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文檔簡介
各類鼻咽癌細胞株特性及來源CNE1為鼻咽高分化鱗狀細胞癌細胞系;CNE2、HNE1、HNE2、HNE3、HONE1為鼻咽低分化鱗狀細胞癌細胞系;5—8F為鼻咽低分化鱗狀細胞癌,細胞系SUNE—1亞株,具有高轉移、高成瘤能力;6-10B為鼻咽低分化鱗狀細胞癌細胞系SUNE-1亞株,具有高成瘤潛能,不轉移特性。C666-1為長期攜帶EB病毒基因的低分化鼻咽癌細胞株;HK-1為攜帶EB病毒基因的高分化鼻咽癌細胞株?NP69為永生化鼻咽上皮細胞系,于1XKsFM(keratinoeyteserum-freemedium,KSFM)培養(yǎng)基中,37C、5%CO2、飽和濕度條件下培養(yǎng),呈現(xiàn)鱗狀上皮樣、貼壁生長,具有正常鼻咽上皮的特性。CNE11癌組織來源病人王某某,女,58歲,,籍貫吉林省,,中國醫(yī)學科學院日壇醫(yī)院住院號:2382248.1975年8月13日患者因頭痛耳鳴、鼻衄等癥狀來院就診。臨床檢查鼻咽部有菜花樣腫物,腫瘤已侵犯顱底和顱神經(jīng)(川,IV,區(qū)劉),雙頸淋巴結轉移,診斷為鼻咽癌。X光診斷為鼻咽后壁軟組織腫物符合鼻咽癌,顱底象見左側翼狀突外板可疑骨質(zhì)破壞,鼻咽部腫物作活檢,病理診斷為高分化鱗癌。培養(yǎng)過程在第12代時(培養(yǎng)后的6個月),在上皮樣細胞培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)有少量梭形細胞。在有的培養(yǎng)瓶中,梭形細胞逐漸增加。在接種少量細胞的培養(yǎng)瓶中,有的全為上皮樣細胞,有的全為梭形細胞。選擇全為上皮樣的細胞傳代,稱CNE細胞株;全為梭形的細胞傳代,稱CNF細胞株CNE細胞株容易形成空泡,不傳代的老細胞,在顯微鏡下可見到有些細胞的胞漿突出,然后脫落成死細胞,還有多核巨細胞。在這二株細胞,特別是CNF細胞的單層或多層細胞上有很多圓形細胞,核大,漿少。在培養(yǎng)液中也有大量圓的脫落細胞。將培養(yǎng)液中的懸浮細胞接種于培養(yǎng)瓶,細胞仍能貼瓶,生長出原來的上皮樣細胞或梭形細胞。將CNE,CNF細胞和這二株細胞的脫落細胞培養(yǎng)成單層后,不傳代,每周換液二次,繼續(xù)培養(yǎng)7個月,未能得到類淋巴母細胞株,在培養(yǎng)過程中未見到腫瘤組織培養(yǎng)中常見到的成纖維細胞生長。特性CNE-22組織來源和培養(yǎng)方法組織取自鼻咽癌(W期)患者,林XX,63歲,男性,廣東籍,活檢組織病理檢查為慢性鼻咽炎,但同時負壓吸引的鼻咽脫落細胞為低分化鱗狀細胞癌(圖1)?病人血清的EB病毒抗體和鼻咽脫落細胞的EBNA檢測,病人血清的各種抗EB病毒抗體的滴度分別為:VCA/IgG1:320,EAIgG1:160,VCA/lgA1:40,EA/lgA<1:5,抗EBNA抗體為1:160=鼻咽脫落細胞中發(fā)現(xiàn)成團的癌細胞呈EBNA陽性細胞株的EB病毒抗原用抗補體免疫熒光試驗檢查CNE-2細胞中各種EB病毒抗原。體外培養(yǎng)第3代細胞可見2谷淑燕,趙文平,曾毅,唐慰平趙明倫鄧惠華,李昆.從低分化鼻咽癌病人建立鼻咽癌上皮細胞株[J].癌癥,1983,02:70-72+129-130?EBNA陽性,胞核呈顆粒狀明亮的熒光,細胞傳至第11代后進行多次檢查,EBNA均呈陰性。經(jīng)ludR或巴豆油、丁酸激活的細胞,檢查EA、VCA也呈陰性。將細胞與類淋巴母細胞株HK-1共同培養(yǎng),觀察EB病毒對上皮細胞的再感染,6天后上皮細胞的EBNA仍呈陰性。HNE1、HNE2,HNE3和HONE1324組織細胞培養(yǎng)及建株腫瘤組織取自4倒男性鼻咽癌初診患者,分別命名為HNE1、HNE2,HNE3和HONE1,其中HNE1和H0NE1為EBV陽性,HNE2和HNE3為EBV陰性。病理診斷均為低分化鱗癌。EBV抗原及EBV基因組分析EBNA檢測結果發(fā)現(xiàn).HNE£和HONE1細胞30代以前均為EBNA陽性,HNE2和HNE3則為陰性。晚代HNE1和HONE1細胞的EBNA也逐漸轉為陰性,而從HONE1第5代細胞中克隆出來的CL40亞株的EBNA則非常穩(wěn)定,傳至52代其EBNA陽性率仍高達85—90%,VCA結果示HNE1、HNE2、HNE3,均為EA/VCA朗性.HONE細胞中只有0.1%為陽性。3人體鼻咽癌上皮樣細胞株和梭形細胞株的建立[J].中國
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