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支原體Mycoplasma南華大學(xué)醫(yī)學(xué)院吳移謀教授第19章第一節(jié)概述定義缺乏細胞壁形態(tài)上呈高度多形性能通過除菌濾器在無生命培養(yǎng)基中能生長繁殖最小的原核細胞型微生物能形成有分支的長絲,故稱支原體柔膜體綱支原體目肺炎支原體,人型支原體,生殖支原體,穿透支原體,發(fā)酵支原體,梨支原體脲脲原體支原體分類支原體科無膽甾原體科螺原體科支原體屬脲原體屬一、生物學(xué)性狀(一)形態(tài)
0.3~0.5
μm
無細胞壁
高度多形性:球、桿、絲狀和分枝狀等
一般Giemsa染色較好,染為淡紫色(二)結(jié)構(gòu)
內(nèi)外兩層為蛋白質(zhì)及糖類,中層為脂類(磷脂為主),凡作用于膽固醇的物質(zhì),如皂素、毛地黃甙、二性霉素B等均能破壞細胞膜致其死亡。
特殊的頂端結(jié)構(gòu):粘附宿主上皮
細胞表面,與支原
體的致病有關(guān)。(三)培養(yǎng)特性
營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基:
10%~20%人或動物血清以提供膽固醇與其
它長鏈脂肪酸,多數(shù)還需添加酵母浸液、組
織浸液、核酸提取物和輔酶。
pH:適宜7.6~8.0(<7.0易死亡),但解脲脲
原體最適pH5.5~6.5
兼性厭氧:
大多寄生性支原體在37℃時在微氧環(huán)境(含
5%CO2和90%N2)中生長最佳。
繁殖方式多樣:二分裂繁殖外,還有分節(jié)、斷裂、
出芽或分枝等方式固體培養(yǎng)基:
2~7天長出直徑約10~600
μm的典型的“荷包蛋樣”菌落:低倍鏡下見菌落呈圓形,心致密隆起,深入瓊脂,外周由顆粒包繞。液體培養(yǎng)基:
清亮,用顏色變化單位(CCU)表示。需用放大鏡/低倍顯微鏡觀察支原體典型菌落
鑒別點
支原體細菌L型細胞壁缺失原因在遺傳上與細菌無關(guān)與原菌相關(guān),可以回復(fù)細胞膜含高濃度固醇細胞膜不含固醇培養(yǎng)特性需要膽固醇大多需要高滲培養(yǎng)菌落大小生長慢,菌落小菌落稍大(0.6~1.0)液體培養(yǎng)液體培養(yǎng)混濁度極低有一定混濁度,可附壁支原體與細菌L型的異同點不同點缺乏細胞壁,形態(tài)多樣,能通過濾菌器。固體培養(yǎng)—菌落呈荷包蛋樣或顆粒狀。臨床表現(xiàn)相似—間質(zhì)性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等相同點
支原體葡萄糖精氨酸尿素吸附細胞致病性
肺炎支原體+——紅細胞肺炎、支氣管炎人型支原體—+——泌尿生殖道感染生殖器支原體+———泌尿生殖道感染穿透支原體++—紅細胞條件感染
CD4+T細胞多見于艾滋病巨噬細胞溶脲脲原體——+—泌尿生殖道感染
流產(chǎn)及不孕不育
生化反應(yīng)(四)抗原結(jié)構(gòu)
?補體結(jié)合試驗可檢測糖脂類抗原
?ELISA試驗可檢測蛋白質(zhì)類抗原
?血清抗體可用生長抑制試驗(growth
inhibitiontest,GIT)和代謝抑制試驗
(metabolicinhibitiontest,MIT)以
鑒定(五)抵抗力
?對化學(xué)消毒劑敏感,對結(jié)晶紫、
醋酸鉈、亞碲酸鉀有抵抗力;
?對影響細胞壁合成的抗生素如青
霉素類天然耐受,但對干擾蛋白
質(zhì)合成的抗生素如強力霉素、交
沙霉素等敏感。二、致病性與免疫性(一)致病機制
?莢膜或微莢膜:抗吞噬作用
?毒性代謝產(chǎn)物:神經(jīng)毒素、磷脂酶C、核酸酶、過氧化氫和超氧離離子均能引起宿主黏膜上皮細胞或紅細胞的病理損傷
?超抗原:免疫調(diào)節(jié)
?其它:如穿透支原體粘附侵入CD4+
T細胞引起損傷
?粘附素:粘附呼吸道或泌尿生殖道上皮細胞(二)所致疾病
?存在廣泛,多不致病
?肺炎支原體引起原發(fā)性非典型性肺炎
?溶脲脲原體、人型支原體和生殖支原
體可引起泌尿生殖系統(tǒng)感染和不育癥?穿透支原體和發(fā)酵支原體為艾滋病的輔助致病因素二、致病性與免疫性(三)免疫性
?體液免疫:抗膜蛋白的抗體包括
IgM、IgG和SIgA
?細胞免疫:主要是特異性CD4+Th1
細胞分泌細胞因子二、致病性與免疫性0.2~0.3μm,高度多形性,如球形、球桿狀、棒狀、分枝狀和絲狀;初次分離應(yīng)在含血清和新鮮酵母浸出液的培養(yǎng)基中,一般10天左右長出菌落;多次傳代后生長加快,菌落呈“油煎蛋”狀;能發(fā)酵葡萄糖,不能利用精氨酸與尿素;對美藍、醋酸鉈、青霉素不敏感。第二節(jié)
肺炎支原體一、生物學(xué)性狀(一)致病性
1.主要經(jīng)飛沫傳播,但大多數(shù)發(fā)生于夏
末秋初,5~15歲青少年發(fā)病率最高。
2.含特殊的頂端結(jié)構(gòu):P1表面蛋白(170
kDa)和P30(32
kDa)為主要的粘附蛋白,使肺炎支原體黏附于呼吸道上皮。
3.肺炎支原體具有超抗原作用,能刺激炎癥細胞在感染部位釋放大量的淋巴因子(如TNF-α、IL-1、IL-6)引起組織損傷。二、致病性與免疫性(二)所致疾病
原發(fā)性非典型性肺炎(primaryatypicalpneumonia),臨床以咳嗽、發(fā)熱、頭痛、咽痛和肌肉痛為主,有時并發(fā)支氣管肺炎、皮疹、心血管和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。二、致病性與免疫性(三)免疫性
血清特異性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴細胞;
呼吸道局部黏膜產(chǎn)生的SIgA對防止再感染有較強保護作用;
出現(xiàn)IgE介導(dǎo)的I型超敏反應(yīng),促使哮喘病急性發(fā)作
(一)分離培養(yǎng)
痰或咽拭子接種在SP-4培養(yǎng)基,挑選可疑菌落,經(jīng)形態(tài)學(xué)、糖發(fā)酵、溶血性、血細胞吸附試驗進行初步鑒定,進一步鑒定需用特異性抗血清做GIT與MIT實驗。三、微生物學(xué)檢查法三、微生物學(xué)檢查法(二)血清學(xué)檢查
冷凝集試驗:
即用病人血清與人O型血紅細胞或自身紅細胞混合,4℃過夜時可發(fā)生凝集,而在37℃時這種凝集又分散解離開,但僅50%左右的患者才出現(xiàn)
陽性。此反應(yīng)為非特異性。
快速診斷
ELISA:檢測P1和P30蛋白mAbs
PCR:從痰標本中檢測16SrRNA或
P1蛋白基因防治原則
大環(huán)內(nèi)酯類藥物
喹諾酮類藥物四、防治原則第三節(jié)
解脲脲原
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