目錄術(shù)語(yǔ)2023/7/2811微生物基礎(chǔ)知識(shí)微生物定義：個(gè)體微小，與人類生活密切相關(guān)一大類生物群體，包括細(xì)菌、病毒、真菌、放線菌、立克次體、支原體、衣原體、螺旋體。影響微生物生長(zhǎng)的主要因素

酸堿度：酵母和霉菌適宜在微酸性環(huán)境中溫濕度：微生物有各自的最適溫度，一般是在20～70℃左右。氧氣：厭氧、需氧氣、兼性厭氧抑菌性物質(zhì)（抗生素、防腐劑、消毒劑）：微生物的殺滅程度營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（C\N\P）微量元素及維生素：包括碳化物、氮化物、水和無機(jī)鹽以及微量元素等2023/7/2821.1幾種常見細(xì)菌金黃色葡萄球菌沙門氏菌2023/7/283

大腸桿菌2023/7/284銅綠假單胞桿菌2023/7/285枯草芽孢桿菌2023/7/286

酵母菌2023/7/287

黑曲霉2023/7/2881.2常見污染藥物制劑的微生物1.葡萄球菌：可引起局部感染2.大腸桿菌：膽道及尿道感染3.綠膿桿菌：化膿性感染、中耳炎、肺炎4.枯草桿菌：結(jié)膜炎5.酵母菌：使糖分解，藥液產(chǎn)生有機(jī)酸6.霉菌：使制劑霉壞、酸敗變質(zhì)2023/7/2891.3微生物繁殖的特點(diǎn)2023/7/28101、水和水溶液2、自然原材料（動(dòng)植物來源）3、木制材料4、人和動(dòng)物上/內(nèi)（皮膚、口腔/喉部、腸道）5、空氣6、地面7、衣服1.4常見微生物的存在環(huán)境2023/7/28112潔凈區(qū)基礎(chǔ)知識(shí)2.1潔凈區(qū)定義：潔凈區(qū)：需要對(duì)塵粒及微生物含量進(jìn)行控制的房間（區(qū)域）。其建筑結(jié)構(gòu)、裝備及其使用均具有減少該區(qū)域內(nèi)污染源的介入、產(chǎn)生和滯留的功能。-------------------------中國(guó)GMP.潔凈室（房間）：一個(gè)通過設(shè)計(jì)、維護(hù)及控制手段達(dá)到防止發(fā)生藥品微粒和微生物污染的房間。這類房間應(yīng)能穩(wěn)定地保持適當(dāng)?shù)目諝鉂崈艏?jí)別-------美國(guó)FDA無菌工藝藥品cGMP工業(yè)指南（2019年）潔凈區(qū)的兩大污染：1）微生物2）塵埃粒子2023/7/28122.2微生物和灰塵之間的關(guān)系灰塵——“微生物的飛行器”。微生物不是憑空存在的，99%的微生物都附在顆粒上?？刂瓶諝庵械奈⒘?shù)，就是控制了微生物數(shù)量?；覊m、微粒具有沉降和粘附的趨勢(shì)，所以同一區(qū)域內(nèi)，地面是微粒相對(duì)集中的地方，也是微生物相對(duì)較多的地方，墻壁也容易粘附灰塵。2023/7/2813

2.3粒子的粒徑范圍及懸浮時(shí)間不同粒徑粒子在空氣中的懸浮時(shí)間2023/7/28142.4潔凈區(qū)設(shè)計(jì)特點(diǎn)1、表面光滑、易于清潔、無死角；2、不同潔凈度級(jí)別的房間有足夠的壓差；3、天花板密封；4、100級(jí)區(qū)無地漏、其它區(qū)域地漏應(yīng)液封；5、設(shè)置更衣室；6、更衣室安裝過濾器；7、更衣室的潔凈度級(jí)別與高級(jí)別的房間相同；8、氣流流向有效等等具體見新版GMP——廠房

2023/7/2815各級(jí)別空氣懸浮粒子標(biāo)準(zhǔn)（2019版GMP）

2.5潔凈區(qū)潔凈級(jí)別劃分2023/7/2816

潔凈區(qū)微生物檢測(cè)動(dòng)態(tài)標(biāo)準(zhǔn)潔凈區(qū)潔凈級(jí)別劃分2023/7/28172.6空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)及過濾器1.HVAC概念：空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)，是包含溫度、濕度、空氣清凈度以及空氣循環(huán)的控制系統(tǒng)，被稱為HVAC（英語(yǔ)：Heating,Ventilation,Air-conditioning）。

國(guó)空氣過濾器分類2023/7/28182.7潔凈室氣流2023/7/28192023/7/28202023/7/28212.8飲用水和純化水飲用水：為天然水經(jīng)凈化處理所得的水，其質(zhì)量必須符合現(xiàn)行中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》。純化水：為飲用水經(jīng)蒸餾法、離子交換法、反滲透法或其他適宜的方法制得的制藥用水。不含任何添加劑，其質(zhì)量應(yīng)符合純化水項(xiàng)下的規(guī)定。2023/7/28222.9純化水標(biāo)準(zhǔn)2023/7/28232023/7/28242.1010版GMP制藥用水的適用范圍2023/7/282510版GMP的相關(guān)規(guī)定2023/7/28263潔凈區(qū)清潔效果評(píng)定

3.1塵埃粒子測(cè)定

塵埃粒子計(jì)數(shù)儀原理：采用激光二極管作為光學(xué)傳感光源，光學(xué)傳感器產(chǎn)生由探測(cè)激光經(jīng)塵埃粒子散射的信號(hào)脈沖，并對(duì)其輸出的脈沖信號(hào)進(jìn)行數(shù)字信號(hào)處理。

測(cè)試粒徑(um)：

0.3、0.5、1、2、3、5(有效0.5、5)

每分鐘取樣量和取樣時(shí)間：100L/min

經(jīng)過一年同步驗(yàn)證穩(wěn)定的空調(diào)系統(tǒng)一個(gè)房間采樣一個(gè)點(diǎn)。

適用范圍：

100級(jí)、萬(wàn)級(jí)、十萬(wàn)級(jí)、

2023/7/28273.2微生物測(cè)定《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》2019修訂版：“為評(píng)估無菌生產(chǎn)的微生物狀況，應(yīng)對(duì)微生物進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，監(jiān)測(cè)方法有沉降菌法、定量空氣浮游菌采樣法和表面取樣法（如：棉簽擦拭法和接觸碟法）等。動(dòng)態(tài)取樣應(yīng)避免對(duì)潔凈區(qū)造成不良影響。成品批記錄的審核應(yīng)同時(shí)考慮環(huán)境監(jiān)測(cè)的結(jié)果。對(duì)表面和操作人員的監(jiān)測(cè)，應(yīng)在關(guān)鍵操作完成后進(jìn)行。在正常的生產(chǎn)操作監(jiān)測(cè)外，可在系統(tǒng)驗(yàn)證、清潔或消毒等操作完成后增加微生物監(jiān)測(cè)”?！皯?yīng)制定適當(dāng)?shù)膽腋×Ｗ雍臀⑸锉O(jiān)控警戒和糾偏限度。操作規(guī)程中應(yīng)詳細(xì)說明結(jié)果超標(biāo)時(shí)需采取的糾偏措施”。2023/7/28281、潔凈區(qū)沉降菌的監(jiān)測(cè)，沉降碟的暴露時(shí)間為4小時(shí)。如果在同一位置使用多個(gè)沉降碟連續(xù)進(jìn)行監(jiān)測(cè)并累積計(jì)數(shù)，則單個(gè)沉降碟的暴露時(shí)間可以少于4小時(shí)；

2、表面微生物的監(jiān)測(cè)采樣可以采用棉簽擦拭法和接觸碟法。棉簽擦拭法適用于不平整的表面；接觸碟法適用于光滑平坦的表面。中國(guó)新版GMP和EUGMP均規(guī)定表面微生物監(jiān)測(cè)的接觸碟的直徑為55mm，可以理解為其接觸面積約為25cm2。

2、采樣時(shí)培養(yǎng)基表面應(yīng)與采樣點(diǎn)接觸不少于10s，向整個(gè)接觸表面施加恒定均勻的壓力（如施加的質(zhì)量約為25g/cm2），不得有環(huán)形或線性運(yùn)動(dòng)，裝置有接觸并拿開后，要加蓋并盡快用適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)條件培養(yǎng)。3.3微生物檢測(cè)方法2023/7/2829

4潔凈區(qū)污染來源2023/7/2830

高速相機(jī)拍攝的打噴嚏照片噴嚏2023/7/2831未洗的手用水自然沖洗

用洗滌劑消毒后手2023/7/28322023/7/2833人是最大的污染源2023/7/2834人體內(nèi)外表面廣泛存在微生物人體攜帶的微生物根據(jù)衛(wèi)生情況不同因人而異2023/7/28355、污染的控制原則：預(yù)防外來污染物的進(jìn)入連續(xù)地消除產(chǎn)生的污染限制污染的產(chǎn)生2023/7/28365.1預(yù)防污染物的進(jìn)入5.1.1空氣中污染的控制為了達(dá)到潔凈室（區(qū)）對(duì)空氣潔凈度級(jí)別的要求，必須對(duì)空氣進(jìn)行凈化處理，并根據(jù)生產(chǎn)工藝要求劃分空氣潔凈度級(jí)別。在藥品生產(chǎn)中，減少空氣中塵粒污染常用的方法——空氣潔凈技術(shù)采用的過濾方法減少空氣微生物的方法有——1）空氣潔凈技術(shù)采用的過濾方法：2）化學(xué)消毒方法：采用消毒劑作用于室內(nèi)空氣和物體表面；3）紫外線照射方法：采用紫外線對(duì)室內(nèi)空氣進(jìn)行照射。過濾器是實(shí)現(xiàn)空氣凈化的主要手段，是潔凈空調(diào)的主要設(shè)備之一?？諝膺^濾器一般按其過濾效率的高低分為初（粗）效、中效、亞高效、高效。總之通過空調(diào)系統(tǒng)合理的正壓設(shè)計(jì)、氣鎖、滅菌與凈化達(dá)到空氣控制目的。

2023/7/2837水的污染控制水去粒子和除菌常用的對(duì)水消毒的方法，與空氣消毒的方法一樣，是化學(xué)消毒劑、過濾與紫外線照射3種?；瘜W(xué)消毒劑方法和膜過濾法適用于水系統(tǒng)的連續(xù)循環(huán)處理。紫外線照射法在水系統(tǒng)中應(yīng)用紫外線照射消毒，適用于需要特殊處理的水，一般在末端之前。這種方法因處理過的水無臭無味，而優(yōu)于化學(xué)消毒劑方法；因不產(chǎn)生微生物移居濾器的現(xiàn)象，而優(yōu)于膜濾器。2023/7/2838物料的污染控制1）進(jìn)入生產(chǎn)的原輔料必須符合標(biāo)準(zhǔn)。2）直接與藥品（中間產(chǎn)品）接觸的設(shè)備、工具、容器、內(nèi)包裝容器應(yīng)清洗滅菌。3）物料進(jìn)出潔凈區(qū)程序控制。具體見WS040011 物料進(jìn)出潔凈區(qū)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程2023/7/2839人員污染的控制1）人員進(jìn)出潔凈區(qū)程序2）人員在潔凈區(qū)的活動(dòng)3)人員衛(wèi)生2023/7/28405.2連續(xù)地消除污染流速：考慮輸入的過濾空氣量與房間的體積流型：持續(xù)地排除被污染的空氣；預(yù)防渦流層流：a、水平層流b、垂直層流2023/7/28415.3限制污染的產(chǎn)生5.3.1人員著裝及更衣保護(hù)藥品不被人員的污染無菌服，維護(hù)良好（無破縫，無污跡）并正確穿戴（系好衣扣無頭發(fā)或衣服外漏）。D級(jí)區(qū)：應(yīng)將頭發(fā)、胡須等相關(guān)部位遮蓋。應(yīng)穿合適的工作服和鞋子或鞋套。應(yīng)采取適當(dāng)措施，以避免帶入潔凈區(qū)外的污染物。C級(jí)區(qū)：應(yīng)將頭發(fā)、胡須等相關(guān)部位遮蓋，應(yīng)戴口罩。應(yīng)穿手腕處可收緊的連體服或衣褲分開的工作服，并穿適當(dāng)?shù)男踊蛐?。工作服?yīng)不脫落纖維或微粒。更衣SOP：嚴(yán)格執(zhí)行。WS040003 人員出入車間程序

2023/7/2842洗手2023/7/28435.3.2潔凈區(qū)行為規(guī)范良好的行為很關(guān)鍵，要穿著正確；移動(dòng)正確；行動(dòng)正確；工作正確。不正確的行為：不要因?yàn)椴徽_的著裝而散播身體的粒子；不要因?yàn)闆]有手套的手接觸表面和物料而引起交叉污染；不要在潔凈室內(nèi)脫去潔凈室工作服；不要用手指擦頭發(fā)或身體其他部位；不要在患感冒或其他疾病期間進(jìn)潔凈室工作；不要在潔凈室吃、喝、抽煙或讀報(bào)等；不要在潔凈室內(nèi)戴首飾和手表；不要在潔凈室使用錯(cuò)誤的擦布或清潔物料；不要在潔凈室快速地走、移動(dòng)、轉(zhuǎn)身；不要從前面走進(jìn)操作者并隔著工作臺(tái)講話；不要靠在工作臺(tái)、產(chǎn)品或其他物料上；不要把手、手臂和手肘放在工作臺(tái)上休息；不要再使用掉在地上的工具和物品。2023/7/2844潔凈區(qū)的清潔與消毒2023/7/2845污染控制和潔凈室技術(shù)是以高度自覺、高度熟練的人員作為基礎(chǔ)的,而這些人員是穿著潔凈服按照規(guī)定的工序工作的。潔凈室工作的人員與在其他環(huán)境中工作的人相比,有更大的責(zé)任去理解、接受和執(zhí)行與潔凈室工作步驟有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。為保證人員、生產(chǎn)工藝與潔凈室之間的有效互動(dòng),既需要訓(xùn)練有素的人員,需要潔凈室的物流記錄,還需要寬敞的存儲(chǔ)區(qū),寬大的擺放位置,及有序的潔凈設(shè)備存放區(qū)和寬敞的氣閘和更衣室。2023/7/2846人員污染1、《中華人民共和國(guó)藥品管理法》（主席令第45號(hào)）第五十一條藥品生產(chǎn)企業(yè)、藥品經(jīng)營(yíng)企業(yè)和醫(yī)療機(jī)構(gòu)直接接觸藥品的工作人員，必須每年進(jìn)行健康檢查?；加袀魅静』蛘咂渌赡芪廴舅幤返募膊〉?，不得從事直接接觸藥品的工作。2、關(guān)注人員健康：人員健康健康分為生理健康、心理健康。潔凈區(qū)人員健康出現(xiàn)問題的后果可能帶來新的治病污染；潔凈區(qū)不良行為出現(xiàn)的概率增加；影響人員的工作情緒；造成職業(yè)傷害，發(fā)生各種安全事故；降低設(shè)備的精度及使用壽命；由于思維、意識(shí)不清而造成誤用等2