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文檔簡介
坐骨神經-腓腸肌標本制備生理學實驗課的目的
PurposeofthisCourse驗證和鞏固生理學的基本理論了解獲得生理學知識的科學方法掌握生理學實驗的基本操作技術培養(yǎng)嚴肅的態(tài)度、嚴格的要求、嚴密的方法培養(yǎng)對事物觀察、分析、綜合的能力,獨立思考解決問題的能力以及創(chuàng)新的精神和創(chuàng)新的能力實驗課的要求
RequirementsofthisCourse實驗前:預習教材并積極思考實驗中:仔細觀察并動手操作;愛護儀器器械和實驗動物實驗后:保持衛(wèi)生清潔,寫好實驗報告并可進入論壇討論
實驗報告的一般格式
TheFormatofExperimentalReports姓名、班級、組別(Name,class&group)實驗題目、日期(Title&Date)實驗目的、原理(Purpose&Principle)實驗對象(Subject)實驗器材和實驗方法(Materials&Methods)實驗結果(Results)討論(Discussion)結論(Conclusion)撰寫實驗報告或在以后的科研論文中如何區(qū)分結果、討論、結論:
1、結果:結果是實驗產生的純客觀的描述,多以圖表、數據形式進行表述。
2、討論:①對實驗結果進行理論上的分析和論證②對本實驗研究方法的科學性和局限性的探討③提出可供深入研究的問題,或本實驗尚待進一步解決的問題④對未來研究及如何推廣研究提出建議。3、結論:結論呈現的是研究中的客觀事實,應是基本肯定的,也可以是否定的,并可以在相同背景下重復出現;它是對研究工作的一個小結,交代所研究的問題,所獲得的結論以及解決問題所達到的程度,還可以對今后的研究指出方向,提出新的課題。坐骨神經-腓腸肌標本制備PreparationofSciaticNerve-GastrocnemiusMuscleSpecimen1、熟悉并掌握蟾蜍或蛙坐骨神經腓腸肌標本的制備方法2、熟悉并掌握生理學實驗常用器械的使用和基本操作技術實驗目的(Purpose)
實驗原理(Principle)
①為什么要做這個實驗?在生理學實驗中常利用蛙的坐骨神經-腓腸肌標本研究神經、肌肉的興奮、興奮性;刺激與反應的規(guī)律和肌肉收縮的特征等,制備坐骨神經腓腸肌標本是生理學實驗的一項基本操作技術。②為什么實驗動物選蟾蜍?兩棲動物一些基本生命活動和生理機能與溫血動物近似,而其離體組織、器官保持活性所需的條件比較簡單,易于控制和掌握,所以生理實驗中常選擇蟾蜍或青蛙的離體組織或器官作為實驗標本。③怎樣保持離體器官的活性?
任氏液是—種比較接近兩棲動物內環(huán)境的液體,可以用來延長青蛙心臟在體外跳動時間、保持兩棲類其他離體組織器官生理活性等實驗對象(Subject):
蟾蜍或蛙
ToadorFrog
實驗藥品(Drug):
任氏液(Ringer'ssolution)
原液成分:
20%NaCl(ml)32.510%KCl(ml)1.410%CaCl2(ml)1.2
5%NaHCO3(ml)4.01%NaH2PO4(ml)1.0
C6H12O6(g)2.0(可不加,為什么?)H2O加至(ml)1000
實驗器械(Tools)毀髓針:用于破壞蛙的腦和脊髓,怎么破壞?-視頻剪刀:普通剪刀用于剪皮膚、肌肉和骨等粗硬組織;細剪刀或眼科剪刀用于剪神經血管和心包膜等細軟組織;禁用眼科剪刀剪皮膚、肌肉或其他粗硬物鑷子:圓頭鑷子對組織損傷較小,用于夾捏組織和牽提切口;有齒鑷子用于夾捏骨頭和剝脫蛙皮;眼科鑷子有直彎兩種,用于分離神經、血管和夾捏細軟組織,切不可用鑷子直接夾捏或牽提神經血管,為什么?玻璃分針:用于分離血管神經等組織,不可用力過猛以防折斷蛙板:用于固定蛙類,以便進行解剖和實驗鋅銅弓:用于對標本施加刺激,以檢查其興奮性,鋅銅弓的原理?實驗器械(Tools)鋅銅弓用金屬鋅和銅鉚接而成,鋅銅弓在極性溶液中形成回路時,鋅與銅兩極產生約0.5~0.7V的直流電壓,因此可用來刺激神經和肌肉,使神經或肌肉興奮。這種刺激僅在鋅銅弓與神經或肌肉接觸瞬間產生,持續(xù)接觸不能使神經或肌肉興奮,為什么?鋅銅弓原理簡介:金屬與溶液之間便產生了電位差——電極電位。如果將Zn和Cu一端接觸,則在接觸部位電流由Cu向Zn方向流動;而在溶液中則相反,由Zn向Cu流動。當鋅銅弓接觸組織時(注意:表面必須濕潤),電流便沿Zn→可興奮組織→Cu方向流動,而產生流動作用。這樣,鋅銅弓好像一個電池,Zn如同其陽極,Cu好像陰極而發(fā)揮作用。神經或肌肉的電刺激閾值非常小,所以僅用鋅銅弓接觸,即可構成刺激,以便檢驗組織的機能活性。Cu和Zn外部電子分布可以由上頁第一段解釋,內部怎么理解?實驗方法(Methods)視頻搗毀蟾蜍腦、脊髓小心毒液,雙毀髓時應注意使蟾蜍頭部前俯,防止耳后腺分泌物射入實驗者眼內,如被射入,應立即用生理鹽水沖洗眼睛。剪除蟾蜍軀干上部、內臟剝皮
剝皮后蛙的后肢:分離兩腿,制作坐骨神經-腓腸肌標本
1、分離兩腿(separatethetwolegs)2、游離結扎腓腸肌(dissociate&ligaturetheGastrocnemius)3、游離坐骨神經(dissociatethesciaticnerve)4、游離、剪斷股骨(free&cutthethighbone)5、剪斷膝關節(jié)(cutthekneejoint)完成制作,用鋅銅弓檢查標本興奮性Checktheexcitabilityofthespecimen注意事項(Attention)1、小心
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