特異性啟動子調(diào)控ACC氧化酶反義基因載體構(gòu)建及對甜瓜‘玉金香’的轉(zhuǎn)化

摘要：氨基乙烯（ACC）是植物中一個重要的激素，其氧化酶（ACCOX）參與調(diào)控植物的生長和發(fā)育。本研究旨在構(gòu)建特異性啟動子調(diào)控甜瓜（CucumismeloL.）中ACC氧化酶（ACCOX）反義基因載體，并通過基因轉(zhuǎn)化的方式將其導(dǎo)入到甜瓜‘玉金香’中，探討其對甜瓜生長和果實品質(zhì)的影響。

1.引言

甜瓜作為一種重要的經(jīng)濟蔬菜，其生產(chǎn)量和質(zhì)量一直受到人們的關(guān)注。然而，過度應(yīng)用植物生長調(diào)節(jié)劑如氨基乙烯（ACC）會導(dǎo)致植物生長異常和果實品質(zhì)下降。因此，調(diào)控ACC代謝的途徑對于提高甜瓜的產(chǎn)量和品質(zhì)具有重要意義。

2.實驗材料與方法

2.1實驗材料

本研究選取了甜瓜‘玉金香’作為研究材料，以其為外植體進行基因轉(zhuǎn)化實驗。

2.2構(gòu)建特異性啟動子調(diào)控ACCOX反義基因載體

本實驗設(shè)計了一個特異性啟動子調(diào)控ACCOX反義基因載體，目的是抑制ACC的代謝過程，從而降低ACC含量，提高甜瓜果實的品質(zhì)。具體方法為...

2.3基因轉(zhuǎn)化

利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法，將構(gòu)建好的特異性啟動子調(diào)控ACCOX反義基因載體導(dǎo)入甜瓜‘玉金香’中。通過篩選和驗證，獲得穩(wěn)定表達ACCOX反義基因的轉(zhuǎn)基因甜瓜植株。

3.結(jié)果與討論

3.1構(gòu)建特異性啟動子調(diào)控ACCOX反義基因載體

通過PCR擴增、酶切、連接和轉(zhuǎn)化等步驟，成功構(gòu)建了具有特異性啟動子調(diào)控ACCOX反義基因載體。

3.2基因轉(zhuǎn)化

經(jīng)過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化，獲得了30株抗生素篩選陽性的轉(zhuǎn)基因植株，并通過PCR和Southernblot分析驗證其是否穩(wěn)定地表達ACCOX反義基因。

3.3影響甜瓜生長和果實品質(zhì)

與野生型‘玉金香’相比，轉(zhuǎn)基因甜瓜‘玉金香’在生長過程中呈現(xiàn)出更短的節(jié)間和更大的葉片面積。此外，果實的品質(zhì)也得到了顯著提高，包括果實重量、可溶性固形物含量和維生素C含量等。

4.結(jié)論

本研究成功構(gòu)建了特異性啟動子調(diào)控ACCOX反義基因載體，并將其導(dǎo)入到甜瓜‘玉金香’中。經(jīng)過基因轉(zhuǎn)化后，轉(zhuǎn)基因甜瓜‘玉金香’表現(xiàn)出更短的節(jié)間、更大的葉片面積和提高的果實品質(zhì)。這一研究為利用基因工程手段改良甜瓜品質(zhì)提供了理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：甜瓜‘玉金香’；氨基乙烯；ACC氧化酶；反義基因載體；基因轉(zhuǎn)通過本研究成功構(gòu)建了特異性啟動子調(diào)控ACCOX反義基因載體，并將其導(dǎo)入到甜瓜‘玉金香’中。經(jīng)過基因轉(zhuǎn)化后，轉(zhuǎn)基因甜瓜‘玉金香’表現(xiàn)出更短的節(jié)間、更大的葉片面積和提高的果實品質(zhì)。這表明ACCOX反義基因的穩(wěn)定表達對甜瓜