實(shí)時(shí)熒光定量

PCR儀一、實(shí)時(shí)熒光定量PCR的原理熒光定量PCR通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過(guò)程，結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析，計(jì)算待測(cè)樣品的初始模板量。熒光定量PCR儀熒光定量PCR儀是一種帶有激發(fā)光源和熒光信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)的PCR儀，通常配有電腦系統(tǒng)及相應(yīng)的分析軟件。定量PCR技術(shù)的產(chǎn)生1992年由Higuchi等人第一次報(bào)告：使用EB內(nèi)插染料法插至雙鏈DNA，經(jīng)改裝的帶有冷CCD的PCR儀檢測(cè)樣品的熒光強(qiáng)度PCR循環(huán)=雙鏈DNA=染料=熒光后來(lái)用與雙鏈DNA有更強(qiáng)結(jié)合力的SYBRGreen

I取代EB熒光定量實(shí)時(shí)PCR與普通PCR的比較實(shí)時(shí)在線監(jiān)控對(duì)樣品擴(kuò)增的整個(gè)過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控，能夠?qū)崟r(shí)地觀察到產(chǎn)物的增加，直觀地看到反應(yīng)的對(duì)數(shù)期降低反應(yīng)的非特異性使用引物和熒光探針同時(shí)與模板特異性結(jié)合，提高了PCR反應(yīng)的特異性增加定量的精確性全程監(jiān)控，準(zhǔn)確的算法進(jìn)行定量結(jié)果分析更加快捷方便，無(wú)需跑膠羅氏產(chǎn)品介紹以及與同類(lèi)產(chǎn)品之間的對(duì)比一、LC1.5和LC2.0LightCycler熒光定量PCR系統(tǒng)LC1.5LC2.0Lightcycler

1.5結(jié)構(gòu)分析以空氣加熱及冷卻迅速改變溫度帶有極高表面積/容量比例的密封20

l毛細(xì)管加熱線圈可容納32個(gè)樣品的卡盤(pán)將熒光儀定位的分檔器發(fā)動(dòng)機(jī)將樣品置于光學(xué)儀上的分檔器發(fā)動(dòng)機(jī)熱室風(fēng)扇濾器免維護(hù)的

LED光源光學(xué)倍增管Lightcycler

2.0結(jié)構(gòu)分析空氣加熱系統(tǒng)LED激發(fā)光源PMT檢測(cè)系統(tǒng)光纖熱力學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：1、空氣加熱2、毛細(xì)管反應(yīng)體系優(yōu)點(diǎn):1、升降溫速度快（0.05℃-20℃/秒），2、體系均一，不存在邊緣現(xiàn)象3、把反應(yīng)體系縮小到0-20ul，節(jié)省試劑成本實(shí)現(xiàn)快速PCR光學(xué)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：1、免維護(hù)的LED冷光源，壽命長(zhǎng)達(dá)2萬(wàn)小時(shí)以上

2、光學(xué)倍增管（Rodenstock

）3、多達(dá)6通道（LC2.0）和3通道（LC1.5）實(shí)時(shí)檢測(cè)優(yōu)點(diǎn)：1、毛細(xì)管光學(xué)特性將光線散射、衍射降至最低，避免LED功率低的問(wèn)題2、免維護(hù)，帶自動(dòng)檢驗(yàn)功能3、輕易實(shí)現(xiàn)內(nèi)標(biāo)、內(nèi)對(duì)照及多重PCRLightCycler結(jié)構(gòu)分析激發(fā)光源Rodenstock-LED（發(fā)光二極管）冷光源，免維護(hù)，開(kāi)機(jī)可以馬上進(jìn)行操作。檢測(cè)系統(tǒng)光學(xué)倍增管(PMT)靈敏度高，寬檢驗(yàn)范圍,背景低，無(wú)邊緣效應(yīng)加熱方式空氣加熱管間差小，熱傳導(dǎo)速率20℃/秒，溫控變化準(zhǔn)確（0.05-20℃/秒）。反應(yīng)體系兩種石英玻璃毛細(xì)管體系(20ul和100ul)光學(xué)性好，反應(yīng)體系小，節(jié)約試劑成本,適合多種用途。檢測(cè)光路范圍530nm,

555nm,610nm,

640nm,670nm,

710nm.六個(gè)波長(zhǎng)，并解決相關(guān)熒光素?zé)晒飧蓴_問(wèn)題LightCycler軟件4.0更先進(jìn)的自動(dòng)定量方法全新的相對(duì)定量軟件

全自動(dòng)熔點(diǎn)曲線分組

全自動(dòng)熔點(diǎn)溫度提示

簡(jiǎn)化數(shù)據(jù)和用戶管理PCR領(lǐng)域最聰明的革新–LightCycler熒光定量PCR系統(tǒng)30至40分鐘完成PCR過(guò)程收集每一循環(huán)的數(shù)據(jù)并立即顯示于聯(lián)機(jī)電在一個(gè)基因組當(dāng)量中可檢測(cè)出單基因拷貝可檢測(cè)10－1010拷貝線性范圍，無(wú)需稀釋樣全開(kāi)放，成為國(guó)內(nèi)外試劑廠家的首選開(kāi)發(fā)平超高速實(shí)時(shí)在線監(jiān)測(cè)高靈敏范圍廣開(kāi)放性六個(gè)熒光通道最小化靈活性閉管分析輕易實(shí)現(xiàn)內(nèi)標(biāo)、內(nèi)對(duì)照或多重PCR定量反應(yīng)體積降至10－20ul，費(fèi)用低廉支持水解探針、雜交探針及SYBR

Green

I消除污染風(fēng)險(xiǎn)Lightcycler的分析模式適用于所有的通用探針及染料分析模式：

SYBR

Green

I（熒光染料）TaqMan（水解探針）Molecular

beacon（分子信標(biāo)）Lightcycler上開(kāi)發(fā)獨(dú)有的分析模式：

Hybridization

Probe

Format（雜交探針）SimpleProbe

（單探針）SYBR-Green

I檢測(cè)模式SYBR

Green

I能選擇性地與雙鏈DNA結(jié)合，在外界光源激發(fā)下產(chǎn)生強(qiáng)烈熒光。在PCR過(guò)程中，

SYBR

Green

I可與新合成地雙鏈DNA結(jié)合，產(chǎn)生地?zé)晒庑盘?hào)強(qiáng)度與雙鏈DNA含量成正比，熒光檢測(cè)在每一循環(huán)的延期后進(jìn)行。SYBR

Green

I與非特異性雙鏈DNA（如引物二聚體）結(jié)合產(chǎn)生的干擾可通過(guò)融解曲線分析而得到解決。水解探針（Taqman

）檢測(cè)模式同時(shí)標(biāo)記有熒光發(fā)光分子和熒光淬滅分子的一

條探針在激發(fā)光作用下，發(fā)光分子所產(chǎn)生的熒光可

被淬滅分子吸收，因而檢測(cè)不到熒光。在PCR延伸

時(shí)，因Taq酶具有的5，－3，核酸外切酶活性，可降

解熒光探針，使熒光發(fā)光分子與熒光淬滅分子分開(kāi)，在外界光源激發(fā)下即可發(fā)出熒光，熒光強(qiáng)度與PCR

擴(kuò)增產(chǎn)物量有關(guān)。分子信標(biāo)（Molecular

Beacon

Probe）獨(dú)特的頸環(huán)結(jié)構(gòu)，由非特異的頸和特異的環(huán)組成，探針的5’端標(biāo)記熒光分子，3’端標(biāo)記一個(gè)吸收或淬滅熒光的分子。自身環(huán)化時(shí)儀器檢測(cè)不到熒光，在PCR反應(yīng)的退火階段，探針因與模板鏈雜交而打開(kāi)，使5’端熒光分子與3’端吸收或淬滅熒光的分子分開(kāi)，儀器就會(huì)檢測(cè)到熒光信號(hào)。每一個(gè)循環(huán)，隨著PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，熒光信號(hào)會(huì)增強(qiáng)，從而根據(jù)熒光信號(hào)的增強(qiáng)來(lái)計(jì)算PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的增加量。雜交探針（HybProbe）檢測(cè)模式設(shè)計(jì)與檢測(cè)區(qū)互補(bǔ)的分別帶有不同染料標(biāo)記的一對(duì)寡核苷酸（既雜交探針），在與擴(kuò)增的DNA片斷雜交時(shí)，兩種染料互相接近。其中供體熒光染料受外來(lái)光源激發(fā)后，將能量傳遞給附近的受體染料，既發(fā)生熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET），從而釋放出

受體染料分子的發(fā)射波長(zhǎng)熒光信號(hào)。熒光信號(hào)的強(qiáng)度和DNA的產(chǎn)量成正比。其他非特異性產(chǎn)物由于不會(huì)與探針雜交，因而不產(chǎn)生信號(hào)干擾。AnnealingElongationEnd

of

ElongationDenaturationFluoresceinLC

Redfor

sequence

specific

detection

of

DNA雜交探針檢測(cè)－羅氏專(zhuān)利性技術(shù)Template:Plasmid;Target:CycA;DetectionFormat:HybridizationProbesStandard

Calculated1

.024

E+

99

.433

E+

71

.127

E+

71

.029

E+

69

.902

E+

41

.021

E+

49

.217

E+

29

.276

E+

11

.085

E+

1H

2

Oc1o.n0cEe+n1t0ra9t.i5o2n2

E+

91

.0

E+

91

.0

E+

81

.0

E+

71

.0

E+

61

.0

E+

51

.0

E+

41

.0

E+

31

.0

E+

21

.0

E+

1H

2

O雜交探針的優(yōu)點(diǎn)：

1.靈敏度高寬動(dòng)力學(xué)范圍特異性高可用于突變分析Monitoring

of

PCR

with

the

LightCyclerUsing

Hybridization

Probes專(zhuān)用于SNP基因分型和突變檢測(cè)的

SimpleProbeSimpleProbe作為一種獨(dú)特的雜交探針只含有一條寡核苷酸探針，能夠特異性的與目的基因上含有SNP位點(diǎn)的靶序列結(jié)合。探針與靶序列結(jié)合后，釋放出能夠被檢測(cè)到的熒光信號(hào)，通過(guò)對(duì)熔點(diǎn)曲線分析中探針釋放的熒光信號(hào)強(qiáng)度的分析，可以得到對(duì)目的基因的多態(tài)位點(diǎn)的準(zhǔn)確分析結(jié)果。Denaturation

phase:SimpleProbe

free

in

solution;

emission

of

reporter

dye

is

quenchedQ

5‘R3‘5‘primerQ

5‘

3‘-pAnnealing

phase:Fluorescence

from

reporter

dye

increases

when

probe

is

annealed

to

itcomplementary

targetRNew

Probe

Format

:

SimpleProbe

Format-高效低成本的新型探針R

=

Reporter

(Fluorescein)Q

=Quencher3‘-p熒光定量PCR儀的部分應(yīng)用醫(yī)學(xué)相關(guān)研究疾病的臨床早期診斷病原體的含量檢測(cè)合理用藥分子水平的療效研究疾病的發(fā)病監(jiān)控研究腫瘤相關(guān)基因腫瘤、耐藥基因的檢測(cè)研究組織或培養(yǎng)細(xì)胞中mRNA的表達(dá)水平－各種處理對(duì)細(xì)胞mRNA含量變化的影響－比較染病組織與正常組織中各種mRNA含量差異DNA或RNA的轉(zhuǎn)染量與實(shí)驗(yàn)結(jié)果關(guān)系的研究基因分型及SNP分析轉(zhuǎn)基因動(dòng)物及植物研究重點(diǎn)問(wèn)題說(shuō)明超高速的熱循環(huán)——由于采用空氣迅速改變

溫度，以及利用有高表面積/體積比的光學(xué)玻璃毛細(xì)管模式，使升降溫速度最高可達(dá)20℃/秒，

溫控≤

0.2

℃

，

每20～30分鐘便能完成30～40個(gè)循環(huán)。升降溫?cái)?shù)率唯一可調(diào)——可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需要調(diào)整升降溫速率的系統(tǒng)0.05~20℃/秒，優(yōu)化實(shí)驗(yàn)。配套功能強(qiáng)大的分析軟件：絕對(duì)定量（具“單點(diǎn)定標(biāo)”功能）相對(duì)定量（可進(jìn)行效率校正）自動(dòng)基因分型（SNP）顏色干擾校正獨(dú)特的熔點(diǎn)曲線分析功能，可進(jìn)一步作PCR后分析：---檢測(cè)非特異擴(kuò)增并作矯正---鑒別基因型而又無(wú)需采用測(cè)序凝膠---檢測(cè)點(diǎn)突變，并可利用雙色檢測(cè)及顏色補(bǔ)償軟件在同一反應(yīng)中分析較復(fù)雜的突變?yōu)槭裁词褂肈Nase-Free

&

RNase-Free的光學(xué)玻璃毛細(xì)管?玻璃反應(yīng)管可加快熱傳導(dǎo)速率.毛細(xì)管增加表面積/體積比，確保空氣和反應(yīng)成分之間的溫度迅速平衡，溫度均一.縮短了PCR反應(yīng)時(shí)間，特別是熒光激發(fā)的時(shí)間，保證了反應(yīng)成分的穩(wěn)定性，尤其是熒光染料的穩(wěn)定性?？s小反應(yīng)體系，降低檢測(cè)成本。光學(xué)玻璃毛細(xì)管的材料適合熒光訊號(hào)的測(cè)定，類(lèi)似光纖LightCycler/毛細(xì)管/試劑的成本核算儀器的維護(hù)費(fèi)用LightCycler是免維護(hù)的儀器,采用的光源是普通的發(fā)光二極管，壽命長(zhǎng)達(dá)20000小時(shí)以上，

非常穩(wěn)定，價(jià)格低廉。而鹵素?zé)艄庠?，壽?lt;2000小時(shí)，發(fā)光強(qiáng)度衰減明顯，需要定期更換，價(jià)格昂貴。單一反應(yīng)成本的計(jì)算單一反應(yīng)成本包括試劑成本和反應(yīng)管成本，由于毛細(xì)管的反應(yīng)體系是10~20ul，而其他同類(lèi)機(jī)器的反應(yīng)體系是50ul，所以使用LC試劑的成本可以減少至少一半。Light

Cycler其他機(jī)型反應(yīng)管價(jià)格0.45

USD0.12

USD反應(yīng)體系10~20

ul50

ul反應(yīng)液/試劑成本2.4

USD4.8

USD總反應(yīng)成本2.85

USD4.92

USDLC1.5與同質(zhì)產(chǎn)品的對(duì)比項(xiàng)

目ROCHELightCycler

1.5ABIABI

7300MJOPTICON

I備

注光源LED（發(fā)光二極管）冷光源，免維修，開(kāi)機(jī)可以馬上進(jìn)行操作，壽命>

20000小時(shí)。鹵素?zé)簟勖蹋桀A(yù)熱，壽命2000小時(shí)。LED（發(fā)光二極管）,每一個(gè)孔位一個(gè)獨(dú)立的激發(fā)光源和檢測(cè)裝置。LightCycler光源無(wú)需定期更換，穩(wěn)定方便，光路相同，樣本誤差最小，節(jié)約成本。加熱方式空氣加熱，溫控變化準(zhǔn)確（±0.4℃）半導(dǎo)體加熱制冷（溫控±0.5℃）半導(dǎo)體加熱制冷（溫控±0.5℃）LightCycler變溫速度快，溫控精確。升降溫速度熱傳導(dǎo)速率20℃/秒，（0.05-20℃/秒)熱傳導(dǎo)速率2.5℃/秒熱傳導(dǎo)速率2.5℃/秒LightCycler升降溫速度快，并可調(diào)節(jié)運(yùn)行時(shí)間30－40分鐘2－3小時(shí)1

.5－2

.5小時(shí)LightCycler檢測(cè)時(shí)間短，快速出結(jié)果，應(yīng)用最靈活單點(diǎn)定標(biāo)功能軟件可支持單點(diǎn)定標(biāo)功能無(wú)無(wú)LightCycler每次實(shí)驗(yàn)節(jié)約反應(yīng)管和反應(yīng)試劑4－5份，且單點(diǎn)擬合確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果反應(yīng)管反應(yīng)體系(定量)石英玻璃毛細(xì)管10-20ul薄壁塑料管50ul－100

ul專(zhuān)用薄壁塑料管50ul－100

ul石英玻璃管熒光檢測(cè)靈敏度好，導(dǎo)熱快,試劑用量省項(xiàng)

目ROCHELightCycler

1.5ABIABI

7300MJOPTICON

I備

注光路波長(zhǎng)及熒光接收模式530nm,640nm,710nm.并解決相關(guān)熒光素?zé)晒飧蓴_問(wèn)題，光電雜合模式4通道，無(wú)顏色補(bǔ)償功能,CCD鏡頭模式(需使用Rox染料進(jìn)行校正,占用一個(gè)通道,實(shí)際只有3個(gè)通道可用)1通道，無(wú)顏色補(bǔ)償功能,96個(gè)LED光源分別檢測(cè)LightCycler檢測(cè)波長(zhǎng)經(jīng)過(guò)優(yōu)化，檢測(cè)范圍廣泛，通道間相距較遠(yuǎn)，干擾

最小，而且通過(guò)顏色補(bǔ)

償功能可將干擾降到最低程度檢測(cè)方式實(shí)時(shí)檢測(cè)在線觀測(cè)（每一循環(huán)光強(qiáng)度變化，溫度變化，反應(yīng)時(shí)間均可觀測(cè)）實(shí)時(shí)檢測(cè)在線觀測(cè)實(shí)時(shí)檢測(cè)在線觀測(cè)LightCycler可實(shí)時(shí)檢測(cè)整個(gè)PCR過(guò)程，也能在

PCR運(yùn)行中根據(jù)試驗(yàn)需

要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)條件的調(diào)節(jié),使用靈活.試劑定量方法Hybridizationprobes(雜交探針):(定量和熔點(diǎn)曲線分析，擴(kuò)增范圍100-1000bp）·TaqMan探針·SYBRGREEN

I·分子航標(biāo)TaqMan探針（定量，解鏈曲線分析,擴(kuò)增范圍50-150bp〕SYBRGREEN

I·分子航標(biāo)TaqMan探針（定量，解鏈曲線分析,擴(kuò)增范圍50-150bp〕SYBRGREEN

I·分子航標(biāo)LightCycler使用的熒光檢測(cè)模式最多，對(duì)于各

種臨床檢測(cè)和科研實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用最為廣泛動(dòng)力學(xué)范圍10X7X7XLightCycler檢測(cè)線性范圍廣泛，無(wú)需特別處理樣本LC2.0與同質(zhì)產(chǎn)品的對(duì)比項(xiàng)

目ROCHELightCycler

2.0ABIABI

7500MJOPTICON

Ⅱ備

注反應(yīng)管反應(yīng)體系(定量)石英玻璃毛細(xì)管10-100ul薄壁塑料管50ul－100

ul專(zhuān)用薄壁塑料管50ul－100

ul石英玻璃管熒光檢測(cè)靈敏度好，導(dǎo)熱快,試劑用量省光路波長(zhǎng)及熒光接收模式六通道，530nm,560nm,610nm,640nm,670nm,710nm.并解決相關(guān)熒光素?zé)晒飧蓴_問(wèn)題，光電雜合模式五通道，無(wú)顏色補(bǔ)償功能,CCD鏡頭模式(使用的探針染料增加)2通道，無(wú)顏色補(bǔ)償功能,96個(gè)LED光源分別檢測(cè)LightCycler檢測(cè)波長(zhǎng)經(jīng)過(guò)優(yōu)化，檢測(cè)范圍廣泛，通道間相距較遠(yuǎn)，干擾最小，而且通過(guò)顏色補(bǔ)償功能可將干擾降到最低程度二、LC480LightCycler?480實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)高靈敏

可檢測(cè)單拷貝基因動(dòng)力學(xué)范圍廣

可檢測(cè)10－1010個(gè)拷貝高重復(fù)性

重復(fù)性高，CV＜0.3％高分辨率

輕松區(qū)分1000拷貝以下2倍濃度差異高速

40分鐘完成40個(gè)PCR循環(huán)技術(shù)創(chuàng)新

采用Therma-BaseTM熱循環(huán)專(zhuān)利技術(shù)和先進(jìn)的光學(xué)檢測(cè)系靈活模塊化自動(dòng)化平臺(tái)統(tǒng)，徹底消除邊緣效應(yīng)，保持穩(wěn)定優(yōu)異的檢測(cè)結(jié)果。分析模式多樣，絕對(duì)定量，相對(duì)定量，融解曲線分析等幾乎適用所有的檢測(cè)模式（SYBR

GreenⅠ，Taqman

Probe，Hybprobe，SimpleProbe等）可互換的96孔，384孔加熱模塊，用戶可以自助更換模塊，不需要工程師到場(chǎng)配以LIMS系統(tǒng)及自動(dòng)進(jìn)樣機(jī)械臂，可實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程操作及全自動(dòng)化運(yùn)作用戶界面友好

軟件直觀簡(jiǎn)潔，易操作LightCycler?480系統(tǒng)主要特點(diǎn)LightCycler?480系統(tǒng)主要參數(shù)溫度控制37℃－95

℃最大升溫速率4.8

℃最大降溫速率2.5

℃激發(fā)光源標(biāo)準(zhǔn)氙燈檢測(cè)裝置冷CCD濾鏡激發(fā)波長(zhǎng)（nm）：450，483，523，558，615發(fā)射波長(zhǎng)（nm）：500，533，568，610，640，670軟件功能絕對(duì)定量、Tmcalling、含效率校正的相對(duì)定量、基因分型、產(chǎn)物鑒定等。創(chuàng)新的PCR熱循環(huán)模塊設(shè)計(jì)Therma-BaseTM

是一個(gè)內(nèi)壁布滿燈芯狀毛細(xì)管結(jié)構(gòu)的腔體，通過(guò)一系列的冷凝合蒸發(fā)，Therma-BaseTM

高效地傳遞熱量，從而實(shí)現(xiàn)整板最大的溫度均一性。Therma-BaseTM核心優(yōu)勢(shì)優(yōu)異的空間溫度均一性快速、準(zhǔn)確的溫度調(diào)控40個(gè)循環(huán)＜40分鐘(384孔板)先進(jìn)獨(dú)特的光學(xué)系統(tǒng)LC480系統(tǒng)使用寬光譜、高強(qiáng)度的氙燈作為光源。激發(fā)光經(jīng)過(guò)多次反射后形成與孔板大小相同、光強(qiáng)均一的光柱，有效消除邊緣效應(yīng)。激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)的任意組合，使得多種熒光染料和檢測(cè)模式可用于目前所有的實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)。LC480光學(xué)系統(tǒng)的核心優(yōu)勢(shì)：－最靈活地選擇熒光染料及檢測(cè)模式－整板數(shù)據(jù)的精確捕獲－強(qiáng)大的多重PCR能力多檢測(cè)通道支持所有的檢測(cè)模式LightCycler?

480系統(tǒng)支持目前所有檢測(cè)模式的使用，包括雜交探針、SYBR

Green

I

DNA結(jié)合染色、單探針、水解探針和分子信標(biāo)等等。多色熒光檢測(cè)系統(tǒng)，提供五色激發(fā)通道（450

nm,483

nm,523

nm,558

nm,615

nm）和六色熒光檢測(cè)通道（

500

nm,533

nm,568

nm,610

nm,640

nm,670

nm）,并具有顏色補(bǔ)償功能；可自由選擇，輕松實(shí)現(xiàn)多重或多色PCR。公認(rèn)的性能獨(dú)特的軟件基于用戶公認(rèn)的LC480軟件，新的LC480軟件采用羅氏獨(dú)特的算法來(lái)進(jìn)行高度精確、自動(dòng)化的數(shù)據(jù)分析。而且，新軟件還提供了許多新的的特性，讓用戶能夠輕松、省時(shí)地處理高通量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。LC480軟件設(shè)計(jì)宗旨是為了用戶需求量身定做。支持絕對(duì)定量、融解曲線分析、相對(duì)定量和自動(dòng)基因分型等功能。LC480軟件的核心優(yōu)勢(shì)：采用公認(rèn)的優(yōu)秀算法來(lái)分析數(shù)據(jù)友好的用戶界面，簡(jiǎn)單的快捷方式，便于進(jìn)行高通量樣品編輯及數(shù)據(jù)處理。軟件模塊化，用戶可根據(jù)自己的研究情況選擇性安裝。模塊系統(tǒng)概念LightCycler?

480在系統(tǒng)初始配置的基礎(chǔ)上，還可根據(jù)客戶的特別要求，通過(guò)在系統(tǒng)中添加各種先進(jìn)的軟件分析模塊進(jìn)行系統(tǒng)升級(jí)，滿足用戶不同階段的研究需求。目前可提供的系統(tǒng)模塊包括：－定性檢測(cè)－絕對(duì)定量分析－相對(duì)定量分析－統(tǒng)計(jì)分析工具－基因分型研究良好的兼容性LightCycler?

480可順利實(shí)現(xiàn)與現(xiàn)有實(shí)驗(yàn)室系統(tǒng)聯(lián)結(jié)，包括LIMS或是與自動(dòng)裝載微孔板的工作站

聯(lián)用實(shí)現(xiàn)全流程的自動(dòng)化操作。LightCycler?

480系統(tǒng)增強(qiáng)流程管理及數(shù)據(jù)管理的能力：實(shí)現(xiàn)真正的自動(dòng)化流程現(xiàn)代化的軟件設(shè)計(jì)思路，可與LIMS連接兼容性符合數(shù)據(jù)管理要求（21

CFR-11條款）LightCycler?

480系統(tǒng)自動(dòng)化裝板過(guò)程LightCycler480與ABI

7900

HT對(duì)比LightCycler480ABI

7900

HTPCR專(zhuān)利Roche擁有臨床和科研領(lǐng)域PCR專(zhuān)利ABI從Roche僅獲得科研領(lǐng)域PCR使用授權(quán)光源氙光源，光源發(fā)光波長(zhǎng)更廣范，強(qiáng)度更強(qiáng)，使得靈敏度達(dá)到最大化，通過(guò)折疊光路系統(tǒng)，激發(fā)光垂直射入每個(gè)反應(yīng)孔位，使各孔位光強(qiáng)均一化，解決邊緣效應(yīng)。氬離子激光光源，頂部激發(fā)光，各孔位有光程差，具有邊緣效應(yīng)，需加入校正試劑光路波長(zhǎng)450nm、483nm、523nm、558nm、615nm五色熒光488nm（單一激發(fā)光波長(zhǎng)，對(duì)很多熒光素不適用）檢測(cè)系統(tǒng)CCD成像系統(tǒng)，500nm、533nm、568

nm、610nm、640nm、670nm六個(gè)檢測(cè)通道，具有顏色補(bǔ)償功能，解決熒光素干擾問(wèn)題。CCD成像系統(tǒng)，通過(guò)光柵在500～660nm

連續(xù)檢測(cè)。無(wú)顏色補(bǔ)償功能。（采用普通TaqMan探針技術(shù)只能進(jìn)行雙色或三色實(shí)驗(yàn)）加熱方式采用therma-base專(zhuān)利技術(shù)的半導(dǎo)體加熱，解決模塊加熱的邊緣效應(yīng)，保證每個(gè)孔位受熱的均一性。半導(dǎo)體加熱，熱傳導(dǎo)最