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關(guān)于雞蛋清中提取溶菌酶溶菌酶溶菌酶(lysozyme)又稱胞壁質(zhì)酶(muramidase),由129個(gè)氨基酸組成的一種無(wú)毒、無(wú)副作用,又具有一定的溶菌作用堿性球蛋白,可溶于水和酸性溶液,而且耐熱(pH4~7的范圍內(nèi),在100℃處理1min仍有近100%的活力,但在堿性環(huán)境條件下,酶穩(wěn)定性較差),耐干燥,在室溫下可長(zhǎng)期存放,性質(zhì)穩(wěn)定。溶菌酶存在于人體的各個(gè)組織中,如心、臟、脾、肺和腎等,其中以腎和肺中含量最高。鳥(niǎo)類(lèi)和家禽的蛋清、哺乳動(dòng)物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁等體液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量最為豐富。植物中有溶菌酶,目前已從木瓜、無(wú)花果、蕪菁、大麥等植物中分離出溶菌酶,其分子量較大,約為24000~29100。第2頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月溶菌酶的應(yīng)用醫(yī)藥方面
溶菌酶作為一種存在于人體正常體液及組織中的非特異性免疫因素,具有多種藥理作用,它具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤等功效,目前日本已生產(chǎn)出醫(yī)用溶菌酶,其適應(yīng)癥為出血、血尿、血痰和鼻炎等。
第3頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月食品和發(fā)酵工業(yè)溶菌酶是一種無(wú)毒、無(wú)副作用的蛋白質(zhì),又具有一定的溶菌作用,因此可用作食品防腐劑?,F(xiàn)已廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)品、肉食品、蛋糕、清酒、料酒及飲料中的防腐;還可以添入乳粉中,使牛乳人乳化,以抑制腸道中腐敗微生物的生存,同時(shí)直接或間接地促進(jìn)腸道中雙歧桿菌的增殖。此外,還能利用溶菌酶生產(chǎn)酵母浸膏和核酸類(lèi)調(diào)味料等。
第4頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月細(xì)胞工程
溶菌酶具有破壞細(xì)菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)的功能,以此酶處理細(xì)菌可得到原生質(zhì)體,因此,溶菌酶是基因工程、細(xì)胞工程中細(xì)胞融合操作必不可少的工具酶。第5頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月雞蛋清中提取溶茵酶材料原料:雞蛋、NaOH、NaCl、丙酮儀器與設(shè)備:攪拌器(200-300r/min),離心機(jī)(4000r/min),抽濾機(jī)第6頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月工藝流程
原料→清洗→去蛋殼→分離蛋清→攪拌→過(guò)濾→加鹽→調(diào)節(jié)pH值→結(jié)晶→干燥→成品→包裝第7頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月實(shí)驗(yàn)步驟選擇新鮮雞蛋,蛋清的pH值不能低于8.0,否則不能用。清洗:用水洗掉蛋殼表面的不潔之物。將雞蛋的兩端各敲一個(gè)小洞,使蛋清流出。用攪拌機(jī)攪拌,將蛋清攪拌稠度均勻即可,以不引起泡沫為宜,防止由于起泡引起蛋白質(zhì)的泡沫變性,而影響溶菌酶活性及產(chǎn)率。過(guò)濾:用雙層紗布將稠度均勻的蛋清過(guò)濾,濾除蛋清溶液中的臍帶塊及蛋殼等。加鹽:按50:1的比例(NaCl:蛋清液),向蛋清液中加入NaCl細(xì)粉,邊攪拌邊加入促使NaCl細(xì)粉及時(shí)溶解,以避免NaCl沉于容器底部,而因局部濃度過(guò)高而產(chǎn)生大量的白色沉淀第8頁(yè),共10頁(yè),星期六,2024年,5月結(jié)晶:用1mod/l的NaOH溶液調(diào)節(jié)PH為9.5-10.0,邊攪拌邊加,避免過(guò)堿引起蛋白質(zhì)變性。于4℃條件下靜置過(guò)夜,至結(jié)晶析出。結(jié)晶過(guò)濾或分離:用濾紙或尼龍布過(guò)濾,或用離心機(jī)離心10min,得到溶菌酶結(jié)晶。結(jié)晶洗滌:用丙酮將溶菌酶結(jié)晶洗滌數(shù)次(一般3次即可)。干燥:將溶菌酶結(jié)晶在常溫或(50-60)℃條件下干燥制成成品,水分含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為(
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