瀕危野生植物及其制品物種鑒定規(guī)范?????1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了定瀕危野生植物及其制品物種鑒定時(shí)物種鑒定的一般原則、物種鑒定指標(biāo)、實(shí)驗(yàn)室區(qū)域設(shè)置、崗位設(shè)置、人員資質(zhì)要求與管理、檢驗(yàn)鑒定程序、檢驗(yàn)方法的認(rèn)可、污染預(yù)防與處理、安全防護(hù)、際國(guó)內(nèi)合作與援助、持續(xù)能力提升等主要技術(shù)內(nèi)容。本標(biāo)準(zhǔn)適用于瀕危野生植物及其制品物種的鑒定。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB15569農(nóng)業(yè)植物調(diào)運(yùn)檢疫規(guī)程GB/T27025檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求SN/T1193基因檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GA/T382法庭科學(xué)DNA實(shí)驗(yàn)室規(guī)范GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T19495.3轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)核酸提取純化方法GB/T27403實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范食品分子生物學(xué)檢測(cè)SN/T3500進(jìn)出口食品安全生物學(xué)檢測(cè)抽樣規(guī)范SN/T4626DNA條形碼物種鑒定操作規(guī)程LY/T2501野生動(dòng)物及其產(chǎn)品的物種鑒定規(guī)范3術(shù)語(yǔ)及定義3.1瀕危野生植物endangeredwildplant本標(biāo)準(zhǔn)特指cites目錄及國(guó)家保護(hù)植物目錄里的植物。3.2瀕危野生植物產(chǎn)品endangeredwildplantproducts前款所指瀕危野生植物的任何部分及其衍生物。3.3物種鑒定speciesIdentification采用形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)、分子生物學(xué)等檢驗(yàn)技術(shù)，對(duì)瀕危野生植物及其產(chǎn)品進(jìn)行分類地位（科、屬、種）的認(rèn)定。3.4檢材checkmaterials&checksamples委托單位（人）提供的、用作物種鑒定的瀕危野生植物及其產(chǎn)品。3.5宏觀形態(tài)學(xué)macromorphology通過(guò)瀕危野生植物植株形態(tài)特征進(jìn)行鑒定的科學(xué)方法。3．6微觀形態(tài)學(xué)micromorphology通過(guò)瀕危野生植物部分結(jié)構(gòu)特征進(jìn)行鑒定的科學(xué)方法，一般需借助放大設(shè)備。3.7基因條碼技術(shù)DNAbarcoding采用基因測(cè)序技術(shù)對(duì)物種的基因條碼進(jìn)行識(shí)別，利用其種內(nèi)特異性和種間多樣性實(shí)現(xiàn)對(duì)物種的快速鑒定的技術(shù)。3.8Sanger測(cè)序法Sangersequencing以單鏈或雙鏈DNA為模板，在DNA聚合酶的催化下延伸結(jié)合在模板上的引物，直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每個(gè)反應(yīng)含有四種dNTP，并混入用同位素或熒光標(biāo)記的ddNTP，使XX的寡聚核苷酸選擇性終止，通過(guò)髙分辨率變性毛細(xì)管電泳分離片段獲得堿基順序的方法。ITSITS是內(nèi)源轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（

Internally

Transcribed

Spacer）的英文縮寫，

位于rRNA

編碼基因18S，5.

8S和28S之間的小基因片段。PCRpolymerasechainreaction聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)又稱體外DNA擴(kuò)增技術(shù)是利用DNA在體外高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至PCRpolymerasechainreaction聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)又稱體外DNA擴(kuò)增技術(shù)是利用DNA在體外高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈，低溫時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合，再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度，DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖（5'-3'）的方向合成互補(bǔ)鏈?？s略語(yǔ)BOLD：生命條形碼數(shù)據(jù)系統(tǒng)（TheBarcodeofLifeDataSystembptbp：堿基對(duì)（Basepair.）CTAB:十六烷基三甲基溴化銨（CetyltrithylammoniumBromide）DNA:脫氧核糖核酸（DeoxyribonucleicAcid）dNTP:脫氧核糖核苷三磷酸（DeoxyribonucleosideTriphosphate）ddntp:TaqDNA聚合酶:耐熱DNA聚合酶（TaqDNAPolymerase）Tris:三（羥甲基）氨基甲烷[Tris（hydroxymethyl）Aminomethane]物種鑒定原則5.1根據(jù)具體案（事）件縮小目標(biāo)物種的范圍、確定適用的檢驗(yàn)鑒定方法。5.2形態(tài)特征完整、物種特征鮮明的檢材，采用宏觀形態(tài)學(xué)方法進(jìn)行檢驗(yàn)鑒定。5.3具有物種特異性的微觀結(jié)構(gòu)特征的檢材，采用微觀形態(tài)學(xué)方法進(jìn)行檢驗(yàn)。5.4具有物種特異性生化成分的檢材，可采用生物化學(xué)方法進(jìn)行檢驗(yàn)鑒定。5.5采用宏觀形態(tài)學(xué)方法無(wú)法進(jìn)行物種鑒定（但能夠提取DNA的檢材）可采用生化和分子生物學(xué)方法進(jìn)行檢驗(yàn)鑒定。5.6宏觀形態(tài)學(xué)方法中具有物種唯一性的特征指標(biāo)可以單獨(dú)使用，如指標(biāo)特征不具有物種唯一性，則應(yīng)聯(lián)合使用2個(gè)以上指標(biāo)做出鑒XX論。5.7如果單獨(dú)使用一種分子生物學(xué)方法不能可靠地確認(rèn)來(lái)源物種，則應(yīng)使用兩種以上方法進(jìn)行聯(lián)合印證。物種鑒定指標(biāo)宏觀形態(tài)學(xué)指標(biāo)以物種典型或特異的形態(tài)特征作為鑒定指標(biāo)（參見(jiàn)中國(guó)植物志）。微觀形態(tài)學(xué)指標(biāo)根據(jù)種子、花、等組織的典型或特異性的微觀形態(tài)學(xué)指標(biāo)。生物化學(xué)指標(biāo)以物種典型或特異的生化特征、在陰性和陽(yáng)性嚴(yán)格對(duì)照下作為鑒定指標(biāo)。分子生物學(xué)指標(biāo)以物種DNA長(zhǎng)度多態(tài)性和序列多態(tài)性作為分子生物學(xué)指標(biāo)。應(yīng)經(jīng)過(guò)有效性驗(yàn)證。儀器和試劑要求7.1儀器7.1.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配置與其所應(yīng)用的檢驗(yàn)方法所必需的儀器設(shè)備，且應(yīng)是具有資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備廠家生產(chǎn)的合格產(chǎn)品。7.1.2檢驗(yàn)方法所必需的關(guān)鍵（核心）設(shè)備所產(chǎn)生的數(shù)據(jù)或結(jié)果應(yīng)能夠被同行認(rèn)可。7.1.3儀器設(shè)備應(yīng)定期進(jìn)行檢查、保養(yǎng)和校正。7.1.4新購(gòu)置的儀器設(shè)備、或原有儀器設(shè)備維修保養(yǎng)后，在使用前應(yīng)當(dāng)校準(zhǔn)或測(cè)試。實(shí)驗(yàn)耗材和試劑7.2.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配置與其所應(yīng)用的檢驗(yàn)方法所必需的實(shí)驗(yàn)耗材和試劑，且應(yīng)是具有資質(zhì)的廠家生產(chǎn)的合格產(chǎn)品。7.2.2所有實(shí)驗(yàn)耗材和試劑應(yīng)處于保質(zhì)期或有效期內(nèi)。7 .2.3商品試劑盒應(yīng)標(biāo)明到貨日期和有效期。實(shí)驗(yàn)室自行配制的試劑應(yīng)在容器上標(biāo)明名稱、濃度、配制時(shí)間、配制人、保存條件、失效日期等相關(guān)內(nèi)容。7.2.4每一批次購(gòu)進(jìn)的耗材和試劑應(yīng)進(jìn)行符合性驗(yàn)證等質(zhì)控檢驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室區(qū)域設(shè)置8.1實(shí)驗(yàn)室基本要求8.1.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)立完善的組織機(jī)構(gòu)、質(zhì)量保障和管理體系。8.1.2實(shí)驗(yàn)室的各功能分區(qū)應(yīng)布局合理，通風(fēng)良好、光線適度、設(shè)備完善，達(dá)到檢驗(yàn)鑒定的要求。8.1.3配備生物安全設(shè)施，確保環(huán)境不受瀕危野生植物攜帶病原的污染。8.2實(shí)驗(yàn)室區(qū)域設(shè)置原則8.2.1實(shí)驗(yàn)室區(qū)域設(shè)置的一般原則區(qū)域設(shè)置應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)過(guò)程中檢材和試劑受到污染，保障結(jié)果的可靠性。8.2.2基本區(qū)域設(shè)置8.2.2.1宏觀形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)、微觀形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)、生物化學(xué)檢驗(yàn)和分子生物學(xué)檢驗(yàn)應(yīng)分別設(shè)置檢驗(yàn)區(qū)域。8.2.2.2微觀形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)室和生物化學(xué)檢驗(yàn)室應(yīng)分別設(shè)置樣品制備和檢驗(yàn)兩個(gè)基本區(qū)域。8.2.2.3分子生物學(xué)的DNA檢驗(yàn)室應(yīng)設(shè)置樣品前處理、核酸提取、試劑配置、PCR擴(kuò)增加樣、PCR擴(kuò)增、產(chǎn)物分析七個(gè)基本區(qū)域。8.2.3其他區(qū)域設(shè)置8.2.3.1檢材貯存室：主要用于送檢材料的妥善保管和貯存。8.2.3.2初檢室：主要用于案件的登記、檢材的初檢和照相、錄相、固定等。8.2.3.3試劑貯存和配制室：主要用于試劑的貯存、配制、消耗品的消毒等。8.2.3.4數(shù)據(jù)分析室：主要用于檢驗(yàn)結(jié)果的分析、比對(duì)、鑒定報(bào)告的形成等。8.2.3.5檔案室：主要用于案件資料、實(shí)驗(yàn)操作相關(guān)資料的存檔保存等。崗位設(shè)置、人員資質(zhì)要求及管理9.1工作人員包括鑒定人和鑒定助理等應(yīng)遵守國(guó)家有關(guān)法律法規(guī)，誠(chéng)實(shí)守信，有良好的職業(yè)道德操守，嚴(yán)格遵守海關(guān)相關(guān)規(guī)定和要求，嚴(yán)格保守秘密。9.2技術(shù)負(fù)責(zé)人應(yīng)具備博士學(xué)位或具有副高級(jí)以上專業(yè)技術(shù)職稱，相關(guān)專業(yè)，五年以上相關(guān)工作經(jīng)驗(yàn)，具備形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)相關(guān)專業(yè)背景和熟練操作技能，了解瀕危動(dòng)物物證鑒定領(lǐng)域的前沿技術(shù)。9.3鑒定人應(yīng)具備中級(jí)以上專業(yè)技術(shù)職稱，相關(guān)專業(yè)，在相關(guān)實(shí)驗(yàn)室工作一年以上，并通過(guò)能力驗(yàn)證或?qū)嶒?yàn)室間比對(duì)等測(cè)試。9.4鑒定助理應(yīng)具備本科以上學(xué)歷，相關(guān)專業(yè)，具有6個(gè)月以上相關(guān)技術(shù)培訓(xùn)的經(jīng)歷。9.5必要時(shí)，技術(shù)負(fù)責(zé)人和鑒定人按照有關(guān)要求有配合相關(guān)部門履行結(jié)果解釋和出庭義務(wù)。樣品鑒定10.1樣品受理10.1.1鑒定受理應(yīng)由專門人員負(fù)責(zé)，受理人應(yīng)驗(yàn)明委托單位的有效證明材料。10.1.2送檢人應(yīng)填寫送檢登記表，詳細(xì)填寫送檢單位、送檢人姓名、送檢日期、檢材類型、數(shù)量及特征、鑒定要求等基本情況，并進(jìn)行檢材的交接、拍照或錄像存檔。10.1.3檢材應(yīng)提取實(shí)物樣品以備復(fù)核檢驗(yàn)，并告知。10.1.4檢驗(yàn)鑒定如需對(duì)檢材進(jìn)行破壞性取樣而嚴(yán)重改變其原有價(jià)值的，應(yīng)征得委托單位同意。10.1.5無(wú)法鑒定的，經(jīng)技術(shù)主管同意后方可退回委托單位。10.1.6檢材進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室后應(yīng)貼上標(biāo)簽并填寫檢材處理表，由專人管理；待檢、在檢和巳檢的檢材應(yīng)分別存放；轉(zhuǎn)移檢材或使用時(shí)經(jīng)手人應(yīng)簽名。10.2檢驗(yàn)鑒定原則本著由簡(jiǎn)單到復(fù)雜、由無(wú)損到有損的原則，確定檢驗(yàn)鑒定方法。10.3檢驗(yàn)鑒定10.3.1宏觀形態(tài)學(xué)方法根據(jù)檢材的形態(tài)特征，進(jìn)行判別。10.3.2微觀形態(tài)學(xué)方法根據(jù)檢材類別，選擇適當(dāng)?shù)臋z驗(yàn)方法，并確定樣品制備方法。顯微圖片應(yīng)標(biāo)注放大倍數(shù)。10.3.3生物化學(xué)方法根據(jù)檢材類別，選擇適當(dāng)?shù)臋z驗(yàn)方法，確定樣品制備方法，檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)照。實(shí)驗(yàn)應(yīng)重復(fù)1次以上。10.3.4分子生物學(xué)方法（見(jiàn)附錄A）DNA提取根據(jù)鑒定目標(biāo)選擇的檢驗(yàn)方案確定DNA提取的方法，應(yīng)設(shè)置空白對(duì)照并嚴(yán)格防止樣品相互污染。需要純化的DNA，可選擇高質(zhì)量純化試劑盒或其他純化方法。PCR擴(kuò)增嚴(yán)格設(shè)置陽(yáng)性（巳知的DNA樣品）和陰性（不加DNA的空白）對(duì)照。檢驗(yàn)時(shí)樣本要在分子量標(biāo)準(zhǔn)之間的泳道上電泳。應(yīng)重復(fù)1次以上。擴(kuò)增產(chǎn)物的純化采用純化試劑盒或其他同行公認(rèn)的純化方法。10.3.4.5測(cè)序產(chǎn)物應(yīng)雙向測(cè)序。采用克隆測(cè)序時(shí)每個(gè)PCR產(chǎn)物應(yīng)測(cè)定5個(gè)以上。10.3.5檢材的后處理10.3.5.1檢驗(yàn)鑒XX束后，除留存?zhèn)浞輼悠芬酝?，剩余的檢材返還委托單位。10.3.5.2變質(zhì)和超過(guò)保留時(shí)限的檢材，及攜帶疫病的檢材應(yīng)進(jìn)行無(wú)害化處理。10.4結(jié)果分析檢驗(yàn)后，對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，能夠明確給出認(rèn)定或否XX論的，形成鑒定意見(jiàn)。10.5復(fù)檢檢驗(yàn)應(yīng)保證兩次重復(fù)檢驗(yàn)。10.6鑒定的復(fù)核對(duì)鑒XX果不明確或其他特殊需要，按有關(guān)程序經(jīng)同意可送相關(guān)權(quán)威機(jī)構(gòu)進(jìn)行復(fù)核鑒定。10.7鑒定質(zhì)量控制（1）對(duì)鑒定過(guò)程中出現(xiàn)結(jié)果明顯偏離和錯(cuò)誤，鑒定人應(yīng)立即報(bào)告技術(shù)負(fù)責(zé)人，并停止鑒定工作。技術(shù)負(fù)責(zé)人應(yīng)與鑒定人一起對(duì)影響鑒定的各個(gè)環(huán)節(jié)（包括樣品、儀器、試劑、分析方法、實(shí)驗(yàn)環(huán)境和污染等）逐一排查，確定問(wèn)題來(lái)源，并整改。整改應(yīng)有記錄，并存檔。（2）對(duì)影響鑒XX果的關(guān)鍵設(shè)備和試劑，實(shí)驗(yàn)室除定期進(jìn)行校準(zhǔn)、驗(yàn)證和維護(hù)外，還應(yīng)進(jìn)行期間核查。期間核查應(yīng)有計(jì)劃，并記錄存檔。（3）實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定計(jì)劃組織內(nèi)部評(píng)審、質(zhì)量評(píng)審、管理評(píng)審、參加能力驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)等，以確保對(duì)鑒定質(zhì)量的有效控制。評(píng)審過(guò)程和評(píng)審發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題應(yīng)形成評(píng)審報(bào)告，并存檔。10.8鑒定報(bào)告起草形成明確鑒XX論的，起草鑒定報(bào)告。報(bào)告應(yīng)有一定的格式（可參照有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)）。鑒定人對(duì)鑒XX果負(fù)責(zé)，須在鑒定報(bào)告書上簽名。10.9鑒定報(bào)告的審核、簽發(fā)技術(shù)負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)鑒定報(bào)告內(nèi)容的審核，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)鑒定報(bào)告的簽發(fā)。最后，鑒定報(bào)告加蓋公章后生效。檢驗(yàn)方法的認(rèn)可11.1認(rèn)可的或有效驗(yàn)證的標(biāo)準(zhǔn)11.1.1有選定的標(biāo)準(zhǔn)樣品。11.1.2靈敏度檢驗(yàn)：確定能可靠鑒定所需的最小樣本量。11.1.3物種群體遺傳學(xué)調(diào)查適用性。11.1.4具有特異性、適用性、穩(wěn)定性或通用性。PCR及相關(guān)檢驗(yàn)方法的認(rèn)可見(jiàn)GA/T382—20027.4。11.2新方法的使用在現(xiàn)有方法無(wú)法解決的情況下，需采用新方法進(jìn)行檢驗(yàn)鑒定時(shí)，應(yīng)由同行專家組成的專家組認(rèn)可。11.2標(biāo)準(zhǔn)方法確認(rèn)（1）根據(jù)檢材的需要和實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際情況優(yōu)先選擇使用標(biāo)準(zhǔn)方法。（2）實(shí)驗(yàn)室在采用標(biāo)準(zhǔn)方法之前，應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室能否正確執(zhí)行該標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行確認(rèn)。具體確認(rèn)要求按GB/T27025《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》執(zhí)行。（3）如實(shí)驗(yàn)室采用的標(biāo)準(zhǔn)方法發(fā)生了改變，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)重新進(jìn)行確認(rèn)。11.3非標(biāo)方法確認(rèn)非標(biāo)方法包括海關(guān)總署下發(fā)的技術(shù)文件、其他實(shí)驗(yàn)室采用、權(quán)威刊物發(fā)表和實(shí)驗(yàn)室自行研制的尚未形成標(biāo)準(zhǔn)的鑒定方法。非標(biāo)方法應(yīng)符合GB/T27401《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范動(dòng)物檢疫》要求。實(shí)驗(yàn)室在沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)方法或現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)方法無(wú)法完成鑒定的情況下可考慮采用非標(biāo)方法，但必須經(jīng)過(guò)如下驗(yàn)證確認(rèn)。（1）其他實(shí)驗(yàn)室采用、權(quán)威刊物發(fā)表非標(biāo)方法須經(jīng)至少6家實(shí)驗(yàn)室聯(lián)合驗(yàn)證確認(rèn)。（2）實(shí)驗(yàn)室自行研制的鑒定方法須經(jīng)同行專家組成的專家組審核，并經(jīng)至少6家實(shí)驗(yàn)室聯(lián)合驗(yàn)證確認(rèn)。檔案資料12.1檢驗(yàn)檔案12.1.1登記資料：包括受理記錄、送檢單位的委托證明材料、檢材照片、檢材保管或返回記錄、檢驗(yàn)中交接記錄、鑒定文書的發(fā)放記錄等。12.1.2檢驗(yàn)記錄資料：根據(jù)不同檢驗(yàn)方法所需要的不同資料，如形態(tài)學(xué)的各種量度、檢驗(yàn)記錄，生化檢驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)記錄，分子生物學(xué)的DNA提取記錄、PCR反應(yīng)記錄、電泳檢驗(yàn)記錄、測(cè)序結(jié)果、數(shù)據(jù)處理等。12.1.3圖譜圖片：包括掃描電鏡照片、光鏡照片、儀器分析圖表、照片、自顯影圖、干燥膠等。12.1.4鑒定文件：包括鑒定意見(jiàn)書或檢驗(yàn)報(bào)告、檢驗(yàn)結(jié)果圖譜等。12.2操作手冊(cè)12.2.1實(shí)驗(yàn)方法類：植物及其器官的制備方法及程序；掃描電鏡樣品的制備方法及程序；特殊成分的生化檢驗(yàn)方法；各種DNA提取方法、DNA定量方法、檢驗(yàn)方法和各種物種鑒定方法及程序等。12.2.2儀器操作類：各種儀器的操作使用方法、維護(hù)方法。12.2.3試劑配制類：各種試劑的配制方法、貯存方法。12.3說(shuō)明書類重要儀器設(shè)備說(shuō)明書、特殊試劑盒操作說(shuō)明書、特殊試劑說(shuō)明書等應(yīng)留檔備查。12.4方法認(rèn)可記錄檢驗(yàn)方法等的認(rèn)可程序、專家會(huì)議紀(jì)要、認(rèn)可過(guò)程記錄等。12.5管理檔案實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制守則、實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)則、安全操作守則、人員培訓(xùn)記錄、實(shí)驗(yàn)室核查記錄、資格測(cè)試記錄、實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行記錄（包括主要儀器設(shè)備的使用記錄、保修和維修記錄、突發(fā)事件處理記錄等）等。12.6其他資料物種檢驗(yàn)鑒定工作流程圖、儀器設(shè)備清單、儲(chǔ)存試劑的清單等。12.7電子化管理對(duì)檢驗(yàn)鑒定文書、備份樣品名錄等建立數(shù)據(jù)庫(kù)，進(jìn)行電子化管理。12.8保密凡檢驗(yàn)鑒定文書應(yīng)在指定地點(diǎn)由專人負(fù)責(zé)保管，未經(jīng)主管領(lǐng)導(dǎo)書面同意不能復(fù)制、外借，更不可遺失。主管領(lǐng)導(dǎo)簽發(fā)的復(fù)制和外借憑證應(yīng)與檢驗(yàn)鑒定文書一起存檔保存。生物安全預(yù)防與處理13.1檢材樣品13.1.1取樣時(shí)，根據(jù)樣品特點(diǎn)，應(yīng)取深層組織、或清洗掉外層附著物，減少外源性污染。13.1.2各樣品應(yīng)標(biāo)記清楚，防止各樣品間的混淆、以及與巳知樣品的污染。13.2檢驗(yàn)人員13.2.1檢驗(yàn)人員應(yīng)嚴(yán)格按檢驗(yàn)規(guī)程操作。13.2.2進(jìn)人實(shí)驗(yàn)室應(yīng)穿實(shí)驗(yàn)室工作服和工作鞋。13.2.3檢驗(yàn)操作中應(yīng)戴一次性手套，一旦手套被污染應(yīng)馬上更換。13.2.4根據(jù)檢驗(yàn)的需要應(yīng)戴實(shí)驗(yàn)室專用帽子、口罩和防護(hù)眼鏡。13.3檢驗(yàn)區(qū)域13.3.1檢驗(yàn)開(kāi)始前應(yīng)用75%乙醇將工作臺(tái)擦洗干凈，檢驗(yàn)結(jié)束后用10%次氯酸鈉再擦洗所有的工作臺(tái)面。13.3.2檢驗(yàn)室應(yīng)定期清潔并進(jìn)行紫外燈照射消毒。PCR區(qū)域應(yīng)使用專用清潔工具。13.4檢驗(yàn)器材13.4.1各區(qū)域應(yīng)配置專用的移液器、試劑架等，不應(yīng)拿到其他區(qū)域使用。13.4.2試管使用前應(yīng)高壓滅菌。13.4.3可高壓滅菌的移液器等在使用前應(yīng)高壓滅菌；無(wú)法高壓滅菌的應(yīng)定期用75%乙醇和純水清洗，使用前再用紫外燈照射。13.5檢驗(yàn)過(guò)程13.5.1開(kāi)啟試管前應(yīng)瞬時(shí)離心。13.5.2應(yīng)使用一次性移液吸頭。13.5.3蛋白質(zhì)類生化試劑應(yīng)分裝成小包裝。13.5.4分子生物學(xué)檢驗(yàn)應(yīng)設(shè)置陽(yáng)性和陰性對(duì)照。安全防護(hù)14.1急救裝置在實(shí)驗(yàn)室的固定位置應(yīng)設(shè)急救箱和緊急噴淋裝置，并有明確標(biāo)識(shí)，所有人員應(yīng)掌握使用方法。14.2化學(xué)藥品14.2.1化學(xué)藥品應(yīng)標(biāo)記清楚，應(yīng)有專門存放程序和記錄。14.2.2化學(xué)藥品的棄置應(yīng)按專門程序進(jìn)行，并備詳細(xì)記錄。14.2.3特殊藥品使用前應(yīng)有專門培訓(xùn)。14.3儀器操作14.3.1儀器操作說(shuō)明中應(yīng)注明該儀器操作中發(fā)生事故或故障的可能性及原因，并注明預(yù)防和處理的方法。14.3.2應(yīng)按規(guī)定對(duì)儀器定期進(jìn)行檢查、保養(yǎng)。14.4檢驗(yàn)人員14.4.1檢驗(yàn)人員必須認(rèn)真學(xué)習(xí)檢驗(yàn)規(guī)程和有關(guān)的安全技術(shù)規(guī)程。14.4.2在使用前應(yīng)了解化學(xué)藥品的毒性，并清楚急救方法。14.4.3在使用前應(yīng)了解設(shè)備性能及操作中可能發(fā)生事故的原因，掌握預(yù)防和處理事故的方法。14.4.4檢驗(yàn)室內(nèi)禁止吸煙、進(jìn)食，嚴(yán)禁用試驗(yàn)器皿處理食物。14.4.5離開(kāi)檢驗(yàn)室前用清潔用品洗手。14.5植物疫病處理來(lái)自野生瀕危植物檢材時(shí)，應(yīng)考慮到檢材可能攜帶病原體，并注意防范疫病的傳染、傳播。取樣可按照SN/T1809-2006相關(guān)規(guī)定操作執(zhí)行。14.6廢棄物處置、電氣設(shè)備、放火、紫外光源和激光光源按照GB19489的相關(guān)規(guī)定執(zhí)行。國(guó)際國(guó)內(nèi)合作與援助15.1建立國(guó)內(nèi)外瀕危植物鑒定實(shí)驗(yàn)室間合作機(jī)制。15.2經(jīng)主管部門同意，允許在國(guó)內(nèi)和國(guó)際合作伙伴間共享數(shù)據(jù)，以便在必要時(shí)進(jìn)行解釋分析，協(xié)助國(guó)際調(diào)查。15.3收集用于鑒定分析象牙等瀕危動(dòng)物的技術(shù)文獻(xiàn)資料。15.5與技術(shù)先進(jìn)的研究機(jī)構(gòu)和犯罪調(diào)查專家合作開(kāi)展能力建設(shè)和培訓(xùn)。持續(xù)能力提升16.1對(duì)參與鑒定過(guò)程的鑒定工作人員進(jìn)行培訓(xùn)，以不斷提高鑒定人員的技術(shù)能力。16.2實(shí)驗(yàn)室每年至少一次參加由權(quán)威機(jī)構(gòu)組織的能力驗(yàn)證。16.3實(shí)驗(yàn)室制定計(jì)劃開(kāi)展實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)。16.4跟蹤國(guó)際最新科技發(fā)展前沿，開(kāi)展科學(xué)研究和標(biāo)準(zhǔn)制修訂工作，并把成果應(yīng)用于日常鑒定工作。附錄A

（資料性附錄）

PCR基本資料對(duì)較短的DNA序列來(lái)進(jìn)行物種鑒定的一種分子生物學(xué)技術(shù)，是傳統(tǒng)形態(tài)鑒別方法的有效補(bǔ)充。由于不同物種的DNA序列是由腺嘌呤（A）、鳥(niǎo)嘌呤（G）、胞嘧啶（C）、胸腺嘧啶（T）四種堿基以不同順序排列組成，因此對(duì)某一特定DNA片段序列進(jìn)行分析即能夠區(qū)分不同物種。DNA條形碼分子鑒定通常是選用ITS2/ITS為主體序列，以葉綠體為輔助序列。一、儀器的一般要求。所用儀器有電子天平、離心機(jī)、聚合鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerasechainreaction，PCR）儀、電泳儀和測(cè)序儀DNA序列測(cè)定用測(cè)序儀，是一臺(tái)具有自動(dòng)灌膠、自動(dòng)進(jìn)樣、自動(dòng)數(shù)據(jù)收集分析等全自動(dòng)電腦控制的測(cè)定DNA片段中堿基順序或大小，以及定量用精密儀器，測(cè)序方法主要采用雙脫氧鏈終止法，又稱Sanger法。4種雙脫氧核酸（ddNTP）的堿基分別用不同的熒光進(jìn)行標(biāo)記，在通過(guò)毛細(xì)管時(shí)，不同長(zhǎng)度的DNA片段上的4種熒光基團(tuán)被激光激發(fā)，發(fā)出不同顏色的熒光，被電荷耦合元件圖像傳感器?（charge-coupleddevice，CCD）檢測(cè)系統(tǒng)識(shí)別，并直接翻譯成?DNA序列，獲得供試品的峰圖文件和序列文件。二、測(cè)定步驟本法主要包括供試品處理、DNA提取、DNA條形碼序列PCR擴(kuò)增、電泳檢測(cè)和序列測(cè)定、序列拼接及結(jié)果判定，主要步驟如下。1.檢材處理為防止外源微生物污染，檢材使75%乙醇擦拭表面后晾干，或采取其他有效去除微生物污染的方法。