醫(yī)學(xué)微生物學(xué)――第十六章其他細菌第十六章其他細菌第一節(jié)彎曲菌屬彎曲菌屬（Campylobacter）是一類呈逗點狀或S形的革蘭陰性桿菌。有13個種，廣泛分布于動物界，可引起動物和人類的腹瀉、胃腸炎和腸道外感染。對人致病的有空腸彎曲菌、大腸彎曲菌、胎兒彎曲菌等，其中以空彎曲菌（C°jejuni）空腸彎曲菌生物學(xué)特性形態(tài)細長，呈弧形、螺旋形、S形或海鷗狀。運動活潑，一端或兩端有單鞭毛。無芽胞，無莢膜，革蘭陰性。微需氧，需在5%O2、10%CO2和85%N2的環(huán)境中生長。在36?37℃生長良好，但在42℃中選擇性好，此溫度可使糞便中其他細菌的生長受到抑制。營養(yǎng)要求高，用含血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，在同一培養(yǎng)基上可出現(xiàn)兩種菌落，一種為灰白、濕潤、扁平邊緣不整的蔓延生長的菌落；另一種為半透明、圓形、凸起、有光澤的細小菌落。生化反應(yīng)不活潑，不發(fā)酵糖類，氧化酶陽性，馬尿酸鹽水解試驗陽性。有菌體（0）抗原、熱不穩(wěn)定抗原和鞭毛（H）抗原。根據(jù)（0）抗原不同將空腸彎曲菌分為42個血清型。抵抗力較弱。培養(yǎng)物放置冰箱中很快死亡，56℃5min即被殺死。干燥環(huán)境中僅存活3h，培養(yǎng)物放室溫可存活2?24周。致病性與免疫性空腸彎曲菌引起胃腸道感染主要是該菌產(chǎn)生細胞毒素和一種不耐熱腸毒素，后者與大腸埃希菌的LT和霍亂腸毒素有部分抗原交叉?？漳c彎曲菌是引起散發(fā)性細菌性腸炎最常見的菌種之一。該菌常通過污染飲食、牛奶、水源等被食入，或與動物直接接觸被感染。由于空腸彎曲菌對胃酸敏感，經(jīng)口食入至少104個細菌才有可能致病，該菌在小腸內(nèi)繁殖，侵入腸上皮引起炎癥。臨床表現(xiàn)為痙攣性腹痛、腹瀉、血便或果醬樣便，量多；頭痛、不適、發(fā)熱。通常該病自限，病程5?8d。機體感染空腸彎曲菌后可產(chǎn)生特異性抗體，能通過調(diào)理作用和活化補體等作用增強吞噬細胞的吞噬、殺滅細菌及補體的溶菌作用。診斷與防治可用糞便標本涂片、鏡檢，查找革蘭氏陰性弧形或海鷗狀彎曲菌，或用懸滴法觀察魚群樣運動或螺旋式運動。分離培養(yǎng)可直接用選擇性培養(yǎng)基，于42℃和37℃微需氧環(huán)境下培養(yǎng)，可見兩種類型的菌落。鑒定用馬尿酸水解試驗、醋酸吲哚酚水解試驗等生化反應(yīng)以及PCR法直接檢出糞便中的彎曲菌。目前尚無特異性疫苗。預(yù)防主要是注意飲水和食品衛(wèi)生，加強人、畜、禽類的糞便管理。治療可用紅霉素、氨基糖苷類抗生素、氯霉素等。第二節(jié)螺桿菌屬螺桿菌屬(Helicobacter)是從彎曲菌屬中劃分出來的新菌屬，只在37℃生長而在25℃和42℃均不能生長的革蘭陰性螺形桿菌。至少有9個種，代表菌種是幽門螺桿菌(H.pylori)。它與胃竇炎、十二指腸潰瘍和胃潰瘍關(guān)系密切，可能與胃癌的發(fā)生也有關(guān)。幽門螺桿菌生物學(xué)特性革蘭陰性。菌體細長彎曲呈螺形、S形或海鷗狀，大小為0.3?1.0X2.0?5.0口山。在胃粘膜粘液層中常呈魚群樣排列，傳代培養(yǎng)后可變成桿狀或球形。菌體一端或兩端可有多根帶鞘鞭毛，運動活潑。微需氧菌。最適生長溫度為35?37℃。營養(yǎng)要求高，需血液或血清，生長時還需一定濕度（相對濕度98%）。培養(yǎng)3d可見細小、針尖狀、半透明的菌落。生化反應(yīng)不活潑，不分解糖類，氧化酶和過氧化氫酶均陽性，脲酶豐富，快速脲酶試驗強陽性。幽門螺桿菌菌株具有共同抗原，其表面蛋白在不同株之間相似，電泳時出現(xiàn)4條主要區(qū)帶。用免疫印跡分析證明幽門螺桿菌與空腸彎曲菌等的菌體外膜蛋白不出現(xiàn)交叉反應(yīng)，但其鞭毛蛋白具有明顯的交叉反應(yīng)。致病性與免疫性幽門螺桿菌病的確切機制尚未完全闡明，引起胃炎與消化性潰瘍可能是多種因子的協(xié)同作用，如粘附素、脲酶、蛋白酶、細胞毒素和內(nèi)毒素等的毒害作用。幽門螺桿菌存在于胃粘膜，與人類B型慢性胃炎、消化性潰瘍等密切相關(guān)。在胃炎和胃潰瘍患者的胃粘膜中，本菌的檢出率高達80%?100%。另據(jù)研究，幽門螺桿菌感染是胃癌的危險因子。幽門螺桿菌陽性的宿主常出現(xiàn)胃上皮細胞增生，幽門螺桿菌感染時胃內(nèi)亞硝胺、亞硝基化合物增多，一氧化氮的合成可致DNA亞硝化脫氨作用，從而有可能使細胞發(fā)生突變。有報道在cagA基因陽性菌株感染的患者中，有62%出現(xiàn)萎縮性胃炎，2%發(fā)展為胃癌，故認為cagA基因與胃癌發(fā)生相關(guān)。感染幽門螺桿菌后，在病人血液和胃液中能檢出特異性IgG、IgM和IgA抗體；亦產(chǎn)生多種細胞因子，但各作用不同，如IL—2、IL—6可能對抗感染有利，而IL—8、TNF等可能與致病有關(guān)。診斷與防治組織活檢標本可用于組織學(xué)檢查或?qū)⒒顧z組織磨碎用于分離培養(yǎng)、血液用于測抗體含量?？焖僭\斷方法有：①直接涂片鏡檢：為革蘭陰性，細長彎曲呈海鷗狀細菌。②快速脲酶分解試驗：用尿素培養(yǎng)基，如培養(yǎng)基由黃變紅為陽性。③血清學(xué)診斷：檢測血清中抗幽門螺桿菌菌體抗體與抗脲酶抗體。④分子生物學(xué)技術(shù)：用16SrDNA寡核苷酸探針或用PCR檢測幽門螺桿菌。分離培養(yǎng)則用選擇培養(yǎng)基在微需氧和濕潤的環(huán)境中，35℃孵育4天觀察菌落。再以氧化酶、過氧化氫酶及脲酶試驗進行鑒定。目前正在試用重組脲酶幽門螺桿菌疫苗，并證明疫苗不僅有預(yù)防作用，同時還具有治療作用。治療可用抗菌療法，多采用以膠體次枸櫞酸鉍或抑酸劑為基礎(chǔ)，再加兩種抗生素的三聯(lián)療法。第三節(jié)假單胞菌屬假單胞菌屬(Pseudomonas)是一類革蘭陰性、無芽胞、有莢膜和鞭毛，需氧，直或微彎的桿菌。分布廣泛，種類繁多，到目前為止已超過200種，與人類關(guān)系較大的有銅綠假單胞菌，熒光假單胞菌和類鼻疽假單胞菌等。銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌(P.aeruginosa)俗稱綠膿桿菌，廣泛分布于自然界，是一種常見的條件致病菌。由于在生長過程中產(chǎn)生綠色水溶性色素，感染后使膿汁或敷料出現(xiàn)綠色，故得名。生物學(xué)特性革蘭陰性，大小為0.5?1.0X1.5?3.0um的直或微彎桿菌。無芽胞，有莢膜，單端有1?3根鞭毛，運動活潑。臨床分離的菌株常有菌毛。需氧，在普通培養(yǎng)基上生長良好。最適生長溫度為35℃，在4℃不生長而在42℃可生長是銅綠假單胞菌的一個特點。菌落大小不一，扁平濕潤，邊緣不齊，產(chǎn)生帶熒光的水溶性色素(青膿素與綠膿素)而使培養(yǎng)基呈亮綠色。在血瓊脂平板上產(chǎn)生透明的溶血環(huán)。在液體培養(yǎng)基中呈混濁生長，常在其表面形成菌膜。銅綠假單胞菌分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，但不分解甘露醇、麥芽糖、蔗糖和乳糖。多數(shù)菌不液化明膠。銅綠假單胞菌分解尿素，氧化酶陽性，不形成吲哚。銅綠假單胞菌抵抗力較其他革蘭陰性菌強，耐許多化學(xué)消毒劑與抗生素，56℃需1小時殺死細菌。銅綠假單胞菌有。和H抗原。O抗原包括兩種成分，一種是內(nèi)毒素脂多糖，另一成分是原內(nèi)毒素蛋白(originalendotoxinprotein,OEP)。OEP是一種高分子抗原，具有強免疫原性，其抗體不僅對同一血清型細菌有特異性保護作用，且對不同血清型的細菌也有共同保護作用。OEP廣泛存在于一些革蘭陰性菌中，包括其他種類的假單胞菌、大腸埃希菌、肺炎克氏菌和霍亂弧菌等，是一種極有意義的類屬抗原。致病性與免疫性主要致病物質(zhì)是內(nèi)毒素，此外尚有菌毛、莢膜、胞外酶和外毒素等多種致病因子。銅綠假單胞菌分布廣泛，水、空氣、土壤，醫(yī)院環(huán)境中都存在此菌，同時也是人體的正常菌群。本菌的感染多見于皮膚粘膜受損部位，如燒傷、創(chuàng)傷等，也見于因長期化療或使用免疫抑制劑的患者。在醫(yī)源性感染中由本菌引起者約占10％，在某些特殊病房中，如燒傷和腫瘤病房、各種導(dǎo)管和內(nèi)窺鏡的治療與檢查室內(nèi)，本菌感染率可高達30％。本菌幾乎可感染人體的任何組織和部位，經(jīng)常引起手術(shù)切口、燒傷組織感染，表現(xiàn)為局部化膿性炎癥。也可引起中耳炎、角膜炎、尿道炎、胃腸炎、心內(nèi)膜炎、膿胸，以及菌血癥、敗血癥。本菌尚可引起嬰兒嚴重的流行性腹瀉。中性粒細胞的吞噬作用在抗銅綠假單胞菌感染中起著重要的作用。感染后產(chǎn)生的特異性抗體，尤其分泌型IgA粘膜表面免疫作用，也有一定的抗感染作用。診斷與防治按疾病和檢查目的不同分別采取標本。①炎癥分泌物、膿液、血液、腦脊液等；②醫(yī)院病區(qū)或手術(shù)室的物品、醫(yī)療器材等。將標本接種于血瓊脂平板，培養(yǎng)后根據(jù)菌落特征，色素及生化反應(yīng)等鑒定。血清學(xué)、綠膿菌素及噬菌體分型可供流行病學(xué)、醫(yī)院內(nèi)感染追蹤調(diào)查等使用。已研制出多種銅綠假單胞菌疫苗，其中以O(shè)EP疫苗具有不受菌型限制，保護范圍廣，毒性低等優(yōu)點。銅綠假單胞菌可由各種途徑傳播，主要是通過污染醫(yī)療器具及帶菌醫(yī)護人員引起的醫(yī)源性感染，應(yīng)對醫(yī)院感染予以重視。治療可選用慶大霉素、多粘菌素等。第四節(jié)嗜血桿菌屬嗜血桿菌屬(Haemophilus)是一類革蘭陰性小桿菌，常呈多形態(tài)性。無鞭毛、無芽胞。生長需求較高，在人工培養(yǎng)時需新鮮血液才能生長，故名。新鮮血液中含有該菌的生長因子X和V，X因子是一種高鐵血紅素(hematin)，V因子是輔酶I或H(NAD或NADP)。根據(jù)對X因子和V因子的需求不同，將本屬分為17個種。對人具有致病的有流感嗜血桿菌，埃及嗜血桿菌、杜克嗜血桿菌等(表16－2)。流感嗜血桿菌流感嗜血桿菌(H.influenzae)俗稱流感桿菌。1892年波蘭細菌學(xué)家Pfeiffer首先從流行性感冒患者鼻咽部分離出，當時被誤認為是流感的病原菌。直至1933年流感病毒分離成功，才確定了流感的真正病原，但流感嗜血桿菌這一錯名卻仍用至今?，F(xiàn)知此菌可引起小兒急性腦膜炎、鼻咽炎、中耳炎等化膿性疾病：在患流感時它可作為繼發(fā)性感染的病原菌。生物學(xué)特性革蘭陰性小桿菌，大小為0.3?0.4X1.0?1.5um。在急性感染標本如腦脊液中多為短小桿菌，在恢復(fù)期病灶或長期人工傳代培養(yǎng)常呈球桿狀，長桿狀和絲狀等多形態(tài)。無鞭毛或芽胞，有毒株在營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基上生長6?18h出現(xiàn)明顯莢膜。在陳舊培養(yǎng)基上莢膜常消失。多數(shù)菌株有菌毛。需氧或兼性厭氧。最適生長溫度為33?37℃。生長需要X和V因子。X因子是血紅素及其衍生物，耐熱，120℃、30min不被破壞，是細菌合成過氧化氫酶、過氧化物酶、細胞色素氧化酶等呼吸酶的輔基；V因子是輔酶I或H,耐熱性差，120℃15min即被破壞，在細胞呼吸中起遞氫作用。但血液中的V因子通常處于被抑制狀態(tài)，加熱80?90℃10min破壞紅細胞膜上的不耐熱抑制物，可使V因子釋放，故流感嗜血桿菌在加熱血瓊脂平板即巧克力色平板上生長較佳，35℃培養(yǎng)18?24h可見0.5?1.0mm直徑的菌落，呈灰白色、圓形、光滑。有莢膜菌株的菌落呈輕度粘稠。當流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同孵育時，由于后者能合成較多的V因子，在金黃色葡萄球菌菌落周圍生長的流感嗜血桿菌的菌落較大，離金黃色葡萄球菌菌落越遠的越小，此稱為衛(wèi)星現(xiàn)象。(satellitephenomenon)，有助于對流感嗜血桿菌的鑒定。流感嗜血桿菌有二種主要抗原：①莢膜多糖抗原具有型特異性?？蓪⒂星v膜的流感桿菌分為a、b、c、d、e、f6個型，其中b型致病力最強，也是引起兒童感染最常見的菌型。流感嗜血桿菌與肺炎鏈球菌的莢膜多糖有部分共同，如b型與肺炎鏈球菌15型A、35型B、6型和29型之間有交叉反應(yīng)。②菌體抗原：主要指外膜蛋白抗原，可用于流行病學(xué)調(diào)查。流感嗜血桿菌抵抗力弱，50?55℃30min可被殺死。對一般消毒劑敏感。在干燥痰中生存時間不超過48h。對青霉素和氯霉素易產(chǎn)生耐藥性，其耐藥性由R質(zhì)控決定。致病性與免疫性主要致病物質(zhì)為莢膜、菌毛與內(nèi)毒素等。致病力強的流感桿菌產(chǎn)生IgA蛋白酶，能分解破壞分泌型IgA。流感嗜血桿菌在呼吸道定植者可達人群的50%,但有莢膜的b型株定植者不多。所致疾病分為原發(fā)性與繼發(fā)性感染兩類。原發(fā)性（外源性）感染多為有莢膜的b型菌株引起的急性化膿性感染，如腦膜炎、鼻咽炎、咽喉會厭炎、關(guān)節(jié)炎、心包炎等，以少兒多見。繼發(fā)性（內(nèi)源性）感染常繼發(fā)于流行性感冒、麻疹、百日咳、結(jié)核病等，大多由無莢膜菌株引起。臨床類型有慢性支氣管炎、中耳炎、鼻竇炎等，多見于成年人。抗流感嗜血桿菌的免疫以體液免疫為主，抗莢膜多糖抗體能增強吞噬作用，并能活化補體產(chǎn)生溶菌作用，抗外膜蛋白抗原的抗體也有促進補體介導(dǎo)的吞噬作用。診斷與防治標本有痰液、腦脊液、鼻咽分泌物、血液和膿液等。腦脊液和膿汁標本直接涂片鏡檢結(jié)合臨床癥狀，可作出初步診斷。腦脊液離心沉淀物發(fā)現(xiàn)可疑菌時，亦可同時用型特異血清進行莢膜腫脹試驗，以達快速鑒定的目的。分離培養(yǎng)可將檢材接種于巧克力色培養(yǎng)基或瓊脂平板上，35℃培養(yǎng)24?48h,根據(jù)菌落形態(tài)、生化反應(yīng)等特征以及衛(wèi)星現(xiàn)象，莢膜腫脹試驗予以鑒定。b型流感桿菌的莢膜多糖疫苗，對1.5?2.0歲以上兒童有較好的抗體反應(yīng)，1年內(nèi)保護率在90％以上。治療可選用廣譜抗生素。第五節(jié)軍團菌屬1976年在美國費城召開全美退伍軍人會議，期間暴發(fā)流行一種嚴重肺炎，與會者149人，有34人死亡。從死者肺組織中分離到一種新菌，命名為軍團菌。軍團菌屬(Legionella)包括39個種和61個血清型，從人體分離的已有19種，其中主要致病菌為嗜肺軍團菌(L.pneumophila)。嗜肺軍團菌生物學(xué)特性革蘭陰性桿菌，常規(guī)染色不易著色，多用Dieterle鍍銀法或Giemsa法染色，分別染成黑褐色和紅色。有端生或側(cè)生鞭毛，無芽胞，有微莢膜。需氧菌，多數(shù)菌株在2.5%?5%CO2環(huán)境中生長良好，最適生長溫度為36℃,營養(yǎng)要求較苛刻，且生長緩慢。初次分離需L一半胱氨酸，培養(yǎng)基中含鐵鹽可促進生長。在活性炭一酵母浸出液瓊脂(BCYE)培養(yǎng)基中，3?5d形成1?2mm,圓形凸起，灰白色有光澤的菌落。在F—G(Feeley-Garman)瓊脂培養(yǎng)基中，3?5d培養(yǎng)可見針尖大小菌落，在紫外線照射下可發(fā)出黃色熒光。在富含L一酪氨酸一苯丙氨酸瓊脂平板上產(chǎn)生棕色水溶性色素。觸酶陽性，氧化酶陽性，能分解馬尿酸鹽。有。和H抗原，根據(jù)?？乖譃?5個血清型，其中1型就是1976年軍團病的病原菌。在我國分離較多的嗜肺軍團菌為1型（Lp1）和6型（Lp6）。在Lp1?10血清型都具有29kDa外膜蛋白成分，此成分是機體應(yīng)答反應(yīng)的主要免疫原。嗜肺軍團菌在自然界廣泛存在，在人工管道的水源中常見，如醫(yī)院空調(diào)冷卻水、淋浴頭、輔助呼吸機等所產(chǎn)生的氣溶膠顆粒中均存在此菌。對常用化學(xué)消毒劑敏感，1％來蘇處理數(shù)分鐘即可殺死，但對氯作用的抵抗力比腸道菌大，于21℃時水中含0.1mgL游離氯，殺死90%嗜肺軍團菌需40min,而殺死大腸埃希菌則不到1min。致病性與免疫性微莢膜、菌毛、毒素和多種酶類可能是嗜肺軍團菌的致病物質(zhì)。軍團菌產(chǎn)生的吞噬細胞活化抑制因子有磷酸酶、核酸酶和細胞毒素等，能抑制吞噬體與溶酶體融合，故不僅不被殺死，反而可在細胞內(nèi)生長繁殖導(dǎo)致細胞的死亡。嗜肺軍團菌可引起軍團病，主要通過呼吸道吸入帶菌飛沫、氣溶膠而感染，多流行于夏秋季，為全身性疾患。有流感樣型（輕癥型）、肺炎型（重癥型）和肺外感染三種臨床類型。流感樣型可出現(xiàn)發(fā)熱、不適，頭痛和肌肉疼痛，預(yù)后良好；肺炎型起病驟然，出現(xiàn)以肺部感染為主的多器官損害，寒戰(zhàn)高熱、咳嗽、胸痛，全身癥狀明顯，最終導(dǎo)致呼吸衰竭。肺外感染型為繼發(fā)性感染，當重癥軍團病發(fā)生菌血癥而散布至全身多部位，如腦、腸、腎、肝、脾等，出現(xiàn)多臟器感染的癥狀。軍團菌亦是醫(yī)院感染的病原菌之一，近年來，許多報道由于中央空調(diào)冷卻塔用水污染軍團菌而導(dǎo)致醫(yī)院內(nèi)感染。嗜肺軍團菌為胞內(nèi)寄生菌，細胞免疫在抗感染中起主要作用。診斷與防治標本可采集下呼吸道分泌物、胸水、活檢肺組織及血液等。因痰中的正常菌群對軍團菌有影響，故用痰標本檢出困難。涂片作革蘭染色檢查意義不大。直接法熒光抗體染色鏡檢有診斷意義?；顧z組織標本用Dieterle鍍銀法染色。分離培養(yǎng)用含半胱氨酸和鐵鹽的BCYE培養(yǎng)基，接種后置2.5%CO2的孵箱中培養(yǎng)。根據(jù)菌落特征、生化反應(yīng)等作出鑒定；或用免疫熒光染色法可快速診斷出培養(yǎng)的病菌。檢查病人血清中抗軍團菌IgM、IgG抗體有助于特異性診斷，常用方法為IF和ELISA法。至今尚無有效的軍團菌疫苗。預(yù)防應(yīng)強調(diào)水源的管理，包括對人工管道系統(tǒng)的消毒處理。治療首選紅霉素，對治療反應(yīng)遲緩的可合用利福平及其他藥物。第六節(jié)鮑特菌屬鮑特菌屬(Bordetella)是一類革蘭陰性小球桿菌，包括百日咳鮑特菌、副百日咳鮑特菌、支氣管敗血鮑特菌和鳥鮑特菌等4種，前三種親緣關(guān)系很接近。百日咳鮑特菌是百日咳的病原菌，副百日咳鮑特菌可引起急性呼吸道感染，其他鮑特菌只感染動物。百日咳鮑特菌生物學(xué)特性革蘭氏陰性小桿菌，大小為0.5?2.0X0.2?0.5um。無芽胞、無鞭毛，光滑型菌株有莢膜。營養(yǎng)要求很高，初次分離培養(yǎng)需用含甘油、馬鈴薯、血液的鮑一金(Bordet-Gengou)培養(yǎng)基。35?37℃培養(yǎng)3?5d后形成細小、光滑、隆起、有珠光色澤的菌落，周圍有不明顯的溶血環(huán)。不發(fā)酵糖類。新分離菌株為光滑型，稱I相菌，具有菌體(O)和表面小)抗原。I相菌有毒力，人工培養(yǎng)后可發(fā)生變異，表現(xiàn)為莢膜和菌毛的逐漸消失，形態(tài)、菌落、溶血性、抗原結(jié)構(gòu)、致病力等也全面變異，n、ni相為過渡相，w相即為粗糙型菌