微生物的純培養(yǎng) 平板劃線法_第1頁
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文檔簡介

名詞解釋平板劃線分離法是指把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落，通常把這種單菌落當(dāng)作待分離微生物的純種。有時這種單菌落并非都由單個細(xì)胞繁殖而來的，故必須反復(fù)分離多次才可得到純種。其原理是將微生物樣品在固體培養(yǎng)基表面多次作“由點(diǎn)到線”稀釋而達(dá)到分離目的的。1實驗原理分類劃線的形式有多種，可將一個平板分成四個不同面積的小區(qū)進(jìn)行劃線第一區(qū)(A區(qū))面積最小，作為待分離菌的菌源區(qū)，第二和第三區(qū)(B、C區(qū)）是逐級稀釋的過渡區(qū)，第四區(qū)（D區(qū))，則是關(guān)鍵區(qū)，使該區(qū)出現(xiàn)大量的單菌落以供挑選純種用。為了得到較多的典型單菌落，平板上四區(qū)面積的分配應(yīng)是D>C>B>A2實驗原理操作步驟融化培養(yǎng)基將牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基放入水浴中加熱至融化。1倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右，按無菌操作法倒2只平板（每皿約15mL），平置，待凝固。2將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞將試管口通過火焰將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液將試管通過火焰，并塞上棉花左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三到五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)基。灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線，重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃

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