濕熱滅菌工藝的驗證

－標準與方法上海市食品藥品監(jiān)督管理局上海市食品藥品包裝材料測試所驗證部徐敏鳳電話13916582946mail:xuminfeng@GMP的新增內容63條：任何滅菌工藝在投入使用前，都必須通過物理檢測手段驗證其對產品的適用性及滅菌效果，即每種被滅菌產品和物品的所有部位都達到了設定的滅菌要求，必要時還應進行生物指示劑試驗，作為滅菌監(jiān)控的補充手段。64條：應對滅菌工藝的有效性定期進行再驗證（每年至少一次）。設備有重大變更后，應進行再驗證。應保存再驗證的結果和記錄。65條：所有的待滅菌物品均須按規(guī)定的要求處理，以獲得良好的滅菌效果，滅菌工藝的設計應確保滅菌完全。GMP的新增內容66條：應通過驗證確認滅菌設備腔室內待滅菌產品和物品的裝載方式。67條：應按供應商的要求保存和使用生物指示劑，并通過陽性對照來確認其質量。使用生物指示劑時，應采取嚴格措施，防止由其所致的微生物污染。68條：應有明確區(qū)分已滅菌產品和待滅菌產品的方法。每一車（盤或其它裝載設備）產品或物料均應貼簽，清晰地注明品名、批號并標明是否已經滅菌。必要時，可用濕熱滅菌指示帶加以區(qū)分。69條：每一個滅菌批次都應有滅菌記錄。應把滅菌記錄作為該批產品放行的依據。GMP的新增內容熱力滅菌監(jiān)測或記錄的溫度探頭與用于控制的溫度探頭應分開每次滅菌均應記錄滅菌過程的時間/溫度曲線應定期將獨立的溫度顯示器的讀數(shù)與滅菌過程中記錄獲得的圖譜對照。應監(jiān)測每種裝載方式所需升溫時間，且從所有被滅菌產品或物品達到設定的滅菌溫度后開始計算滅菌時間。應有措施防止已滅菌產品或物品在冷卻過程中遭受污染。GMP的新增內容濕熱滅菌參數(shù)應包括滅菌時間、溫度或壓力應經常對腔室作檢漏測試被滅菌物品應用合適的材料適當包扎直接接觸產品的包裝容器、灌裝設備、膠塞及可能與產品接觸的工器具等的濕熱滅菌應采用純蒸汽國際法規(guī)和標準目的獲得有效合理的滅菌參數(shù)證明濕熱滅菌設備對被滅菌品的適用性不同滅菌程序的可靠性和重現(xiàn)性初始菌Bioburden

濕熱滅菌介質：飽和蒸汽空氣-蒸汽混合氣體過熱水等D值/Z值F值（F0值）蒸汽的質量干燥值（Drynessvalue

）不冷凝氣體（NoncondesableGases

）飽和蒸汽（SaturatedSteam）過度殺滅程序（OverkillApproach）預真空程序（PrevacuumProcess）蒸汽－空氣混合氣體（Steam-AirMixture）滅菌

過熱水程序（SuperheatedWaterProcess）

無菌保證水平（SterilityAssuranceLevel,SAL）滅菌法選擇的基本原則滅菌法選擇的基本原則過度殺滅法。假設：N0＝106D121＝1分鐘Z＝10℃將數(shù)據代入公式，得L=1，再按計算，達到微生物殘存概率為一百萬分之一所需的物理及生物殺滅力如下：物理殺滅力FPHY為12分鐘，生物殺滅力FBIO

＝D121×（LogN0－LogNF）＝12分鐘滅菌法選擇的基本原則殘存概率法假設產品的生物負荷測試中：N0＝102D121＝1分鐘Z＝10℃經滅菌后，微生物殘存概率NF小于10-6利用上面的數(shù)值，可以計算出微生物殘存概率小于10-6所需的FPHY和FBIO如下：F0＝FPHY＝FBIO＝D121×（LogN0－LogNF）＝8分鐘滅菌法選擇的基本原則WHOSterilizationbymoistheat6.4Sterilizationbymoistheat…issuitableonlyforwater-wettablematerialsandaqueousformulations.….Thetemperaturerecordershouldnormallybeindependentofthecontroller,andthereshouldbeanindependenttemperatureindicator,thereadingfromwhichshouldberoutinelycheckedagainstthechartrecorderduringthesterilizationperiod.Forsterilizersfittedwithadrainatthebottomofthechamber,itmayalsobenecessarytorecordthetemperatureatthispositionthroughoutthesterilizationperiod.Thereshouldberegularleaktestsonthechamberwhenavacuumphaseispartofthecycle.6.4濕熱滅菌法…僅適用于水浸潤性材料或水溶液?！绦蚩刂葡到y(tǒng)應獨立于溫度記錄儀表，并配置獨立的溫度顯示器。滅菌過程中，溫度顯示器的讀數(shù)應與滅菌曲線記錄對照?！皇业撞垦b有排水口的滅菌柜，有必要測定并記錄該點在滅菌全過程中的溫度數(shù)據。如滅菌程序中含抽真空，則應定期對腔室進行檢漏試驗。WHOSterilizationbymoistheat6.5Theitemstobesterilized,otherthanproductsinsealedcontainers,shouldbewrappedinamaterialthatallowstheremovalofairandthepenetrationofsteambutpreventsrecontaminationaftersterilization.Allpartsoftheloadshouldbeincontactwithwaterorsaturatedsteamattherequiredtemperaturefortherequiredtime.6.5如被滅菌品不是最終滅菌產品，則應使用合適的材料將其適當包扎，所用材料及包扎方式應利于排除空氣，有利于蒸汽穿透并能防止滅菌后的二次污染。在規(guī)定的滅菌溫度和滅菌時間內，所有被滅菌品應與水或飽和蒸汽相接觸.蒸汽的潛熱為540卡/克，有空氣處滅菌效果差，脈動真空水噴淋等就是要解決潛熱問題幾種常用的濕熱滅菌法液體注射劑產品的滅菌空氣－蒸汽混合物（SAM）過熱水噴淋法重力置換法（不推薦）下排式蒸汽滅菌柜（重力置換法）下排式蒸汽滅菌柜工作原理圖1、蒸汽進入2、高溫度蒸汽比重小，在上部3、蒸汽不斷進入4、冷凝水及低溫度空氣在底部被擠走GravityDisplacementAutoclaveAtequaltemperatureandpressure,airisinfactontheaverage1.5timesdenserthansteam.過熱水噴淋滅菌柜-外形熱交換器由不銹鋼制造、衛(wèi)生級、雙功能（加熱及冷卻），有效，安全。湍流、速度、液體循環(huán)交換（蒸汽和冷卻水）自動實現(xiàn)熱交換器內部的清潔。控制柜衛(wèi)生離心泵：保持水的高速循環(huán)，這對實現(xiàn)溫度的均一性至關重要。CA除菌過濾器過熱水噴淋/溫度-壓力曲線Temperature/PressureChartHotWaterShowerProcessTemperature(C)Pressure(bar)Time(min)02040601208010000.51.01.52.02.5140120100806040200排氣FoHotwaterspraysterilizer本圖為旋轉式噴淋滅菌柜水噴淋-高效熱交換，程序短可用于乳劑、氨基酸等配外部雙管板熱交換器過程：進PW→蒸汽加熱循環(huán)水→在過壓保護條件下→水噴淋產品→達到滅菌溫度-保溫→冷卻→平衡壓力-出料轉速：1-5轉/分產品溫差可控<±0.5℃被滅菌品純化水門密封條噴淋管固定架傳動裝置hotwaterspraysterilizerwithRotatingCageforfatemulsions,etc.過熱水旋轉噴淋滅菌程序Initialization

程序開始FillingPW

進PW到設定液位Heating

逐步加熱＋加壓縮空氣Sterilizing

滅菌＋壓縮空氣Draining

排放氣/水Safetyexhaustcheck<±0.1bar

安全壓力檢查SafetycoolingCheck<80℃

安全溫度檢查Endofprogram

程序結束Cooling

冷卻SAM-滅菌柜-流程示意Steam：蒸汽Sterilefilter：除菌過濾器Referencebottle：參照瓶Heatexchanger：熱交換器Pressurevessel：壓力容器Fan：風葉（非金屬）PT100：溫度探頭Coolingwater：冷卻水Coldwater：冷凍水（~7℃

）Condensate：冷凝水SprayCondensate：噴淋冷凝水Drain：排放口Temperature-PressureChart

SA-MixtureProcessSAM混合氣體滅菌溫度-壓力曲線Time(min)020406012080100Pressure(bar)00.51.01.52.02.5Temperature(C)140120100806040200紅線為壓力：蘭線為溫度冷卻時間長Fo滅菌中的壓力平衡玻璃瓶目的是不讓水汽化有一定的保持包裝作用充氣要求比較低，一般可控制在~2巴左右如加蒸汽，總壓在2巴左右壓力的設定還取決于產品軟包裝要保護PP類塑料包裝不變形、不受損壞，特別是在冷卻階段，當溶液溫度較高、外部處冷卻階段時開始時壓力也不宜過大，要考慮到對虛焊的影響壓力控制要求比瓶子的要高一些Equipmentsterilizer適用對象Equipmentparts?Textiles?Rubberstoppers?Utensils?Infectiouswaste?Aluminumcaps?Ampoules?VialsGlass&plasticbottles?Plasticbags?Blisterpacks?Contactlenses?Glass&plasticsyringes(emptyorfilled,wrappedorover-wrapped)程序隨被滅菌品的特性而定用于多孔/固體物品

滅菌器滅菌程序過濾器與膠塞、儀表和電器連線等工作服手套口罩過濾器灌裝器具抽真空>-0.07MPa進蒸汽：運行3次121℃保溫至設定的時間排氣抽真空干燥約15分鐘至設定的滅菌溫度進過濾氣體平衡壓力程序結束脈動真空蒸汽滅菌程序溫度脈動真空：抽真空-進蒸汽-抽真空-進蒸汽預真空升溫保溫干燥降溫排氣結束123真空Steam-PulsingSterilizers100121滅菌工藝的驗證及其驗證文件DQ在選用蒸汽滅菌器時，首先應根據產品的工藝來考慮蒸汽滅菌器的選型，主要是裝量的大小、滅菌溫度與時間的可控制性、滅菌程序的可選擇性、滅菌時腔室內溫度的一致性、升溫與降溫速率的穩(wěn)定性、控制及記錄系統(tǒng)的可靠性等。首先對所選滅菌器進行確認（IQ/OQ）例如：空氣過濾器的泄漏測試容積、真空度、壓力以及泄漏率測試