細(xì)菌ESBL酶與耐藥性

主講人：華耀？青霉素發(fā)現(xiàn)者、英國(guó)科學(xué)家弗萊明〔1928〕粘肽〔構(gòu)成細(xì)胞壁〕〔－〕胞漿內(nèi)細(xì)胞膜細(xì)胞膜外細(xì)胞壁合成受阻，細(xì)胞壁缺損，外環(huán)境水分滲入到菌體，菌體膨脹裂解而死。絲氨酸的結(jié)構(gòu)式克拉維酸〔1〕主要是有質(zhì)粒介導(dǎo)ESBLs基因由質(zhì)粒介導(dǎo),可通過(guò)接合、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)等形式在細(xì)菌間擴(kuò)散?！?〕TEM型ESBLs〔2〕SHV型ESBLsSHV型ESBLs是由SHV-1衍化而來(lái)。SHV家族中第一個(gè)SHV型ESBLs是SHV-2。SHV-2發(fā)生了Gly-238-Ser位點(diǎn)的突變,這增加了對(duì)氧亞氨基類抗生素的親和力和水解能力。比照其它的SHV型ESBLs氨基酸序列分析發(fā)現(xiàn),氨基酸的突變主要集中在179,238,240,205位點(diǎn)。

〔三〕ESBLs的檢測(cè)方法

1、標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法頭孢他啶\克拉維酸頭孢他啶2三相水解試驗(yàn)區(qū)分菌株為產(chǎn)ESBLs或產(chǎn)頭孢菌素酶〔AmpC酶〕ESBLs和AmpC酶同時(shí)產(chǎn)生的情況。①號(hào)槽：酶粗提物；②號(hào)槽：酶+CA；③號(hào)槽：酶+氯唑西林〔CLO〕；④號(hào)槽：酶+CA+CLO單產(chǎn)ESBLs菌株①號(hào)槽：酶粗提物；②號(hào)槽：酶+CA；③號(hào)槽：酶+氯唑西林〔CLO〕；④號(hào)槽：酶+CA+CLO聯(lián)合產(chǎn)ESBLs和AmpC菌株3、E-test法4、分子生物學(xué)檢測(cè)聚合酶鏈?zhǔn)椒错?PCR)參照GenBank已發(fā)表的TEM、SHV、CTX-M和OXA各亞型的基因序列，分別設(shè)計(jì)特異性引物5、總結(jié)ESBLs的檢測(cè)方法表型初篩試驗(yàn)初步判斷表型確證試驗(yàn)最終確認(rèn)三相水解試驗(yàn)確認(rèn)菌株是否只產(chǎn)ESBLsE-test法分子生物學(xué)檢測(cè)〔四〕ESBLs的防治按作用分為三類：〔1〕可逆性競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑：鄰氯西林、雙氯西林等〔2〕不可逆競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑：克拉維酸、舒巴坦等〔3〕非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑：甲氧西林等克拉維酸不可逆競(jìng)爭(zhēng)性抑制藥物分解，細(xì)菌存活酶失活，藥物起作用鄰氯西林

+鄰氯西林可逆性競(jìng)爭(zhēng)性抑制

(三)合理使用抗生素有報(bào)道顯示抗生素尤其是第三代頭孢菌素的應(yīng)用與ESBLs的感染流行有關(guān)。敏感菌因抗生素的選擇性壓力而被大量殺滅后，耐藥菌得以大量繁殖而成為優(yōu)勢(shì)菌，同時(shí)抗生素的選擇性壓力也加快了細(xì)菌突