質(zhì)的功能尚未闡明。將其中主要的血漿蛋白質(zhì)含量及功能歸納如表10-1。第29頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）白蛋白白蛋白（又稱清蛋白，albumin,Alb）：由肝實質(zhì)細(xì)胞合成，在血漿中的半壽期約為15-19天，是血漿中含量最多的蛋白質(zhì)，占血漿總蛋白的40%-60%。第30頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月白蛋白制劑的種類：①人血白蛋白②血漿蛋白成分兩者的區(qū)別主要在于含白蛋白的純度不同，前者為96%以上，后者為83%以上。制備工藝：用乙型肝炎疫苗免疫的健康人血漿，經(jīng)低溫乙醇蛋白分離法提取，并經(jīng)病毒滅活處理制成。用重組DNA技術(shù)制備重組血漿蛋白制劑。第31頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月血漿EOH：8%，PH：7.2，T：-3℃，r/2：0.14，PC：5.1%上清Ⅰ沉淀ⅠEOH：25%，PH：6.9，T：-5℃，r/2：0.09，PC：3.0%上清Ⅱ+Ⅲ沉淀Ⅱ+Ⅲ（供分離Ig用）EOH：18%，PH：5.2，T：-5℃，r/2：0.09，PC：1.6%上清Ⅳ-1沉淀Ⅳ-1Cohn6法工藝流程第32頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月上清Ⅳ-4沉淀Ⅳ-4EOH：40%，PH：4.8，T：-5℃，r/2：0.11，PC：0.8%上清液Ⅴ沉淀ⅤEOH：40%，PH：4.5，T：-3℃，PC：3%上清液不純物質(zhì)EOH：40%，PH：5.0，T：-5℃，r/2：0.09，PC：10%Cohn6法工藝流程第33頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月EOH：40%，PH：5.2，T：-5℃，r/2：0.01，PC：2.5%上清液白蛋白Cohn6法工藝流程問：低溫乙醇法中影響蛋白質(zhì)沉淀反應(yīng)的因素？第34頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月應(yīng)用：①維持和調(diào)節(jié)血液滲透壓白蛋白產(chǎn)生的滲透壓大而粘度低，是最有效的血容擴(kuò)張劑。②為組織提供營養(yǎng)白蛋白能結(jié)合陽離子，也能結(jié)合陰離子，故能輸送性質(zhì)不同的物質(zhì)，如脂肪酸、激素、金屬離子、酶和藥物③運(yùn)輸和解毒結(jié)合有毒物質(zhì)運(yùn)送至解毒器官，然后排出體外；第35頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月A、pH當(dāng)pH位于等電點時，蛋白質(zhì)的溶解度最小，所以最易沉淀以根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點不同順序沉淀出不同的血漿蛋白。通常低溫乙醇法是在pH4.4-7.4之間進(jìn)行分離.B、溫度溫度低，蛋白質(zhì)的溶解度低。溶液中加入乙醇，因乙醇的水合作用，會產(chǎn)生放熱現(xiàn)象，而溫度升高可能造成蛋白質(zhì)的變性，所以在低溫乙醇工藝中，整個過程均應(yīng)控制在0～-8℃。如溫度控制不當(dāng)，輕則會影響蛋白質(zhì)的得率，重則引起蛋白質(zhì)變性。第36頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月C、蛋白質(zhì)濃度如果溶液的蛋白質(zhì)濃度較大，容易引起多種蛋白共同沉淀，所以在分離過程中，可將蛋白質(zhì)溶液作適當(dāng)?shù)南♂專詼p少蛋白質(zhì)之間的相互作用，避免多種蛋白共同沉淀，但過分稀釋，蛋白質(zhì)易變性，同時增大分離的容量，也不可取。所以應(yīng)選擇適宜的濃度。在低溫乙醇工藝中，蛋白質(zhì)濃度范圍為：0.2-6.6%D、離子強(qiáng)度鹽類與蛋白質(zhì)的互相影響隨離子強(qiáng)度而變化。在低鹽溶液中，鹽濃度的很小改變即可引起蛋白質(zhì)溶解度的極大變化。離子強(qiáng)度用r/2表示。低溫乙醇法工藝中離子強(qiáng)度的變化范圍在0.01-0.16。正常人血清的離子強(qiáng)度接近于0.15。第37頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月E、乙醇濃度乙醇能降低蛋白質(zhì)溶液的介電常數(shù)，隨著乙醇濃度的增加蛋白質(zhì)溶液的介電常數(shù)逐漸降低，而其溶解度急劇下降。在低溫乙醇工藝中，乙醇的濃度范圍在0-40%。在五變系統(tǒng)中，對蛋白分離最重要的變化因素是PH和乙醇濃度。第38頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）免疫球蛋白制品免疫球蛋白（immunoglobulin）：指具有抗體活性的動物蛋白。主要存在于血漿中，也見于其他體液、組織和一些分泌液中。人血漿內(nèi)的免疫球蛋白大多數(shù)存在于丙種球蛋白（γ-球蛋白）中。按結(jié)構(gòu)可以分為：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE五類按功能應(yīng)用可分為：正常人免疫球蛋白、特異性球蛋白、靜脈注射免疫球蛋白第39頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月1）正常人免疫球蛋白又稱丙種球蛋白或多價免疫球蛋白(簡稱丙球)，僅供肌肉注射用，所以又稱肌注免疫球蛋白制劑。是采用低溫乙醇法從大量混合血漿（藥典要求1000人份以上）中分離制得的免疫球蛋白濃縮劑。有液體劑型和凍干劑型兩種。第40頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月主要作用：主要用來預(yù)防一些病毒性感染，如甲肝、丙肝、麻疹等疾病的預(yù)防以及丙種球蛋白缺乏癥的治療。注:國內(nèi)濫用正常免疫球蛋白的現(xiàn)象比較嚴(yán)重。一些人認(rèn)為經(jīng)常使用丙種球蛋白可以“增強(qiáng)抵抗力”或“有益無害”。事實上濫用丙球不但無益，而且可能產(chǎn)生免疫依賴等副作用。第41頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月不良反應(yīng)：正常人免疫球蛋白只能用于肌肉注射，因此，劑量有限且作用慢。對于需要大劑量用藥的病例，必須進(jìn)行靜脈注射。而如果將肌注丙球用于靜脈注射，多數(shù)患者會發(fā)生程度不同的類過敏反應(yīng)，如頭痛、惡心、發(fā)熱、胸悶，甚至血壓下降，意識喪失。如果患者有丙球缺乏癥，則發(fā)生不良反應(yīng)的危險性更大。第42頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月特異性免疫球蛋白：

是由對某些病原微生物具有高滴度抗體的血漿制備的特異的高效價免疫球蛋白。與正常免疫球蛋白不同，此類制劑必須具有至少一種高滴度抗體，用于臨床上特定疾病的預(yù)防和治療。

2）特異性免疫球蛋白第43頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月第44頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月種類

目前用于臨床的特異性免疫球蛋白有十余種，較常用的如：乙肝免疫球蛋白甲肝免疫球蛋白破傷風(fēng)免疫球蛋白、狂犬免疫球蛋白、風(fēng)疹免疫球蛋白、水痘免疫球蛋白等。

第45頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月A、乙型肝炎免疫球蛋白（HBIG）

HBIG是先用乙肝疫苗免疫供血漿者，然后采集富含高效價抗-HBs的血漿，低溫乙醇蛋白分離法或經(jīng)批準(zhǔn)的其它分離方法提純，并經(jīng)病毒滅活處理制成，

有液體和凍干兩種劑型，主要用于乙肝的預(yù)防，尤其在阻斷母嬰垂直傳播中有明顯的效果。第46頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月B、破傷風(fēng)免疫球蛋白（TIG）TIG系篩選經(jīng)破傷風(fēng)類毒素免疫過的供漿員，加強(qiáng)免疫后采集含高效價破傷風(fēng)抗體的血漿，經(jīng)低溫乙醇蛋白分離法或經(jīng)批準(zhǔn)的其它分離方法提純，并經(jīng)病毒滅活處理制成。采用經(jīng)批準(zhǔn)的人用破傷風(fēng)疫苗和免疫程序第47頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月C、狂犬免疫球蛋白（RIG）

RIG是采用人用狂犬疫苗免疫供血漿者后，采集含高效價狂犬病抗體的血漿，經(jīng)低溫乙醇蛋白分離法或經(jīng)批準(zhǔn)的其它分離方法提純，再經(jīng)病毒滅活處理制成。采用經(jīng)批準(zhǔn)的人狂犬疫苗和免疫程序進(jìn)行免疫。第48頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月3、補(bǔ)體系統(tǒng)蛋白制品補(bǔ)體系統(tǒng)（complementsystem）：一組存在于人和脊椎動物正常新鮮血清中的非特異性球蛋白。補(bǔ)體系統(tǒng)是由20多種不同的血清蛋白組成的多成分系統(tǒng)，占血清總蛋白10%。作用：①溶解和殺傷作用②免疫粘附作用③趨化作用④過敏毒素作用⑤促進(jìn)血凝作用第49頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月4、凝血系統(tǒng)蛋白制品

正常情況下，當(dāng)血管破損，血小板聚集，凝血酶生成，交聯(lián)纖維蛋白在聚集血小板的基礎(chǔ)上形成，鞏固用于堵住傷口的塞子。繼而激活纖溶系統(tǒng)，溶解多余的纖維蛋白，避免形成血栓栓塞，最終修復(fù)破損的血管，以維持血管的完整和通暢。第50頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月凝血因子纖維蛋白血小板血管內(nèi)皮促凝功能血流抗凝蛋白纖溶蛋白血管內(nèi)皮抗凝功能TheHemostaticBalance出血凝血凝血過程第51頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）、凝血因子VIII（FVIII）①冷沉淀凝血因子：保存期內(nèi)的新鮮冰凍血漿，在1～6℃的條件下融化后，分離出沉淀在血漿中的不溶解物質(zhì)，并凍結(jié)而成的制品。注：冷沉淀要在-20～-30℃冰凍保存，輸注時還要融化。特別是作為家庭治療就太麻煩。第52頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月②凝血因子VIII濃縮劑：大混合血漿（500～5000個獻(xiàn)血者血漿）制備此產(chǎn)品,新鮮冰凍血漿內(nèi)的冷沉淀作為起始原料，進(jìn)一步用硅膠膠吸附、甘氨酸或聚乙二醇純化，最后冷淡干燥凍干燥制成。可分為中純度及高純度。中純度一般為毫升含第VIII因子活性15～20單位；高純度可達(dá)25～40單位。第53頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月

VIII因子濃縮劑與冷沉淀相比有高活性（15～20單位／毫升）、高穩(wěn)定性和可溶性已知制品瓶中第VIII因子單位數(shù)，可準(zhǔn)確計算輸注劑量并且體積小，便于運(yùn)輸、儲存、再配制及使用，可在家庭或工作場所隨時自己注射治療。第54頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月適應(yīng)癥：冷沉淀含有第VIII因子，還含有纖維蛋白原（濃度相當(dāng)于血漿內(nèi)的5倍）及其他血漿蛋白（如第XIII因子和纖維結(jié)合蛋白）。甲型血友病，纖維蛋白原、第XIII因子缺乏癥和Willebrand病的患者使用。清除非毒性物質(zhì)、細(xì)胞粘連、炎癥、創(chuàng)傷愈合中起重要作用。第55頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月

VIII因子濃縮劑含高純度的第VIII因子，用于治療甲型血友病，不能用于治療血管性假血友病及無纖維蛋白原血癥。第56頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月(2)、凝血酶原復(fù)合物濃縮劑（prothrombincomplexconcentrates，PCC)凝血酶原復(fù)合物：從健康人混合血漿中分離制備的1種能促進(jìn)血液凝固的靜脈注射血漿蛋白制劑。PCC主要含有依賴于維生素K的凝血酶原（FⅡ）、凝血酶原轉(zhuǎn)化因子（FⅦ）、抗血友病乙型因子（FⅨ）和自身凝血酶原（FⅩ）其理化性質(zhì)極為相似，商品PCC幾乎都含有上述4種因子第57頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月制備工藝：PCC的制備方法，都是使用無機(jī)鹽吸附劑（如硫酸鋇、磷酸三鈣、氫氧化鋁）或離子交換吸附劑（如DEAE纖維素和DEAESephadexA50及DEAESepharoseFastFlow）。這些吸附劑的特性允許為治療目的從人血漿中大規(guī)模制備含F(xiàn)Ⅱ、FⅦ、FⅨ、FⅩ4種凝血因子的濃縮物。

第58頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月無機(jī)鹽吸附劑方法制備PCC是用EDTA抗凝的血漿，再以枸櫞酸鈉洗脫，隨后經(jīng)乙醇沉淀。磷酸三鈣作為吸附劑制備的PCC，再用超濾法或PEG沉淀法獲得濃縮物，磷酸三鈣吸附的PCC制劑中，F(xiàn)Ⅶ含量比FⅨ高第59頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月離子交換吸附劑方法制備PCC血漿、或去冷沉淀血漿（冷上清）作為PCC分離的起始原料PCC中的FⅡ、FⅦ、FⅨ、FⅩ4種凝血因子都有低的等電點，通常使用離子交換劑吸附。以陰離子交換劑DEAE纖維素和DEAESephadexA50廣泛使用。第60頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月第61頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月適應(yīng)證：血友病B（hemophiliaB）嚴(yán)重肝臟疾?。喝缰匕Y肝炎、肝硬化等。血漿凝血酶原時間（prothrombintime,PT)延長患者的手術(shù)維生素K缺乏癥DIC第62頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月(3)人血纖維蛋白原

纖維蛋白原（xianweidanbaiyuan）：一種由肝臟合成的具有凝血功能的蛋白質(zhì)，是纖維蛋白的前體。分子量340000，半衰期4～6日，血漿中參考值2～4克/升。制備工藝：方法步驟為：（１）凍血漿融漿；（２）乙醇組分Ⅰ沉淀；（３）離心；（4）乙醇組分Ⅱ沉淀；（４）乙醇組分Ⅲ沉淀；（５）原液制取。第63頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月適應(yīng)癥：先天性低纖維蛋白原血癥、原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶引起的低纖縮蛋白原血癥第64頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）血液制品安全性1、經(jīng)血液制品傳播的疾?。翰《荆耗壳敖?jīng)輸血傳播的病毒包括HIV、肝炎病毒（包括乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、丁型肝炎病毒等）、微小病毒B19（B19V）、巨細(xì)胞病毒（CMV）和EB病毒等。細(xì)菌：梅毒螺旋體、耶爾森菌、葡萄球菌、鏈球菌等。病原蟲：輸用瘧疾流行區(qū)的血液或紅細(xì)胞制品，有可能傳染瘧疾。第65頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月第66頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月第67頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月2、血液制品安全的綜合性保證系統(tǒng)（三重安全網(wǎng)）（1）加強(qiáng)血源管理（2）加強(qiáng)原料血漿的篩檢（3）核心生產(chǎn)技術(shù)——血漿蛋白分離方法和病毒去除/滅活方法第68頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）血液制品中病毒去除/滅活方法滅活物理法加熱方法（巴斯德消毒法）、紫外照射、美藍(lán)熒光照射?；瘜W(xué)法有機(jī)溶劑結(jié)合/表面活性劑(S/D法)、低PH發(fā)法，理化結(jié)合法β-丙內(nèi)脂/紫外照射法第69頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月②去除病毒色譜法第70頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月2、人尿液制品正常人尿是人代謝排出的無菌的液體，并且已知尿中含有50多種物質(zhì)，其中95％左右是水，

無機(jī)物質(zhì)：鈉、鉀、氯、硫酸鹽、磷酸鹽、銨鹽、鈣離子等；

有機(jī)物質(zhì)：尿素、尿激酶、表皮生長因子、生長激素、促紅細(xì)胞生長素、促性腺激素、血管舒緩素和抗腫瘤肽類物質(zhì)等，都是對人體有益的物質(zhì)。

第71頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月

（1）尿液中的生物活性物質(zhì)尿激酶激肽釋放酶尿抑胃素人尿胰蛋白酶抑制劑人絨毛膜促性腺激素促紅細(xì)胞生長素第72頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月①尿激酶

人血液中的尿激酶原在部分降解后從尿液中排出的一種絲氨酸蛋白酶，為血纖蛋白溶酶原激活劑，可將纖溶酶原轉(zhuǎn)化為纖溶酶。

該品主要用于血栓栓塞性疾病的溶栓治療：急性心肌梗塞、急性腦血栓形成和腦血管栓塞、肢體周圍動靜脈血栓、中央視網(wǎng)膜動靜脈血栓及其他新鮮血栓閉塞性疾病。以及腎移植、整形外科手術(shù)等出現(xiàn)的血栓形成，均有較好的療效。第73頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月②激肽釋放酶一種絲氨酸蛋白酶，能使激肽原釋放出一種多肽——激肽，它具有很高的生理活性，在人體組織中起著十分重要的生理作用。發(fā)現(xiàn)激肽釋放酶－激肽系統(tǒng)（kallikreinkininsystem，KKS）作為一個復(fù)雜的內(nèi)源性多酶系統(tǒng)，參與調(diào)控心血管、腎臟、神經(jīng)系統(tǒng)等的生理功能，與心臟病、腎病、炎癥反應(yīng)、癌癥等疾病的發(fā)生有著密切關(guān)系。第74頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月③尿抑胃素是從妊娠婦女的尿中提取出HCG(絨毛膜激素)之后所分離到的一種高分子糖蛋白抑制胃分泌鹽酸的一種腸胃激素。其結(jié)構(gòu)與人的表皮生長因子相同。還能促進(jìn)表皮生長。在臨床上主要用于治療十二指胃潰瘍第75頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月④人絨毛膜促性腺激素(HCG)人絨毛膜促性腺激素是由胎盤的滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，第76頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月絨膜促性腺激素人絨毛膜促性腺激素(HCG)由胎盤滋養(yǎng)層合體細(xì)胞分泌的一種糖蛋白。第77頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月適應(yīng)癥：（1）維持月經(jīng)黃體的壽命，使月經(jīng)黃體增大成為妊娠黃體；（2）促進(jìn)雄激素芳香化轉(zhuǎn)化為雌激素，同時刺激孕酮形成；（3）抑制植物凝集素對淋巴細(xì)胞的刺激作用，人絨毛膜促性腺激素可吸附于滋養(yǎng)細(xì)胞表面，以免胚胎滋養(yǎng)層細(xì)胞被母體淋巴細(xì)胞攻擊；（4）刺激胎兒睪丸分泌睪酮，促進(jìn)男性性分化；（5）能與母體甲狀腺細(xì)胞TSH受體結(jié)合，刺激甲狀腺活性。第78頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月胎盤為胎兒進(jìn)行營養(yǎng)、呼吸和排泄的器官，并產(chǎn)生分泌素。

當(dāng)分娩時，先是子宮收縮，然后子宮口擴(kuò)張，胎兒突破羊膜產(chǎn)出，結(jié)扎并剪斷臍帶；最后子宮再次收縮，由底蛻膜的海綿層與子宮壁分離，將胎盤及胎膜排出。

3.胎盤制品

第79頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月第80頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月第81頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月人胎盤作為補(bǔ)藥在我國已有1000多年的歷史了.《本草拾遺》中便以“胎胞”和“胞衣”加以記載?！侗静菥V目》中稱胎盤為“紫河車”?！拔陡驶蛳獭薄ⅰ靶詼亍?，具有“安心養(yǎng)血、益氣、補(bǔ)精、解毒、補(bǔ)血”的作用，對“疲勞、消瘦、衰弱者”有奇效.人胎盤中含有多種維生素和酶，如卵泡激素、黃體激素、催乳素、溶菌酶、激肽酶、蛋白酶等第82頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月(1)人胎盤血白蛋白健康人胎盤血液經(jīng)鹽析、辛酸鈉處理的方法或衛(wèi)生部批準(zhǔn)的其他適宜方法提取，經(jīng)60℃10小時加溫滅活病毒素制成。白蛋白含量96%以上，含適宜的穩(wěn)定劑，不含防腐劑和抗生素，專供靜脈輸注第83頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月①制造工藝提?。翰捎昧蛩徜@鹽析、酸沉淀以及辛酸鈉保護(hù)下的熱處理等步驟，自胎盤浸液中提取白蛋白，純化：并結(jié)合適宜的吸附劑吸附，或低溫乙醇分段沉淀等處理步驟進(jìn)一步提純。（應(yīng)含適量的穩(wěn)定劑，每g蛋白質(zhì)加0.16mmol辛酸鈉或0.08mmol辛酸鈉和0.08mmol乙酰色氨酸鈉）。熱處理：每批制品經(jīng)60±0.5℃加溫10小時處理。熱處理可在除菌過濾前或分裝后24小時內(nèi)進(jìn)行。第84頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月分批：同一制造工藝、同一容器混合的制品作為一批。不同濾器除菌過濾或不同機(jī)柜凍干的制品應(yīng)分為亞批。半成品檢定：液體制劑于除菌過濾后應(yīng)做理化檢查及熱原質(zhì)試驗，并應(yīng)按亞批抽樣做無菌試驗。凍干：除菌過濾后，制品應(yīng)及時分裝、旋凍，并按《人血白蛋白制造及檢定規(guī)程》1.2.5項規(guī)定進(jìn)行凍干。第85頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月②適應(yīng)癥：失血創(chuàng)傷及燒傷等引起的休克。腦水腫及大腦損傷所致的顱壓升高。防治低蛋白血癥。肝硬化或腎病引起的水腫或腹水。新生兒高膽紅素血癥。第86頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月(2)促性腺激素釋放素（GnRH）促性腺激素釋放激素是下丘腦分泌產(chǎn)生的神經(jīng)激素，對脊椎動物生殖的調(diào)控起重要作用向雌性動物注射促性腺激素，可以促進(jìn)其超數(shù)排卵。對供體雌性動物和受體動物注射促性腺激素，提高胚胎在受體雌性動物體內(nèi)的成活幾率。第87頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月(3)人胎盤免疫調(diào)節(jié)因子(HumanPlacental

ImmunoregulatoryFactorHPIFHPIF具有免疫調(diào)節(jié)活性,能提高機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫水平。動物試驗及臨床應(yīng)用證明:使用安全、無毒副作用、無抗原性。HPIF是一種較為理想的免疫調(diào)節(jié)劑。第88頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月制備工藝：健康新鮮胎盤,洗凈、剪去臍帶、羊膜及大血管,剪碎,稱重,加生理鹽水,再用勻漿器搗碎,于低溫冰箱及室溫中反復(fù)凍融數(shù)次透析(各家不全相同,有的用靜置法透析36～48小時;有的用負(fù)壓透析12小時;有的則用超濾代替透析),取透析液定濃度,除菌過濾后分裝安瓿,封口第89頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)人體來源生物制品制備實例

（Exampleofbio-preparateapplicationtohuman）一、人血漿白蛋白制劑的制備（preparateofhumanbloodplasmaalbumin

）

血（無抗凝劑）→自然凝固→分離出血清（無纖維蛋白酶原、凝血因子等）血+混合抗凝劑草酸銨草酸鉀離心上清血漿總蛋白：6.2-7.9%白蛋白：3.8-4.8%水：90-92%（現(xiàn)常用肝素、檸檬酸鈉）第90頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）結(jié)構(gòu)和性質(zhì)（structureandcharacter）白蛋白（albumin）又稱人血漿白蛋白，約占血漿總蛋白的65%。是維持血漿膠體滲透壓的主要物質(zhì)。白蛋白為單鏈分子pI為4.7，易溶于水，在60%硫酸銨飽和度以上沉淀。對酸較穩(wěn)定，受熱變性。從人體中分離的白蛋白有兩種：人血漿白蛋白和胎盤白蛋白。第91頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）工藝路線（圖3-1）

2%利凡諾、NaHCO3pH8.6,離心分離絡(luò)合物蒸餾水NaCl、HCl弱酸性，65℃，離心離心液濃縮超濾濃縮液滅活病毒

65℃/h，60℃/10h熱處理液除菌除菌過濾白蛋白液干燥冷凍干燥白蛋白圖3-1白蛋白生產(chǎn)工藝路線去雜蛋白人血漿（%）第92頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）工藝要點

①絡(luò)合（利凡諾沉淀，乳酸依沙吖啶）：攪拌血漿用NaHCO3調(diào)pH至8.6，加等體積2%利凡諾溶液，攪拌后靜置2-4h，分離上清與絡(luò)合物沉淀。②解離：在沉淀中加滅菌蒸餾水。用0.5mol/LHCI調(diào)節(jié)pH至弱酸性，加NaCl至0.15%-0.2%，攪拌下進(jìn)行解離。第93頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月③去雜蛋白：65℃恒溫1h，離心分離出上清液。④熱處理（60℃，10h）：滅活病毒。⑤凍干品白色疏松物體。白蛋白含量占95%以上，水分<1%，水溶后pH為6.6-7.2，硫酸銨殘量<0.01%，細(xì)菌學(xué)和熱原質(zhì)檢測合格。第94頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月二、尿激酶（urokinase）的制備（1）天然尿激酶是由兩條肽鏈通過二硫鍵連接而成。是絲氨酸蛋白酶，絲氨酸、組氨酸是活性中心必需的氨基酸。該酶底物專一性很強(qiáng)，血纖維蛋白溶酶原是唯一的天然蛋白質(zhì)底物，作用于Arg-Val鍵上，使纖溶酶原轉(zhuǎn)為纖溶酶。（2）尿激酶的pI為8-9。溶液狀態(tài)不穩(wěn)定。用于治療各種新血栓形成或血栓梗塞疾病。第95頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）工藝流程（圖3-2）男性尿

沉淀10℃下,pH8.5上清尿液酸化pH5.0-5.5酸化尿吸附硅藻土，5℃硅藻土吸附物洗滌5℃，水硅藻土柱洗脫0.02%氨水，0.1mol/LNaCl飽和NaH2PO4,調(diào)pH8.0洗脫液去熱源、色素DEAE-SephadexA50柱，pH8.0,（二乙氨乙基葡聚糖）流出液（活性部分）濃縮羧甲基纖維素（CMC柱，pH4.2)CMC柱洗脫（HAC-NaAC)氨水+NaCl,pH11.5-11.8洗脫液透析H2O,4℃透析液凍干成品圖3-2尿激酶生產(chǎn)工藝路線第96頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（4）工藝要點①收尿：男性尿，8h內(nèi)處理。調(diào)尿液pH6.5以下。②硅藻土吸附：加入1%的硅藻土，5℃下攪拌吸附1h。③洗脫：硅藻土吸附物用5℃冷水洗滌后裝柱，當(dāng)洗脫液由清變渾時開始收集。④除熱原、色素：收集液用飽和NaH2PO4，調(diào)pH8.0，加NaCl調(diào)電導(dǎo)至22M/Ω，過DEAE-SephadexA50層析柱，收集流出活性部分。第97頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月⑤CMC濃縮：流出液用1mol/LHAc調(diào)至pH4.2，用蒸餾水調(diào)電導(dǎo)至16-17M/Ω，通過CM-C層析柱。用10倍體積的pH4.2的HAC-NaAc緩沖液洗滌柱床。洗后用0.1%氨水0.1mol/LNaCl溶液洗脫尿激酶。收集活性組分，雜質(zhì)被吸附。⑥產(chǎn)品質(zhì)量：無色澄清液或白色凍干粉末。酶活力>15,000IU/mg蛋白質(zhì)。第98頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月三、絨膜促性激素（HCG）的制備（1）HCG的性質(zhì)（characterofHCG）HCG是一種糖蛋白，由α、β兩亞基組成，易溶于水，pI為3.2-3.3。HCG由胎盤滋養(yǎng)層合體細(xì)胞所分泌。婦女妊娠45-70天，尿中HCG含量可達(dá)30.000-50.000IU/24h。治療女性不育癥，神經(jīng)性皮炎。男性性功能過低癥和隱睪癥，子宮出血和習(xí)慣性流產(chǎn)。第99頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月

圖3-3HCG生產(chǎn)工藝路線孕婦尿尿：苯甲酸-乙醇（飽和液）：乙醇（1：0.075：5）用HCl調(diào)pH4-5HCG(粗品）提取NaACpH4.8提取液透析水，5℃以下透析內(nèi)液吸附（CMSepharoseCI-6B）羧甲基瓊脂糖凝膠吸附后交換劑洗滌Ⅰ，Ⅱ峰NaAC,pH4.8,pH5.9洗滌后交換劑洗脫NaAC,pH8.5洗脫液冷凍干燥

—30℃HCG精品

溶解蒸餾水，10℃以下HCG溶液透析pH6.8,5℃以下透析內(nèi)液吸附羥基磷灰石，pH6.8吸附物解吸0.5mmol/L,1.0mmol/L磷酸鹽緩沖液（PBS),pH6.8解吸液冷凍干燥—30℃HCG純品（2）HCG生產(chǎn)工藝路線粗制第100頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）工藝要點①吸附粗品：先用HCl調(diào)孕婦尿至pH4-5，加苯甲酸—乙醇飽和液（孕婦尿：苯甲酸乙醇飽和液：乙醇=1:0.075:5）攪拌1h靜置2-3h，過濾，棄濾液，得吸附物。在攪拌下加入95%乙醇，至苯甲酸全部溶解有絮狀沉淀產(chǎn)生，靜置過夜，離心，沉淀用95%乙醇和丙酮洗滌，干燥得粗制品。第101頁，課件共109頁，創(chuàng)作于2023年2月②提取：在4℃下加10倍量0.067mol/L、pH4.8醋酸鹽緩沖液，攪拌4h，離心，取上清液。沉淀再提取2h。合并兩次提取液，棄去沉淀。③離子交換層析：CM-Sepharose柱用0.01mol/L的醋酸鹽緩沖液平衡后進(jìn)行層析上柱。依次用p