第0章緒論、名詞解釋2.單克隆抗體二、填空1．分子生物學(xué)的研究內(nèi)容主要包含（ ）、（ ）、（ ）三部分。三、是非題1、20世紀(jì)60年代，Nirenberg建立了大腸桿菌無細(xì)胞蛋白合成體系。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)poly（U）指導(dǎo)了多聚苯丙氨酸的合成，poly（G）指導(dǎo)甘氨酸的合成。（X）四、簡答題分子生物學(xué)的概念是什么？你對現(xiàn)代分子生物學(xué)的含義和包括的研究范圍是怎么理解的？分子生物學(xué)研究內(nèi)容有哪些方面？分子生物學(xué)發(fā)展前景如何？人類基因組計(jì)劃完成的社會(huì)意義和科學(xué)意義是什么？6．簡述分子生物學(xué)發(fā)展史中的三大理論發(fā)現(xiàn)和三大技術(shù)發(fā)明。簡述分子生物學(xué)的發(fā)展歷程。二十一世紀(jì)生物學(xué)的新熱點(diǎn)及領(lǐng)域是什么？21世紀(jì)是生命科學(xué)的世紀(jì)。20世紀(jì)后葉分子生物學(xué)的突破性成就，使生命科學(xué)在自然科學(xué)中的位置起了革命性的變化。試闡述分子生物學(xué)研究領(lǐng)域的三大基本原則，三大支撐學(xué)科和研究的三大主要領(lǐng)域？答案：一、名詞解釋.分子生物學(xué)：分子生物學(xué)就是研究生物大分子之間相互關(guān)系和作用的一門學(xué)科，而生物大分子主要是指基因和蛋白質(zhì)兩大類；分子生物學(xué)以遺傳學(xué)、生物化學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等學(xué)科為基礎(chǔ)，從分子水平上對生物體的多種生命現(xiàn)象進(jìn)行研究。.單克隆抗體：只針對單一抗原決定簇起作用的抗體。二、填空1,結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)，基因表達(dá)與調(diào)控，DNA重組技術(shù)三、是非題四、簡答題分子生物學(xué)的概念是什么？答案：有人把它定義得很廣：從分子的形式來研究生物現(xiàn)象的學(xué)科。但是這個(gè)定義使分子生物學(xué)難以和生物化學(xué)區(qū)分開來。另一個(gè)定義要嚴(yán)格一些，因此更加有用：從分子水平來研究基因結(jié)構(gòu)和功能。從分子角度來解釋基因的結(jié)構(gòu)和活性是本書的主要內(nèi)容。你對現(xiàn)代分子生物學(xué)的含義和包括的研究范圍是怎么理解的？分子生物學(xué)是從分子水平研究生命本質(zhì)的一門新興邊緣學(xué)科，它以核酸和蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)及其在遺傳信息和細(xì)胞信息傳遞中的作用為研究對象，是當(dāng)前生命科學(xué)中發(fā)展最快并正在與其它學(xué)科廣泛交叉與滲透的重要前沿領(lǐng)域。狹義：偏重于核酸的分子生物學(xué)，主要研究基因或DNA的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、表達(dá)和調(diào)節(jié)控制等過程，其中也涉及與這些過程有關(guān)的蛋白質(zhì)和酶的結(jié)構(gòu)與功能的研究。分子生物學(xué)的發(fā)展為人類認(rèn)識生命現(xiàn)象帶來了前所未有的機(jī)會(huì)，也為人類利用和改造生物創(chuàng)造了極為廣闊的前景。所謂在分子水平上研究生命的本質(zhì)主要是指對遺傳、生殖、生長和發(fā)育等生命基本特征的分子機(jī)理的闡明，從而為利用和改造生物奠定理論基礎(chǔ)和提供新的手段。這里的分子水平指的是那些攜帶遺傳信息的核酸和在遺傳信息傳遞及細(xì)胞內(nèi)、細(xì)胞間通訊過程中發(fā)揮著重要作用的蛋白質(zhì)等生物大分子。這些生物大分子均具有較大的分子量，由簡單的小分子核苷酸或氨基酸排列組合以蘊(yùn)藏各種信息，并且具有復(fù)雜的空間結(jié)構(gòu)以形成精確的相互作用系統(tǒng)，由此構(gòu)成生物的多樣化和生物個(gè)體精確的生長發(fā)育和代謝調(diào)節(jié)控制系統(tǒng)。闡明這些復(fù)雜的結(jié)構(gòu)及結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系是分子生物學(xué)的主要任務(wù)。分子生物學(xué)主要包含以下三部分研究內(nèi)容：A.核酸的分子生物學(xué)，核酸的分子生物學(xué)研究核酸的結(jié)構(gòu)及其功能。由于核酸的主要作用是攜帶和傳遞遺傳信息，因此分子遺傳學(xué)(moleculargenetics)是其主要組成部分。由于50年代以來的迅速發(fā)展，該領(lǐng)域已形成了比較完整的理論體系和研究技術(shù)，是目前分子生物學(xué)內(nèi)容最豐富的一個(gè)領(lǐng)域。研究內(nèi)容包括核酸/基因組的結(jié)構(gòu)、遺傳信息的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與翻譯，核酸存儲的信息修復(fù)與突變，基因表達(dá)調(diào)控和基因工程技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用等。遺傳信息傳遞的中心法則(centraldogma)是其理論體系的核心。B.蛋白質(zhì)的分子生物學(xué)蛋白質(zhì)的分子生物學(xué)研究執(zhí)行各種生命功能的主要大分子一蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能。盡管人類對蛋白質(zhì)的研究比對核酸研究的歷史要長得多，但由于其研究難度較大，與核酸分子生物學(xué)相比發(fā)展較慢。近年來雖然在認(rèn)識蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)及其與功能關(guān)系方面取得了一些進(jìn)展，但是對其基本規(guī)律的認(rèn)識尚缺乏突破性的進(jìn)展。分子生物學(xué)發(fā)展前景如何？21世紀(jì)是生命科學(xué)世紀(jì)，生物經(jīng)濟(jì)時(shí)代，分子生物學(xué)將取得突飛猛進(jìn)的發(fā)展，結(jié)構(gòu)基因組學(xué)、功能基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、生物信息學(xué)、信號跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)成為新的熱門領(lǐng)域，將在農(nóng)業(yè)、工業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域帶來新的變革。社會(huì)意義：人類基因組計(jì)劃與曼哈頓原子計(jì)劃、阿波羅登月計(jì)劃并稱為人類科學(xué)史上的三大工程，具有重大科學(xué)意義、經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。.極大地促進(jìn)生命科學(xué)領(lǐng)域一系列基礎(chǔ)研究的發(fā)展，闡明基因的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系、生命的起源和進(jìn)化、細(xì)胞發(fā)育、生產(chǎn)、分化的分子機(jī)理，疾病發(fā)生的機(jī)理等，為人類自身疾病的診斷和治療提供依據(jù)，為醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)帶來翻天覆地的變化；.促進(jìn)生命科學(xué)與信息科學(xué)、材料科學(xué)和與高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)相結(jié)合，刺激相關(guān)學(xué)科與技術(shù)領(lǐng)域的發(fā)展，帶動(dòng)起一批新興的高技術(shù)產(chǎn)業(yè)；.基因組研究中發(fā)展起來的技術(shù)、數(shù)據(jù)庫及生物學(xué)資源，還將推動(dòng)對農(nóng)業(yè)、畜牧業(yè)(轉(zhuǎn)基因動(dòng)、植物)、能源、環(huán)境等相關(guān)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，改變?nèi)祟惿鐣?huì)生產(chǎn)、生活和環(huán)境的面貌，把人類帶入更佳的生存狀態(tài)?？茖W(xué)意義：.確定人類基因組中約5萬個(gè)編碼基因的序列基因在基因組中的物理位置，研究基因的產(chǎn)物及其功能.了解轉(zhuǎn)錄和剪接調(diào)控元件的結(jié)構(gòu)和位置，從整個(gè)基因組結(jié)構(gòu)的宏觀水平上了解基因轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié).從總體上了解染色體結(jié)構(gòu)，了解各種不同序列在形成染色體結(jié)構(gòu)、DNA復(fù)制、基因轉(zhuǎn)錄及表達(dá)調(diào)控中的影響與作用.研究空間結(jié)構(gòu)對基因調(diào)節(jié)的作用.發(fā)現(xiàn)與DNA復(fù)制、重組等有關(guān)的序列.研究DNA突變、重排和染色體斷裂等，了解疾病的分子機(jī)制，為疾病的診斷、預(yù)防和治療提供理論依據(jù).確定人類基因組中轉(zhuǎn)座子，逆轉(zhuǎn)座子和病毒殘余序列，研究其周圍序列的性質(zhì).研究染色體和個(gè)體之間的多態(tài)性6．三大理論發(fā)現(xiàn)DNA是遺傳物質(zhì)DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中心法則三大技術(shù)發(fā)明限制性內(nèi)切酶載體逆轉(zhuǎn)錄酶簡述分子生物學(xué)的發(fā)展歷程。答案：從1847年施旺和施萊登提出細(xì)胞學(xué)說——證明動(dòng)植物是由細(xì)胞組成的，到今天人們對生物大分子——細(xì)胞的化學(xué)組成確有了深刻地認(rèn)識。孟德爾的遺傳規(guī)律最先使人們對性狀遺傳產(chǎn)生了理性認(rèn)識，而Morgan的基因?qū)W說則進(jìn)一步將“性狀”與“基因”相偶聯(lián)，成為現(xiàn)代遺傳學(xué)的奠基石。隨著核酸化學(xué)研究的進(jìn)展，Watson和Crick又提出了脫氧核糖核酸的雙螺旋模型，為充分揭示遺傳信息的傳遞規(guī)律鋪平了道路。在蛋白質(zhì)化學(xué)方面，繼Sumner在1936年證實(shí)酶是蛋白質(zhì)之后，Sanger利用紙電泳及層析技術(shù)于1953年首次闡明胰島素的一級結(jié)構(gòu)，開創(chuàng)了蛋白質(zhì)序列分析的先河。而Kendrew和Perutz利用X射線衍射技術(shù)解析了肌紅蛋白及血紅蛋白的三維結(jié)構(gòu)，論證了這些蛋白質(zhì)在輸送分子氧過程中的特殊作用，成為研究生物大分子空間立體構(gòu)型的先驅(qū)。20世紀(jì)40年代被認(rèn)為是分子生物學(xué)的孕育時(shí)期。1941年，曾在摩爾根實(shí)驗(yàn)室工作過的美國遺傳學(xué)家比德爾同美國生物化學(xué)家塔特姆合作，把生物化學(xué)引進(jìn)了遺傳學(xué)，推導(dǎo)出“一個(gè)基因一種酶”的新概念（后來有所修改），40年代中期被普遍承認(rèn)，從而建立了生物化學(xué)、遺傳學(xué)。有兩項(xiàng)研究成果促進(jìn)了分子生物學(xué)的發(fā)展。一項(xiàng)是由德國移居美國的物理學(xué)家M.德爾布呂克和其同事們在1946年發(fā)現(xiàn)不同種的噬菌體在一定條件下能進(jìn)行基因交換重組。另一項(xiàng)是，1946?1947年，美國微生物學(xué)家J.萊德伯格同E.L.塔特姆合作，以大腸桿菌為材料，也發(fā)現(xiàn)了基因分離和重組現(xiàn)象。這兩項(xiàng)突破以及他們對噬菌體和大腸桿菌的一些基本研究，對分子生物學(xué)的發(fā)展起了十分重要的作用。1944年，美國細(xì)菌學(xué)家O.T.埃弗里發(fā)現(xiàn)DNA是不同種的肺炎雙球菌之間的轉(zhuǎn)化因子。第一次證明DNA攜帶著遺傳信息。這一十分重要的成果卻引起很大爭論，一方面受傳統(tǒng)思想的影響，很多人懷疑他所分離出的DNA不純，可能還是混雜的蛋白質(zhì)在起作用；但是這一成就無疑地也刺激了人們對DNA化學(xué)組成和晶體結(jié)構(gòu)的研究。1953年4月25日——DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的分子模型。這一成就后來被譽(yù)為20世紀(jì)以來生物學(xué)方面最偉大的發(fā)現(xiàn)，也被認(rèn)為是分子生物學(xué)誕生的標(biāo)志?！皒174噬菌體DNA的全部約5400個(gè)堿基的順序，促進(jìn)了基因調(diào)節(jié)控制的研究。至于蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)分析，則建立在英國的布口刺格父子及他們的學(xué)生創(chuàng)立并發(fā)展的X射線晶體衍射技術(shù)的基礎(chǔ)上。該實(shí)驗(yàn)室的M.F.佩魯茨自30年代末開始，就系統(tǒng)地研究了血紅蛋白的結(jié)構(gòu)。1969年完成了全部64種密碼的破譯。至此，基因控制蛋白質(zhì)合成之謎得到了初步解答。遺傳密碼的破譯，被認(rèn)為是分子遺傳學(xué)發(fā)展史上最輝煌的成果之一。1961年法國細(xì)胞遺傳學(xué)家F.雅各布和J.莫諾德共同合作，提出了乳糖操縱子理論，以后被證實(shí)為在原核細(xì)胞中基因控制的普遍方式。美國分子生物學(xué)家H.M.特明和D.巴爾的摩長期從事腫瘤病毒研究的基礎(chǔ)上，于1970年分別獨(dú)立地發(fā)現(xiàn)雞肉瘤病毒和白血病病毒都是RNA病毒。在此基礎(chǔ)上他們發(fā)現(xiàn)了依賴于RNA的DNA聚合酶即反轉(zhuǎn)錄酶。反轉(zhuǎn)錄酶能使RNA鏈上的遺傳密碼反轉(zhuǎn)錄給DNA。這一發(fā)現(xiàn)不僅對某些腫瘤的病因作了分子生物學(xué)的闡明，而且動(dòng)搖了中心法則的不可逆性，成為中心法則的重要補(bǔ)充。真核細(xì)胞內(nèi)的調(diào)控機(jī)制要復(fù)雜得多，也是當(dāng)前生物學(xué)家重點(diǎn)探索的問題之一。在此基礎(chǔ)之上，分子生物學(xué)發(fā)展的速度越來越快。二十一世紀(jì)生物學(xué)的新熱點(diǎn)及領(lǐng)域是什么？答案：結(jié)構(gòu)生物學(xué)是當(dāng)前分子生物學(xué)中的一個(gè)重要前沿學(xué)科，它是在分子層次上從結(jié)構(gòu)角度特別是從三維結(jié)構(gòu)的角度來研究和闡明當(dāng)前生物學(xué)中各個(gè)前沿領(lǐng)域的重要學(xué)科問題，是一個(gè)包括生物學(xué)、物理學(xué)、化學(xué)和計(jì)算數(shù)學(xué)等多學(xué)科交叉的，以結(jié)構(gòu)（特別是三維結(jié)構(gòu)）測定為手段，以結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系研究為內(nèi)容，以闡明生物學(xué)功能機(jī)制為目的的前沿學(xué)科。這門學(xué)科的核心內(nèi)容是蛋白質(zhì)及其復(fù)合物、組裝體和由此形成的細(xì)胞各類組分的三維結(jié)構(gòu)、運(yùn)動(dòng)和相互作用，以及它們與正常生物學(xué)功能和異常病理現(xiàn)象的關(guān)系。分子發(fā)育生物學(xué)也是當(dāng)前分子生物學(xué)中的一個(gè)重要前沿學(xué)科。人類基因組計(jì)劃，被稱為“21世紀(jì)生命科學(xué)的敲門磚”?！叭祟惢蚪M計(jì)劃”以及“后基因組計(jì)劃”的全面展開將進(jìn)入從分子水平闡明生命活動(dòng)本質(zhì)的輝煌時(shí)代。目前正迅速發(fā)展的生物信息學(xué)，被稱為“21世紀(jì)生命科學(xué)迅速發(fā)展的推動(dòng)力”。尤應(yīng)指出，建立在生物信息基礎(chǔ)上的生物工程制藥產(chǎn)業(yè)，在21世紀(jì)將逐步成為最為重要的新興產(chǎn)業(yè)；從單基因病和多基因病研究現(xiàn)狀可以看出，這兩種疾病的診斷和治療在21世紀(jì)將取得不同程度的重大進(jìn)展；遺傳信息的進(jìn)化將成為分子生物學(xué)的中心內(nèi)容”的觀點(diǎn)認(rèn)為，隨著人類基因組和許多模式生物基因組序列的測定，通過比較研究，人類將在基因組上讀到生物進(jìn)化的歷史，使人類對生物進(jìn)化的認(rèn)識從表面深入到本質(zhì)；研究發(fā)育生物學(xué)的時(shí)機(jī)已經(jīng)成熟。在21世紀(jì)，遺傳信息的進(jìn)化研究成果，將成為解決發(fā)育問題的基礎(chǔ)，發(fā)育問題這一難題可望獲得突破性進(jìn)展；在21世紀(jì)，生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)化的趨勢將不斷加劇。基因工程技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)和基因治療技術(shù)等將對21世紀(jì)的產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。當(dāng)前，生命科學(xué)基礎(chǔ)研究中最活躍的前沿主要包括：分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、生態(tài)學(xué)，并由這些活躍的前沿引伸出諸如：基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、人類基因組計(jì)劃、后人類基因組計(jì)劃、克隆羊、克隆魚、“腦的十年”、生

逐漸十髦的名詞和熱門話題。相應(yīng)的應(yīng)用研究或技術(shù)研究也正趨成熟并生物工程，即基因工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程、酶工程、細(xì)胞工逐漸t紀(jì)全球關(guān)注的領(lǐng)域。程:、胚胎工程等。由于生命科學(xué)與人類生存、人們健康、社會(huì)發(fā)展密切相關(guān)，必t紀(jì)全球關(guān)注的領(lǐng)域。21世紀(jì)是生命科學(xué)的世紀(jì)。20世紀(jì)后葉分子生物學(xué)的突破性成就，使生命科學(xué)在自然科學(xué)中的位置起了革命性的變化。試闡述分子生物學(xué)研究領(lǐng)域的三大基本原則，三大支撐學(xué)科和研究的三大主要領(lǐng)域？答案：（1）研究領(lǐng)域的三大基本原則：構(gòu)成生物大分子的單體是相同的；生物遺傳信息表達(dá)的中心法則相同；生物大分子單體的排列（核苷酸，氨基酸）導(dǎo)致了生物的特異性。（2）三大支撐學(xué)科：細(xì)胞學(xué)，遺傳學(xué)和生物化學(xué)。（3）研究的三大主要領(lǐng)域：主要研究生物大分子結(jié)構(gòu)與功能的相互關(guān)系，其中包括DNA和蛋白質(zhì)之間的相互作用；激素和受體之間的相互作用；酶和底物之間的相互作用。分子生物學(xué)習(xí)題集（2012版）TOC\o"1-5"\h\z\o"CurrentDocument"習(xí)題一 基因、基因組、基因組學(xué)和基因的化學(xué)本質(zhì) 9\o"CurrentDocument"習(xí)題二DNA的復(fù)制、重組、損傷、修復(fù)以及突變 14\o"CurrentDocument"習(xí)題三DNA轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄及其轉(zhuǎn)錄后加工 19\o"CurrentDocument"習(xí)題四 翻譯及其后加工 24\o"CurrentDocument"習(xí)題五 基因表達(dá)的調(diào)控 29\o"CurrentDocument"習(xí)題六 基因工程以及其他現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù) 34習(xí)題一基因、基因組、基因組學(xué)和基因的化學(xué)本質(zhì)一、名詞解釋（每題3分，共15分）1、SNP2、satelliteDNA3、annealing4、RFLP5、physicalmap二、填空題（每空1分，共15分）1、Tm是指DNA熱變性時(shí)候的熔點(diǎn)，雙鏈DNA中若 含量多，則其Tm值高。2、DNA分子中存在三類核苷酸序列，高度重復(fù)序列、中度重復(fù)序列和單拷貝序列。tRNA、rRNA以及組蛋白等由 編碼，而大多數(shù)蛋白質(zhì)由 編碼。3、硝酸纖維素膜可結(jié)合單鏈核酸。將RNA變性后轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上再進(jìn)行雜交，稱為 印跡法；將DNA變性后轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上再進(jìn)行雜交，稱為 印跡法。4、蛋白質(zhì)組是指 。5、維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要因素是它由范德華力和疏水作用構(gòu)成。6、現(xiàn)在普遍使用的測定DNA一級結(jié)構(gòu)的方法是Sanger提出的 法。7、真核生物構(gòu)成染色質(zhì)的蛋白質(zhì)有 和 兩類。染色質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)為 ，二級結(jié)構(gòu)是 纖維。8、DNA在酸性溶液中會(huì)發(fā)生，所以DNA應(yīng)該存放在堿性溶液中；RNA在堿性溶液中發(fā)生，所以RNA應(yīng)該存放在酸性溶液中。9、如果一種DNA溶液的A260A280<1.6,那么這種DNA樣品嚴(yán)重受到的污染。三、判斷題（每題1分，共10分）1、原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的差別之一是前者無染色體結(jié)構(gòu)，后者有染色體結(jié)構(gòu)。（）2、基因組是指某一種生物所具有的全部基因的總稱。（）3、真核生物基因的大小通常是外顯子的數(shù)目和長度決定的。（）TOC\o"1-5"\h\z4、在所有的真核生物中，內(nèi)含子的長度和序列是高度保守的。（ ）5、酵母的基因普遍要比人的基因小，因此，酵母基因組編碼的蛋白質(zhì)普遍要比人基因組編碼的蛋白質(zhì)要小。（）6、在自由的四種核苷酸混合溶液中，任何堿基之間都可以形成氫鍵而發(fā)生配對。（ ）7、大幅度增加或減少溶液的pH都會(huì)導(dǎo)致一種雙鏈DNA的Tm下降。（ ）8、富含GC的DNA雙螺旋比富含AT的DNA雙螺旋穩(wěn)定的主要原因是GC堿基對比AT堿基對多一個(gè)氫鍵。（）9、超螺旋DNA的能量狀態(tài)總是高于相同序列的松弛型DNA。（ ）10、用氯化銫梯度超離心純化質(zhì)粒DNA時(shí)，蛋白質(zhì)在離心管的最上部，RNA懸浮在中間，而DNA沉在底部。（ ）四、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1、有關(guān)蛋白質(zhì)組不正確的敘述是（ ）A、翻譯后加工可導(dǎo)致同一個(gè)翻譯產(chǎn)物形成幾種不同的蛋白質(zhì)B、蛋白質(zhì)之間的相互作用可形成組織特異性蛋白質(zhì)復(fù)合物C、環(huán)境因素對一個(gè)細(xì)胞的蛋白質(zhì)組無影響D、一個(gè)病態(tài)細(xì)胞的蛋白質(zhì)組可能與一個(gè)健康細(xì)胞的蛋白質(zhì)組有所不同2、DNA在細(xì)胞核內(nèi)被包裝成30nm的染色質(zhì)纖維。在試管里加入某種物質(zhì)可以人為破壞TOC\o"1-5"\h\z這種結(jié)構(gòu)（包括10nm染色質(zhì)纖維），你認(rèn)為這種物質(zhì)是（ ）A、NaCl B、輔酶 C、核糖核酸酶 D、ATP3、序列特異性DNA結(jié)合蛋白與DNA結(jié)合的主要作用力是（ ）A、離子鍵 B、氫鍵 C、疏水作用 D、范德華力4、基因組中含有的轉(zhuǎn)座子最多的生物是（）A、細(xì)菌 B、噬菌體 C、酵母 D、玉米5、導(dǎo)致DNA雙螺旋具有大溝和小溝的原因是（ ）A、AT堿基對與GC堿基對的外形不同B、嘌呤堿基大，形成大溝，而嘧啶堿基小，形成小溝C、DNA結(jié)合蛋白將DNA扭曲成特定的形狀D、兩條鏈上的磷酸核糖骨架不是完全相對稱的TOC\o"1-5"\h\z6、噬菌體基因組DNA上的堿基發(fā)生糖基化和甲基化修飾的主要功能是（ ）A、促進(jìn)基因組DNA整合到宿主基因組上 8、保護(hù)病毒DNA受到限制性酶的水解C、有利于核酸正確的排列 D、穩(wěn)定DNA，防止突變7、雙螺旋DNA具有的典型特征包括（ ）4沿著一條鏈?zhǔn)谴鬁?，另外一條鏈?zhǔn)切?B、堿基對的排列與螺旋軸平行C、嘌呤堿基和嘧啶堿基的數(shù)目相同 D、螺旋的方向總是右手8、在許多不同物種中，具有高度保守的序列一般是（ ）A、假基因 B、特定的間隔序列C、不重要的蛋白質(zhì)的基因 D、非常重要的蛋白質(zhì)的基因9、以下有關(guān)染色質(zhì)的敘述不正確的是（ ）A、原核生物無染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，真核生物才有染色質(zhì)結(jié)構(gòu)8、染色質(zhì)由DNA、RNA、組蛋白和非組蛋白構(gòu)成0、染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位是核小體D、組蛋白是一種序列特異性DNA結(jié)合蛋白10、關(guān)于一種真核生物的基因組的最佳定義是（ ）A、這種生物所有的編碼蛋白質(zhì)的基因B、這種生物細(xì)胞核所有的DNAC、這種生物所有的遺傳物質(zhì)D、這種生物的單倍體細(xì)胞所具有的所有染色體五、問答題（每題10分，共40分）1、如果有人在大腸桿菌細(xì)胞里發(fā)現(xiàn)一種新的蛋白質(zhì)，它既含有跨膜的結(jié)構(gòu)域，又含有與DNA結(jié)合的結(jié)構(gòu)域，下面顯示的是這種蛋白質(zhì)的部分氨基酸序列：...Ala-Leu-Phe-Ala-Gly-Ile-Val-Glu-Asn-Ser-Thr-Ala-Asp-Trp-His-Arg-Lys-His-Arg...（1）你認(rèn)為哪一段氨基酸序列最有可能發(fā)現(xiàn)在跨膜的結(jié)構(gòu)域？為什么？（2）如果進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)證明這種蛋白質(zhì)并不是一種跨膜蛋白，而是位于細(xì)胞質(zhì)。那么，你認(rèn)為（1）中所指的氨基酸序列位于蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)的什么部分？（3）指出這種蛋白質(zhì)分子中最有可能與DNA結(jié)合、發(fā)生相互作用的氨基酸序列？為什么？（4）你認(rèn)為這些氨基酸更可能與堿基還是磷酸核糖骨架相互作用？（5）何種次級鍵是蛋白質(zhì)與DNA之間作用最強(qiáng)的化學(xué)鍵？2、大腸桿菌DNA的GC含量是0.532（摩爾分?jǐn)?shù)為（1）計(jì)算大腸桿菌DNA在0.05mol/LNaCl溶液中的Tm(2)你認(rèn)為DNA退火溫度是大于、等于還是小于Tm?為什么？(3)嗜熱菌能夠生存在高達(dá)100℃的環(huán)境，你認(rèn)為這一類細(xì)菌可以使用哪些手段維持其DNA在高溫下仍然處于雙螺旋狀態(tài)。(4)某些生物喜歡生活在熱水之中！例如，某些細(xì)菌適宜生活在近乎沸騰的熱泉中，如果將它們放在正常的溫度下(37℃左右)，反而不利于它們的生存。為什么37℃對于適宜生活在95℃下的生物體內(nèi)的蛋白質(zhì)的功能是有害的？3、(1)有人在純化質(zhì)粒DNA的時(shí)候，由于某種原因?qū)⒉糠旨兓腄NA在室溫下放在水里面近一個(gè)月的時(shí)間。等他想到這件事的時(shí)候，他可以接著繼續(xù)純化還是需要從頭來重新純化？為什么？如果他純化的是RNA，又該如何處理？(2)冰凍的乙醇經(jīng)常被用來沉淀DNA。乙醇溫度的重要性何在？它對短的DNA還是長的DNA更加重要？為什么？4、(1)“生命需要的必需基因的最低數(shù)目究竟有多少”一直是科學(xué)家感興趣的問題。迄今為止，最小的生物的基因組來自寄生的支原體，其大小為5x105bp。試估計(jì)這種生物最多需要多少個(gè)編碼蛋白質(zhì)的基因。這些蛋白質(zhì)基因的功能會(huì)是什么？如何能夠更精確的確定所需要的必需基因的數(shù)目？(2)全基因組序列分析已經(jīng)導(dǎo)致像大腸桿菌這樣的細(xì)菌幾乎所有的蛋白質(zhì)基因得以確定。然而，如果要用類似的方法想毫不含糊的確定大多數(shù)真核生物基因組編碼蛋白質(zhì)的基因，則非常困難。給出一個(gè)原因解釋以上現(xiàn)象。習(xí)題二DNA的復(fù)制、重組、損傷、修復(fù)以及突變一、名詞解釋（每題3分，共15分）1、Okazakifragment2、semiconservativereplication3、NER4、nonsensemutation5、suppressormutation二、填空題（每空1分，共15分）1、體內(nèi)DNA復(fù)制一般以為引物，復(fù)制的方向總是，催化引物合成的酶稱為。而體外復(fù)制DNA通常用人工合成的為引物。2、DNA甲基化修飾的甲基供體是。原核細(xì)胞DNA上被修飾的堿基一般是—，真核細(xì)胞的DNA被修飾的堿基通常位于內(nèi)的__。3、大腸桿菌染色體DNA復(fù)制的起始區(qū)稱為，酵母染色體DNA復(fù)制的起始區(qū)稱為 ，兩者均富含 堿基對。4、大腸桿菌DNA連接酶使用 作為能源，病毒和真核細(xì)胞的DNA鏈接酶則使用 作為能源。用于基因工程的DNA連接酶一般來自。5、參與大腸桿菌染色體DNA復(fù)制的主要聚合酶是該酶在復(fù)制體上組裝成不對稱的二聚體，分別負(fù)責(zé)前導(dǎo)鏈和后隨鏈的合成。三、判斷題（每題1分，共10分）TOC\o"1-5"\h\z1、岡崎片段只由DNA組成。（ ）2、端粒酶帶有自己的DNA模板。（ ）3、細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制既需要DNA聚合酶，也需要RNA聚合酶。（ ）4、同源重組和位點(diǎn)特異性重組都形成Holliday中間體結(jié)構(gòu)。（ ）5、如果HIV是一種DNA病毒，那么治療的難度將大大降低。（ ）6、轉(zhuǎn)座重組既可以導(dǎo)致基因的失活，也可以導(dǎo)致基因的激活。（）7、癌癥一般發(fā)生在人年邁的時(shí)候，其主要原因是隨著年紀(jì)的增大，人體內(nèi)的抑癌基因逐步失活。（）8、在一個(gè)基因的編碼區(qū)內(nèi)發(fā)生的核苷酸的插入或缺失總是導(dǎo)致移碼突變。（）9、一個(gè)正在進(jìn)行雙向復(fù)制的真核細(xì)胞的DNA分子，當(dāng)兩個(gè)相鄰的復(fù)制叉相遇的時(shí)候，一個(gè)復(fù)制叉的前導(dǎo)鏈總是跟另外一個(gè)復(fù)制叉的后隨鏈相遇。（）10、DNA損傷的修復(fù)機(jī)制完全依賴于每一個(gè)DNA具有兩個(gè)拷貝，每一個(gè)拷貝分別屬于同源染色體中的一個(gè)。（）四、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）TOC\o"1-5"\h\z1、原核生物DNA復(fù)制不需要（ ）A、DNA聚合酶工 B、DNA解鏈酶C、DNA連接酶 D、端粒酶2、大腸桿菌染色體DNA復(fù)制所需要的DNA聚合酶有（ ）A、DNA聚合酶工 B、DNA聚合酶口C、DNA聚合酶m D、DNA聚合酶工和印3、DNA連接酶需要被連接的兩個(gè)DNA片段分別具有（ ）A、3'-OH和5'-P B、5'-OH和3'-PC、3'-OH和5'-OH D、5'-P和3'-P4、端粒酶是一種（）4依賴于DNA的DNA聚合酶 8、依賴于DNA的RNA聚合酶0、依賴于RNA的DNA聚合酶 口、依賴于RNA的RNA聚合酶5、假定一個(gè)轉(zhuǎn)座子插入到某一個(gè)基因的可讀框內(nèi)，并產(chǎn)生11bp的靶點(diǎn)重復(fù)，當(dāng)轉(zhuǎn)座子離開以后，留下重復(fù)序列，那么，這最終將導(dǎo)致（）A、轉(zhuǎn)換 B、顛換 C、移碼突變 D、易位6、將兩段寡脫氧核苷酸片段5'-ACCACGTAACGGA-3'和5'-GTTAC-3'與DNA聚合酶一起加到含有dATP、dGTP、dCTP和dTTP的反應(yīng)混合物之中，預(yù)測反應(yīng)的終產(chǎn)物被參入的各堿基的比例是（）A、2C：1T B、1G：1TC、3G：2TD、3G：3T：2C7、如果一個(gè)具有放射性的DNA分子在沒有放射性標(biāo)記的dNTP溶液里進(jìn)行兩輪復(fù)制，那TOC\o"1-5"\h\z么得到的四個(gè)子代DNA分子的放射性分布是（ ）A、兩股各有一半帶有放射性 B、所有都含有放射性C、兩個(gè)沒有放射性 D、有一個(gè)DNA分子的兩條鏈具有放射性8、細(xì)胞內(nèi)的突變主要發(fā)生在（ ）A、DNA復(fù)制 B、DNA修復(fù) C、轉(zhuǎn)錄D、翻譯9、堿基類似物導(dǎo)致DNA發(fā)生突變的主要原因是（ ）4插入到堿基之間，使DNA發(fā)生斷裂 8、使C變成TC、能夠與不同的堿基配對 D、促進(jìn)DNA的脫嘌呤10、人類基因組比大腸桿菌基因組大700倍左右，然而，人類基因組復(fù)制的時(shí)間僅比大腸桿菌基因組復(fù)制長6~8倍。這是因?yàn)椋?）A、組蛋白的存在提高了人染色體DNA的復(fù)制速率B、人類基因組的GC含量低，兩條鏈更容易解鏈C、人基因組的許多序列在復(fù)制中直接跳過去，因?yàn)橹挥?%~5%的序列編碼蛋白質(zhì)D、人染色體DNA上具有多個(gè)復(fù)制起始區(qū)，大腸桿菌只有一個(gè)1、（1）在使用雙脫氧法測定DNA一級結(jié)構(gòu)的時(shí)候，如果在反應(yīng)系統(tǒng)中添加SSB，可以提高DNA的得率為什么？現(xiàn)在測序使用的酶一般都是耐熱的DNA聚合酶使用這樣的DNA聚合酶有什么好處？（2）大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)的SSB的主要功能是什么？你如何確定它是不是DNA復(fù)制的一種必需成分？2、（1）有人將狗體內(nèi)的己糖激酶與狼體內(nèi)的己糖激酶的氨基酸序列進(jìn)行了比對，結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩者完全相同?；诖?，你能否認(rèn)為這兩種生物體內(nèi)的己糖激酶基因從來沒有突變過嗎？為什么？（2）有人從使用羥胺誘發(fā)的突變中篩選到一種拷貝數(shù)極高的質(zhì)粒，其在大腸桿菌內(nèi)的拷貝數(shù)遠(yuǎn)高于野生型的質(zhì)粒，究其原因是DNA復(fù)制頻率提高了。經(jīng)過序列分析發(fā)現(xiàn)，突變體的質(zhì)粒在復(fù)制起始區(qū)周圍的一個(gè)啟動(dòng)子序列發(fā)生了突變。試提出一種機(jī)制解釋質(zhì)粒拷貝數(shù)增加的現(xiàn)象，同時(shí)設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)來證明你的解釋。3、假定你一直在尋找一個(gè)具有更高進(jìn)行性的DNA聚合酶，用于PCR研究。你從幾種不同來源的細(xì)菌培養(yǎng)物中分別得到了幾種DNA聚合酶的粗品，現(xiàn)在要使用長達(dá)幾千堿基的單鏈DNA作為模板，測定酶活性。（1）除了在測活系統(tǒng)中添加DNA模板和DNA聚合酶抽提物以外，還應(yīng)該加入哪些成分？（2）如果你在粗抽提物中發(fā)現(xiàn)了一種具高進(jìn)行性的DNA聚合酶，需要進(jìn)一步純化它。在用不同的引物一模板測定活性以后，你驚奇地發(fā)現(xiàn)，如果以短DNA引物/單鏈環(huán)狀DNA模板測定活性，進(jìn)行性不高。但是，如果你以線形的模板啟動(dòng)反應(yīng)，然后迅速地環(huán)化模板，則發(fā)現(xiàn)延伸的進(jìn)行性非常高。對此現(xiàn)象請給予合理的解釋。如果你使用上面的環(huán)狀模板、短的DNA引物測定活性，則發(fā)現(xiàn)在加入無DNA聚合酶的細(xì)胞粗抽提物以后，純化好的DNA聚合酶能像使用線形模板一樣，很好地使用環(huán)狀模板。對此你又如何解釋？如何驗(yàn)證你的解釋？（3）你本以為在測活系統(tǒng)中加入大腸桿菌的SSB可能會(huì)刺激DNA的合成，但結(jié)果不然。然而，如果你加的是T4噬菌體的SSB，則能刺激DNA的合成。另外，在有ATP的情況下加入RecA，結(jié)果也能刺激DNA的合成，但如果使用不能水解的ATP類似物代替ATP，則對DNA的合成無刺激。對此，試提出合理的解釋。4、（1）DNA復(fù)制起始區(qū)一般具有哪些特征？（2）細(xì)菌染色體只有一個(gè)復(fù)制起始區(qū)，而真核細(xì)胞染色體具有多個(gè)復(fù)制起始區(qū)，為什么？（3）使用何種方法可以得到一個(gè)染色體DNA上的復(fù)制起始區(qū)序列？習(xí)題三DNA轉(zhuǎn)錄、逆轉(zhuǎn)錄及其轉(zhuǎn)錄后加工一、名詞解釋（每題3分，共15分）1、Pribnowbox2、cis-actingelement3、enhancer4、corepromoter5、mRNAediting二、填空題（每空1分，共15分）1、一個(gè)基因的有意義鏈?zhǔn)侵?，它的序列與mRNA。2、大腸桿菌的RNA聚合酶由 和—因子組成，參與轉(zhuǎn)錄起始的是而參TOC\o"1-5"\h\z與延伸的是 。3、真核細(xì)胞核mRNA前體后加工最重要的三種方式是_____、 和。4、snRNA即是它的主要功能是參與 ；snoRNA即是它的主要功能是參與 后加工。5、使用 方法可以確定原核細(xì)胞的啟動(dòng)子序列，使用 方法可以確定真核細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄的起始點(diǎn)。三、判斷題（每題1分，共10分）1、原核生物與真核生物的RNA聚合酶在結(jié)構(gòu)上具有高度的同源性，構(gòu)成原核生物RNA聚合酶的每一個(gè)亞基在真核細(xì)胞內(nèi)都有同源的亞基。（）2、內(nèi)含子在剪接反應(yīng)中被切除，所以一種蛋白質(zhì)的基因如果在內(nèi)含子內(nèi)發(fā)生突變，一般不會(huì)影響到這種蛋白質(zhì)的功能。（）3、與蛋白質(zhì)酶不同的是，核酶的活性不受溫度的影響。（ ）

TOC\o"1-5"\h\z4、RNA病毒因?yàn)闊oDNA基因組，所以其生活史省去了從DNA到RNA的過程。（ ）5、真核細(xì)胞mRNA的加帽反應(yīng)需要GTP。（ ）6、mRNA的剪接總是產(chǎn)生套索結(jié)構(gòu)。（ ）7、AAUAAA是真核細(xì)胞mRNA的主要加尾信號該序列在加尾反應(yīng)完成以后被切除。。 ）8、多數(shù)真核生物mRNA的降解開始于“脫帽”，隨后是“去尾”。（ ）9、mRNA前體上與5'端最近的內(nèi)含子最有可能先被剪接掉。（ ）10、既然內(nèi)含子大都是遺傳“垃圾”，所以在RNA剪接的時(shí)候不必進(jìn)行精確的切除。（ ）四、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1、tRNA基因的轉(zhuǎn)錄不需要的轉(zhuǎn)錄因子是（ ）A、TFOA B、TFOB C、TFOC D、TFOD2、在正常的生長條件下某一細(xì)菌基因的啟動(dòng)子的普里布諾框由TCGACT突變成TATACT,由此而引起該基因轉(zhuǎn)錄水平發(fā)生變化，以下幾項(xiàng)描述中正確的是（）A、該基因的轉(zhuǎn)錄增加 B、該基因的轉(zhuǎn)錄降低C、該基因不能轉(zhuǎn)錄 D、該基因的轉(zhuǎn)錄沒有變化3、如果你想設(shè)計(jì)一種新的抗菌藥物，其作用對象是原核細(xì)胞的RNA聚合酶，那么，你所TOC\o"1-5"\h\z設(shè)計(jì)的藥物作用的最佳靶點(diǎn)應(yīng)該是（ ）A、a亞基 B、B亞基 C、3亞基 D、a因子4、以下不會(huì)出現(xiàn)在一個(gè)cDNA克隆中的序列是（ ）A、加尾信號 B、多腺苷酸尾巴 C、5’-非翻譯序列 D、TATA框5、DNA復(fù)制過程中合成RNA引物與細(xì)胞內(nèi)其他RNA的差別在于（ ）A、T代替U B、由DNA聚合酶催化C、C、只能以DNA-RNA雜交雙鏈形式存在D、合成的方向是3'-5’6、真核細(xì)胞的TATA框（）A、與-35區(qū)一道起作用 B、存在于所有編碼蛋白質(zhì)基因的啟動(dòng)子上CsWRNA聚合酶定位到啟動(dòng)子上 D、存在于-10區(qū)TOC\o"1-5"\h\z7、原核細(xì)胞內(nèi)受RNA聚合酶全酶濃度的提高而加速的轉(zhuǎn)錄步驟是（ ）A、封閉的轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物的形成 B、啟動(dòng)子清空C、轉(zhuǎn)錄延伸 D、轉(zhuǎn)錄終止8、某些發(fā)生在RNA聚合酶B亞基上的突變能夠阻止依賴于P因子的轉(zhuǎn)錄終止，你認(rèn)為下列最有可能在體外恢復(fù)依賴于P因子的轉(zhuǎn)錄終止的條件是（ ）A、降低轉(zhuǎn)錄體系中的ATP濃度 B、降低轉(zhuǎn)錄體系中的GTP、CTP和UTP的濃度C、使用強(qiáng)啟動(dòng)子啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄 D、在轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)中加入核糖體9、RNA聚合酶和DNA聚合酶所具有的共同性質(zhì)是（ ）A、都需要模板和引物 B、都具有自我校對的活性C、都需要Mg2+ D、都能夠?qū)е翫NA發(fā)生解鏈10、以下屬于轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)調(diào)控的機(jī)制是（ ）A、DNA分子上的C發(fā)生甲基化修飾 B、轉(zhuǎn)錄因子與啟動(dòng)子結(jié)合C、RNA分子上的C脫氨基轉(zhuǎn)變成U D、基因擴(kuò)增五、問答題（每題10分，共40分）1、（1）如果將由RNA聚合酶口催化轉(zhuǎn)錄的一個(gè)蛋白質(zhì)的基因讓RNA聚合酶工或RNA聚合酶出來轉(zhuǎn)錄，那么，這種蛋白質(zhì)的mRNA前體還能經(jīng)歷哪些后加工反應(yīng)？為什么？（2）細(xì)菌體內(nèi)的轉(zhuǎn)錄和翻譯在時(shí)空上是偶聯(lián)的，但真核生物并沒有這樣的偶聯(lián)關(guān)系。然而，真核細(xì)胞內(nèi)卻有其他的過程與轉(zhuǎn)錄偶聯(lián)，你認(rèn)為它們是哪些過程？產(chǎn)生這種偶聯(lián)機(jī)制的直接原因是什么？2、假定枯草桿菌基因組一共具有7300個(gè)基因，其中5125個(gè)基因在營養(yǎng)型細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，而在芽泡形成中只有3532個(gè)基因表達(dá)(假設(shè)枯草桿菌的全基因組序列和所有基因的編碼序列均已經(jīng)被確定I(1X吏用何種技術(shù)可以快速確定這5125個(gè)在營養(yǎng)型細(xì)胞表達(dá)的基因和3532個(gè)在芽泡形成中表達(dá)的基因？(2)將營養(yǎng)型細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的基因數(shù)和在芽泡形成中表達(dá)的基因數(shù)相加并非是7300,為什么？(3)一種枯草桿菌突變體已失去了產(chǎn)生芽泡的能力，只能以營養(yǎng)型細(xì)胞生長，你認(rèn)為哪些基因的突變能產(chǎn)生這種表型？3、下圖顯示的是一種細(xì)菌的幾個(gè)相鄰的基因結(jié)構(gòu)圖譜?；虻拿Q用帶有數(shù)字的ORF表示，每一個(gè)ORF似乎是一個(gè)基因，但還沒有得到專門的鑒定。某些ORF后來被證明參與Arg的合成，因此這些基因也用arg來表示，圖中彎曲的箭頭為轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)。圖中單純的數(shù)字是基因之間的核甘酸數(shù)目。OUFtiORF7ORFSORFS口的OKF2OHF3QAF4(1)已有證據(jù)表明一種調(diào)節(jié)蛋白的結(jié)合位點(diǎn)與argF的啟動(dòng)子序列重疊。部分證據(jù)來自DNA酶工足跡實(shí)驗(yàn)，受這種調(diào)節(jié)蛋白保護(hù)的區(qū)域有29nt，從-10區(qū)的中間延伸到-35區(qū)的上游。試畫出導(dǎo)致上升結(jié)論的足跡實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，需要同時(shí)給出對照實(shí)驗(yàn)。(2)從(1)給出的信息、來看，你認(rèn)為調(diào)節(jié)蛋白最有可能是激活蛋白還是阻遏蛋白?為什么?(3)下圖顯示的是靠近0印=5起點(diǎn)區(qū)域的一段RNA序列，這種結(jié)構(gòu)有什么意義？它來自哪一個(gè)轉(zhuǎn)錄物?GCCdtiUAGCAUAGGG+CUUUVGCUCUUUUV(4)在細(xì)菌的培養(yǎng)基中加入Arg，能夠提高ORF4的轉(zhuǎn)錄。這意味著ORF4編碼的蛋白質(zhì)的功能是什么？ORF4有可能參與合成Arg嗎？為什么？4、(1)有人得到一種哺乳動(dòng)物的細(xì)胞系：它的一個(gè)基因的啟動(dòng)子被細(xì)菌的強(qiáng)啟動(dòng)子序列(-35區(qū)和-10區(qū)一致序列)取代，因此，可以被細(xì)菌的RNA聚合酶有效識別。然而，當(dāng)他將帶有原核生物轉(zhuǎn)錄所有必需成分的質(zhì)粒(獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)證明，這些質(zhì)粒能夠高表達(dá)出有功能的蛋白質(zhì))導(dǎo)入到上述細(xì)胞系的時(shí)候，發(fā)現(xiàn)這個(gè)受原核生物啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的基因表達(dá)的效率很低，最后只產(chǎn)生很少的mRNA。對此現(xiàn)象試提出兩種可能的機(jī)制給予解釋。(2)在真核細(xì)胞內(nèi)，RNA聚合酶口發(fā)生磷酸化修飾是基因表達(dá)十分重要和關(guān)鍵的一步。試回答:①催化磷酸化的激酶是什么？②磷酸化的具體對象是什么？③磷酸化的主要功能是什么？習(xí)題四翻譯及其后加工一、名詞解釋（每題3分，共15分）1、Shine-Dalgarnosequence2、wobblerule3、signalhypothesis4、N-endrule5、translationalframeshift二、填空題（每空1分，共15分）1、翻譯的時(shí)候肽鏈延伸的方向總是 ，而閱讀mRNA模板的方向總是2、核糖體上與tRNA結(jié)合的部位有A、P和E，其中與空載tRNA結(jié)合的是—，與起始tRNA結(jié)合的部位是__。TOC\o"1-5"\h\z3、翻譯的起始密碼子通常是 ，有時(shí)也可以是 。然而，它們都編碼 。終止密碼子則有 、 和 。4、原核生物和真核生物在翻譯的時(shí)候第一個(gè)被參入的氨基酸分別是 和 。5、原核生物在蛋白質(zhì)生物合成的時(shí)候，參與起始階段的起始因子有3種，其中與起始tRNA結(jié)合的是；參與延伸階段的延伸因子有3種，其中與氨酰-tRNA結(jié)合的是；終止釋放因子有3種，其中能夠水解GTP的是。三、判斷題（每題1分，共10分）1、通過封閉多肽離開通道起作用的抗生素一定結(jié)合在核糖體的小亞基上。（）2、抑制轉(zhuǎn)肽酶活性的抗生素通常與核糖體的大亞基結(jié)合。（ ）

TOC\o"1-5"\h\z3、根據(jù)擺動(dòng)法則，tRNA上的反密碼子在第三個(gè)位置的核苷酸處于搖擺的位置。（ ）4、如果將細(xì)胞質(zhì)中的mRNA導(dǎo)入到線粒體基質(zhì)內(nèi)翻譯，通常得不到有功能的蛋白質(zhì)產(chǎn)物。（ ）5、參與糖酵解和糖異生途徑的酶都沒有信號肽。（ ）6、甲硫氨酸的密碼子只有一個(gè)（AUG），但起始密碼子可以是AUG，也可以是GUG或UUG。由于GUG和UUG編碼的是其他氨基酸，故如果以它們作為起始密碼子的話，第一個(gè)參入的氨基酸將不再是Met。（）7、密碼子第一位堿基發(fā)生的突變要比第三位發(fā)生的突變的危害要大得多。（ ）8、催化大腸桿菌其實(shí)甲硫氨酰-tRNA合成的氨酰-tRNA合成酶識別的氨基酸是甲酰甲硫氨酸。（ ）9、核糖體大亞基的主要功能是催化肽鍵的形成，而小亞基主要是結(jié)合mRNA和tRNA。（ ）10、與tRNA相連的氨基酸本身在決定何種氨基酸參入到正在延伸的肽鏈上不起任何作用。（ ）四、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1、不是通過模擬tRNA的結(jié)構(gòu)與核糖體結(jié)合的蛋白質(zhì)是（ ）A、IF2 B、EF-GC、RF2 D、eRF22、一種新發(fā)現(xiàn)的抗生素能夠抑制細(xì)菌的蛋白質(zhì)合成。如果將這種抗生素加到以AUGUUUUUUUAG為模板的體外翻譯系統(tǒng)之中，則只形成一種二肽產(chǎn)物fMet-Phe。根據(jù)以上信息，你認(rèn)為該抗生素抑制（）A、翻譯的起始 B、氨酰-tRNA進(jìn)入A部位C、C、核糖體移位D、翻譯的終止3、在中度脅迫條件下，細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)發(fā)生變性或去折疊。有助于細(xì)胞度過脅迫條件而提高表達(dá)或開始表達(dá)的基因是（）A、編碼糖酵解途徑的酶 B、編碼分子伴侶C、編碼RNA聚合酶口 D、編碼核糖體亞基4、大腸桿菌16SrRNA的3'端序歹^是5'-CACCUCCUUAOH-3'，那陷mRNA分子上的SD序列是（）A、UCCUU B、UCCUCC C、GGAAUD、AGGAGG5、嘌呤霉素通過分子模擬抑制翻譯，被它模擬的分子是（ ）A、肽酰-tRNA B、氨酰-tRNA C、肽酰轉(zhuǎn)移酶 D、終止釋放因子6、假定一個(gè)編碼蛋白質(zhì)（由200個(gè)氨基酸組成）的基因由2個(gè)外顯子和1個(gè)內(nèi)含子組成。以下幾種突變中最有可能阻止這種蛋白質(zhì)不能合成的是（）A、第2個(gè)外顯子內(nèi)發(fā)生一個(gè)插入突變 B、基因的內(nèi)含子區(qū)域缺失5個(gè)核苷酸C、內(nèi)含子內(nèi)發(fā)生一個(gè)堿基置換 D、第2個(gè)外顯子內(nèi)發(fā)生一個(gè)無義突變7、以下有關(guān)翻譯進(jìn)位的敘述正確的是（ ）A、EF-Tu在結(jié)合氨酰-tRNA的時(shí)候水解GTPB、在EF-Tu釋放以后，氨酰-tRNA必須旋轉(zhuǎn)，肽鍵才能形成C、aa-tRNA-EF-Tu在與EF-Ts結(jié)合的時(shí)候水解GTPD、EF-Tu能夠與EF-G同時(shí)與核糖體結(jié)合8、在核糖體上，mRNA的結(jié)合部位和轉(zhuǎn)肽酶的活性中心分別位于（ ）A、兩個(gè)亞基之間；大亞基B、兩個(gè)亞基之間；小亞基C、大亞基；小亞基 D、小亞基；大亞基9、在一個(gè)真核細(xì)胞內(nèi)，由一種特定的mRNA翻譯出來的蛋白質(zhì)的量部分取決于（ ）

A、A、DNA甲基化的程度B、mRNA降解的速率C、某些轉(zhuǎn)錄因子的存在 D、mRNA含有的內(nèi)含子的數(shù)目10、一種轉(zhuǎn)基因突變細(xì)菌有望用于人體疫苗，為了獲得FDA的批準(zhǔn)，突變的性質(zhì)需要預(yù)先知道，而最重要的是回復(fù)突變成野生型的可能性更需要明確。你認(rèn)為獲得FDA批準(zhǔn)可能性最低的突變是（）A、點(diǎn)突變 8、插入突變 C、缺失突變 口、染色體重排五、問答題（每題10分，共40分）1、（1）原核生物與真核生物在識別起始密碼子的機(jī)制上有何不同？這種差別與原核生物的mRNA多數(shù)是多順反子及真核生物的mRNA絕大多數(shù)是單順反子有無某種關(guān)系？為什么？（2）在大腸桿菌細(xì)胞里表達(dá)來自嗜熱菌的基因現(xiàn)在已經(jīng)是十分普遍的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。然而，有時(shí)表達(dá)的效果不錯(cuò)，有時(shí)表達(dá)得則不理想。Ishida和Oshima在研究中發(fā)現(xiàn)，在大腸桿菌細(xì)胞里表達(dá)量極低的基因在緊靠RBS附近含有回文序列。如果將此序列去除，這些基因的表達(dá)量將大大提高。為什么這種回文序列在嗜熱菌體內(nèi)對基因表達(dá)不構(gòu)成問題，但在大腸桿菌卻能降低基因翻譯的效率？（3）遺傳密碼的哪些性質(zhì)有利于基因從一種生物向另外一種生物的轉(zhuǎn)移（通過基因工程或自然轉(zhuǎn)移）？哪些性質(zhì)不利于基因從一種生物向另外一種生物的轉(zhuǎn)移？2、如果你分離到一個(gè)病毒的400nt的DNA片段，它能編碼至少兩種不同的蛋白質(zhì)，一個(gè)長度是120個(gè)氨基酸殘基，另一個(gè)的長度為80個(gè)氨基酸殘基。（1）你認(rèn)為這種現(xiàn)象普遍嗎？（2）試提出兩個(gè)模型解釋以上現(xiàn)象。（3）如果你測定這兩種蛋白質(zhì)的氨基酸序列，發(fā)現(xiàn)它們無序列同源性，那么，你能排除哪一個(gè)模型？為什么？3、如果你在研究某一個(gè)細(xì)菌基因的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)這個(gè)基因能正常地轉(zhuǎn)錄，但轉(zhuǎn)錄出來的mRNA不能正常地被啟動(dòng)翻譯。（1）你認(rèn)為哪些突變可以產(chǎn)生這樣的后果？（2）你如何進(jìn)一步確定這種細(xì)菌究竟發(fā)生了何種突變？（3）如果你得到這種突變細(xì)菌的回復(fù)突變體，即一種新的突變讓這個(gè)基因恢復(fù)正常的翻譯起始，但新突變的位點(diǎn)與原來突變的位點(diǎn)不同，那么，相對于第一次突變，第二次突變會(huì)是什么？4、某些細(xì)菌的某些蛋白質(zhì)基因（如大腸桿菌乳糖操縱子的阻遏蛋白LacI）以GUG而不是AUG作為起始密碼子，對此現(xiàn)象請回答以下問題：（1）在這些基因的翻譯產(chǎn)物中，第一個(gè)參入的氨基酸仍然是甲酰甲硫氨酸嗎？（2）為什么其基因內(nèi)部的AUG不能作為起始密碼子？（3）如果將此GUG突變成AUG，這些基因的翻譯效率會(huì)有何變化？（4）起始tRNA如何識別GUG？這種現(xiàn)象可以用擺動(dòng)法則解釋嗎？習(xí)題五基因表達(dá)的調(diào)控一、名詞解釋（每題3分，共15分）1、antisenseRNA2、operon3、house-keepinggene4、regulon5、riboswitch二、填空題（每空1分，共15分）TOC\o"1-5"\h\z1、原核生物基因表達(dá)的“默認(rèn)”狀態(tài)是表達(dá)，因此基因表達(dá)調(diào)控的方式主要是 ，而真核生物基因表達(dá)的“默認(rèn)”狀態(tài)是不表達(dá)，故其基因表達(dá)調(diào)控的方式主要是 。2、操縱子一般由 、 和 三種成分組成。3、參與基因表達(dá)調(diào)控的調(diào)節(jié)蛋白分為 和 兩種，操縱子上與調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合的核苷酸序列通常稱為 ，在正調(diào)控中起作用的是 。4、大腸桿菌的乳糖操縱子表達(dá)受到 和 兩種機(jī)制的調(diào)節(jié)，而色氨酸操縱子受到 和 兩種機(jī)制的調(diào)控。5、乳糖操縱子的天然誘導(dǎo)物是 ，實(shí)驗(yàn)室里常用 作為乳糖操縱子的安慰誘導(dǎo)物，以誘導(dǎo)B-半乳糖苷酶的產(chǎn)生。三、判斷題（每題1分，共10分）1、某些蛋白質(zhì)不僅可以作為阻遏蛋白還可以作為激活蛋白參與基因表達(dá)的調(diào)控。（）TOC\o"1-5"\h\z2、轉(zhuǎn)錄因子都具有與DNA結(jié)合的模體結(jié)構(gòu)。（ ）3、真核細(xì)胞核的三種RNA聚合酶負(fù)責(zé)的基因轉(zhuǎn)錄都受到增強(qiáng)子的調(diào)節(jié)。（ ）4、大腸桿菌乳糖操縱子和阿拉伯糖操縱子既受到負(fù)調(diào)控，也受到正調(diào)控。（ ）5、大腸桿菌和枯草桿菌在色氨酸弱化子的結(jié)構(gòu)上非常相似，都需要前導(dǎo)序列中含有色氨酸的密碼子。（）TOC\o"1-5"\h\z6、調(diào)節(jié)基因一般都位于操縱子的附近，這種構(gòu)造有利于調(diào)節(jié)基因?qū)Σ倏v子的控制。（ ）7、管家基因在細(xì)胞里始終表達(dá)，因此沒有也不需要對其表達(dá)進(jìn)行調(diào)控。（ ）8、激活蛋白參與正調(diào)控，其濃度越高，激活基因表達(dá)的效果就越好。（ ）9、組蛋白的乙酰化修飾是可逆的，但組蛋白的甲基化是不可逆的。（）10、細(xì)菌中弱化子的作用方式是在翻譯水平來控制轉(zhuǎn)錄。（ ）四、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1、如果將大腸桿菌乳糖操縱子的啟動(dòng)子換成強(qiáng)啟動(dòng)子，那么實(shí)現(xiàn)乳糖操縱子最高表達(dá)的條件將是（）A、高乳糖，低葡萄糖 B、高乳糖，高葡萄糖C、低乳糖，低葡萄糖 D、A和B2、有一種突變株大腸桿菌即使在有高濃度葡萄糖的時(shí)候，乳糖操縱子也呈現(xiàn)高水平的表達(dá)。此突變株最有可能（）A、乳糖操縱子的阻遏蛋白因突變而失去活性B、比野生型表達(dá)較少的cAMPC、CAP發(fā)生突變，導(dǎo)致其沒有cAMP也有活性D、催化cAMP合成的腺苷酸環(huán)化酶喪失活性3、以下是關(guān)于大腸桿菌乳糖操縱子敘述，其中正確的是（ ）A、乳糖是天然的誘導(dǎo)物，IPTG是安慰誘導(dǎo)物B、CAP-cAMP的結(jié)合使DNA彎曲C、CAP與DNA結(jié)合的結(jié)構(gòu)域含有螺旋-環(huán)-螺旋模體D、其啟動(dòng)子為強(qiáng)啟動(dòng)子4、以下關(guān)于RNAi的敘述中，錯(cuò)誤的是（ ）A、可特異性地導(dǎo)致mRNA的降解B、可特異性地抑制mRNA的翻譯C、只存在于真核生物 D、通常抑制特定mRNA的轉(zhuǎn)錄5、下圖顯示的是大腸桿菌色氨酸操縱子前導(dǎo)序列的大致結(jié)構(gòu)：UGGUGGAV￡_四4 （ r, 1UUUUUUU 1:IFHH1 12 3 4以下可導(dǎo)致色氨酸操縱子表達(dá)提高的突變是（ ）A、將兩個(gè)UGG突變成GGGB、序列3發(fā)生的突變減弱其與序列4的配對，但不影響2與3之間的配對C、序列3發(fā)生的突變減弱其與序列2的配對，但不影響3與4之間的配對D、以上都不是6、如果一個(gè)突變導(dǎo)致大腸桿菌色氨酸操縱子前導(dǎo)序列內(nèi)的SD序列不起作用，那么，色氨酸操縱子的表達(dá)受到的影響將是（ ）A、在高Trp條件下的表達(dá)升高 B、在低Trp條件下的表達(dá)升高C、在高Trp條件下的表達(dá)下降 D、在低Trp條件下的表達(dá)下降7、如果使用定點(diǎn)突變的手段將大腸桿菌色氨酸操縱子前導(dǎo)肽的起始密碼子突變成UGA，那么色氨酸操縱子將（ ）A、不管細(xì)胞內(nèi)Trp水平的高低，總是被阻遏B、不管細(xì)胞內(nèi)Trp水平的高低，總是被表達(dá)C、在有Trp的時(shí)候才表達(dá)D、在沒有Trp的時(shí)候才表達(dá)8、大腸桿菌的CRP被認(rèn)為直接與RNA聚合酶相互作用，而激活很多操縱子的表達(dá)。支持這種觀點(diǎn)的證據(jù)是（）A、發(fā)生在RNA聚合酶a亞基上的突變可阻止CRP的激活B、某些CRP突變體（crp-）呈顯性突變C、某些CRP結(jié)合位點(diǎn)與啟動(dòng)子的-35區(qū)序列重疊D、CRP只有結(jié)合cAMP以后才有活性9、屬于表觀遺傳變化的是（ ）A、DNA甲基化 B、DNA缺失C、DNA突變D、DNA擴(kuò)增10、選擇性剪接是真核生物基因表達(dá)的一種重要手段，以下各種選擇性剪接方式中不可能發(fā)生的是（）A、外顯子跳過 B、內(nèi)含子保留C、改變外顯子連接的順序 D、可變的5’-剪接位點(diǎn)五、問答題（每題10分，共40分）1、酵母細(xì)胞內(nèi)有兩種蛋白質(zhì)一一蛋白A和蛋白B，它們都由管家基因編碼。然而，蛋白A的量始終高于蛋白B，對此試提出兩種可能的機(jī)制給予合理的解釋。2、一些被稱為抗誘導(dǎo)物（anti-inducer）的化合物能夠與阻遏蛋白（例如乳糖操縱子的阻遏蛋白）結(jié)合，抑制誘導(dǎo)物對特定基因表達(dá)的誘導(dǎo)。試就此抗誘導(dǎo)物的作用機(jī)制給予解釋。3、如果使用DNA芯片技術(shù)分別測定酵母菌在基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基上的基因表達(dá)情況,那么，哪些基因在基礎(chǔ)培養(yǎng)基上生長的酵母菌內(nèi)大量表達(dá)？哪些基因在兩種不同的培養(yǎng)基上生長的酵母菌體內(nèi)都表達(dá)？4、大腸桿菌的乳糖透過酶既能運(yùn)輸乳糖,也能運(yùn)輸乳糖酸(lactobionicacid)。但是,B-半乳糖苷酶水解乳糖酸的效率并不高。某些大腸桿菌突變體內(nèi)的B-半乳糖苷酶發(fā)生了突變，使其能夠更好地水解乳糖酸。這樣的突變體能夠生活在以乳糖酸為唯一碳源的培養(yǎng)基上。然而，如果培養(yǎng)基中沒有IPTG，突變體就不能生長。對此你如何解釋？你如何進(jìn)一步驗(yàn)證你的解釋？習(xí)題六基因工程以及其他現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)一、名詞解釋（每題3分，共15分）1、genetherapy2、geneknock-out3、proteinengineering4、DNAchip5、geneknock-in二、填空題（每空1分，共15分）1、制備cDNA文庫需要的工具酶有、限制性酶和。2、限制性內(nèi)切酶一般分為___類，用于基因工程的屬于第二類，這一類在組成上一般為 ，識別的序列通常具有 特征，切點(diǎn)位于識別序列內(nèi)部。TOC\o"1-5"\h\z3、Southern、Northern和Western印跡分別被用來檢測DNA、RNA和，它們所使用的探針分別是 、核酸和 。4、 是應(yīng)用于蛋白質(zhì)工程中的最主要的手段。5、實(shí)時(shí)PCR主要用于 。6、在分子克隆中，能催化黏端又能催化平端DNA連接的DNA連接酶是7、雙向電泳的第一相是進(jìn)行 ，第二相是進(jìn)行 。8、小的核