百年生機(jī)為時(shí)養(yǎng)器血液學(xué)檢測，血?dú)庵笖?shù)分析血液處理，血?dú)庵笖?shù)分析CONTENTS01血液學(xué)檢測02血?dú)庵笖?shù)分析血液學(xué)檢測Part-1血液學(xué)檢測一（一）血液學(xué)檢測的臨床意義

目前，獸醫(yī)臨床與入醫(yī)臨床一樣，都致力于提高即時(shí)服務(wù)水平，這樣可以提供更好的客戶服務(wù)和提高獸醫(yī)醫(yī)療水平。

血液學(xué)檢測是獸醫(yī)技術(shù)員應(yīng)掌握的一項(xiàng)重要技能，可為獸醫(yī)提供準(zhǔn)確可信的臨床實(shí)驗(yàn)室檢結(jié)果。理解各種血液學(xué)試驗(yàn)和檢測方法的原理對于保證結(jié)果的準(zhǔn)確性至關(guān)重要。通過血液學(xué)檢測，為獸醫(yī)技術(shù)員提供了進(jìn)行額外診斷檢測的方法、改善動(dòng)物的護(hù)理并且增加診所創(chuàng)收的機(jī)會(huì)。

血液中各種化學(xué)成分的測定有助于準(zhǔn)確診斷，采取適宜的治療及判斷療效。所測定的化學(xué)成分一般與特定器官的功能有關(guān)，這些化學(xué)成分可能是與特定器官功能相關(guān)的酶或特定器官的代謝產(chǎn)物或代謝副產(chǎn)物。完整的血液學(xué)檢查適用于對疾病狀態(tài)的診斷評估、健康動(dòng)物的體檢(如老年動(dòng)物)和手術(shù)前的篩查。分析這些化學(xué)成分通常需要小心地采集血清樣品，一些病例可能需要血漿。一血液學(xué)檢測（二）血樣的采集

準(zhǔn)備采血時(shí)，技術(shù)員應(yīng)首先確定需要進(jìn)行何種檢測。這在某種程度上決定采血所需的器具和采血的部位。樣本必須在沒有使用任何藥物治療前采集。如果已經(jīng)進(jìn)行了治療，需在采血記錄上予以注明。一旦動(dòng)物接受了某些藥物治療，一些檢測方法就無法得到準(zhǔn)確的結(jié)果。

首選的血源是靜脈血。頸靜脈采血是常見動(dòng)物最適合的采血途徑。有些動(dòng)物可能沒有合適的采血靜脈或采集靜脈血可能會(huì)對其造成過度傷害。這時(shí)可能需要通過外周或毛細(xì)血管采血。右表列出了常用的采血部位。采血前采血部位必須用酒精擦拭清潔。酒精揮發(fā)后再進(jìn)行采血操作。動(dòng)物應(yīng)保定，但應(yīng)盡量減少入工保定。保定過程應(yīng)盡量減少動(dòng)物應(yīng)激，動(dòng)物應(yīng)激通常會(huì)造成樣品結(jié)果誤差。犬頭靜脈頸靜脈隱靜脈貓頭靜脈頸靜脈牛尾靜脈乳房靜脈頸靜脈馬頸靜脈鳥類翅脈剪指甲兔耳靜脈剪指甲嚙齒類尾靜脈心臟穿刺動(dòng)物常用采血部位血液學(xué)檢測一采血器具的選擇：傳統(tǒng)的采血工具是針頭和注射器。用這種方法采血時(shí)，應(yīng)選擇適合動(dòng)物的最大號(hào)針頭。注射器應(yīng)選擇最接近采樣容量的型號(hào)。使用過大的注射器可能造成動(dòng)物靜脈塌陷。最好的采血工具是真空采血系統(tǒng)。這種采血系統(tǒng)由一個(gè)針頭、持針器和采集管組成。采集管可能是不含或含有抗凝劑的無菌管。管的容量從幾微升至15

mL不等。采血時(shí)應(yīng)選擇合適型號(hào)的采集管，以減少樣品的損傷并避免靜脈塌陷?；诠軆?nèi)真空壓力的大小，采集管內(nèi)應(yīng)采集適量的血液，以保證抗凝劑和血液成最佳比例。這種方法的優(yōu)點(diǎn)之一是可以用不同的采集管采集多份樣品，而不需要反復(fù)進(jìn)行靜脈穿刺。使用真空管采血的操作正確時(shí)，所得樣品的質(zhì)量最好。一血液學(xué)檢測（三）血液樣品的處理樣品的處理方式直接影響化驗(yàn)結(jié)果的可信度，許多化學(xué)成分的分析需要采集血液并制備血清樣品，全血或血漿適用于某些檢測方法或某些特殊類型的儀器。一般化學(xué)分析儀都附有說明書指明所需樣品的類型。1.全血

獸醫(yī)技術(shù)員采集全血樣品后，將其裝入含適當(dāng)抗凝劑的容器內(nèi)防止凝集。血液采集后要盡快與抗凝劑混合，搖動(dòng)手法應(yīng)輕柔。劇烈晃動(dòng)可造成溶血，紅細(xì)胞內(nèi)的化學(xué)物質(zhì)釋放入血漿，從而影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。2.血漿血漿是全血的液體組分，細(xì)胞則懸浮于其中。它主要由近90%的水和10%的溶質(zhì)組成，如蛋白質(zhì)、碳水化合物、維生素、激素、酶、脂肪、鹽類、廢物、抗體及其他離子和分子。離心后，吸收樣品時(shí)嚴(yán)禁吸入試管下層的細(xì)胞，以確保樣品內(nèi)無任何細(xì)胞。如果樣品不能在1h之內(nèi)離心，則須冷藏保存。如果肝素沉凝的血漿在分離后保存過夜或冷凍保存，在檢測前應(yīng)將樣品再次離心，以除去可能存在的纖維蛋白團(tuán)塊。冷凍會(huì)影響某些檢測結(jié)果，因此應(yīng)詳細(xì)閱讀檢測說明，以確定哪些檢測需在樣品冷凍前完成。

血漿樣品的制備：（1）.采集血液樣品，置于含有適量抗凝劑的試管內(nèi)。（2）.緩慢搖動(dòng)試管12次，以混勻血液。（3）.確定試管已密封，避免樣品在離心過程中蒸發(fā)。（4）.以2000～3000rpm離心（血樣采集后1h之內(nèi)進(jìn)行)10min。（5）.小心地用毛細(xì)移液管將血漿層移出。（6）.將血漿置于標(biāo)記有日期、采集時(shí)間、動(dòng)物名稱和病歷號(hào)的試管內(nèi)。（7）.立即操作、冷藏或冷凍樣品。一血液學(xué)檢測3.血清血清就是除去纖維蛋白原(一種血漿蛋白)的血漿。凝血過程中，血漿中可溶性的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴豢扇苄缘睦w維蛋白。血液凝集時(shí)，凝血塊周圍析出的液體即為血清。離心時(shí)，轉(zhuǎn)速超過2000~3000rpm或離心時(shí)間過長都可能造成溶血。離心分離時(shí)，血清分離管(SST)內(nèi)的一種凝膠會(huì)在血清或血漿和血細(xì)胞之間形成物理屏障。此外，試管內(nèi)壁還含有能促進(jìn)凝血的二氧化硅顆粒。血液采集入SST試管后，應(yīng)緩緩將試管上下倒置幾次混勻，然后在離心前使血液凝集30min。任何測定延遲時(shí)，都應(yīng)將血清從SST試管中移出并置于無菌試管中，然后將樣品冷藏或冷凍保存。冷凍會(huì)影響一些檢測結(jié)果，因此應(yīng)詳閱檢測說明，以確定哪些檢測須在樣品冷凍前完成。

血清樣品的制備過程：（1）.采集血液樣品，并將其置于不含抗凝劑的試管內(nèi)。（2）.室溫下自然凝集20～30min。（3）.輕輕地用木棉棒沿著試管壁分離血凝塊。（4）.密封試管，以2000～3000rpm的速度離心10min。（5）.用毛細(xì)移液管將血清移出。（6）.將血清置于標(biāo)記有日期、采集時(shí)間、動(dòng)物名稱和病歷號(hào)的試管內(nèi)。（7）.合理冷藏或冷凍樣品。一血液學(xué)檢測（四）抗凝劑的選擇需要用全血或血漿進(jìn)行檢測時(shí)應(yīng)使用抗凝劑?？鼓齽┦羌尤胙簶悠分蟹乐够蜓泳徠淠幕瘜W(xué)物質(zhì)。特定抗凝劑的選擇應(yīng)基于待檢項(xiàng)目而定。有些抗凝劑會(huì)影響分析，因此應(yīng)了解檢測項(xiàng)目以選取適當(dāng)?shù)目鼓齽?。有的抗凝劑?huì)干擾特定的凝集試驗(yàn)。除了選擇抗凝劑之外，檢測前血樣和抗凝劑必須完全混勻(輕柔地倒轉(zhuǎn))。1

h內(nèi)不進(jìn)行檢測的樣品應(yīng)冷藏。分析前應(yīng)先取出恢復(fù)到室溫，并輕柔地倒轉(zhuǎn)混勻。全血不能冷凍，因?yàn)樵诶鋬龊徒鈨鲞^程中血細(xì)胞會(huì)發(fā)生溶解。血液學(xué)檢測一1.草酸鹽和檸檬酸鹽

草酸鹽有鈉、鉀、銨或鋰鹽制劑。檸檬酸鹽有鈉鹽或鋰鹽制劑。鈣是形成血凝塊的必要物質(zhì)，草酸鹽和檸檬酸鹽通過與鈣形成不溶性復(fù)合物而陽凝血。草酸鉀是最常用的草酸鹽制劑，每毫升血防中加入1~2mg可防止凝血。檸檬酸鈉也很常用，特別是輸血時(shí)。目前市場上有商品化的含有適量為酸鹽和檸檬酸鹽抗凝劑的真空采集管。但是，草酚鹽還可結(jié)合酶發(fā)揮活性所必需的金屬離子。草酸鋼鹽可抑制乳酸脫氫酶和堿性磷酸酶的活性。因?yàn)槭氢淃}，不能用于分析鉀離子濃度的血樣。檸檬酸鈉也可干擾鈉離子的分析和許多常見的血液化學(xué)檢測。2.乙二胺四乙酸二鈉

乙二胺四乙酸(EDTA)不改變細(xì)胞形態(tài)，因此是血液學(xué)檢查的首選。當(dāng)血漿樣品要用于化學(xué)分析，則不能使用。EDTA有鈉鹽或鉀鹽制劑，通過與鈣形成不溶的復(fù)合物而阻止凝血，而鈣是形成血凝塊的必要物質(zhì)。EDTA

管有含液體和粉末兩種。液體的會(huì)對樣品造成一定程度的稀釋。為防止凝集，每毫升血液就加入1~2

mg

EDTA。商品化真空管內(nèi)含有適量的EDTA。過量EDTA可造成細(xì)胞收縮，用自動(dòng)分析儀進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)造成結(jié)果無效。血液學(xué)檢測一3.氟化鈉

作為葡萄糖防腐劑的氟化鈉，也有抗凝血的作用。作為抗凝劑時(shí)，每毫升血液應(yīng)加入6~10

mg氟化鈉。目前市場上有商品化的含適量氟化鈉的真空采集管。即使存在其他抗凝劑，氟化鈉還可作為葡萄糖防腐劑加入樣品中。作為葡萄糖防腐劑，每毫升血液中加入2.5

mg氟化鈉即可。氟化鈉可干擾許多項(xiàng)血清酶檢測。4.肝素

對于大部分需用血漿的檢測，特別是血液化學(xué)分析，肝素是最適合的抗凝劑。肝素不可用于血涂片的分類計(jì)數(shù)，因?yàn)榭箰蹌?huì)干擾白細(xì)胞套色。肝素有鈉鹽、鉀鹽、鋰鹽或銨鹽制劑。肝素通過阻止凝血過程中凝血酶原向凝血酶轉(zhuǎn)化而發(fā)揮作用。由于肝素可造成白細(xì)胞凝集和干擾白細(xì)胞正常著色，因此肝素不可用于白細(xì)胞分析。每毫升血液中應(yīng)加入20∪的肝素。商品化真空采集管內(nèi)含有適量肝素。這些真空管在需要采集多個(gè)樣品時(shí)最適用。血液學(xué)檢測一（五）樣品量

采血量是由用于檢測所需的血清或血漿量和動(dòng)物的水合狀態(tài)決定。例如，水合狀態(tài)良好的動(dòng)物，細(xì)胞壓積(PCV)為50%，則血樣中含50%的細(xì)胞和50%的液體。10

mL的血樣可提供5

mL的液體。對于脫水動(dòng)物，血液濃縮會(huì)引起液體和細(xì)胞的比值縮小。PCV為70%的脫水動(dòng)物，血樣中含有70%的細(xì)胞和30%的液體，這意味著10mL血樣中只有3

mL液體。

根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，采集的血樣須為全部檢測項(xiàng)目所需量的3倍，從而在技術(shù)員失誤、儀器故障或需稀釋樣品時(shí)，不必重復(fù)采樣。

在進(jìn)行任何檢測前，血樣必須充分混勻，混合不充分會(huì)造成錯(cuò)誤的結(jié)果。一血液學(xué)檢測（六）影響結(jié)果的因素1.溶血

使用濕注射器采血、采集后劇烈地混合血樣、施壓使樣品經(jīng)針頭注入試管或?qū)⑷獦悠防鋬龆伎赡茉斐扇苎?。由于注射器?nèi)貯留的水會(huì)導(dǎo)致溶血，因此，用于采血的注射器必須干燥。將血液注入試管內(nèi)之前，必須將注射器的針頭拔掉，因?yàn)槠仁寡簭男♂樋淄ㄟ^時(shí)會(huì)造成血細(xì)胞破裂，將血樣移入試管時(shí)，獸醫(yī)技術(shù)入員必須緩慢地將血液從注射器內(nèi)推出，且要避免產(chǎn)生氣泡。用過量的酒精擦拭皮膚且皮膚未干時(shí)便采樣也會(huì)導(dǎo)致溶血。2.化學(xué)污染

常規(guī)化學(xué)測定所需的樣品試管無須無菌，但必須是化學(xué)純的。重復(fù)使用的試管必須將洗滌劑完全清洗干凈，以免影響試驗(yàn)結(jié)果。3.不合理的標(biāo)記

樣品采集后，如果未立即在試管上做標(biāo)記，可能會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重的錯(cuò)誤。試管上必須標(biāo)明日期、采集時(shí)間，動(dòng)物名你和病歷號(hào)。送檢前，獸醫(yī)技術(shù)入員應(yīng)核對樣品標(biāo)記和送檢表兩次，制備樣品和檢測時(shí)也是如此。4.不適當(dāng)?shù)臉悠诽幚?/p>

理想情況下，所有的化學(xué)測定都應(yīng)在樣品采集后1h內(nèi)完成，但實(shí)際中并不總是如此。在這種情況下，必須正確處理和保存樣品，從而使它們的化學(xué)成分接近采集時(shí)動(dòng)物體內(nèi)的水平。樣品溫度不能過高，因?yàn)楦邷貢?huì)破壞樣品的些化學(xué)成分及活化某些物質(zhì)。如果血清或血漿樣品被冷凍保存，解凍后必須混勻，避免產(chǎn)生濃度差。5.動(dòng)物的影響

臨床中，血樣采集前動(dòng)物應(yīng)禁食。采食后，血糖水平立刻升高，無機(jī)磷水平則會(huì)下降。餐后脂血癥可導(dǎo)致血漿或血清呈混濁或云絮狀。進(jìn)食后腎小球?yàn)V過率一過性地升高也會(huì)影響腎功能指標(biāo)的檢測。采集血液前，不用限制飲水。血?dú)庵笖?shù)分析Part-2血?dú)庵笖?shù)分析二（一）概念血?dú)夥治觯˙G）是應(yīng)用血?dú)夥治鰞x，通過測定動(dòng)物血液的H+濃度和溶解在血液中的氣體（主要指CO2、O2），來了解動(dòng)物呼吸功能與酸堿平衡狀態(tài)的一種手段，它能直接反映肺換氣功能及其酸堿平衡狀態(tài)。采用的標(biāo)本常為動(dòng)脈血。適用于：低氧血癥和呼吸衰竭的診斷；呼吸困難的鑒別診斷；昏迷的鑒別診斷；手術(shù)適應(yīng)證的選擇；呼吸機(jī)的應(yīng)用、調(diào)節(jié)、撤機(jī)；呼吸治療的觀察；酸堿失衡的診斷等。血?dú)夥治鰞x可直接測定的有動(dòng)脈氧分壓（PO2）、動(dòng)脈二氧化碳分壓（PCO2）、動(dòng)脈氫離子濃度（pH），并推算出一系列參數(shù)，發(fā)展到今天可測定50多項(xiàng)指標(biāo)。血?dú)庵笖?shù)分析二（二）各檢測指標(biāo)解讀1、酸堿度(pH)

參考值7.35～7.45。<7.35為酸血癥，>7.45屬堿血癥。但pH正常并不能完全排除無酸堿失衡。2、二氧化碳分壓(PCO2)

參考值(各種動(dòng)物有差異)乘0.03即為H2CO3含量。超出或低于參考值稱高、低碳酸血癥。是判斷各型酸堿中毒主要指標(biāo)。3、二氧化碳總量(TCO2)

代表血中CO2和HCO3之和，在體內(nèi)受呼吸和代謝二方面影響。代謝性酸中毒時(shí)明顯下降，堿中毒時(shí)明顯上升。4、氧分壓（PO2）

為物理溶解于血液中的氧所產(chǎn)生的張力。檢測指標(biāo)二5、動(dòng)脈血氧含量（O2ct）

是指每100ml血液中實(shí)際帶氧量的毫升數(shù)，包括物理溶解在血液中的氧和以化學(xué)結(jié)合形式存在的氧。O2ct能真實(shí)地反映動(dòng)脈血液中氧的含量，是較可靠的診斷缺氧和低氧血癥的客觀指標(biāo)。6、氧飽和度(SatO2)

95℅～98℅是指動(dòng)脈血液中Hb在一定氧分壓下和氧結(jié)合的百分比，即氧合Hb占Hb的百分比。O2sat僅僅表示血液中氧與Hb結(jié)合的比例，雖然多數(shù)情況下也作為缺氧和低氧血癥的客觀指標(biāo)，但與PO2不同的是它在某些情況下并不能完全反映機(jī)體缺氧的情況，尤其當(dāng)合并貧血或Hb減低時(shí)，此時(shí)雖然O2sat正常，但卻可能存在著一定程度的缺氧。7、實(shí)際碳酸氫根（AB）

AB是體內(nèi)代謝性酸堿失衡重要指標(biāo)，在特定條件下計(jì)算出SB也反映代謝因素。二者正常為酸堿內(nèi)穩(wěn)正常。二者皆低為代謝性酸中毒（未代償），二者皆高為代謝性堿中毒AB>SB為呼吸性酸中毒，AB<SB為呼吸性堿中毒。檢測指標(biāo)二8、剩余堿（BE）

BE(B)和BE(ecf)代表體內(nèi)堿儲(chǔ)備的增加或減少，是判斷代謝性酸堿失衡的重要指標(biāo)。9、