RAPD技術(shù)在廣西產(chǎn)絞股藍(lán)遺傳特征及鑒別中的應(yīng)用研究的開題報(bào)告開題報(bào)告一、研究背景絞股藍(lán)（CaulisTrachelospermi）是紫背藤科植物，為廣泛應(yīng)用于中藥領(lǐng)域之一。廣西是世界絞股藍(lán)的主要產(chǎn)區(qū)之一，但因絞股藍(lán)藥材易混淆，鑒別困難，使用安全風(fēng)險(xiǎn)高，導(dǎo)致市場(chǎng)出現(xiàn)品質(zhì)問(wèn)題。因此，科學(xué)準(zhǔn)確鑒別絞股藍(lán)的品種資源，對(duì)于相關(guān)行業(yè)的健康發(fā)展具有重要意義。RAPD技術(shù)即隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA技術(shù)，因其具有快速、靈敏、經(jīng)濟(jì)、可重復(fù)等特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于植物遺傳多樣性研究和品種鑒定上。本研究旨在利用RAPD技術(shù)研究廣西產(chǎn)絞股藍(lán)的遺傳特征，同時(shí)鑒別不同品種資源，為絞股藍(lán)資源保護(hù)與合理利用提供科學(xué)依據(jù)。二、研究目的（1）通過(guò)RAPD技術(shù)研究廣西產(chǎn)絞股藍(lán)的遺傳多樣性和品種間遺傳關(guān)系。（2）通過(guò)RAPD技術(shù)建立廣西產(chǎn)絞股藍(lán)的遺傳指紋圖譜，為品種鑒定提供科學(xué)依據(jù)。（3）為絞股藍(lán)資源保護(hù)和開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。三、研究?jī)?nèi)容與方法（1）樣品采集和處理。在廣西主要產(chǎn)絞股藍(lán)的市縣采集絞股藍(lán)植株，進(jìn)行冷凍保存，以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)。（2）DNA提取和質(zhì)量檢測(cè)。采用CTAB法提取絞股藍(lán)植株的全基因組DNA，并用紫外線分光光度計(jì)檢測(cè)DNA純度和濃度。（3）RAPD擴(kuò)增反應(yīng)。根據(jù)不同品種與同品種不同來(lái)源交叉設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，選取合適條件進(jìn)行反應(yīng)體系的確定，RAPD擴(kuò)增反應(yīng)。（4）PCR產(chǎn)物分析。將PCR產(chǎn)物用瓊脂糖凝膠電泳分離、測(cè)定，得出圖譜像帶進(jìn)行分析。并基于UWin被用來(lái)計(jì)算遺傳相異系數(shù)、聚類分析、生物多樣性參數(shù)和MA序列生成等。四、預(yù)期成果（1）在廣西產(chǎn)絞股藍(lán)品種間建立遺傳多樣性指紋圖譜，為品種鑒定提供科學(xué)依據(jù)。（2）明確廣西產(chǎn)絞股藍(lán)的遺傳變異情況和遺傳特征，為絞股藍(lán)資源保護(hù)和開發(fā)利用提供重要科學(xué)依據(jù)。（3）預(yù)期撰寫學(xué)術(shù)論文1篇并參加國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)會(huì)議展示成果。五、進(jìn)度安排時(shí)間節(jié)點(diǎn)研究?jī)?nèi)容第1-2個(gè)月文獻(xiàn)調(diào)研，制定實(shí)驗(yàn)計(jì)劃第3-4個(gè)月樣品采集和處理第5-6個(gè)月DNA提取和質(zhì)量檢測(cè)，RAPD擴(kuò)增反應(yīng)第7-8個(gè)月PCR產(chǎn)物分析，數(shù)據(jù)分析第9-10個(gè)月論文撰寫及修改第11個(gè)月學(xué)術(shù)會(huì)議展示成果第12個(gè)月進(jìn)行總結(jié)和結(jié)論，并提交論文六、預(yù)算費(fèi)用預(yù)算費(fèi)用包括實(shí)驗(yàn)室耗材費(fèi)、維護(hù)基金以及出差費(fèi)用等，具體內(nèi)容如下：費(fèi)用（元）實(shí)驗(yàn)室耗材費(fèi)10000維護(hù)基金500