原發(fā)性肝細(xì)胞癌相關(guān)分子機(jī)制研究進(jìn)展關(guān)鍵詞：原發(fā)性肝細(xì)胞癌；分子機(jī)制原發(fā)性肝細(xì)胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)是一種常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，按病理分型發(fā)病率占肝癌75%。該病起病隱匿，預(yù)后差?，F(xiàn)有共識(shí)認(rèn)為這是一種多因素參與、多基因突變共同促發(fā)的疾病。研究發(fā)現(xiàn)：HCC患者在病程中，其血清及腫瘤組織會(huì)出現(xiàn)多種蛋白和基因的異常表達(dá)，通過(guò)對(duì)這些蛋白及基因的研究不僅為HCC的早期診斷、治療及預(yù)后判斷提供依據(jù)，而且為抗HCC藥物的效果評(píng)估提供指標(biāo)。因此，本文對(duì)HCC近年來(lái)的相關(guān)標(biāo)記物及其分子機(jī)制研究進(jìn)行概述。1HCC血清標(biāo)志物1.1甲胎蛋白(α-fetoprotein，AFP)甲胎蛋白是傳統(tǒng)的HCC標(biāo)志物，是分子量6.9萬(wàn)的特異性蛋白。孕期在胎兒肝臟內(nèi)合成，胎齡30周含量達(dá)到峰值，出生后漸漸降低，至1歲時(shí)平穩(wěn)。正常成人血清中AFP含量很低，HCC患者血清中含量可明顯升高。但易出現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性，因此臨床對(duì)其結(jié)果持慎重態(tài)度。代偉偉等[1]研究發(fā)現(xiàn)，HCC患者血清AFP、CA125、CA199及CEA水平顯著高于病毒性肝炎及肝硬化患者；劉永煒等[2]對(duì)健康體檢者、慢性肝炎、肝硬化及肝癌術(shù)后患者血清AFP、CA199、和CEA進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)三者聯(lián)合可提高肝癌的早期診斷率，AFP、CEA水平變化對(duì)肝癌預(yù)后判斷有一定意義。劉軍等[3]研究發(fā)現(xiàn)對(duì)比CEA、CA125及CA199，AFP對(duì)HCC的診斷價(jià)值最高。因此，AFP依然是診斷HCC的首選標(biāo)記物，但聯(lián)用其它標(biāo)記物效果更好。1.2維生素K缺乏誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)(proteininducedbyvitaminKabsence,PIVKA-Ⅱ)PIVKA-Ⅱ?qū)佼惓Ｄ冈囊环N，1984年LIEBMAN等[4]在HCC患者血清中首先發(fā)現(xiàn)這種凝血酶原含量異常升高，后研究證實(shí)，其主要由HCC細(xì)胞分泌，較AFP更具特異性。劉宓等[5]研究發(fā)現(xiàn)HCC患者血清PIVKA-Ⅱ、AFP含量明顯高于其他惡性腫瘤、慢性乙肝及正常人。胡明芬等[6]收集436例肝病患者，對(duì)比研究發(fā)現(xiàn)：HCC患者血清PIVKA-Ⅱ含量明顯高于慢性乙肝、慢性丙肝及肝硬化，診斷價(jià)值高于AFP。且單測(cè)PIVKA-Ⅱ與PIVKA-Ⅱ、AFP聯(lián)合檢測(cè)診斷準(zhǔn)確率無(wú)差異。故此，PIVKA-Ⅱ是繼AFP之后的又一特異性極佳的蛋白標(biāo)志物，與AFP聯(lián)合診斷效果更準(zhǔn)確。1.3癌胚抗原(carcino-embryonicantigen，CEA)癌胚抗原在大部分惡性腫瘤患者血清中均有升高，對(duì)HCC無(wú)特異性，多作為輔助標(biāo)記物。翁洋等[7]研究發(fā)現(xiàn)：CEA、AFP在原發(fā)性肝癌、轉(zhuǎn)移性肝癌患者血清中均升高，但原發(fā)性肝癌血清中CEA明顯高于轉(zhuǎn)移性肝癌。機(jī)制需進(jìn)一步研究。1.4表觀遺傳學(xué)標(biāo)志物（EpigeneticMarkers）表觀遺傳學(xué)以非DNA序列改變誘發(fā)的基因表達(dá)及細(xì)胞表型變化為研究對(duì)象，通過(guò)現(xiàn)代生物技術(shù)研究其調(diào)控機(jī)制。研究領(lǐng)域涉及DNA甲基化、組蛋白修飾、RNA甲基化及染色質(zhì)修飾等內(nèi)容[8]。其中DNA甲基化與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)，其可導(dǎo)致抑癌基因轉(zhuǎn)錄失活或靜默而引發(fā)腫瘤。徐靜等[9]研究表明：p15和p16基因啟動(dòng)因子區(qū)甲基化在HCC癌細(xì)胞中發(fā)生率明顯高于正常肝細(xì)胞。孟建軍等[10]通過(guò)研究K562細(xì)胞系及GM12878細(xì)胞系中11個(gè)組蛋白修飾的分布特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)較正常細(xì)胞，調(diào)控細(xì)胞發(fā)生癌變的組蛋白修飾有H3K9ac、H3K27ac、H3K79me2及H3K36me3，據(jù)此找到了引起K562細(xì)胞系癌變的5個(gè)關(guān)鍵基因。這證明DNA甲基化與HCC發(fā)生密切相關(guān)，機(jī)制有待研究。1.5血清酶（Serumenzymes）甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶同工酶F(GPDA-F)和γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶II(GGT-II)在HCC患者血清中常明顯升高，但特異性不強(qiáng)。研究證明[11]二者在各種良性肝病血清中的含量明顯低于HCC，配合AFP檢出率可達(dá)97.2%。趙琴等[12]通過(guò)文獻(xiàn)薈萃發(fā)現(xiàn)：由HCC癌細(xì)胞分泌的維生素K缺乏誘導(dǎo)蛋白（proteininducedbyvitaminKabsence,PIVKA-Ⅱ）較AFP更特異，特別對(duì)早期HCC的診斷，在AFP低20ng/mL，PIVKA-Ⅱ即可超過(guò)臨界值，運(yùn)用前景廣泛。另外，堿性磷酸酶對(duì)HCC診斷也有一定意義。1.6微小RNA(miRNAs)微小RNAs(miRNAs)是一組內(nèi)源性、小分子量非編碼單鏈RNA家族，大部分成員由20-24個(gè)核苷酸組成，與多種惡性腫瘤發(fā)生有關(guān)。張華等[13]研究發(fā)現(xiàn)MiR-224在HCC癌者血清中的表達(dá)量明顯高于肝硬化、乙型肝炎及健康人群。林凌等[14]研究結(jié)果也證實(shí)了這一點(diǎn)，且發(fā)現(xiàn)早期肝癌術(shù)后MiR-224血清中含量可明顯減少。於琳等[15]研究發(fā)現(xiàn)HCC患者M(jìn)IR-202血清含量明顯低于常人，聯(lián)合AFP對(duì)HCC檢出率度達(dá)93%，特異性很強(qiáng)。這提示微小RNAs中可以提煉出多個(gè)新血清標(biāo)志物。2HCC組織診斷標(biāo)記物2.1環(huán)氧合酶-2(Cyclooxygenase-2，COX-2)作為催化花生四烯酸合成前列腺素的限速酶，COX-2正常情況不表達(dá)，但其參與多種生理、病理代謝。既往研究表明COX-2不僅與胰腺炎、結(jié)腸炎及慢性萎縮性胃炎關(guān)系密切,而且在結(jié)腸癌[16]、腎癌[17]及胃癌[18]發(fā)生發(fā)展有關(guān)聯(lián)。謝詠梅等[19]研究發(fā)現(xiàn)，COX-2在肝硬化中表達(dá)為90%，在癌前病變和HCC癌組織中表達(dá)逐漸下降，推斷COX2抑制劑最佳使用期為癌前病變期。何友釗等［20］研究證明COX-2表達(dá)與HCC分化程度呈負(fù)相關(guān)。方艷秋等［21］研究證實(shí)，COX-2抑制劑NS-398可抑制肝癌細(xì)胞株的增值，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。COX-2目前被認(rèn)為是慢性炎癥向腫瘤轉(zhuǎn)變的介導(dǎo)因素，但作用機(jī)制需進(jìn)一步研究。2.2自噬基因Beclin1自噬是細(xì)胞為維持穩(wěn)態(tài)而降解內(nèi)部老化細(xì)胞器及其它成分的過(guò)程。自噬基因Beclin1定位于17號(hào)染色體q21，是一種擁有12個(gè)外顯子的蛋白質(zhì)。研究證明它是肺癌、結(jié)腸癌、乳腺癌、宮頸癌及胰腺癌等發(fā)生、發(fā)展的重要調(diào)節(jié)基因，在癌組織及癌圍組織中表達(dá)均升高[22-26]。楊威等[27]研究顯示，Beclin1在HCC癌組織內(nèi)的陽(yáng)性率明顯高于正常肝組織，且與腫瘤病理分級(jí)、有無(wú)癌栓呈正相關(guān)。段昌虎等[28]研究64例HCC手術(shù)標(biāo)本，51例Beclin1在癌組織中高表達(dá)。李云龍等[29]研究發(fā)現(xiàn)肝癌組織中Beclin1的高表達(dá)與LC3的表達(dá)、腫瘤的浸潤(rùn)、分級(jí)分期及細(xì)胞增殖呈明顯的正相關(guān)。這說(shuō)明Beclin1的高表達(dá)與HCC的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系，機(jī)制有待進(jìn)一步研究。2．3基質(zhì)金屬蛋白酶家族(matrixmetalloproteinases，MMPs)基質(zhì)金屬蛋白酶家族屬內(nèi)肽酶，是一類鋅離子高度依賴性蛋白酶，目前發(fā)現(xiàn)了28種[30]。其中基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)與HCC關(guān)系密切。研究[31、32]發(fā)現(xiàn)，HCC癌組織與癌旁組織比較，MMP-9明顯高表達(dá)。吳濤等[33]等研究發(fā)現(xiàn)，癌細(xì)胞MPP-9表達(dá)陽(yáng)性的HCC患者術(shù)后復(fù)發(fā)率，明顯高于MPP-9表達(dá)陰性的患者。腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)黏附與去黏附交替過(guò)程是其發(fā)生腫瘤蔓延的關(guān)鍵，MMP-9可降解腫瘤細(xì)胞周圍基質(zhì)，為瘤細(xì)胞的蔓延提供條件。因此，MPP-9表達(dá)對(duì)HCC術(shù)后復(fù)發(fā)具有很大價(jià)值。李娟等［34］研究報(bào)道，MMP-2在癌組織中的表達(dá)明顯高于癌旁組織與正常組織。且TNM分期越高，陽(yáng)性表達(dá)率越高，呈明顯正相關(guān)。羅佳等[35]研究100例HCC患者癌組織和癌旁組織MMP-2表達(dá)，結(jié)論相同。這證明MMP-2、MMP-9與HCC的侵襲和早期轉(zhuǎn)移關(guān)系密切，因此加強(qiáng)對(duì)MMP-2、MMP-9分子途徑研究非常必要。2.4P38MAPK蛋白MAPKs信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)存在于大部分細(xì)胞內(nèi)，可將刺激信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)至細(xì)胞核，引起細(xì)胞凋亡、增殖、分化等生理過(guò)程。P38MAPK途徑是其重要的一種。研究[36]發(fā)現(xiàn)它在瘤細(xì)胞增值、蔓延及轉(zhuǎn)移過(guò)程中有重要作用。張萌等[37]研究發(fā)現(xiàn)，P38MAPK蛋白在HCC癌組織中表達(dá)明顯高于正常肝組織，王霞等[38]研究發(fā)現(xiàn)P38MAPK抑制劑SB203580可升高HBx下調(diào)的RXRa基因表達(dá)，降低促癌基因DNMT3a蛋白含量，從而抑制HCC生長(zhǎng)。邱建武等[39]研究發(fā)現(xiàn)SB203580確實(shí)可以抑制HCC細(xì)胞的增殖。這從側(cè)面驗(yàn)證了P38MAPK蛋白在HCC發(fā)生、發(fā)展中的意義。但該通路中各因子相互作用關(guān)系尚不清楚，有待進(jìn)一步研究。2.7SOX2基因SOX2屬于SOX基因家族B亞族成員，該家族在Y染色體性別決定區(qū)上，共包含SOX1、SOX2及SOX3等30余個(gè)成員。SOX2定位于3q26.3-q27，研究表明SOX2可調(diào)控胚胎生長(zhǎng)、性別控制及細(xì)胞分化。其異常表達(dá)與胃癌[40]、宮頸癌[41]、肺癌[42]等惡性腫瘤發(fā)病關(guān)系密切。但在不同腫瘤組織中表達(dá)情況又有所差異。吳彬［43］對(duì)42例HCC患者的癌組織及癌旁組織中SOX2mRNA進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)癌SOX2在癌組織中的表達(dá)水平明顯高于癌旁組織。葉偉康等［44］采用定量PCR對(duì)78例HCC患者的癌組織中SOX2mRNA進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)瘤細(xì)胞中SOX2的表達(dá)水平較正常細(xì)胞明顯升高。這提示SOX2的升高與HCC的發(fā)生、發(fā)展有一定關(guān)系，作用機(jī)制尚不清楚。綜上所述，原發(fā)性肝細(xì)胞癌是一種多因素、多步驟發(fā)展的惡性腫瘤，在我國(guó)惡性腫瘤致死率上排名第二[45]。近年來(lái)，隨著分子病理學(xué)的發(fā)展，與HCC生長(zhǎng)、蔓延、轉(zhuǎn)移有關(guān)的標(biāo)記物和蛋白越來(lái)越受到關(guān)注。研究也取得了巨大進(jìn)展，這些成果對(duì)HCC的早期診斷、藥物選擇、預(yù)后判斷提供了很大幫助，但由于HCC相關(guān)的分子機(jī)制錯(cuò)綜復(fù)雜，有許多研究尚處于實(shí)驗(yàn)階段。因此，對(duì)HCC分子的機(jī)制的研究還有廣泛的前景。參考文獻(xiàn)：[1]代偉偉,劉正新,徐寶鴻.肝癌和肝硬化患者血清CA125、CA199、AFP和CEA水平變化[J].實(shí)用肝臟病雜志,2017,20:81-84.[2]劉永煒,吳向民.血清AFP、CA199、和CEA水平在肝癌診斷和預(yù)后中的作用[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2017,5(32):406-409.[3]劉軍.四種腫瘤標(biāo)記物測(cè)定對(duì)肝癌的診斷價(jià)值[J].中國(guó)腫瘤臨床與康復(fù),2017,24:30-32.[4]LIEBMANH,FURICBC,TONGMJ,etal.Des-gamma-carboxyprothrombin(abnormal)prothrombinasaserummarkerofprimaryhepatocellularcareinoma[J].NEnglJMed,1984,310(22):1427-1431.[5]劉宓,鐘銀,雪王偉,等.血清異常凝血酶原在肝細(xì)胞癌診斷中的療效分析[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2017,27(29):90-93.[6]胡明芬,莊林,李云麗,等．異常凝血酶原對(duì)原發(fā)性肝癌的診斷價(jià)值［J].中國(guó)肝臟病雜志,2017,9:79－82.[7]翁洋,王吉魁,溫艷惠,等.血清AFP、CEA、CA19-9和CA125檢測(cè)在原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性肝細(xì)胞癌診斷中的臨床價(jià)值[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2016,5(45):470-472.[8]丁勇,許超,吳季輝,等.表觀遺傳學(xué)研究進(jìn)展.中國(guó)科學(xué):生命科學(xué),2017,47:3-15.[9]徐靜,李旭,高人燾,等.原發(fā)性肝細(xì)胞癌p16、p15基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)檢測(cè)[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2006,41(4):365-367.[10]孟建軍,李前忠.人類K562細(xì)胞系中組蛋白修飾的調(diào)控分析[J].內(nèi)蒙古大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版),2017,48(6):625-632.[11]季穎林,倪潤(rùn)州,黃介飛,等.血清GDPA-F/ALT、GGT-Ⅱ與AFP同步檢測(cè)對(duì)肝細(xì)胞癌的診斷價(jià)值[J].南通醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2003,23(4):391,393.[12]趙琴,劉園園,雷旭,等.應(yīng)用異常凝血酶原在乙型肝炎病毒感染者中篩查HCC研究進(jìn)展.世界華人消化雜志,2017,25(9):803-809.[13]張華,陳旭義,楊波,等.肝細(xì)胞肝癌患者血清microRNA-224水平變化及其臨床診斷意義的研究[J].中國(guó)腫瘤臨床,2014,41(9):576-579.[14]林凌,魯葆春.miR-224在早期肝細(xì)胞癌診斷中的價(jià)值[J].中華全科醫(yī)學(xué),2016,14(9):1445-1448.[15]於琳,張開炯,柴利,等.原發(fā)性肝細(xì)胞癌組織、血清miR-202表達(dá)變化及其意義[J].山東醫(yī)藥,2017,57(7):1-4.[16]李志鋒,劉進(jìn)忠,石榮亞,等.COX-2、MMP-9與PTEN在結(jié)腸腺癌組織中的表達(dá)及意義[J].重慶醫(yī)學(xué),2017,46(33):4676-4679.[17]易松,王翠蘋,曾甫清.COX-2與MMP-14在腎癌組織中的表達(dá)水平及臨床意義[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué),2017,17:77-80.[18]雷鴿,劉新群,王學(xué)祥.COX-2在胃潰瘍與胃癌的表達(dá)及其與幽門螺旋桿菌的關(guān)系[J].臨床消化病雜志,2016,28(4):209-211.[19]謝詠梅,李肖,嚴(yán)律南,等.生長(zhǎng)抑素、環(huán)氧合酶-2在肝癌發(fā)生發(fā)展中的變化及意義[J].四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2015,46(5):710-716.[20]何友釗,李波,劉勇,等.COX-2在人肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及其對(duì)耐藥性的影響[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志,2011,15:26-29,38.[21]方艷秋,齊亞靈,蘆小單,等.環(huán)氧輔酶2抑制劑NS-398對(duì)人肝癌細(xì)胞SMMC-7721增值與調(diào)亡的影響[J].吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2013,38(6):1190-1194.[22]董桂蘭,董量,柯春錦,等.Belin1和LC3蛋白在非小細(xì)胞肺癌的表達(dá)和臨床意義[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2017,33(13):2097-2100.[23]賴人旭,麥蕾,高敏照,等.結(jié)腸癌組織中Beclin1、p62的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2017,20(37):5059-5061.[24]潘贇昊,顧巖,石陽(yáng),等.Belin1表達(dá)水平與乳腺癌臨床分期相關(guān)性的研究[J].臨床檢驗(yàn)雜志(電子版),2017,6(3):445-447.[25]楊毅,丁妍,于愛清,等.自噬對(duì)宮頸癌細(xì)胞干性及增值能力的影響[J].重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2017,42(11):1390-1394.[26]柯能文,劉續(xù)寶.Belin1分子在胰腺癌組織中的表達(dá)及其臨床意義[J].中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2017,24(6):671-679.[27]楊威,楊紅杰,莫瑞祥,等.Belin1在人肝癌組織中的表達(dá)及TGF-β對(duì)肝癌細(xì)胞增殖的影響[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2015,36:108-109.[28]段昌虎,劉曉晨,豆發(fā)福,等.HBX及Belin1在肝癌中表達(dá)的關(guān)系研究[J].ChineseHepatology,2017,22:20-23.[29]李云龍,王梅,付魯渝,等.肝癌中TLR3信號(hào)分子與自噬相關(guān)基因表達(dá)的相關(guān)性及臨床意義[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2016,36(11):1285-1294.[30]CieplakP,StronginAY,Strongin.Matrixmetalloproteinasesfromthecleavagedatatothepredictiontoolsandbeyond[J].BiochimBiophysActa,2017,4889(17):30064-30062.[31]劉俊慧,閭愛斌,徐士榮,等.肝細(xì)胞癌患者血清中MMP-9、m-AST檢測(cè)的臨床意義[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥,2014,9(29):48-49.[32]丁峰,楊夙,王巍,等.肝細(xì)胞癌中RhoE和基質(zhì)金屬蛋白酶-9的表達(dá)及意義[J].中國(guó)老年學(xué)雜志,2017,2(37):916-917.[33]吳濤,黃秋林,熊廷剛,等.MMP-9、Snail蛋白在肝細(xì)胞癌聯(lián)合表達(dá)與術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系[J].肝膽胰外科雜志,2014,26(2):94-96,101.[34]李娟,胡曉松,周方方,等.肝細(xì)胞癌組織中Claudin-3、MMP-2表達(dá)觀察[J].山東醫(yī)藥,2017,57(39):45-47.[35]羅佳,章敬成,劉繁榮,等.肝癌組織中FMNL-2、MMP-2表達(dá)及臨床病理分析[J].腫瘤防治研究,2014,41(5):460-463.[36]崔婷婷,席淑華.MAPK信號(hào)傳導(dǎo)通路與腫瘤的發(fā)生[J].實(shí)用腫瘤雜志,2013,28(5):550-552.[37]張萌,