課時規(guī)范練38微生物的培育技術及應用一、基礎練1.下列關于培育基的說法,正確的是()A.培育基是為微生物的生長繁殖供應養(yǎng)分的基質B.培育基只有兩類:液體培育基和固體培育基C.除水以外的無機物只能供應無機鹽D.無機氮源不行能供應能量2.下列有關微生物培育的敘述,不正確的是()A.倒平板時需在酒精燈火焰旁進行B.溶化牛肉膏時,稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C.平板劃線法接種時,每次劃線操作之前都需對接種環(huán)進行滅菌D.制備牛肉膏蛋白胨培育基時,滅菌后加入瓊脂并用玻棒不斷攪拌,目的是促進其溶化3.在培育基的配制過程中,具有如下步驟,其正確依次為 ()①溶化②調pH③加棉塞④包扎⑤分裝⑥稱量A.①②⑥⑤③④ B.⑥①②⑤③④C.⑥①②⑤④③ D.①②⑤④⑥③4.漆酶屬于木質降解酶類,在環(huán)境修復、農業(yè)生產(chǎn)等領域有著廣泛用途。下圖是分別、純化和保存漆酶菌株的過程,相關敘述正確的是()A.飲用水中含有大量微生物,是分別產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B.選擇培育基中須要加入漆酶的底物作為唯一碳源C.在已涂布的平板上干脆劃線可以進一步純化獲得單菌落D.斜面培育基中含有大量養(yǎng)分物,可在常溫下長期保存菌株5.化學需氧量(COD)是衡量污水中有機污染物含量的重要指標。從某污水處理系統(tǒng)中分別出多種細菌,經(jīng)分別篩選獲得具有高效降低COD實力的菌株,過程如圖所示。下列相關說法正確的是()A.可用顯微鏡干脆計數(shù)法統(tǒng)計菌液中的細菌數(shù)目來確定接種時菌液的最佳稀釋倍數(shù)B.制備牛肉膏蛋白胨固體培育基時,需在倒平板后進行滅菌操作C.由菌落分布狀況可知,在該固體培育基上接種的方法是平板劃線法D.挑取單菌落后接種到液體培育基中培育,目的是純化菌株6.下圖表示培育和純化酵母菌的部分操作步驟,下列相關敘述正確的是()A.對試驗操作的空間、操作者的衣著和手進行滅菌處理B.步驟①倒平板操作時,倒好后應馬上將其倒過來放置C.步驟②應多個方向劃線,使接種物慢慢稀釋,培育后出現(xiàn)單個菌落D.步驟③劃線結束后在皿蓋上做好標注7.下列有關土壤中微生物的分別與計數(shù)的說法,錯誤的是 ()A.因為土壤中各類微生物的數(shù)量不同,所以,為獲得不同類型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進行分別B.測定土壤中細菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍不同C.假如得到了3個或3個以上菌落數(shù)目在30~300的平板,則說明稀釋操作比較成功,并能夠進行菌落的計數(shù)D.牛肉膏蛋白胨培育基的菌落數(shù)目明顯小于選擇培育基的數(shù)目,說明選擇培育基已篩選出一些細菌菌落8.將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸確定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入確定量的蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培育基?；卮鹣铝袉栴}。(1)M培育基若用于真菌的篩選,則培育基中應加入鏈霉素抑制的生長,加入了鏈霉素的培育基屬于培育基。該培育基允許生長,其他種類微生物生長。

(2)M培育基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長供應了多種養(yǎng)分物質,養(yǎng)分物質類型除氮源外還有(答出兩點即可)。氮源進入細菌后,可參與合成的生物大分子有(答出兩點即可)。

(3)若在M培育基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培育,平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)生淀粉酶的微生物,加入的顯色劑是。

(4)甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結果:甲同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133。乙同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認為這兩位同學的結果中,乙同學的結果可信度低,其緣由是。

二、提升練1.生長圖形法是一種測定微生物養(yǎng)分需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類,探討小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需養(yǎng)分物質的培育基混合后倒成平板,然后在平板上劃分數(shù)區(qū),將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域,培育結果如圖所示,下列說法正確的是()A.培育基倒成平板后干脆培育可推斷有無污染B.培育基倒成平板后須要進行滅菌處理C.圖示結果表明該菌須要生長因子乙或丙D.生長圖形法還可用于某些菌種的篩選2.將沒有吃完的西瓜,蓋上保鮮膜后放入冰箱,是很多人日常貯存西瓜的方法。有這樣一種說法:蓋上保鮮膜貯存的西瓜中細菌種類和數(shù)目反而比沒用保鮮膜的多。某生物探討小組針對上述說法進行探究,他們用保鮮膜保存了三天的西瓜表面的瓜瓤制備浸出液,探討細菌的種類和數(shù)量。下列說法正確的是()A.應當接受稀釋涂布平板法進行接種B.瓜瓤浸出液是液體,因此培育時平板不用倒置C.僅須要設置盛有培育基的空白平板作比照D.可通過平板上菌落的特征初步推斷細菌的種類3.做“微生物的分別與培育”試驗時,下列敘述錯誤的是()A.高壓滅菌加熱結束時,打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋B.倒平板時,應將打開的皿蓋放到一邊,以免培育基濺到皿蓋上C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應趁熱快速挑取菌落D.用記號筆標記培育皿中菌落時,應標記在皿底上4.篩選淀粉分解菌需運用以淀粉為唯一碳源的培育基。接種培育后,若細菌能分解淀粉,培育平板經(jīng)稀碘液處理,會出現(xiàn)以菌落為中心的透亮圈(如圖),試驗結果見下表。菌種菌落直徑(C)/mm透亮圈直徑(H)/mmH/C細菌Ⅰ5.111.22.2細菌Ⅱ8.113.01.6有關本試驗的敘述,正確的是()A.培育基除淀粉外還含有氮源等其他養(yǎng)分物質B.篩選分解淀粉的細菌時,菌液應稀釋后涂布C.以上兩種細菌均不能將淀粉酶分泌至細胞外D.H/C值反映了兩種細菌分解淀粉實力的差異5.為分別和培育土壤中能分解尿素的細菌,試驗小組運用了下列培育基配方,將各種物質溶解后,用蒸餾水定容到1000mL,再經(jīng)高溫滅菌,制成固體培育基;經(jīng)接種、培育后統(tǒng)計每克土壤樣品中的活菌數(shù)目。回答下列問題。KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O蛋白胨葡萄糖尿素瓊脂1.4g2.1g0.2g1.0g10.0g1.0g15.0g(1)依據(jù)培育基的成分推斷,該同學能否分別出土壤中分解尿素的細菌?(填“能”或“不能”),緣由是

。

(2)培育基常用方法滅菌,培育皿常用方法滅菌。待培育基冷卻到50℃左右時,在酒精燈火焰旁邊倒平板,等平板冷卻凝固后,將平板倒過來放置,可以防止

,以免造成污染。

(3)要統(tǒng)計每克土壤樣品中的活菌數(shù)目,宜接受法接種,依據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積,統(tǒng)計平板上的,

就能大約推想出樣品中的活菌數(shù)。(4)培育分解尿素的細菌時,在接種前須要檢測培育基是否被污染。對于固體培育基應接受的檢測方法是

。

(5)某同學在稀釋倍數(shù)為106的培育基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為234個,那么每克樣品中的菌落數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.1mL)。

(6)若在培育分解尿素的細菌的過程中,發(fā)覺了另一種B細菌,在B細菌四周分解尿素的細菌的生長繁殖受到抑制,甲同學提出的觀點是B細菌產(chǎn)生了不利于(抑制)分解尿素的細菌生存的物質。請你在以下試驗的基礎上,接著完成驗證甲同學所提觀點的試驗過程:

(用文字和箭頭表示)。

課時規(guī)范練38微生物的培育技術及應用一、基礎練1.A依據(jù)培育基的物理性質,可分為液體培育基、半固體培育基和固體培育基,在液體培育基中加入不同量的凝固劑如瓊脂可形成半固體或固體培育基;除水以外的無機物如NH4HCO3,既可以是碳源,也可以是氮源,不僅僅供應無機鹽;無機氮源有時也能供應能量,如NH3可以為硝化細菌供應能量。2.D倒平板時需在酒精燈火焰旁進行,A項正確;溶化牛肉膏時,稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯,B項正確;平板劃線法接種時,每次劃線操作之前都需對接種環(huán)進行滅菌,C項正確;制備牛肉膏蛋白胨培育基時,滅菌前向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%瓊脂,加熱并使其溶解,D項錯誤。3.B在培育基的配制過程中,依據(jù)微生物的生長須要,稱量不同的養(yǎng)分物質,然后溶化、調整pH、培育基的分裝、加棉塞、包扎等,所以正確的依次是⑥①②⑤③④。4.B飲用水中含有微生物較少,不愿定含有產(chǎn)漆酶的菌株,分別產(chǎn)漆酶菌株的取樣應當?shù)綄缓举|素的環(huán)境中,A項錯誤;選擇培育基中加入漆酶的底物作為唯一碳源,只有能夠產(chǎn)生漆酶的菌株才能在該培育基上生長,其他微生物因缺少碳源不能生長,培育后可通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落,B項正確;在涂布平板上長出的菌落可以通過平板劃線法或稀釋涂布平板法進一步純化,C項錯誤;斜面培育基能增大接種面積,可在低溫下保存菌株,但不能長期保存,D項錯誤。5.A利用血球計數(shù)板在顯微鏡下干脆計數(shù)是一種常用的細胞計數(shù)法,這種方法可以干脆測定樣品中全部的細胞數(shù)目,因此可用來確定接種時菌液的最佳稀釋倍數(shù),A項正確;制備牛肉膏蛋白胨固體培育基時,需在滅菌操作后進行倒平板,B項錯誤;由菌落分布狀況可知,在該固體培育基上接種的方法是稀釋涂布平板法,C項錯誤;挑取單菌落后接種到液體培育基中培育,目的是增大菌株的數(shù)量(擴大培育),D項錯誤。6.C對試驗操作的空間、操作者的衣著和手須要進行消毒處理,A項錯誤;倒完平板后馬上蓋上培育皿,冷卻后將平板倒過來放置,B項錯誤;步驟②多個方向劃線,使接種物慢慢稀釋,培育后出現(xiàn)單個菌落,C項正確;圖中操作結束后需在培育皿皿底標注菌種及接種日期等信息,而不是在皿蓋上做標注,D項錯誤。7.D土壤是微生物的自然培育基,土壤中各類微生物的數(shù)量不同,獲得不同類型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進行分別,A項正確;土壤中細菌總量高于土壤中能分解尿素的細菌的數(shù)量,所以選用的稀釋范圍不同,B項正確;接受稀釋涂布平板法進行計數(shù)時,得到了3個或3個以上菌落數(shù)目在30~300的平板,則說明稀釋操作比較成功,并能夠進行菌落的計數(shù),C項正確;選擇培育基的菌落數(shù)目明顯小于牛肉膏蛋白胨培育基的菌落數(shù)目,說明選擇培育基已篩選出一些細菌菌落,D項錯誤。8.答案:(1)細菌選擇特定種類的微生物抑制或阻擋(2)碳源、無機鹽蛋白質、DNA(3)碘液(4)乙同學的結果中,第1個平板的計數(shù)與另2個相差懸殊,結果的重復性差解析:(1)鏈霉素是常用的抗生素,能夠抑制細菌生長,加入鏈霉素的培育基從功能上來說是選擇培育基,選擇培育基只允許特定種類的微生物生長,抑制或阻擋其他種類微生物生長。(2)M培育基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長供應了多種養(yǎng)分物質,養(yǎng)分物質類型除氮源外還有碳源、無機鹽等。氮源進入細菌后,可參與合成蛋白質、DNA、RNA等生物大分子。(3)淀粉遇碘變藍色,若在M培育基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培育,平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)生淀粉酶的微生物,則加入的顯色劑是碘液。(4)乙同學結果不合理,因為第1個計數(shù)結果與另2個相差太遠,不能簡潔地用其平均數(shù),結果的重復性差。二、提升練1.AD平板上不含任何生長因子,若倒成平板后干脆培育,出現(xiàn)菌落說明已被雜菌感染,A項正確;制備平板時,先滅菌再倒平板,B項錯誤;圖中菌落生活在乙、丙區(qū)域之間,說明同時須要乙和丙,C項錯誤;不同菌種所需的生長因子不同,依據(jù)某些菌種須要特殊的生長因子的原理,可利用生長圖形法篩選菌種,D項正確。2.AD探討細菌的種類和數(shù)量,須要接受稀釋涂布平板法進行接種才能計數(shù),A項正確;接種時須要將菌液接種在固體培育基上,培育時平板須要倒置,這樣可以防止培育皿蓋上凝合的水珠落入培育皿造成污染,還可防止培育基表面的水分揮發(fā),B項錯誤;該試驗是比較兩種不同處理方式下西瓜上菌體的種類和數(shù)量,所以除須要設置盛有培育基的空白平板作比照外,還須要設置不蓋保鮮膜同樣條件下保存三天的西瓜表面的瓜瓤制備浸出液后接種的平板做比照,C項錯誤;不同菌體的菌落特征不同,所以可通過平板上菌落的特征初步推斷細菌的種類,D項正確。3.ABC高壓滅菌加熱結束后,自然冷卻至壓力表指針回到零后再慢慢打開排氣閥以解除余氣,然后才能開蓋取物,A項錯誤;倒平板時左手拿培育皿,右手拿錐形瓶,左手將培育皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,倒入培育基后馬上蓋上培育皿皿蓋,B項錯誤;灼燒接種環(huán)之后,要冷卻后才能伸入菌液,以免溫度太高殺死菌種,C項錯誤;在微生物的培育中,一般將培育皿倒置,應在皿底上用記號筆做標記,D項正確。4.ABD培育基一般含有碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子等成分,A項正確;篩選淀粉分解菌時,須要對菌液進行一系列的梯度稀釋,再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培育基上進行培育,B項正確;由題意可知,以上