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文檔簡介
植物細胞的大規(guī)模培養(yǎng)植物細胞大規(guī)模培養(yǎng)方法懸浮培養(yǎng)固體化培養(yǎng)懸浮培養(yǎng)是一種使組織培養(yǎng)物分離成單細胞接種于液體培養(yǎng)基中,在保持良好的分散狀態(tài)下培養(yǎng)并不斷擴增的方法。在進行細胞培養(yǎng)時,需要提供容易破裂的愈傷組織進行液體振蕩培養(yǎng),愈傷組織經(jīng)過懸浮培養(yǎng)可以產(chǎn)生比較純一的單細胞,而緊密不易碎的愈傷組織就不能達到上述目的。懸浮培養(yǎng)懸浮培養(yǎng)優(yōu)點:增加培養(yǎng)細胞與培養(yǎng)液的接觸面積,改善營養(yǎng)供應避免細胞代謝產(chǎn)生的有害物質(zhì)在局部積累而對細胞自身產(chǎn)生毒害保證氧氣的充分供應等。懸浮細胞培養(yǎng)的類型有:成批培養(yǎng):只有一定的氣體交換,營養(yǎng)物質(zhì)耗盡,細胞和產(chǎn)物一次性收獲。連續(xù)培養(yǎng):新鮮培養(yǎng)液連續(xù)添加,用過的培養(yǎng)液平衡排出,營養(yǎng)物質(zhì)不斷補充,細胞保持在增值最快的對數(shù)生長期封閉式:回收流出的細胞于培養(yǎng)系統(tǒng)中,細胞數(shù)目增加開放式:流出的細胞不回收于培養(yǎng)系統(tǒng)中,但進行細胞收獲半連續(xù)培養(yǎng):新鮮培養(yǎng)液每隔一段時間添加,用過的培養(yǎng)液平衡排出,營養(yǎng)物質(zhì)不斷補充細胞培養(yǎng)同步化:1、物理法
1)體積分選2)冷處理法2、化學法
1)饑餓法2)抑制法影響懸浮細胞生長的因素:
起始愈傷組織的質(zhì)量
接種細胞密
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