第十三單元現(xiàn)代生物科技專題

B卷滾動(dòng)提升檢測

一、選擇題：本大題共18個(gè)小題。第卜13題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求，每題2分，第

14-18題有多項(xiàng)符合題目要求，全部選對(duì)的得3分，選對(duì)但不全的得1分，有選錯(cuò)的得

0分。

1.下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的

酶切位點(diǎn)。下列說法正確的是()

限制酶BamHIHindlllEcoRISmal

識(shí)別序列及G1GATCCA4AGCTTG4AATTCCCCiGGG

切割位點(diǎn)CCTAGtGTTCGAtACTTAAtGGGGtCCC

EcoRi目的基因￡caRl

IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII

§皿【Hindi

圖2

A.重組DNA技術(shù)所用的工具醐是限制酶、DNA連接醐和運(yùn)載體

B.只有用同種限制酶切割DNA產(chǎn)生的粘性末端才能互補(bǔ)

C.用圖中質(zhì)粒和外源基因DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，可使用Smal切割

D.使用EcoRI同時(shí)處理質(zhì)粒和外源DNA,可能會(huì)發(fā)生質(zhì)?；蛘吣康幕虻淖陨憝h(huán)化

2.ChlL基因是藍(lán)藻擬核DNA上控制葉綠素合成的基因。為了研究該基因?qū)θ~綠素合成的控

制，需要構(gòu)建缺失ChlL基因的藍(lán)藻細(xì)胞。構(gòu)建的過程如下圖。相關(guān)敘述中，正確的是()

chlL基因紅霉素抗性基因chlL基因重組基因

?k◎上。三懣量且

質(zhì)就重篇《I重后蒜2有chlL基無chlL基

因藍(lán)細(xì)菌因藍(lán)細(xì)菌

A.②過程共形成2個(gè)磷酸二酯鍵

B.①②過程都需要使用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶

C.該項(xiàng)技術(shù)操作成功的標(biāo)志是目的基因的表達(dá)

D.紅霉素抗性基因是標(biāo)記基因，用于篩選含有ChlL基因的受體細(xì)胞

3.植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用技術(shù)或方法與原理不相符的是()

A.植物組織培養(yǎng)和單克隆抗體一一細(xì)胞的全能性

B.纖維素酶、果膠酶處理植物細(xì)胞壁一一酶的專一性

C.原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合一細(xì)胞膜的流動(dòng)性

I).紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)一一細(xì)胞增殖

4.2019年1月24日，我國科學(xué)家宣布世界首批疾病克隆猴在中國誕生，這標(biāo)志著中國體細(xì)

胞克隆技術(shù)走向成熟，實(shí)驗(yàn)用疾病模型猴批量克隆“照進(jìn)現(xiàn)實(shí)”，全球?qū)嶒?yàn)動(dòng)物使用數(shù)量有

望大幅降低，藥物研發(fā)駛?cè)搿翱燔嚨馈?。下列相關(guān)敘述正確的是()

A.體細(xì)胞核移植技術(shù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞的全能性

B.5只克隆舜猴細(xì)胞核基因型與核供體細(xì)胞一致

C.用于核移植的受體細(xì)胞通常選擇處于減數(shù)第一次分裂時(shí)期的卵母細(xì)胞

D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，將其置于含95%。2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)以滿足細(xì)胞代謝

5.治療性克隆對(duì)解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義,簡要流程如圖。

下列有關(guān)敘述正確的是()

_____卵（組）細(xì)胞謫器

FF?B|—@-

A.過程①、②分別應(yīng)用了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)

B.細(xì)胞培養(yǎng)中需提供5祝02,目的是調(diào)節(jié)細(xì)胞外液的滲透壓

C.胚胎干細(xì)胞可來源于囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，具有發(fā)育的全能性

D.將圖中獲得的組織器官移植給個(gè)體A,不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

6.將人細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合得到的人-鼠雜種細(xì)胞進(jìn)行長期培養(yǎng)，雜種細(xì)胞隨機(jī)丟失一部分

人的染色體后，染色體數(shù)目會(huì)保持穩(wěn)定。選取三種雜種細(xì)胞，對(duì)編碼人的芳燒羥化酶(AHH)

和磷酸甘油酸激酶(PGK)的基因進(jìn)行染色體定位研究，結(jié)果如表(“+”表示有，表示

無)。

人的染色體

雜種細(xì)胞AHHPGK

2號(hào)11號(hào)17號(hào)X

甲-+-+-+

乙++--+-

丙-+++-+

卜列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

A.人細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性

B.基因在染色體上的位置稱為基因座位

C.人細(xì)胞中11號(hào)染色體小于17號(hào)染色體

D.編碼AHH和PGK的基因分別在2號(hào)染色體和X染色體上

7.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，如圖所示，a、b、c表示現(xiàn)代工程技術(shù)，①②③分

別表示其對(duì)應(yīng)的結(jié)果，請(qǐng)據(jù)圖回答下面說法正確的是()

A.若a是胚胎分割技術(shù)，則產(chǎn)生的①中，所有個(gè)體的基因型和表現(xiàn)型一定相同

B.若b是體外受精技術(shù)，則形成②的過程屬于克隆

C.若c是核移植技術(shù)，則形成③的過程體現(xiàn)了動(dòng)物體細(xì)胞也具有全能性

D.①②③生產(chǎn)過程中的代孕母畜必須與供體母畜同期發(fā)情

8.目前，精子載體法逐漸成為最具誘惑力的制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物方法之一，該方法以精子作為外

源基因的載體，使精子攜帶外源基因進(jìn)入卵細(xì)胞受精。下圖表示利用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的

基本流程。下列說法正確的是

藕里Q一守

早期胚胎代孕母體轉(zhuǎn)基因以

成熟精子因的耗子

A.獲取外源基因通常用到的工具酶是限制酶和DNA連接酶

B.導(dǎo)入外源基因的精子與卵細(xì)胞結(jié)合后即可完成轉(zhuǎn)化過程

C.②采用體外受精技術(shù)，受精的標(biāo)志是觀察到兩個(gè)極體

D.④過程是胚胎移植，移植的早期胚胎通常是原腸胚

9.下列關(guān)于治療性克隆和生殖性克隆的說法，錯(cuò)誤的是（）

A.使用病人自己的細(xì)胞產(chǎn)生胰島細(xì)胞以治療糖尿病屬于治療性克隆

B.將一個(gè)克隆的胚胎植入一個(gè)女性子宮發(fā)育出嬰兒的過程屬于生殖性克隆

C.治療性克隆屬于無性生殖，生殖性克隆屬于有性生殖

D.治療性克隆和生殖性克隆技術(shù)均需要應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)

10.植物體細(xì)胞雜交需要分離出有活力的原生質(zhì)體，研究者通過實(shí)驗(yàn)研究了酶解時(shí)間對(duì)原生

質(zhì)體產(chǎn)量和活力的影響，結(jié)果如下。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

注：原生質(zhì)體活力=（有活力的原生質(zhì)體數(shù)/原生質(zhì)體總數(shù)）X100%

A.利用纖維素酶和果膠酶去壁后可分離得到原生質(zhì)體

B.隨前解時(shí)間延長兩種原生質(zhì)體產(chǎn)量均先增加后減少

C.適宜兩植物細(xì)胞的最佳酶解時(shí)間分別為10h和12h

D.原生質(zhì)體活力可通過質(zhì)壁分離與復(fù)原實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證

11.紫杉酥是一種高效抗癌的藥物。國內(nèi)某團(tuán)隊(duì)研究光照條件對(duì)紅豆杉愈傷組織生長和紫杉

醇含量的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表:

光照條

接種干重g*L-l收獲干重g,L-1紫杉醇含量%（干重）

件

光照4.339.130.0070

黑暗4.3812.100.0164

下列敘述正確的是（）

A.愈傷組織生長的原理是植物細(xì)胞具有全能性

B.愈傷組織培養(yǎng)過程要在無菌條件下進(jìn)行

C.光照能促進(jìn)愈傷組織的生長并提高紫杉醉含量

D.培養(yǎng)基中的有機(jī)物僅能為愈傷組織提供能量

12.2019年中國綠發(fā)會(huì)就《循環(huán)經(jīng)濟(jì)促進(jìn)法》的修訂提出了諸多

建議，循環(huán)經(jīng)濟(jì)是一種全新的經(jīng)濟(jì)發(fā)展模式，與會(huì)人員提出要讓

［產(chǎn)I，*

循環(huán)經(jīng)濟(jì)之“圓”（如圖所示）轉(zhuǎn)起來。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.生態(tài)工程是實(shí)現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)最重要的手段之一

B.循環(huán)經(jīng)濟(jì)系統(tǒng)的能量最終都來源于玉米等生產(chǎn)者固定的太陽能

C.讓循環(huán)經(jīng)濟(jì)之“圓”轉(zhuǎn)起來的實(shí)質(zhì)是實(shí)現(xiàn)物質(zhì)和能量的循環(huán)利用

D.循環(huán)經(jīng)濟(jì)可充分利用有機(jī)廢棄物，提高了系統(tǒng)的效益和能量利用率

13.生態(tài)工程是生態(tài)學(xué)、工程學(xué)、系統(tǒng)學(xué)、經(jīng)濟(jì)學(xué)等學(xué)科交叉而產(chǎn)生的新興學(xué)科。下列關(guān)于

生態(tài)工程基本原理的敘述，正確的是（）

A.“無廢棄物農(nóng)業(yè)”主要遵循的是物質(zhì)循環(huán)再生原理

B.珊瑚蟲和藻類通過共生實(shí)現(xiàn)“1+1>2"，主要遵循的是協(xié)調(diào)與平衡原理

C.“前面造林，后面砍林”現(xiàn)象，違反的是系統(tǒng)學(xué)與工程學(xué)原理

D.太湖中水體富營養(yǎng)化，引起大面積水華，違反的是物種多樣性原理

14.熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中某種DNA含量。其原理是：在PCR反應(yīng)體系中每加

入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針，當(dāng)Taq酶催化子鏈延伸至探針處,

會(huì)水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成。相

關(guān)敘述正確的是

A.引物與熒光探針都具特異性，與模板結(jié)合時(shí)都遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則

B.Taq酶可以催化子鏈沿著5'-3'方向延伸，需反應(yīng)體系中ATP供能

C.若擴(kuò)增n次，則共有2=1個(gè)熒光分子生成

D.若用上述技術(shù)檢測某基因的轉(zhuǎn)錄水平，則需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶

15.關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用的安全性，下列說法正確的是

A.對(duì)待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定，即堅(jiān)決禁止生物武器

B.對(duì)轉(zhuǎn)基因植物的外源DNA要認(rèn)真選擇，避免產(chǎn)生對(duì)人體有害或過敏的蛋白質(zhì)

C.我國不反對(duì)治療性克隆，允許有限制地進(jìn)行克隆人實(shí)驗(yàn)

D.一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題，要馬上停止實(shí)驗(yàn)，并銷毀重組生物

16.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述,不正確的是（）

A.用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織后,可用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液

B.少數(shù)細(xì)胞在連續(xù)培養(yǎng)50代后可獲得不死性,是某些基因選擇性表達(dá)的結(jié)果

C.根據(jù)在高倍鏡下觀察到基因突變的比例可推知某化學(xué)藥品的毒性

D.PEG誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞,經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能得到優(yōu)良動(dòng)物個(gè)體

17.科研人員研究了馬鈴薯莖尖外植體大小對(duì)幼苗的成苗率和脫毒率的影響，結(jié)果如圖。相

關(guān)敘述正確的是（）

莖尖大小/mm

A.培育脫毒苗所依據(jù)的原理有基因突變和細(xì)胞全能性

B.培育脫毒苗的過程中涉及脫分化和再分化兩個(gè)階段

C.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明莖尖越小脫毒率越高，成苗率越低

D.根據(jù)本實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)脫毒苗時(shí)莖尖的適宜大小為0.60mm

18.小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞，制備流程如卜.圖所示，下列敘述錯(cuò)誤

的是

ab

囊胚胚胎干細(xì)胞

A.取細(xì)胞b,僅僅進(jìn)行DNA分析不能鑒定動(dòng)物性別

B.細(xì)胞a和細(xì)胞b內(nèi)含有的核基因相同，但全能性高低不同

C.使用分割針分割囊胚期胚胎時(shí)，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)要盡可能地均等分割

D.為了獲得更多的囊胚，可注射激素促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多生殖細(xì)胞

二、非選擇題：本大題共4小題。

19.（15分）雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細(xì)胞因子，廣泛用于動(dòng)物領(lǐng)域的

抗病毒治療?？蒲腥藛T將雞干擾素基因作為目的基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法

導(dǎo)入煙草，以獲得抗病毒煙草。如圖為科研人員制備能合成雞干擾素的煙草愈傷組織細(xì)胞的

流程，①~④表示相關(guān)的操作，兩種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示。請(qǐng)回答下列問題:

限制第識(shí)別序列和切割位點(diǎn)

￡<OR1G：AATTC

/AvnllI

GCATCC

堡”煙草愈傷⑥?能合成我干擾素的

組織細(xì)胞姻草電傷組織細(xì)胞

⑴步驟①中，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是

科研人員還在兩種引物的一端分別加上了和序

列，以便于后續(xù)的剪切和連接。為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化,構(gòu)建表達(dá)載體需用兩種限制酶,

選擇的原則是________。

A.Ti質(zhì)粒內(nèi)，每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)

B.目的基因編碼蛋白質(zhì)的序列中,每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)

C.酶切后，目的基因形成的兩個(gè)黏性末端序列不相同

D.酶切后,Ti質(zhì)粒形成的兩個(gè)黏性末端序列相同

（2）步驟②所構(gòu)建的基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需元件還有,步驟

③中需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞。

（3）步驟④中,科研人員提取愈傷組織細(xì)胞的RNA后,先獲得cDNA,再進(jìn)行PCR擴(kuò)增,若最

終未能檢測出干擾素基因，其可能原因是。

（4）用煙草花葉病毒對(duì)獲得的轉(zhuǎn)基因煙草和普通煙草進(jìn)行接種實(shí)驗(yàn)，接種后第19天對(duì)照

組植株進(jìn)入病情指數(shù)（植物受病毒侵染的嚴(yán)重程度）為100的平臺(tái)期,而轉(zhuǎn)基因植株在第

—天才進(jìn)入平臺(tái)期,但此時(shí)的病情指數(shù)為79。說明轉(zhuǎn)基因煙草植株對(duì)病毒的侵染表

現(xiàn)出一定的抗性,但抗性較低,可能的原因有。

20.（14分）犬細(xì)小病毒（CPV）感染幼犬后會(huì)引發(fā)出血性腸炎或心肌炎，VP2蛋白是其主要

的抗原。下圖是利用小鼠制備抗CPV單克隆抗體的基本流程示意圖?；卮鹣铝袉栴}:

B淋巴細(xì)胞￥

￥￥

雜交喃細(xì)胞單克隆抗體

骨髓瘤細(xì)胞

骨幡瘤細(xì)胞培養(yǎng)

（1）單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)是o抗體是由己免疫的B淋巴細(xì)胞分泌的，生產(chǎn)

單克隆抗體時(shí)，一般不直接培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，原因是

(2)過程①是給實(shí)驗(yàn)小鼠注射,目的是獲得。

(3)過程②采用的技術(shù)是,得到的是多種類型的細(xì)胞，原因是。對(duì)

獲得的雜種細(xì)胞選擇培養(yǎng)后，還需要在體外進(jìn)行，并經(jīng)過多次篩選才能獲得數(shù)

量足夠多的能分泌抗體的雜交瘤細(xì)胞。

21.(15分)1972年，Carlson通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得粉藍(lán)煙草和郎氏煙草的雜種植

株。過程簡圖如圖所示，其中①?④表示過程。請(qǐng)回答：

(1)①過程為酶解去壁，需向反應(yīng)體系中加入的酶是，并用甘露醇將反應(yīng)體系的滲透壓調(diào)

到水平。植物細(xì)胞在這樣的反應(yīng)體系中處理，將獲得球形的原生質(zhì)體。在去壁前需對(duì)粉藍(lán)煙

草組織和朗氏煙草組織進(jìn)行處理。

(2)圖中所示這種借助細(xì)胞雜交的方法，將不同來源的基因結(jié)合到一起，再對(duì)雜種細(xì)胞進(jìn)

行培養(yǎng)，獲得具有特定性狀的新植株的技術(shù)屬于技術(shù)。

(3)獲得再生植株的途徑很多。由于腋芽中存在分生組織，故也可采用帶腋芽莖段不通過

階段而直接培養(yǎng)成叢狀苗，再誘導(dǎo)生根獲得再生植株。優(yōu)良品種的快速繁殖通常采用此方法,

原因是

(4)當(dāng)前多地過度開發(fā)旅游資源造成生態(tài)環(huán)境的破壞，為減緩生態(tài)環(huán)境的破壞，保護(hù)自然

旅游資源，通過生態(tài)旅游工程對(duì)旅游設(shè)施進(jìn)行處理，能獲得較佳的經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益和生

態(tài)效應(yīng)。另外當(dāng)前全國興起新農(nóng)村建設(shè)，提高農(nóng)民的生活水平，只有促進(jìn)的協(xié)調(diào)發(fā)展，才能

促進(jìn)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)和生態(tài)的發(fā)展。

22.(15分)隨著生物技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)代的試管嬰兒技術(shù)不僅能解決部分人的生育問題，還

能用于部分腫瘤疾病、遺傳性疾病的治療等，實(shí)現(xiàn)優(yōu)生優(yōu)育?；卮鹣铝袉栴}：

(1)培育試管嬰兒時(shí)，為了提高受孕率，需培植多個(gè)胚胎，因此需要用處理，促進(jìn)女性排

出更多的卵子。

（2）從受精卵到原腸胚需依次經(jīng)歷哪些時(shí)期？卵裂期一。

（3）一對(duì)夫妻，妻子是血友病患者，而丈夫正常。為了生育一個(gè)健康的孩子，進(jìn)行胚胎移

植前需要進(jìn)行

，目前最有效最準(zhǔn)確的方法是SRY-PCR法，操作的基本程序是：從被檢測的囊胚中取出幾個(gè)

（填“滋養(yǎng)層”或“內(nèi)細(xì)胞團(tuán)”）細(xì)胞，提取DNA進(jìn)行擴(kuò)增，用位于Y染色體上的性別決定

基因（即SRY基因）制成的探針進(jìn)行檢測，若未出現(xiàn)雜交鏈，胚胎性別為，而基因工程中

也會(huì)用到DNA探針。

（4）如圖是治療性克隆時(shí)獲取病人胚胎干細(xì)胞的兩種方法，其中方法一中③的獲得用到了

技術(shù)；方法二中獲得④運(yùn)用的原理是-

第十三單元現(xiàn)代生物科技專題

B卷滾動(dòng)提升檢測

一、選擇題：本大題共18個(gè)小題。第「13題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求，每題2分，第

14-18題有多項(xiàng)符合題目要求，全部選對(duì)的得3分，選對(duì)但不全的得1分，有選錯(cuò)的得

0分。

1.下表中列出了兒種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的

酶切位點(diǎn)。下列說法正確的是。

限制酶BamHIHmdlllEcoRISmal

識(shí)別序列及G!GATCCA4AGCTTG4AATTCCCCiGGG

切割位點(diǎn)CCTAGtGTTOGAtACTTMtGGGGtCCC

￡coRl目的基因￡caR[

I.....I.........i

IIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIII外?DNA

tII

ISIMIHindi

圖2

A.重組DNA技術(shù)所用的工具酶是限制酶、DNA連接酶和運(yùn)載體

B.只有用同種限制酶切割DNA產(chǎn)生的粘性末端才能互補(bǔ)

C.用圖中質(zhì)粒和外源基因DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，可使用Smal切割

D.使用EcoRI同時(shí)處理質(zhì)粒和外源DNA,可能會(huì)發(fā)生質(zhì)?；蛘吣康幕虻淖陨憝h(huán)化

【答案】D

【解析】重組DNA技術(shù)中常用的工具醐有限制能和DNA連接酶，運(yùn)載體不屬于工具酶，A

錯(cuò)誤；可用同種限制酶切割DNA產(chǎn)生互補(bǔ)的粘性末端，也可用雙酶切法切割DNA產(chǎn)生互補(bǔ)

的粘性末端，B錯(cuò)誤；若使用SmaI切割質(zhì)粒和外源基因DNA會(huì)導(dǎo)致質(zhì)粒中抗生素抗性基因

（標(biāo)記基因）和目的基因被破壞，C錯(cuò)誤；使用EcoRI同時(shí)處理質(zhì)粒和外源DNA,可能會(huì)產(chǎn)

生質(zhì)粒與質(zhì)粒的結(jié)合、目的基因與目的基因的結(jié)合即自身環(huán)化，1）正確。

2.ChlL基因是藍(lán)藻擬核DNA上控制葉綠素合成的基因。為了研究該基因?qū)θ~綠素合成的控

制，需要構(gòu)建缺失ChlL基因的藍(lán)藻細(xì)胞。構(gòu)建的過程如下圖。相關(guān)敘述中，正確的是（）

A.②過程共形成2個(gè)磷酸二酯鍵

B.①②過程都需要使用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶

C.該項(xiàng)技術(shù)操作成功的標(biāo)志是目的基因的表達(dá)

D.紅霉素抗性基因是標(biāo)記基因，用于篩選含有ChlL基因的受體細(xì)胞

【答案】B

【解析】②過程共形成4個(gè)磷酸二酯鍵，A錯(cuò)誤；①過程和②過程需要限制前切割和DNA連

接酶連接，形成重組質(zhì)粒，B正確；因最終得到的是無ChlL基因的藍(lán)藻，故操作成功的標(biāo)

志并不是目的基因的表達(dá)，C錯(cuò)誤；插入紅霉素抗性基因后ChlL基因被破壞，因此不可能

是篩選含有ChlL基因的受體細(xì)胞，D錯(cuò)誤。

3.植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞工程中所用技術(shù)或方法與原理不相符的是（）

A.植物組織培養(yǎng)和單克隆抗體一一細(xì)胞的全能性

B.纖維素酶、果膠酶處理植物細(xì)胞壁一一酶的專一性

C.原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合一一細(xì)胞膜的流動(dòng)性

D.紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)一一細(xì)胞增殖

【答案】A

【解析】植物組織培養(yǎng)技術(shù)利用了細(xì)胞的全能性，單克隆抗體的制備利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性

和細(xì)胞增殖的原理，A錯(cuò)誤；細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，利用酶的專一性，纖維素

酶和果膠酶能夠去細(xì)胞壁，B正確；原生質(zhì)體融合和動(dòng)物細(xì)胞融合的過程中，都利用了細(xì)胞

膜的流動(dòng)性，C正確；紫草細(xì)胞培養(yǎng)和雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)都利用了細(xì)胞增殖的原理，從而獲

得相應(yīng)的細(xì)胞產(chǎn)物，D正確。

4.2019年1月24日，我國科學(xué)家宣布世界首批疾病克隆猴在中國誕生，這標(biāo)志著中國體細(xì)

胞克隆技術(shù)走向成熟，實(shí)驗(yàn)用疾病模型猴批量克隆“照進(jìn)現(xiàn)實(shí)”，全球?qū)嶒?yàn)動(dòng)物使用數(shù)量有

望大幅降低，藥物研發(fā)駛?cè)搿翱燔嚨馈?。下列相關(guān)敘述正確的是()

A.體細(xì)胞核移植技術(shù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞的全能性

B.5只克隆掰猴細(xì)胞核基因型與核供體細(xì)胞一致

C.用于核移植的受體細(xì)胞通常選擇處于減數(shù)第一次分裂時(shí)期的卵母細(xì)胞

D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，將其置于含95%0z的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)以滿足細(xì)胞代謝

【答案】B

【解析】體細(xì)胞核移植技術(shù)的原理是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，A錯(cuò)誤；5只克隆舜猴細(xì)胞核基

因型與核供體細(xì)胞一致，B正確；用于核移植的受體細(xì)胞通常選擇處于減數(shù)第二次分裂時(shí)期

的卵母細(xì)胞，C錯(cuò)誤；.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，將其置于含95%空氣和5%C0z的混合氣體的培養(yǎng)箱

中培養(yǎng)以滿足細(xì)胞代謝，D錯(cuò)誤。

5.治療性克隆對(duì)解決供體器官缺乏和器官移植后免疫排斥反應(yīng)具有重要意義,簡要流程如圖。

下列有關(guān)敘述正確的是()

『運(yùn)?！钡?/p>

器言

體細(xì)胞細(xì)胞核

A.過程①、②分別應(yīng)用了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)

B.細(xì)胞培養(yǎng)中需提供5%C02,目的是調(diào)節(jié)細(xì)胞外液的滲透壓

C.胚胎干細(xì)胞可來源于囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，具有發(fā)育的全能性

D.將圖中獲得的組織器官移植給個(gè)體A,不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

【答案】C

【解析】過程①是核移植技術(shù)，過程②是早期胚胎培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；細(xì)胞培養(yǎng)中需提供5%C0z,

目的是維持培養(yǎng)液的pH值，B錯(cuò)誤；胚胎干細(xì)胞來源于囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或原始性腺，具有

發(fā)育的全能性，C正確；圖中的重組細(xì)胞的細(xì)胞核來自個(gè)體B,因此將圖中獲得的組織器官

移植給A個(gè)體，會(huì)發(fā)生免疫排斥，D錯(cuò)誤。

6.將人細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合得到的人-鼠雜種細(xì)胞進(jìn)行長期培養(yǎng)，雜種細(xì)胞隨機(jī)丟失一部分

人的染色體后，染色體數(shù)目會(huì)保持穩(wěn)定。選取三種雜種細(xì)胞，對(duì)編碼人的芳煌羥化酶(AHH)

和磷酸甘油酸激酶(PGK)的基因進(jìn)行染色體定位研究，結(jié)果如表(“+”表示有，表示

無)。

人的染色體

雜種細(xì)胞AHHPGK

2號(hào)11號(hào)17號(hào)X

甲-+-+-+

乙++--4--

丙-+++-+

下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

A.人細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性

B.基因在染色體上的位置稱為基因座位

C.人細(xì)胞中11號(hào)染色體小于17號(hào)染色體

D.編碼AHI1和PGK的基因分別在2號(hào)染色體和X染色體上

【答案】C

【解析】人細(xì)胞與小鼠細(xì)胞融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性，A正確；基因在染色體上

的位置稱為基因座位，B正確；人細(xì)胞中11號(hào)染色體大于17號(hào)染色體，C錯(cuò)誤；根據(jù)圖表

分析可判斷，編碼AHII的基因在2號(hào)染色體上，編碼PGK的基因在X染色體上，D正確。

7.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，如圖所示，a、b、c表示現(xiàn)代工程技術(shù)，①②③分

別表示其對(duì)應(yīng)的結(jié)果，請(qǐng)據(jù)圖回答下面說法正確的是()

/u、

①②③

A.若a是胚胎分割技術(shù)，則產(chǎn)生的①中，所有個(gè)體的基因型和表現(xiàn)型一定相同

B.若b是體外受精技術(shù)，則形成②的過程屬于克隆

C.若c是核移植技術(shù)，則形成③的過程體現(xiàn)了動(dòng)物體細(xì)胞也具有全能性

D.①②③生產(chǎn)過程中的代孕母畜必須與供體母畜同期發(fā)情

【答案】D

【解析】利用胚胎分割技術(shù)得到的個(gè)體是由同一個(gè)受精卵分裂發(fā)育的，所有個(gè)體的基因型相

同，但表現(xiàn)型由基因型和環(huán)境共同決定，故表現(xiàn)型不一定相同，A錯(cuò)誤；體外受精屬于有性

生殖，而克隆屬于無性生殖，B錯(cuò)誤；核移植技術(shù)體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性，C錯(cuò)誤；①

②③生產(chǎn)過程均需進(jìn)行胚胎移植，代孕母畜必須與供體母畜同期發(fā)情，以確保生殖器官的生

理環(huán)境相同，D正確。

8.目前，精子載體法逐漸成為最具誘惑力的制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物方法之一，該方法以精子作為外

源基因的載體，使精子攜帶外源基因進(jìn)入卵細(xì)胞受精。下圖表示利用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的

基本流程。下列說法正確的是

標(biāo)記的外源普因*胞

亍①在巴曦里

/知卵早期胚胎代G孕母體—轉(zhuǎn)3基因儀

成熟制?子因的靶子

A.獲取外源基因通常用到的工具酶是限制酶和DNA連接酶

B.導(dǎo)入外源基因的精子與卵細(xì)胞結(jié)合后即可完成轉(zhuǎn)化過程

C.②采用體外受精技術(shù)，受精的標(biāo)志是觀察到兩個(gè)極體

D.④過程是胚胎移植，移植的早期胚胎通常是原腸胚

【答案】C

【解析】獲取外源基因通常用到的工具酶是限制酶，A錯(cuò)誤；導(dǎo)入外源基因的精子與卵細(xì)胞

結(jié)合后且外源基因能進(jìn)行復(fù)制并完成了表達(dá)，才說明完成了轉(zhuǎn)化過程，B錯(cuò)誤；②采用體外

受精技術(shù)，受精的標(biāo)志是觀察到兩個(gè)極體，C正確；④過程是胚胎移植，移植的早期胚胎通

常是桑根胚或囊胚，D錯(cuò)誤。

9.下列關(guān)于治療性克隆和生殖性克隆的說法，錯(cuò)誤的是（）

A.使用病人自己的細(xì)胞產(chǎn)生胰島細(xì)胞以治療糖尿病屬于治療性克隆

B.將一個(gè)克隆的胚胎植入一個(gè)女性子宮發(fā)育出嬰兒的過程屬于生殖性克隆

C.治療性克隆屬于無性生殖，生殖性克隆屬于有性生殖

D.治療性克隆和生殖性克隆技術(shù)均需要應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)

【答案】C

【解析】要把病人的胚胎干細(xì)胞在一定的條件下，通過離體培養(yǎng)和誘導(dǎo)分化形成胰島細(xì)胞以

治療糖尿病，屬于治療性克??；生殖性克隆就是以產(chǎn)生新個(gè)體為目的克隆，即用生殖技術(shù)將

一個(gè)克隆的胚胎植入一個(gè)女性子宮發(fā)育出嬰兒的過程；治療性克隆和生殖性克隆都屬于無性

生殖；治療性克隆和生殖性克隆技術(shù)均需要應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)。故選Q

10.植物體細(xì)胞雜交需要分離出有活力的原生質(zhì)體，研究者通過實(shí)驗(yàn)研究了酶解時(shí)間對(duì)原生

質(zhì)體產(chǎn)量和活力的影響，結(jié)果如下。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

注：原生質(zhì)體活力=（有活力的原生質(zhì)體數(shù)/原生質(zhì)體總數(shù)）X100%

A.利用纖維素酶和果膠酶去壁后可分離得到原生質(zhì)體

B.隨酶解時(shí)間延長兩種原生質(zhì)體產(chǎn)量均先增加后減少

C.適宜兩植物細(xì)胞的最佳酶解時(shí)間分別為10h和12h

D.原生質(zhì)體活力可通過質(zhì)壁分離與復(fù)原實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證

【答案】I）

【解析】細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，則利用纖維素酶和果膠酶去壁后可分離得到原

生質(zhì)體，A正確；據(jù)圖分析，隨酶解時(shí)間延長兩種原生質(zhì)體產(chǎn)量均先增加后減少，B正確；

據(jù)圖分析，清水紫花苜蓿和里奧百脈根的最佳酶解時(shí)間分別為10h和12h,C正確；原生質(zhì)

體已經(jīng)去除細(xì)胞壁，不能發(fā)生質(zhì)壁分離和復(fù)原，D錯(cuò)誤。

11.紫杉醇是一種高效抗癌的藥物。國內(nèi)某團(tuán)隊(duì)研究光照條件對(duì)紅豆杉愈傷組織生長和紫杉

醇含量的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表：

光照條

接種干重g*L-l收獲干重g*L-l紫杉醇含量%（干重）

件

光照4.339.130.0070

黑暗4.3812.100.0164

下列敘述正確的是（）

A.愈傷組織生長的原理是植物細(xì)胞具有全能性

B.愈傷組織培養(yǎng)過程要在無菌條件下進(jìn)行

C.光照能促進(jìn)愈傷組織的生長并提高紫杉醇含量

D.培養(yǎng)基中的有機(jī)物僅能為愈傷組織提供能量

【答案】B

【解析】愈傷組織生長的原理是細(xì)胞增殖，A錯(cuò)誤；愈傷組織培養(yǎng)過程要在無菌條件下進(jìn)行，

B正確；光照抑制愈傷組織的形成，C錯(cuò)誤；培養(yǎng)基中的有機(jī)物能為愈傷組織提供能量和營

養(yǎng)，D錯(cuò)誤。

12.2019年中國綠發(fā)會(huì)就《循環(huán)經(jīng)濟(jì)促進(jìn)法》的修訂提出了諸多

建議，循環(huán)經(jīng)濟(jì)是一種全新的經(jīng)濟(jì)發(fā)展模式，與會(huì)人員提出要讓

循環(huán)經(jīng)濟(jì)之“圓”（如圖所示）轉(zhuǎn)起來。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.生態(tài)工程是實(shí)現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)最重要的手段之一

B.循環(huán)經(jīng)濟(jì)系統(tǒng)的能量最終都來源于玉米等生產(chǎn)者固定的太陽能

C.讓循環(huán)經(jīng)濟(jì)之“圓”轉(zhuǎn)起來的實(shí)質(zhì)是實(shí)現(xiàn)物質(zhì)和能量的循環(huán)利

用

D.循環(huán)經(jīng)濟(jì)可充分利用有機(jī)廢棄物，提高了系統(tǒng)的效益和能

量利用率

【答案】c

【解析】生態(tài)工程是實(shí)現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)最重要的手段之一，A正確；循環(huán)經(jīng)濟(jì)系統(tǒng)的能量最終都

來源于玉米等生產(chǎn)者固定的太陽能，B正確；能量不能循環(huán)利用，C錯(cuò)誤；循環(huán)經(jīng)濟(jì)可充分

利用有機(jī)廢棄物，提高了系統(tǒng)的效益和能量利用率，D正確。

13.生態(tài)工程是生態(tài)學(xué)、工程學(xué)、系統(tǒng)學(xué)、經(jīng)濟(jì)學(xué)等學(xué)科交叉而產(chǎn)生的新興學(xué)科。下列關(guān)于

生態(tài)工程基本原理的敘述，正確的是（）

A.“無廢棄物農(nóng)業(yè)”主要遵循的是物質(zhì)循環(huán)再生原理

B.珊瑚蟲和藻類通過共生實(shí)現(xiàn)“1+1>2"，主要遵循的是協(xié)調(diào)與平衡原理

C.“前面造林，后面砍林”現(xiàn)象，違反的是系統(tǒng)學(xué)與工程學(xué)原理

D.太湖中水體富營養(yǎng)化，引起大面積水華，違反的是物種多樣性原理

【答案】A

【解析】“無廢棄物農(nóng)業(yè)”實(shí)現(xiàn)了土壤養(yǎng)分如氮、磷、鉀及微量元素的循環(huán)利用，主要遵循

的是物質(zhì)循環(huán)再生原理，A正確；珊瑚蟲和藻類通過共生實(shí)現(xiàn)“1+1>2"，主要遵循的是系

統(tǒng)整體性原理，B錯(cuò)誤；

“前面造林，后面砍林”現(xiàn)象主要是農(nóng)民的生計(jì)得不到保證所致，違反的是整體性原理,C錯(cuò)

誤；太湖中水體富營養(yǎng)化，引起大面積水華，說明生物的數(shù)量超過了環(huán)境承載力的限度，違

反的是協(xié)調(diào)與平衡原理，D錯(cuò)誤。

14.熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中某種DNA含量。其原理是：在PCR反應(yīng)體系中每加

入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針，當(dāng)Taq酶催化子鏈延伸至探針處,

會(huì)水解探針，使熒光監(jiān)測系統(tǒng)接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成。相

關(guān)敘述正確的是

熒光探針

引物I

A.引物與熒光探針都具特異性，與模板結(jié)合時(shí)都遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則

B.Taq醐可以催化子鏈沿著5'—3'方向延伸，需反應(yīng)體系中ATP供能

C.若擴(kuò)增n次，則共有2"-1個(gè)熒光分子生成

D.若用上述技術(shù)檢測某基因的轉(zhuǎn)錄水平，則需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶

【答案】ACD

【解析】引物與探針均具特異性，與模板結(jié)合時(shí)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，A正確；根據(jù)圖示

中引物延伸的方向可以確定，Taq酶只能從引物的3'端延伸子鏈，催化子鏈沿著5'-3'

方向延伸，需dNTP作為原料，B錯(cuò)誤；據(jù)題意可知，擴(kuò)增1次，子代中有1個(gè)熒光分子，

擴(kuò)增2次，子代中有3個(gè)熒光分子，若擴(kuò)增n次，則共有2"-1個(gè)熒光分子生成，C正確；熒

光探針為DNA序列，基因的轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物是mRNA,若用上述技術(shù)檢測某基因的轉(zhuǎn)錄水平，則

需要用到逆轉(zhuǎn)錄酶，D正確。

15.關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用的安全性，下列說法正確的是

A.對(duì)待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定，即堅(jiān)決禁止生物武器

B.對(duì)轉(zhuǎn)基因植物的外源DNA要認(rèn)真選擇，避免產(chǎn)生對(duì)人體有害或過敏的蛋白質(zhì)

C.我國不反對(duì)治療性克隆，允許有限制地進(jìn)行克隆人實(shí)驗(yàn)

D.一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題，要馬上停止實(shí)驗(yàn)，并銷毀重組生物

【答案】ABD

【解析】對(duì)待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅(jiān)定，即堅(jiān)決禁止生物武器，A正確；對(duì)轉(zhuǎn)基因植物

外源DNA要進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免產(chǎn)生對(duì)人體有害的或過敏的蛋白質(zhì)，B正確；中國對(duì)于克隆

人的態(tài)度是不反對(duì)治療性克隆，禁止進(jìn)行克隆人的實(shí)驗(yàn)，C錯(cuò)誤；一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)

了安全性問題，要馬上停止實(shí)驗(yàn)，并銷毀重組生物，D正確。

16.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述，不正確的是（）

A.用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織后,可用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液

B.少數(shù)細(xì)胞在連續(xù)培養(yǎng)50代后可獲得不死性,是某些基因選擇性表達(dá)的結(jié)果

C.根據(jù)在高倍鏡下觀察到基因突變的比例可推知某化學(xué)藥品的毒性

D.PEG誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞,經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能得到優(yōu)良動(dòng)物個(gè)體

【答案】BCD

【解析】用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織后，可用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液,A正確;

少數(shù)細(xì)胞在連續(xù)培養(yǎng)50代后可獲得不死性,具有癌變特性,是某些基因突變的結(jié)果,B錯(cuò)誤;

基因突變?cè)诟弑剁R下是觀察不到的,C錯(cuò)誤；由于動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到限制，現(xiàn)有條件下,

動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞不能培育成新個(gè)體,D錯(cuò)誤。

17.科研人員研究了馬鈴薯莖尖外植體大小對(duì)幼苗的成苗率和脫毒率的影響，結(jié)果如圖。相

關(guān)敘述正確的是（）

莖尖大小/mm

A.培育脫毒苗所依據(jù)的原理有基因突變和細(xì)胞全能性

B.培育脫毒苗的過程中涉及脫分化和再分化兩個(gè)階段

C.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明莖尖越小脫毒率越高，成苗率越低

D.根據(jù)本實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)脫毒苗時(shí)莖尖的適宜大小為0.60mm

【答案】BC

【解析】馬鈴薯莖尖病毒極少甚至無病毒，因此可利用馬鈴薯莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)形成脫毒苗,

所依據(jù)的原理是細(xì)胞全能性，A錯(cuò)誤；培育脫毒苗的過程中涉及脫分化和再分化兩個(gè)階段,

B正確；由圖可知，莖尖越小，脫毒率越高，成苗率越低，C正確；在莖尖外植體大小為0.27

mm時(shí)，脫毒率和成苗率均較高，因此馬鈴薯脫毒培養(yǎng)中莖尖外植體的適宜大小為0.27mm,

D錯(cuò)誤。

18.小鼠胚胎干細(xì)胞經(jīng)定向誘導(dǎo)可獲得多種功能細(xì)胞，制備流程如下圖所示，下列敘述錯(cuò)誤

的是

ab

囊胚胚胎干細(xì)胞

A.取細(xì)胞b,僅僅進(jìn)行DNA分析不能鑒定動(dòng)物性別

B.細(xì)胞a和細(xì)胞b內(nèi)含有的核基因相同，但全能性高低不同

C.使用分割針分割囊胚期胚胎時(shí)，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)要盡可能地均等分割

D.為了獲得更多的囊胚，可注射激素促進(jìn)雄鼠產(chǎn)生更多生殖細(xì)胞

【答案】AD

【解析】細(xì)胞b是滋養(yǎng)層細(xì)胞，通過DNA分析可以鑒定動(dòng)物性別，A錯(cuò)誤；細(xì)胞a是內(nèi)細(xì)胞

團(tuán)，細(xì)胞b是滋養(yǎng)層細(xì)胞，兩者來源相同，細(xì)胞內(nèi)核基因相同，但是滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育層

胎膜和胎盤，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)發(fā)育成胎兒的各種組織，所以全能性高低不同，B正確：進(jìn)行胚胎分

割時(shí)，要盡可能的將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，C正確；為了獲得更多的囊胚，可注射激素促進(jìn)雌

鼠產(chǎn)生更多生殖細(xì)胞，D錯(cuò)誤。

二、非選擇題：本大題共4小題。

19.（15分）雞干擾素是一種具有高效和廣譜抗病毒作用的細(xì)胞因子，廣泛用于動(dòng)物領(lǐng)域的

抗病毒治療?？蒲腥藛T將雞干擾素基因作為目的基因,構(gòu)建基因表達(dá)載體,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法

導(dǎo)入煙草，以獲得抗病毒煙草。如圖為科研人員制備能合成雞干擾素的煙草愈傷組織細(xì)胞的

流程，①~④表示相關(guān)的操作，兩種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如表所示。請(qǐng)回答下列問題:

限制監(jiān)識(shí)別序列和切割位點(diǎn)

￡1

GA.ATTC

fkvnllI

GGATCC

感一煙草電傷④.能合成雞干擾素的

組織細(xì)胞煙草愈傷組織細(xì)胞

⑴步驟①中，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是

科研人員還在兩種引物的一端分別加上了和序

列，以便于后續(xù)的剪切和連接。為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化,構(gòu)建表達(dá)載體需用兩種限制酶,

選擇的原則是。

A.Ti質(zhì)粒內(nèi)，每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)

B.目的基因編碼蛋白質(zhì)的序列中,每種限制酶只有一個(gè)切割位點(diǎn)

C.醐切后，目的基因形成的兩個(gè)黏性末端序列不相同

D.酶切后,Ti質(zhì)粒形成的兩個(gè)黏性末端序列相同

（2）步驟②所構(gòu)建的基因表達(dá)載體中未標(biāo)注出的必需元件還有步驟

③中需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞。

（3）步驟④中,科研人員提取愈傷組織細(xì)胞的RNA后,先獲得cDNA,再進(jìn)行PCR擴(kuò)增,若最

終未能檢測出干擾素基因,其可能原因是。

（4）用煙草花葉病毒對(duì)獲得的轉(zhuǎn)基因煙草和普通煙草進(jìn)行接種實(shí)驗(yàn),接種后第19天對(duì)照

組植株進(jìn)入病情指數(shù)（植物受病毒侵染的嚴(yán)重程度）為100的平臺(tái)期，而轉(zhuǎn)基因植株在第

一天才進(jìn)入平臺(tái)期,但此時(shí)的病情指數(shù)為79o說明轉(zhuǎn)基因煙草植株對(duì)病毒的侵染表

現(xiàn)出一定的抗性,但抗性較低,可能的原因有o

【答案】（15分）（1）雞干擾素基因兩端的部分核甘酸序列（2分）GAATTC（2分）GGATCC

（2分）

AC（1分）

（2）復(fù)制原點(diǎn)（1分）Ca"（1分）

（3）雞干擾素基因未能導(dǎo)入煙草愈傷組織細(xì)胞或?qū)霟煵萦鷤M織細(xì)胞的雞干擾素基因未

能轉(zhuǎn)錄（2分）

（4）22（2分）實(shí)驗(yàn)得到的干擾素表達(dá)量較低，未能很好啟動(dòng)機(jī)體產(chǎn)生抗性或病毒接

種量過大，相對(duì)來說干擾素誘導(dǎo)調(diào)控作用滯后或植物體內(nèi)缺乏干擾素受體，導(dǎo)致外源基因表

達(dá)的干擾素誘導(dǎo)或調(diào)控作用減弱（2分）

【解析】分析圖解，圖中過程①表示獲取目的基因，過程②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，過程

③表示將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌，過程④表示目的基因的檢測和鑒定。

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增干擾素基因時(shí)，設(shè)計(jì)引物序列的主要依據(jù)是干擾素基因兩端的部分

核甘酸序列；由于需要用EcoRI、BamllI兩種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，因此科研人員

還在兩種引物的一端分別加上了GAATTC和GGATCC序列，以便于后續(xù)的剪切和連接。

為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，構(gòu)建表達(dá)載體需用兩種限制酶，Ti質(zhì)粒內(nèi)，每種限制酶只有一

個(gè)切割位點(diǎn)，A正確：

目的基因編碼蛋白質(zhì)的序列中，不能有限制酶的切割位點(diǎn)，B錯(cuò)誤；

酶切后，目的基因形成的兩個(gè)黏性末端序列不相同，否則會(huì)自我環(huán)化，C正確；

酶切后，Ti質(zhì)粒形成的兩個(gè)黏性末端序列應(yīng)該不同，否則會(huì)自我連接，D錯(cuò)誤。

故選AC。

（2）基因表達(dá)載體必需具備的成分有目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子和復(fù)制原點(diǎn)，

圖中還缺復(fù)制原點(diǎn)；微生物細(xì)胞作為受體細(xì)胞時(shí)，需要鈣離子處理使其變?yōu)楦惺軕B(tài)細(xì)胞，因

此過程③中需先用Ca"（或CaCk）處理農(nóng)桿菌以便將基因表達(dá)載體導(dǎo)入細(xì)胞。

（3）提取的愈傷組織細(xì)胞的RNA通過逆轉(zhuǎn)錄過程得到DNA：最終未能檢測出干擾素基因，

可能是因?yàn)殡u干擾素基因未能導(dǎo)入煙草愈傷組織細(xì)胞或?qū)霟煵萦鷤M織細(xì)胞的雞干擾素

基因未能轉(zhuǎn)錄。

（4）據(jù)圖分析，接種后第19天對(duì)照組植株進(jìn)入病情指數(shù)為100的平臺(tái)期，而轉(zhuǎn)基因植株在

第22天才進(jìn)入平臺(tái)期，且此時(shí)的病情指數(shù)為79,說明轉(zhuǎn)基因煙草植株對(duì)病毒的侵染表現(xiàn)出

一定的抗性，但抗性較低，可能是因?yàn)閷?shí)驗(yàn)得到的干擾素表達(dá)量較低，未能很好啟動(dòng)機(jī)體產(chǎn)

生抗性（或病毒接種量過大，相對(duì)來說干擾素誘導(dǎo)調(diào)控作用滯后；或植物體內(nèi)缺乏干擾素受

體，導(dǎo)致外源基因表達(dá)的干擾素誘導(dǎo)或調(diào)控作用減弱）。

20.（14分）犬細(xì)小病毒（CPV）感染幼犬后會(huì)引發(fā)出血性腸炎或心肌炎，VP2蛋白是其主要

的抗原。下圖是利用小鼠制備抗CPV單克隆抗體的基本流程示意圖?；卮鹣铝袉栴}：

（1）單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)是?？贵w是由已免疫的B淋巴細(xì)胞分泌的，生產(chǎn)

單克隆抗體時(shí)，一般不直接培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，原因是。

（2）過程①是給實(shí)驗(yàn)小鼠注射，目的是獲得_____。

（3）過程②采用的技術(shù)是,得到的是多種類型的細(xì)胞，原因是o對(duì)

獲得的雜種細(xì)胞選擇培養(yǎng)后，還需要在體外進(jìn)行,并經(jīng)過多次篩選才能獲得數(shù)

量足夠多的能分泌抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【答案】（14分）（1）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（2分）B淋巴細(xì)胞不能無限增殖，骨髓瘤細(xì)

胞不能分泌抗體（2分）

（2）VP2蛋白（或滅活的CPV）（2分）誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能分泌抗VP2蛋白抗體的B淋

巴細(xì)胞（2分）

（3）動(dòng)物細(xì)胞融合（2分）細(xì)胞融合是隨機(jī)的，且不能百分之百成功融合（2分）

克隆化培養(yǎng)和抗體檢測（2分）

【解析】（1）單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。B淋巴細(xì)胞不能無限增殖，骨髓瘤細(xì)

胞不能分泌抗體，但二者融合的雜交瘤細(xì)胞既能無限增殖，又能分泌抗體。

（2）過程①是給實(shí)驗(yàn)小鼠注射VP2蛋白（或滅活的CPV）,目的

粉藍(lán)煙草組織郎氏煙草組織

①…工

是誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生能分泌抗VP2蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞。?

郎氏如草

（3）過程②采用的技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞融合，由于細(xì)胞隨機(jī)融合,粉面煙草

原生質(zhì)體原生質(zhì)體

且不能百分之百成功融合，因此獲得的是多種類型的細(xì)胞，包

②

括未融合的細(xì)胞、同種融合的細(xì)胞和雜種細(xì)胞。對(duì)獲得的雜種

結(jié)構(gòu)甲

細(xì)胞選擇培養(yǎng)后，還需要再進(jìn)行體外克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，