學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載1 7ICS71.00.0學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載1 7CCSY42中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標準SN/T

5706—2023化妝品微生物檢驗方法大腸埃希氏菌檢驗ii t

iCosmetcsmiii t

i-

- -

--

- -

-中華人民共和國海關總署 發(fā)

布學ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準兔兔ｗ下載學ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準兔兔ｗ下載學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載SN/T5706—2023學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載前言本文件按照

GB/T1.標準化工作導則 第1部分:標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。本文件由中華人民共和國海關總署提出并歸口。本文件起草單位:中華人民共和國廣州海關、中華人民共和國深圳海關、中華人民共和國廈門海關、中華人民共和國煙臺海關。本文件主要起草人:凌莉、涂曉波、彭小莉、黃成棟、董潔、袁慕云、冼鈺茵、劉婧文、陳碧玲、廖榮軍、陳夢琪、席靜、段效輝。學ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準兔兔ｗ下載學ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準兔兔ｗ下載學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載SN/T5706—2023學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載化妝品微生物檢驗方法大腸埃希氏菌檢驗1

范圍本文件描述了化妝品中大腸埃希氏菌的定性檢驗方法。本文件適用于化妝品中大腸埃希氏菌的檢驗。2

規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對應的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。SN/T5075

化妝品微生物檢驗制樣規(guī)范3

術語和定義本文件沒有需要界定的術語和定義。4

方法提要β本方法利用大腸埃希氏菌具有β-葡萄糖醛酸苷酶的活性,能分解5-溴-4-氯-3-吲哚--D-葡萄糖醛β酸苷,在胰蛋白胨膽鹽X-葡萄糖醛酸苷瓊脂平板上形成藍綠色菌落,對其進行定性檢驗。注:本方法不適用于少部分β-葡萄糖醛酸苷酶陰性的大腸埃希氏菌,如

O157。5

設備和材料除微生物實驗室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設備外,其他設備和材料如下。 31 42 235. 恒溫培養(yǎng)箱:6℃±1 31 42 235. 恒溫裝置:8℃±2℃。5. 冰箱:

℃~8℃。4 155. 均質(zhì)器或乳液分散機(轉(zhuǎn)速1000r/min以上4 155. 電子天平:感量0.g。 26 1 17895. 無菌錐形瓶:50mL 26 1 17895. 無菌吸管:0mL(具0.mL刻度)。5. 無菌培養(yǎng)皿:直徑90mm。5. 無菌均質(zhì)袋或均質(zhì)杯。 1115.0

無菌接種環(huán):0μL(直徑約3 1115.1

pH

計或精密pH

試紙。 215.2

質(zhì)控菌株:大腸埃希氏菌ATCC25922或CGMCC1.385或等效菌株作為陽性對照; 211學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載SN/T5706—2023學兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ標準下載桿菌

ATCC43864或CICC10296或等效菌株作為陰性對照。6

培養(yǎng)基和試劑 S 116. 大豆酪蛋白卵磷脂吐溫80(CDLP)液體培養(yǎng)基:按 S 11 l 226. 胰蛋白胨膽鹽X-葡萄糖醛酸苷(TryptoneBieX-glucuronide,TBX)瓊脂:按 l 227

檢驗程序17. 化妝品中大腸埃希氏菌檢驗程序1化妝品中大腸埃希氏菌的檢驗程序見圖1。圖1

化妝品中大腸埃希氏菌檢驗程序27. 樣品前處理和稀釋2待測的樣品應在室溫下保存,不要溫育、冷藏和冷凍樣品。樣品的制樣處理按SN/T5075的規(guī)定執(zhí)行。37. 增菌培養(yǎng)3吸取1∶10稀釋的樣品勻液10mL接種到90mLSCDLP增菌液中,置于36℃±1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)418h~24h。47.分離培養(yǎng)用無菌接種環(huán)挑取一環(huán)增菌培養(yǎng)液,劃線接種于

TBX平板培養(yǎng)基,倒置于36℃±1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)18h~24h。在

TBX平板培養(yǎng)基上出現(xiàn)藍綠色菌落者,判斷為大腸埃希氏菌陽性。8

結果報告TBX平板培養(yǎng)基上有藍綠色菌落,報告每克(毫升)樣品中檢出大腸埃希氏菌。否則,報告每克(毫升)樣品中未檢出大腸埃希氏菌。2．ｂｚｆｘｗｗｗ學兔兔ｗ．ｃｏｍ標準下載SN/T5706—2023．ｂｚｆｘｗｗｗ學兔兔ｗ．ｃｏｍ標準下載附 錄

A(規(guī)范性)主要培養(yǎng)基和試劑 S111A. 大豆酪蛋白卵磷脂吐溫80(CDLP S111A.. 成分0005500酪蛋白胨 17.g0005500大豆蛋白胨 3.g氯化鈉 5.g磷酸氫二鉀 2.g葡萄糖 2.g卵磷脂 1.g吐溫80 7.g蒸餾水 1000mL12A.. 制法122 2先將卵磷脂在少量蒸餾水中加溫溶解后,再與其他成分混合,加熱溶解,每瓶90mL,于1212 2滅菌15min。注意振蕩,使沉淀于底層的吐溫80充分混合,冷卻至25℃左右使用。滅菌后的培養(yǎng)基在25℃時的pH

為7.±0.。 T221A. 胰蛋白胨膽鹽X-葡萄糖醛酸苷(BX T221A..成分5 B 0β05 B 0β0 03號膽鹽 1.g5-溴-4-氯-3-吲哚--D-葡萄糖醛酸苷(CIG) 75.mg瓊脂 8.g~18.g蒸餾水 1000mL22A.. 制法22 /5 52 2在2.mL95%的乙醇中加入0.mL1molL的氫氧化鈉溶液,然后加入BCIG的環(huán)己胺 /5 52 2鹽并混