21、沒有人陪你走一輩子，所以你要適應(yīng)孤獨，沒有人會幫你一輩子，所以你要奮斗一生。22、當眼淚流盡的時候，留下的應(yīng)該是堅強。23、要改變命運，首先改變自己。24、勇氣很有理由被當作人類德性之首，因為這種德性保證了所有其余的德性。--溫斯頓．丘吉爾。25、梯子的梯階從來不是用來擱腳的，它只是讓人們的腳放上一段時間，以便讓別一只腳能夠再往上登。415瘧原蟲血片制作染色415瘧原蟲血片制作染色21、沒有人陪你走一輩子，所以你要適應(yīng)孤獨，沒有人會幫你一輩子，所以你要奮斗一生。22、當眼淚流盡的時候，留下的應(yīng)該是堅強。23、要改變命運，首先改變自己。24、勇氣很有理由被當作人類德性之首，因為這種德性保證了所有其余的德性。--溫斯頓．丘吉爾。25、梯子的梯階從來不是用來擱腳的，它只是讓人們的腳放上一段時間，以便讓別一只腳能夠再往上登。415瘧原蟲血片制作染色2021/3/252瘧原蟲血片制作及染色技術(shù)湖北省疾病預(yù)防控制中心血片制作所需設(shè)備載玻片具有磨砂面，且規(guī)格是玻片寬度乘長度在25.2*75.2mm，厚度1mm~1.2mm為好。推玻片有專用的。但現(xiàn)在一般選擇邊緣光滑整齊的載玻片替代推玻片。采血針使用一次性的采血針。玻片盒木制/塑料均可以。75%酒精棉球用于采血部位的消毒。記號筆/B2鉛筆用于載玻片上編寫號碼。Whatman(沃特曼)903號；將濾紙切成10*2cm大小的紙片，以口徑為1.2cm的大孔管，在濾紙上壓出兩個圓形印跡備用。采血時間取血時機現(xiàn)癥病人一般可隨時取血，瘧疾普查時可不考慮取血時機。但在診斷或需要某期瘧原蟲作標本時，則應(yīng)掌握適宜的取血時機。間日瘧在寒熱發(fā)作時，外周血液中主要可見環(huán)狀體期；發(fā)作后數(shù)小時，環(huán)狀體發(fā)育到滋養(yǎng)體期，瘧色素形成，形態(tài)較易辯認，為診斷瘧疾的有利時機；36~48小時，可檢出裂殖體；發(fā)作一、二次后，配子體出現(xiàn)較多。惡性瘧較理想的取血時間是在發(fā)作后至20小時內(nèi)取血，初發(fā)患者退熱后常查不到瘧原蟲。2023/7/206涂制血膜規(guī)則用于檢查瘧原蟲的血涂片有兩種：一種是將血液涂呈薄膜狀，稱薄血膜；一種是血液涂成圓盤狀，稱厚血膜。薄血膜上的血細胞要求平輔在玻片上面。涂片順序，先厚后?。晃恢梅峙?，血片自左向右：薄-厚-標簽；推薄片用玻片短邊。制作厚血膜制作薄血膜

厚血膜血量及涂片法厚血膜用推片的一角，從取血部位刮取約4~5微升血量（相當于火柴頭大?。?，使血滴與平置的載玻片接觸，再由里向外一個方向旋轉(zhuǎn)，轉(zhuǎn)2~4圈，涂成直徑0.8~1厘米大小圓形厚血膜，血膜厚薄均勻，過厚易于脫落，過薄達不到檢出率的要求。2023/7/208薄血膜血量及涂片法薄血膜取潔凈的載玻片2張，1張平置在桌上，以左手拇指，食指夾持載玻片兩端（手指切勿接觸玻片表面），用另一張邊緣平滑（最好為磨口邊緣）的載玻片做推片，用推片一端邊緣的中點從取血部分刮取約1~1.5微升的血量（相當于1/4火柴頭大?。?，使血滴與平置的載玻片接觸，并形成25~35度夾角，待血液向兩側(cè)擴展約2厘米寬度時，均勻而迅速地輕輕向左推出（約2.5厘米長）且邊緣帶有“舌狀”的薄血膜。2023/7/209涂制厚、薄血膜的位置通常是將厚、薄血膜涂在一張載玻片上。方法是將載玻片分為3等分（留出標簽或磨砂面位置后的3等分）。厚血膜涂在載玻片靠近標簽或磨砂面方向的右1/3中央處，圓形、厚薄均勻、邊緣整齊。薄血膜涂在載玻片1/2至左1/3的中部位置，舌狀、厚薄均勻。2023/7/2010血片編號血膜制成后，立即將受檢者的個人編號寫在玻片磨砂面上（血片的編號要與血檢登記本上編號一致）以防差錯。2023/7/2011制作血膜的注意事項

1.

玻片清洗時，避免玻片碰撞、磨損。制作血膜的載玻片必須完全清潔而毫無油漬或污垢。制片時，手指只能持載片的邊緣，不能接觸玻片表面，以免油污使薄血膜產(chǎn)生空白區(qū)以及厚血膜脫落。作為推片的玻片邊緣一定要平滑，才能使推出的血膜均勻一致。2023/7/2012制作血膜的注意事項2.剛涂制的血膜要平放在標本盒內(nèi)或者實驗臺面上。厚血膜未干前勿使標本片傾斜，以免未干的血膜傾向一側(cè)，造成血膜厚薄不均，厚處不易溶血和著色而影響檢查結(jié)果；晾干血膜時應(yīng)注意防塵、防止蒼蠅、蟑螂等昆蟲吮吸血膜，干后應(yīng)及時裝入標本盒內(nèi)。新木制標本盒需敞開放置一段時間，讓木醇揮發(fā)后才能使用，以免厚血膜血紅蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。2023/7/2013制作血膜的注意事項3.血膜讓其自然干燥，切忌用太陽曬或火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。夏天標本盡可能24~48小時內(nèi)固定染色；冬天也不能超過72小時。放置時間越久，厚血膜越不易溶血，染色效果也差。若不能及時染色，薄血膜宜先用甲醇固定（1~3分鐘）然后用過濾清水或自來水對厚血膜溶血，晾干后包好置干燥器于冰箱內(nèi)保存，用時將干燥器置室溫中1~2小時后取出染色。2023/7/2014血片的染色

（一）染液的種類及染色原理染液種類：目前所用的血片染色液，雖然名稱很多，但都是從羅門諾夫斯基氏創(chuàng)造的染液變化過來的?？偟目煞譃樗芤汉途凭芤簝纱箢悾罢甙_氏、西氏（Simon)、J.S.B氏染液等，后者包括利氏(Leishman)、瑞氏和吉氏染液（被國家推薦使用）等。這些染液中的主要染劑都包含美蘭、伊紅和由美蘭氧化所成的天青，所以稱為多色性染劑。血片的染色

（一）染液的種類及染色原理染色原理：伊紅是酸性水溶性鈉鹽，美蘭是堿性水溶性鹽酸鹽，當它們各自溶化水中時，就離解為帶陽電和陰電的離子。伊紅主要離解為酸性的陽離子，在遇到堿性的蛋白質(zhì)如血紅蛋白、嗜伊紅白血球顆粒等即可結(jié)合成不易溶于水的沉淀物染成紅色。美蘭主要離解為堿性的美蘭離子，美蘭就與瘧原蟲、淋巴和大單核細胞的胞漿、嗜堿性白細胞的顆粒等酸性蛋白質(zhì)結(jié)合染成蘭色。2023/7/2016血片的染色

（一）染液的種類及染色原理染色原理：美蘭與伊紅都不能使原蟲和白細胞的核著色，必須由天青作為媒介（染媒）才能使其著色。天青雖然也是堿性染劑，但又具有染媒作用，使原蟲核和白細胞核等原來只能染上極淡蘭色的結(jié)構(gòu)染上顯著的酸性染劑伊紅，這樣，就使白細胞粗大的核染成顯著的既蘭又紅的紫蘭色，而較小或菲薄的原蟲核和淋巴細胞原漿中的顆粒染成紫紅色。2023/7/2017血片的染色

（一）染液的種類及染色原理注意：蛋白質(zhì)是二性電解質(zhì)，當其處于較等電點為酸的溶液中時，便呈堿的作用，即與酸或陰離子結(jié)合，這就說明為何在染液偏酸時，伊紅的著色力強，使紅細胞著色鮮艷而淋巴細胞和原蟲的胞漿著色不顯著；反之，蛋白質(zhì)在偏堿的溶液中呈酸的作用而中和堿基，也就說明為何染液偏堿時，紅細胞和嗜伊紅白細胞的顆粒等被染成紫蘭色。

伊紅在水溶液內(nèi)遇到美蘭或天青，即可互相化合而產(chǎn)生沉淀從而失去染色力，因此，吉氏染液的母液絕對不能進水。2023/7/2018血片的染色

（二）吉氏染液母液配置方法取吉氏粉0.5克置于研缽中，加少量甘油充分研磨，再加再磨，至25毫升加完為止，倒入60或100毫升帶有玻塞的有色玻瓶中。在研缽中加少量甲醇，洗去甘油染液混入瓶內(nèi)，至25毫升甲醇洗凈缽中甘油染液為止，塞緊瓶塞，充分搖勻，置于55~60℃水浴中或溫箱內(nèi)24小時或室溫內(nèi)3~5天，多加搖動，即成原液。吉氏染液是目前較優(yōu)良的血膜染劑，即使在炎熱天氣中，亦可經(jīng)久不變。材料：1、吉氏粉0.5克2、甘油25毫升3、甲醇25毫升2023/7/2019血片的染色

（三）吉氏染液血片染色方法血膜干燥后，用甲醇或無水酒精固定薄血膜，用過濾清水或自來水對厚血膜溶血，然后再進行染色。

成批血片染色：將已固定薄血膜的血片插入染色缸，倒入2%吉氏染液稀釋液（2毫升原液加中性蒸餾水98毫升稀釋均勻即成），同時對厚薄血膜染色30分鐘（如染液不合標準時，得酌情增減染色時間），然后用清水輕輕將染液沖去，再用清水輕輕沖洗一次，干凈后將血片標本（血膜面朝下）插于晾干板上，待干鏡檢。2023/7/2020血片的染色

（三）吉氏染液血片染色方法單張血片染色：薄血膜經(jīng)甲醇固定干燥后，用2%吉氏染液稀釋液1~2毫升，滴入血片標本上染色30分鐘左右，或用中性蒸餾水1~2毫升，加吉氏母液1~2滴，混合均勻后滴入血片標本上，染色20~30分鐘，然后用清水輕輕將片上的染液沖洗干凈，晾干鏡檢。2023/7/2021影響染色效果的因素血片染色好壞除了與玻片是否清潔，血片制作質(zhì)量好壞等有關(guān)外，還受到以下幾個因素的影響：（1）染料溶劑的質(zhì)量染料、甲醇和甘油如果不純，常使配制的染液偏酸或偏堿而影響染色效果。因此必須用分析純的甲醇和中性甘油，而且在配制時所用的器具必須干凈而無水份。2023/7/2022影響染色效果的因素（2）染液的新舊新配制的染液因色素尚未充分溶解，染色力較弱且常呈現(xiàn)偏堿性。染液存放時間越久，染色力越強。通常在染液配制1~2周后才使用，盛裝染液的瓶子應(yīng)加塞蓋密。以防吸潮而影響染液質(zhì)量。2023/7/2023影響染色效果的因素（3）染液稀釋后使用時間吉氏和瑞氏染液的主要成份是美藍、伊紅和由美藍氧化產(chǎn)生的天青，三者能在酒精溶液中溶解，但在水溶液中伊紅遇到美藍和天青即產(chǎn)生沉淀。因此，必須在稀釋染液當時使用，一般在半小時內(nèi)染色力最強。2023/7/2024影響染色效果的因素（4）染液的稀釋濃度染液的濃度高其著色就快而深，從而瘧原蟲寄生紅細胞的薛氏點粗大顯著，但顏色常偏堿；染液濃度過低則染色時間久，顏色偏酸，薛氏點不明顯或消失。2023/7/2025影響染色效果的因素（5）染色時間染色時間長染色效果好，反之較差。室溫高則著色快，染色時間可略縮短，氣溫低可適當延長。因此染色時間應(yīng)根據(jù)染液的質(zhì)量、新舊、稀釋濃度和氣溫而適當增減。2023/7/2026影響染色效果的因素（6）染色用水染液的稀釋用水和染色后沖洗用水應(yīng)選擇Ph7.0~7.2清潔水，通常使用的新鮮的蒸餾水或過濾的冷開水，以及自來水、井水、河水、泉水和雨水等。如果偏酸或偏堿，可用緩沖蒸餾水調(diào)整。染色后發(fā)現(xiàn)血膜顏色偏藍（偏堿）或偏紅（偏酸）時，可用與之相反的酸、堿度水沖洗血片予以糾正。2023/7/2027影響染色效果的因素（7）染色后不要直接將染液殘渣倒掉，應(yīng)沿玻片或染色缸邊緣加水使染液表面一層溢出，并輕輕沖洗，以免染液色素顆粒沾污染片血膜。2023/7/2028注：用于薄血膜的染色和一般漂洗時，用蒸餾水稀釋至1000ml，用于厚血膜及同一張玻片上厚血膜與薄血膜的染色時，用蒸餾水稀釋至500ml。

溶液Ⅰ溶液ⅡpHml磷酸氫二鈉含量(g)ml磷酸二氫鉀含量(g)6.654.70.52148.81.356.868.40.65126.81.15789.50.8599.20.97.196.80.9288.20.87.2105177.20.77.4126.31.255.10.5配制pH6.6~7.4緩沖液兩種貯備液用量表血片制作和染色質(zhì)量標準項目檢查內(nèi)容質(zhì)量標準好中差血片制作厚血膜血量4～5цl略多或略少過多或過少位置玻片右1/3稍偏右偏右過多直徑0.8～1.0cm0.7～0.8或1.0～1.2cm<0.7或>1.2cm外觀圓形厚膜均勻，邊緣整齊圓形稍不均不整齊厚薄不勻影響著色薄血膜血量1～1.5цl略多或略少過多或過少位置玻片1/2～1/3處稍偏右或偏左偏右或偏左過多直徑2.0～2.5cm稍大或稍小過多或過少外觀舌狀厚薄均勻，無劃痕舌狀稍不均厚薄不勻呈波浪型，有劃痕血片染色質(zhì)量外觀厚血膜完整厚血膜半脫落厚血膜全脫落涂片規(guī)則涂片順序，先厚后?。晃恢梅峙?，血片自左向右：薄-厚-標簽；推薄片用玻片短邊。錯1項扣3分2023/7/2030瘧原蟲計數(shù)法（實驗室檢驗報告單）

★全血膜發(fā)現(xiàn)同種、同期瘧原蟲數(shù)在10個以內(nèi)均記實際數(shù)，10個以上但還不到平均每個視野一個蟲登記“少”。如P.V.T少S3.G1，P.f.R少G2?！?/p>

平均每個視野同種、同期瘧原蟲數(shù)在1~5個時記“＋”如pfR+，6~10個以上時記“＋＋”如p.f.R++，10~100個時記“+++”，100個以上時記“＋＋＋＋”，如p.V.R+++G+,