化妝品中恩諾沙星等15種禁用喹諾酮類抗生素的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法國家市場監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會I本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由中國輕工業(yè)聯(lián)合會提出。本標(biāo)準(zhǔn)由全國香料香精化妝品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(SAC/TC257)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：江蘇省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院、嘉文麗(福建)化妝品有限公司、無限極(中國)質(zhì)量監(jiān)督檢測研究院、上海市日用化學(xué)工業(yè)研究所、上海相宜本草化妝品股份有限公司、歐詩漫生物股份有限公司、廣州市嬌蘭化妝品有限公司、完美(廣東)日用品有限公司、江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院、常州市食品藥品監(jiān)督檢驗中心、河北省食ⅡGB/T39999—2021禁用物質(zhì)是指不能作為化妝品生產(chǎn)原料即組分添加到化妝品中的物質(zhì)?！痘瘖y品安全技術(shù)規(guī)范1GB/T39999—2021化妝品中恩諾沙星等15種禁用喹諾酮類抗生素的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了化妝品中15種禁用喹諾酮類抗生素的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法的原理、試劑或本標(biāo)準(zhǔn)不適用于粉類化妝品中喹諾酮類抗生素的測定。本標(biāo)準(zhǔn)15種喹諾酮類抗生素的方法檢出限均為0.15mg/kg,定量限均為0.50mg/kg。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3原理4試劑或材料4.50.1%甲酸乙腈溶液：準(zhǔn)確量取1.0mL甲酸(4.3)至1000m4.60.1%甲酸溶液：準(zhǔn)確量取1.0m4.9標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：純度均不小于98%,15種喹諾酮類抗生素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的中文名稱、英文名稱、CAS號、分4.10混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別準(zhǔn)確稱取適量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(4.9)(精確至0.1mg),用乙腈(4.2)配制成質(zhì)量濃度為1000μg/mL的單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)貯備液(于4℃避光保存，可保存3個月)。準(zhǔn)確移取各單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)貯備26試驗步驟稱取試樣1.0g(精確至0.001g),置于15mL乙腈溶液(4.5)重復(fù)提取一次，合并上清液，用0.1%甲酸乙腈溶液(4.5)定容至25mL。準(zhǔn)確移取見表1;3GB/T39999—2021時間/minA/%表215種喹諾酮類抗生素的質(zhì)譜參數(shù)化合物保留時間/min母離子m/3子離子m/2去簇電壓/V碰撞電壓/V碰撞室出口電壓/V依諾沙星麻保沙星諾氟沙星氧氟沙星99氟羅沙星培氟沙星環(huán)丙沙星洛美沙星4GB/T39999—2021表2(續(xù))化合物保留時間/min母離子m/≈子離子m/z去簇電壓/V碰撞電壓/V碰撞室出口電壓/V丹諾沙星恩諾沙星9奧比沙星沙拉沙星司帕沙星雙氟沙星400.3莫西沙星402.5定量離子。6.2.3標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制將混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(4.10),按高效液相色譜和質(zhì)譜參考工作條件(6.2.1和6.2.2)進(jìn)行測定，以定量離子色譜峰的峰面積為縱坐標(biāo)，與其對應(yīng)的溶液濃度為橫坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。15種喹諾酮類抗生素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的多反應(yīng)監(jiān)測色譜圖參見附錄B中圖B.1。按高效液相色譜和質(zhì)譜參考工作條件(6.2.1和6.2.2)測定試樣溶液(6.1)。如果試樣中待測物質(zhì)的色譜峰保留時間與標(biāo)準(zhǔn)溶液的一致，并且在扣除背景后的試樣質(zhì)譜圖中，所選擇的離子均出現(xiàn)，而且選擇離子的相對豐度與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的進(jìn)行比較，相對偏差不超過表3規(guī)定的范圍，可判定為試樣中含有對應(yīng)的待測物。記錄定量離子色譜峰的峰面積，以外標(biāo)法定量。試樣溶液中被測物的響應(yīng)值均應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍之內(nèi)，超出線性范圍的試樣溶液可用定容液(4.7)適當(dāng)稀釋后進(jìn)行測定。表3定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差k>5050≥k>2020≥k>10k≤10士20士25士30士50除不稱取試樣外，均按6.1～6.2進(jìn)行測定。5GB/T39999—20217試驗數(shù)據(jù)處理試樣中恩諾沙星等15種喹諾酮類抗生素的含量按式(1)計算： (1)式中：X;——試樣中被測組分的含量，單位為毫克每千克(mg/kg);p;——從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的試樣溶液中被測組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每升(μg/L);po——從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的空白樣品溶液中被測組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每升(μg/L);V——試樣溶液首次定容體積，單位為毫升(mL);m——試樣質(zhì)量，單位為克(g);f——稀釋倍數(shù)。計算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。8回收率和精密度在添加濃度為0.50mg/kg～5.0mg/kg范圍內(nèi)，回收率為80%～110%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%。9允許差在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不應(yīng)超過算術(shù)平均值的10%。615種喹諾酮類抗生素的中文名稱、英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量及化學(xué)結(jié)構(gòu)式見中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子質(zhì)量化學(xué)結(jié)構(gòu)式依諾沙星麻保沙星Marbofloxacin諾氟沙星Norfloxacin氧氟沙星氟羅沙星培氟沙星7表A.1(續(xù))中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子質(zhì)量化學(xué)結(jié)構(gòu)式環(huán)丙沙星洛美沙星丹諾沙星Danofloxacin恩諾沙星奧比沙星沙拉沙星N司帕沙星NH8表A.1(續(xù))中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子質(zhì)量化學(xué)結(jié)構(gòu)式雙氟沙星莫西沙星Moxifloxacin9強(qiáng)度/eps強(qiáng)度/eps度強(qiáng)強(qiáng)度/eps強(qiáng)度/eps強(qiáng)度/15種喹諾酮類抗生素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的多反應(yīng)監(jiān)測色譜圖15種喹諾酮類抗生素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的多反應(yīng)監(jiān)測色譜圖見圖B.1。依諾沙星時間/min麻保沙星強(qiáng)度/強(qiáng)度/2.0e4-時間/min諾氟沙星4.45時間/m1時間/mn時間/mn培氟沙星時間/min環(huán)內(nèi)沙星時問/min濟(jì)美沙星圖B.115種喹諾酮類抗生素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的多反應(yīng)監(jiān)測色譜圖強(qiáng)度/cps強(qiáng)度/cps4.0e4-2.0c4-月諾沙星