血清糖鏈抗原153(CA153)定量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程××醫(yī)院檢驗(yàn)科臨床免疫室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號(hào):XXX生效日期：共頁(yè)第頁(yè)1.目的規(guī)范操作流程，保證血清糖鏈抗原153(CA153)定量檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性。2.原理采用雙抗體夾心法原理，整個(gè)過(guò)程18min完成?？寺A153特異抗體混勻，形成夾心復(fù)合物。2．2·第2步孵育：加入鏈霉親和素包被的微粒，讓上述形成的復(fù)合物通過(guò)生物素與鏈霉親和素間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。質(zhì)被清洗液洗去，電極加電壓后產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過(guò)光電倍增管進(jìn)行測(cè)定。檢測(cè)結(jié)果由機(jī)器自動(dòng)從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出。此曲線由儀器通過(guò)2點(diǎn)定標(biāo)校正，由從試劑條形碼掃描入儀器的原版標(biāo)準(zhǔn)曲線而得。3.標(biāo)本要求3．1．1血清標(biāo)本采集用標(biāo)準(zhǔn)樣本試管或含分離膠的試管。標(biāo)本在2~8℃可穩(wěn)定7天，－20℃可穩(wěn)定3個(gè)月。含沉淀的標(biāo)本使用前需離心。心 (大約15000g，10min或2000~3500r／min，5~10min)澄清，方可進(jìn)行檢測(cè)。3．3·患者準(zhǔn)備的一般要求：患者在采血前24h內(nèi)應(yīng)避免運(yùn)動(dòng)和飲酒，不宜改變飲食習(xí)慣和睡眠習(xí)慣。一般主張?jiān)诮?2h后空腹取血，門診患者提倡靜坐15min后再采血。4.試劑與儀器4．2·試劑使用：試劑盒中的試劑是一個(gè)整體，打開后可立即使用，不能被分開。正確操作需要的所有信息可通過(guò)相應(yīng)的試劑條碼讀取。素結(jié)合能力：470ng生物素／mg粒子。含防腐劑。shSysCleanProCellM緩沖液、ProbeWashM清洗液、廢物袋。4．5．1存放在2~8℃。為了確保使用前自動(dòng)混勻期間提供足夠量的磁性微粒，試劑盒5.操作步驟5．1．1在使用前分析儀自動(dòng)使微粒處于懸浮狀態(tài)。通過(guò)各試劑條形碼可讀取其詳細(xì)實(shí)驗(yàn)參數(shù)。在少數(shù)情況下，分析儀無(wú)法自動(dòng)讀取信息時(shí)，請(qǐng)輸入標(biāo)簽上的15位數(shù)字序列。儀將自動(dòng)調(diào)節(jié)反應(yīng)溫度及各試劑瓶瓶蓋的開關(guān)狀態(tài)。6.校準(zhǔn)153檢測(cè)又可溯源至酶免CA153檢測(cè)法和FujirebioDiagnostics的CA153RIA。每批CA153Ⅱ試劑有一條形碼標(biāo)簽，含有該批試劑定標(biāo)所需的特殊信息。應(yīng)用CA153ⅡCalSet定標(biāo)液定標(biāo)校正母定標(biāo)曲線。6．2·定標(biāo)頻率：須使用新鮮試劑對(duì)每個(gè)試劑批進(jìn)行一次定標(biāo)(即試劑盒上機(jī)登入后的24h內(nèi))。下列情況建議重新定標(biāo)：使用同一批試劑的1個(gè)月后(28天)；7天后(在分析儀上使用同一試劑盒)；根據(jù)需要：質(zhì)控結(jié)果超出范圍時(shí)，比如質(zhì)控結(jié)果在規(guī)定的限值外；若兩水平質(zhì)控均在控，則定標(biāo)曲線可延至試劑及質(zhì)控批號(hào)更換。6．3·定標(biāo)驗(yàn)證：分析儀的軟件會(huì)自動(dòng)檢查定標(biāo)曲線的有效性及任何偏離。7.質(zhì)控該測(cè)試適用的質(zhì)控液PreciControlTumorMarker1和2；也可以用其他合適的質(zhì)控液，如××LyphochekTumorMarkerPlusControl。各濃度區(qū)域的質(zhì)控至少每24h、每一個(gè)新批號(hào)試劑盒或每一次定標(biāo)后測(cè)定一次。質(zhì)控間隔期應(yīng)適用于各實(shí)驗(yàn)室的具體要求。檢測(cè)值應(yīng)落在確定的范圍內(nèi)，如果出現(xiàn)質(zhì)控值落在范圍以外，應(yīng)采取糾正措施。8.結(jié)果判斷8．1·結(jié)果計(jì)算：對(duì)每一個(gè)標(biāo)本，免疫分析儀會(huì)自動(dòng)計(jì)算CA153含量，單位是U／ml8．2·檢測(cè)范圍：1．00~300U／ml(由master定標(biāo)曲線的最低檢測(cè)限與最高檢測(cè)限決定)。如果測(cè)定值低于最低檢測(cè)限，報(bào)告為＜1．00U／ml。如果測(cè)定值高于檢測(cè)范圍，報(bào)告為＞300U／ml(結(jié)果達(dá)到3000U／ml樣本應(yīng)作10倍稀釋)。的標(biāo)本可用通用稀釋液手工進(jìn)行1∶10稀釋。稀釋后的標(biāo)本CA153Ⅱ含量必須高于30U／ml。如用手工稀釋結(jié)果應(yīng)乘上稀釋倍數(shù)。如果是機(jī)器自動(dòng)稀釋，機(jī)器會(huì)自動(dòng)計(jì)算結(jié)果。8．4·檢測(cè)結(jié)果的不確定度：具體參見AFP標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的相關(guān)內(nèi)容。9.生物參考區(qū)間本實(shí)驗(yàn)室血清CA153生物參考區(qū)間≤25U／ml。10.性能參數(shù) 或＜100ng／ml)的影響。對(duì)于接受高劑量生物素治療的患者(＞5mg／d)，必須在末次生物素治療8h后采集樣本。檢測(cè)結(jié)果不受類風(fēng)濕因子影響(RF不超過(guò)1500IU／ml)。通常，當(dāng)CA153濃度低于20000U／ml時(shí)不會(huì)出現(xiàn)高劑量鉤狀效應(yīng)。然而，由于CA153的異源性質(zhì)，因此低于該值的高劑量鉤狀效應(yīng)并能完全避免。如果出現(xiàn)不合理的過(guò)低結(jié)果，就應(yīng)當(dāng)以1∶10稀釋樣本后重新檢測(cè)。針對(duì)28種常用藥物進(jìn)行了體外檢測(cè)。未發(fā)現(xiàn)有藥物影響檢測(cè)結(jié)果。少數(shù)病例中極高濃度的分析物特異性抗體、鏈霉親和素或釕抗體會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。通過(guò)適宜性的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可將影響因素降到最低。11.臨床意義體外免疫