遼寧省普通高中2025屆高三（最后沖刺）生物試卷請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認(rèn)真閱讀答題紙上的《注意事項》，按規(guī)定答題。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．下列有關(guān)實驗的敘述，正確的是A．提取菠菜綠葉中色素的原理：不同色素在層析液中的溶解度不同B．利用雞血細胞提取DNA時，需用0.14mol/L的NaCl溶液將DNA溶解C．用龍膽紫溶液染色，可觀察低溫誘導(dǎo)后的洋蔥鱗片葉表皮細胞的染色體數(shù)目D．根據(jù)C02通入溴麝香草酚藍水溶液后的變色速度，可判斷酵母菌的呼吸方式2．細胞在進行有絲分裂時，細胞中的姐妹染色單體均附著于紡錘絲上，這稱為雙定向作用。一種稱為紡錘體裝配檢查點（SAC）的監(jiān)控機制能監(jiān)視紡錘絲附著過程，一旦該過程出現(xiàn)異常，便暫停姐妹染色單體的分離和有絲分裂的繼續(xù)進行。下列敘述錯誤的是（）A．雙定向作用是細胞內(nèi)染色體向兩極移動的前提B．染色體數(shù)目的加倍與雙定向作用存在因果關(guān)系C．不是所有細胞都存在雙定向作用，如根尖成熟區(qū)細胞D．限制有絲分裂的雙定向作用會影響細胞周期的完整性3．非洲豬瘟病毒的遺傳物質(zhì)為雙鏈DNA，2019年年底發(fā)現(xiàn)的新型冠狀病毒遺傳物質(zhì)是單鏈RNA。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．非洲豬瘟病毒DNA兩條鏈的脫氧核甘酸序列不相同B．新型冠狀病毒的RNA都是具有遺傳效應(yīng)的基因片段C．可以用加有動物血清的液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)這兩種病毒D．兩種病毒的核酸徹底水解后，可以得到5種相同產(chǎn)物4．細胞是生物結(jié)構(gòu)和功能的基本單位，下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．細胞骨架與細胞的物質(zhì)運輸、能量轉(zhuǎn)換和信息傳遞等有關(guān)B．鐮刀型紅細胞血紅蛋白的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，細胞容易破裂C．人體內(nèi)細胞之間的黏著性與細胞膜上的糖蛋白有關(guān)D．能合成固醇類激素的內(nèi)分泌細胞，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)一般不發(fā)達5．如圖表示肝細胞與甲、乙、丙三種細胞外液的物質(zhì)交換關(guān)系，下列有關(guān)敘述錯誤的是A．甲、乙、丙依次為組織液、血漿、淋巴B．甲中的葡萄糖進入肝細胞需穿過兩層磷脂分子C．NaHCO3等緩沖物質(zhì)可使乙的pH穩(wěn)定在7.35～7.45D．肝細胞、甲、乙三部位CO2濃度大小關(guān)系為乙>甲>肝細胞6．下列有關(guān)生產(chǎn)措施與預(yù)期結(jié)果對應(yīng)關(guān)系的敘述，正確的是（）A．農(nóng)田滅鼠之后的剩余量接近K/2——保證物種的多樣性B．退耕還林，退牧還草——提高生物多樣性的直接價值C．?；~塘——實現(xiàn)物質(zhì)和能量的多級循環(huán)利用D．利用信息傳遞的生物防治——可以降低害蟲的種群密度二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）β-葡萄糖苷酶是一種存在于微生物中的可水解纖維素的酶，可用于生產(chǎn)燃料乙醇，也可作為洗滌劑的有效成分。某科研小組進行了β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株的分離、鑒定、提純產(chǎn)物等研究。已知七葉靈能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解，其水解產(chǎn)物七葉苷原能和Fe3+作用呈現(xiàn)棕黑色。請回答：（1）為篩選出β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株，應(yīng)到_____________環(huán)境中取樣，取樣后要在液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)，其目的是_________________。（2）選擇培養(yǎng)后要初步分離鑒定出目的菌株，請寫出實驗思路：___________________。（3）用接種針挑取棕黑色的菌落用_____________法進一步純化，進而篩選出高產(chǎn)菌株。（4）將高產(chǎn)菌株擴大培養(yǎng)，獲得發(fā)酵液，用___________法去除發(fā)酵液中分子量小的雜質(zhì)，再用_________法進一步純化，最終獲得純度較高的β-葡萄糖苷酶。（5）生產(chǎn)中為降低成本，β-葡萄糖苷酶最好采用________法固定，以便重復(fù)使用。8．（10分）新型冠狀病毒是一種RNA病毒，會導(dǎo)致人患嚴(yán)重的肺炎。2019年末新型冠狀病毒肆虐，全國上下齊心協(xié)力一致抗疫。2020年2月15日，官方宣布新型冠狀病毒疫苗的研發(fā)取得了新進展，已完成了基因序列合成，正在進行重組質(zhì)粒構(gòu)建和工程菌篩選工作。請聯(lián)系基因工程的相關(guān)知識，回答下列問題：（1）基因工程的四個基本操作步驟是獲取目的基因、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞和______________________。（2）新型冠狀病毒通過其表面的S一蛋白與宿主表面ACE2蛋白結(jié)合完成感染，在研制疫苗時需要獲取病毒的目的基因是______________________，方法是____________________，然后利用___________技術(shù)擴增。（3）腺病毒是一種DNA病毒，編碼數(shù)十個腺病毒的結(jié)構(gòu)和功能蛋白，其中E1區(qū)蛋白與腺病毒的復(fù)制有關(guān)而且對宿主細胞的毒性很強。研究中將E1基因缺失的腺病毒作為運載目的基因的載體，改造后的腺病毒應(yīng)該具備的特點有：______________________（至少答出兩點）。目的基因與腺病毒構(gòu)建重組腺病毒載體必須包括：新型冠狀病毒基因、______________________（至少答出兩點）等。（4）重組腺病毒載體侵染宿主細胞后，利用宿主細胞翻譯出____________________，引發(fā)機體免疫反應(yīng)，產(chǎn)生可用于治療的抗體。在轉(zhuǎn)錄過程中，識別其啟動子的酶是___________。A．病毒的DNA聚合酶B．宿主的DNA聚合酶C．病毒的RNA聚合酶D．宿主的RNA聚合酶9．（10分）土壤含鹽量過高對植物生長、生理造成的危害稱為鹽脅迫。某科研小組研究了提高CO3濃度對鹽脅迫下的黃瓜幼苗葉片光合特性、凈光合速率和植株生長的影響，下列圖示和表格為有關(guān)實驗結(jié)果（其中RuBP羧化酶能催化CO3的固定）。請分析回答有關(guān)問題：處理方式實驗結(jié)果CO3濃度（umol/mol）NaCl濃度（mmol/L）葉綠素A（m/gFW）電子傳遞速率凈光合速率Pn（umolm-3·s-l）干重（g/株）40001．80330193．50801．65186173．0380001．69330304．50801．5330118？（1）上圖為采用葉齡一致的黃瓜葉片，在__________相同且適宜的實驗條件下測得的RuBP羧化酶活性結(jié)果圖。由圖可知，當(dāng)__________時，RuBP羧化酶的活性減小。（3）根據(jù)表中數(shù)據(jù)推測，遭受鹽脅迫時黃瓜葉片會發(fā)生的變化有__________。A．水的光解加快B．色素對光能吸收減少C．C3的還原加快D．（CH3O）積累速率下降（3）分析表中數(shù)據(jù)可知，CO3濃度為800μmol/mol時，鹽脅迫環(huán)境中生長的黃瓜幼苗植株的干重最可能為__________。A．3．7B．5．0C．1．0D．3．8（4）高濃度CO3可緩解鹽脅迫對黃瓜幼苗凈光合速率的抑制作用。由題中信息可知，鹽脅迫條件下提高CO3濃度，一方面可使黃瓜幼苗的電子傳遞速率有所提升，從而使光反應(yīng)速率加快，另一方面__________，進而使光合速率上升。10．（10分）淀粉酶在食品加工及輕工業(yè)生產(chǎn)中具有廣泛用途。研究人員從細菌中克隆了一種淀粉酶基因，為了獲得高產(chǎn)淀粉酶菌株，按下圖所示流程進行基因工程操作。（1）將淀粉酶基因與質(zhì)粒載體重組時需要使用的酶包括_________。（2）大腸桿菌經(jīng)過_________處理后，可作為重組載體的宿主（感受態(tài)）細胞使用。（3）為了初步篩選高產(chǎn)菌株，研究人員將得到的3個工程菌株接種到以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)后用稀碘液處理，可觀察到由于淀粉被分解，在平板上形成以菌落為中心的透明圈。測量不同菌株形成的菌落及透明圈直徑，結(jié)果見下表。工程菌菌落直徑（C，mm）透明圈直徑（H，mm）H/C菌株Ⅰ8.113.01.6菌株Ⅱ5.111.22.2菌株Ⅲ9.517.11.8①表中菌落直徑（C）的大小反映了__________，透明圈直徑（H）的大小反映了_____________。②根據(jù)表中數(shù)據(jù)，可推斷其中淀粉酶產(chǎn)量最高的菌株是_______。（4）基因工程技術(shù)已成功應(yīng)用于人類生產(chǎn)生活中的諸多方面。請從植物育種或人類疾病預(yù)防與治療方面舉一實例，并說明制備該轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的基本技術(shù)流程。（限100字以內(nèi)）___________________11．（15分）下圖是2019-nCoV病毒又稱新冠病毒（+RNA）的結(jié)構(gòu)模式圖。生物學(xué)家根據(jù)RNA能否直接起mRNA作用而分成正鏈（+）RNA病毒與負鏈（-）RNA病毒兩種。負鏈RNA病毒（如毒彈狀病毒）的RNA不能作為mRNA，須先合成互補鏈（正鏈）作為mRNA，再翻譯蛋白質(zhì)分子?；卮鹣铝袉栴}：（1）2019-nCoV病毒合成E蛋白的過程是______________，2019-nCoV病毒與HIV病毒在遺傳物質(zhì)復(fù)制過程的不同之處是______________。（2）S蛋白是2019-nCoV病毒表面主要抗原，要獲取大量S蛋白，首先需要利用2019-nCoV病毒獲取能產(chǎn)生S蛋白的目的基因。其方法是從培養(yǎng)2019-nCoV病毒的細胞中獲取mRNA，構(gòu)建__________文庫，從中獲取目的基因，然后加上_____________構(gòu)建完整的基因表達載體。（3）與新冠肺炎康復(fù)者捐獻的血漿中的抗體相比，抗S蛋白的單克隆抗體的優(yōu)點是______________，其制備的過程中，第二次篩選的目的是______________。（4）在對新冠疑似患者的檢測中，有時會出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象，除了核酸檢測這種方法外，在分子水平上還可以利用______________方法進行檢測。（5）新冠肺炎重癥患者病情惡化的主要原因之一是，病毒感染過度激活人體免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致肺部出現(xiàn)炎性組織損傷。在修復(fù)這些患者的肺損傷方面，干細胞被寄予厚望。因此干細胞治療成為一種可能，人的ES細胞在培養(yǎng)液中加入______________，就可誘導(dǎo)分化成不同類型的細胞，達到治療目的。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、D【解析】

1、葉綠體色素的提取和分離實驗：

①提取色素原理：色素能溶解在酒精或丙酮等有機溶劑中，所以可用無水酒精等提取色素。

②分離色素原理：各種色素隨層析液在濾紙上擴散速度不同，從而分離色素。溶解度大，擴散速度快；溶解度小，擴散速度慢。

2、探究酵母菌細胞呼吸方式實驗的原理是：

（1）酵母菌是兼性厭氧型生物；

（2）酵母菌呼吸產(chǎn)生的CO2可用溴麝香草酚藍水溶液或澄清石灰水鑒定，因為CO2可使溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃，或使澄清石灰水變渾濁；

（3）酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的酒精可用重鉻酸鉀鑒定，由橙色變成灰綠色。【詳解】A、不同色素在層析液中的溶解度不同是分離菠菜綠葉中色素的原理，A錯誤；B、DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，B錯誤；C、洋蔥鱗片葉表皮細胞是高度分化的成熟植物細胞，沒有分裂能力，因此低溫誘導(dǎo)不能使之染色體數(shù)目加倍，C錯誤；D、有氧呼吸產(chǎn)生二氧化碳的速率比無氧呼吸快，且量比無氧呼吸多，因此根據(jù)C02通入溴麝香草酚藍水溶液后的變色速度，可判斷酵母菌的呼吸方式，D正確。故選D。2、B【解析】

有絲分裂的過程特點：

分裂間期：可見核膜核仁，染色體的復(fù)制（DNA復(fù)制、蛋白質(zhì)合成）

前期：染色體出現(xiàn)，散亂排布，紡錘體出現(xiàn)，核膜、核仁消失

（兩失兩現(xiàn)）

中期：染色體整齊的排在赤道板平面上（形數(shù)清晰赤道齊）

后期：著絲點分裂，姐妹染色單體分開，染色體數(shù)目暫時加倍（點裂數(shù)增向兩級）

末期：染色體、紡錘體消失，核膜、核仁出現(xiàn)（兩現(xiàn)兩失）【詳解】A、雙定向作用出現(xiàn)異常，便暫停姐妹染色單體的分離，染色體無法向兩極移動，A正確；B、雙定向作用的順利完成，才能使染色單體分離，染色體數(shù)目的加倍，B錯誤；C、雙定向作用發(fā)生在連續(xù)分裂的細胞中，不是所有的細胞都具有分裂能力，如根尖成熟區(qū)細胞，C正確；D、雙定向作用出現(xiàn)異常，會暫停姐妹染色單體的分離和有絲分裂的繼續(xù)進行，影響細胞周期的完整性，D正確。故選B。3、A【解析】

兩種核酸的比較：英文縮寫基本單位五碳糖含氮堿基存在場所結(jié)構(gòu)DNA脫氧核糖核苷酸脫氧核糖A、C、G、T主要在細胞核中，在葉綠體和線粒體中有少量存在一般是雙鏈結(jié)構(gòu)RNA核糖核苷酸核糖A、C、G、U主要存在細胞質(zhì)中一般是單鏈結(jié)構(gòu)【詳解】A、非洲豬瘟病毒DNA兩條鏈間的相應(yīng)脫氧核苷酸是互補配對的，因此脫氧核苷酸序列不同，A正確；B、新型冠狀病毒的遺傳物質(zhì)是RNA，基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，B錯誤；C、培養(yǎng)病毒不能用普通培養(yǎng)基直接培養(yǎng)，而要用相應(yīng)的活細胞來培養(yǎng)，C錯誤；D、DNA徹底水解的產(chǎn)物是磷酸、脫氧核糖和A、G、C、T四種堿基，RNA徹底水解的產(chǎn)物是磷酸、核糖和A、G、C、U四種堿基，可見兩種病毒的核酸徹底水解后，可以得到4種相同產(chǎn)物，D錯誤。故選A。【點睛】本題主要考查核酸分子的結(jié)構(gòu)、基因的概念以及病毒的培養(yǎng)等，考查學(xué)生的理解能力。4、D【解析】

1、細胞骨架是真核細胞中維持細胞形態(tài)、保持細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)有序性的網(wǎng)架結(jié)構(gòu)，細胞骨架由蛋白質(zhì)纖維組成。2、糖蛋白位于細胞膜的外側(cè)，有識別、保護、潤滑等作用。3、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是細胞內(nèi)由單層膜構(gòu)成的網(wǎng)狀物，能夠增大細胞內(nèi)的膜面積，與蛋白質(zhì)的合成與加工有關(guān)，是脂質(zhì)合成的車間?！驹斀狻緼、由蛋白質(zhì)纖維組成的細胞骨架，與細胞物質(zhì)運輸、能量轉(zhuǎn)換、信息傳遞等有關(guān)，A正確；B、鐮刀型紅細胞血紅蛋白的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，細胞呈鐮刀型，容易破裂，B正確；C、細胞膜的外表的糖蛋白對于動物起保護潤滑的作用，動物細胞間的粘著性也和其有關(guān)，C正確；D、脂質(zhì)的合成車間在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，固醇類激素的化學(xué)本質(zhì)是脂質(zhì)，因此能合成固醇類激素的內(nèi)分泌細胞，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)一般發(fā)達，D錯誤。故選D。5、D【解析】

A、甲、乙、丙依次為組織液、血漿、淋巴，A正確；B、甲組織液中的葡萄糖進入肝細胞需要穿過一層膜，兩層磷脂分子，B正確；C、血漿中NaHCO3與乙中產(chǎn)生的乳酸反應(yīng)，使血漿的pH穩(wěn)定在1．35-1．45之間，C正確；D、CO2通過自由擴散方式由肝細胞→甲→乙，因此肝細胞、甲、乙三部位CO2濃度的大小關(guān)系為肝細胞＞甲＞乙，D錯誤。故選D。【點睛】內(nèi)環(huán)境的組成；內(nèi)環(huán)境的理化特性。本題涉及的知識點是內(nèi)環(huán)境的組成成分，內(nèi)環(huán)境是細胞與外界環(huán)境進行物質(zhì)交換的媒介，血漿、組織液、淋巴、細胞內(nèi)液之間的動態(tài)關(guān)系，物質(zhì)跨膜運輸方式和特點，旨在考查學(xué)生理解所學(xué)找知識的要點，把握知識的內(nèi)在聯(lián)系，并理利用相關(guān)知識對某些生物學(xué)問題進行解釋、推理、判斷、獲取結(jié)論的能力。6、D【解析】

K/2時種群的增長速率最快，對于可持續(xù)資源一般捕獲后保持在K/2，可使種群數(shù)量在較短時間內(nèi)恢復(fù)，而對于有害生物的控制則需要在低于K/2時進行防治。能量流動的特點為：單向流動，逐級遞減?！驹斀狻緼、農(nóng)田滅鼠之后的剩余量應(yīng)小于K/2，以防止田鼠快速增長，A錯誤；B、退耕還林，退牧還草屬于生態(tài)系統(tǒng)的生態(tài)功能，目的是提高生物多樣性的間接價值，B錯誤；C、能量在生態(tài)系統(tǒng)內(nèi)不可以循環(huán)利用，C錯誤；D、生物防治中，利用昆蟲的信息素誘捕或警示有害動物，能降低害蟲的種群密度，D正確。故選D。【點睛】本題考查種群數(shù)量變化曲線的應(yīng)用、生物多樣性的使用價值、生態(tài)系統(tǒng)的信息傳遞的應(yīng)用和能量流動特點等相關(guān)的知識點，要求學(xué)生掌握S型曲線的特點及其應(yīng)用，識記生態(tài)系統(tǒng)生物多樣性的價值和生態(tài)系統(tǒng)信息傳遞在生產(chǎn)上的應(yīng)用，利用知識點之間的內(nèi)在聯(lián)系解決問題。二、綜合題：本大題共4小題7、富含纖維素增加產(chǎn)β-葡萄糖苷酶菌株的濃度配制含基本成分的培養(yǎng)基，加入七葉靈、Fe3+，用稀釋涂布平板法接種并在適宜條件下培養(yǎng)，粽黑色圈大的菌落即為目標(biāo)菌落平板劃線透析法凝膠色譜法化學(xué)結(jié)合或物理吸附【解析】

1.尋找目的菌株的原理是需要根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。2.固定化酶和固定化細胞技術(shù)是指利用物理或化學(xué)方法，將酶或細胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。3.凝膠色譜法也稱為分配色譜法，是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。當(dāng)相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動的速度較慢，而相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)，無法進入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動，路程較短，移動的速度較快，相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)分子得以分離?！驹斀狻浚?）實驗?zāi)康氖且Y選出β-葡萄糖苷酶高產(chǎn)菌株，而β-葡萄糖苷酶是一種存在于微生物中的可水解纖維素的酶，據(jù)此可知要找到目的菌需要到富含纖維素的環(huán)境中取樣，取樣后，為了增加產(chǎn)β-葡萄糖苷酶菌株的濃度，要將樣品菌在液體培養(yǎng)基中進行選擇培養(yǎng)。（2）題意顯示七葉靈能在β-葡萄糖苷酶的作用下水解，其水解產(chǎn)物七葉苷原能和Fe3+作用呈現(xiàn)棕黑色，若要初步分離鑒定出目的菌株，需要在鑒定培養(yǎng)基中加入七葉靈（能在β-葡萄糖苷酶作用下分解）、Fe3+（與七葉靈的水解產(chǎn)物發(fā)生顏色反應(yīng)），為得到單菌落需用稀釋涂布平板法接種，然后置于適宜條件下培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基中呈現(xiàn)棕黑色的菌落即為目的菌。（3）用接種針挑取棕黑色的菌落，然后用平板劃線法接種，置于適宜條件下進一步純化培養(yǎng)，進而篩選出高產(chǎn)菌株。（4）將高產(chǎn)菌株擴大培養(yǎng)，獲得發(fā)酵液，因為透析袋允許小分子自由出入，而不能讓大分子透過，故用透析法處理之后，發(fā)酵液中分子量小的雜質(zhì)就能夠被除去，再用凝膠色譜法進一步純化，最終獲得純度較高的β-葡萄糖苷酶。（5）生產(chǎn)中為降低成本，β-葡萄糖苷酶最好采用化學(xué)結(jié)合或物理吸附法固定，以便重復(fù)使用，同時也能與產(chǎn)物有效的分離?！军c睛】熟知相關(guān)的基礎(chǔ)知識是解答本題的關(guān)鍵！能夠從題目中找到關(guān)鍵信息解答本題中篩選目的菌的原理是解答本題的另一關(guān)鍵！8、目的基因的檢測與鑒定指導(dǎo)S—蛋白合成的基因以病毒的RNA為模板，通過逆轉(zhuǎn)錄合成相應(yīng)的基因（或化學(xué)合成法）PCR能夠侵染宿主細胞，具有多個限制酶切位點，不能復(fù)制，不易引起機體的免疫反應(yīng)啟動子、終止子、標(biāo)記基因病毒的蛋白（或“S一蛋白”或“病毒的S—蛋白”）D【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等．（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法．（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）基因工程的四個基本操作步驟是獲取目的基因、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞和目的基因的檢測和鑒定。（2）疫苗是通過主動免疫的方式刺激機體產(chǎn)生抗體，因為新型冠狀病毒是通過其表面的S一蛋白與宿主表面ACE2蛋白結(jié)合完成感染，因此S一蛋白是病毒的特異性結(jié)構(gòu)，在研制基因工程疫苗時應(yīng)該要獲取的目的基因是指導(dǎo)S一蛋白合成的基因。由于新型冠狀病毒是RNA病毒，RNA結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，需要合成DNA，因此可以采用的方法是以病毒的RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成相應(yīng)的基因，或者根據(jù)病毒的基因測序化學(xué)合成相應(yīng)的DNA。體外擴增DNA的技術(shù)是PCR技術(shù)。（3）根據(jù)題干信息中對于腺病毒的分析，E1基因缺失的腺病毒是不能復(fù)制的，同時對宿主細胞的毒性較弱，不易引起機體的免疫反應(yīng)，同時又要具備運載體的特點，所以需要有能夠插入目的基因的限制性酶切位點，以及侵染宿主細胞的特性。重組腺病毒載體應(yīng)該要滿足的特點是要保證目的基因要能夠表達，因此至少受包括新型冠狀病毒目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等。（4）重組腺病毒載體侵染宿主細胞后，利用宿主細胞翻譯出病毒的S-蛋白，引發(fā)機體免疫反應(yīng)，產(chǎn)生可用于治療的抗體。在轉(zhuǎn)錄過程中，識別其啟動子的酶是用于轉(zhuǎn)錄的酶，所以是RNA聚合酶，這個酶是由宿主細胞提供的?！军c睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作步驟及各操作步驟中的相關(guān)細節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。9、光照強度、溫度土壤含鹽量增加，CO3濃度減小BDARUBP羧化酶活性有所增強，從而使暗反應(yīng)速率加快【解析】

光合作用分為兩個階段進行，在這兩個階段中，第一階段是直接需要光的稱為光反應(yīng)，第二階段不需要光直接參加，是二氧化碳轉(zhuǎn)變?yōu)樘堑姆催^程稱為暗反應(yīng)。光合作用和呼吸作用是植物兩大重要的代謝反應(yīng)，光合作用與呼吸作用的差值稱為凈光合作用。光合作用強度主要受光照強度、CO3濃度、溫度等影響?！驹斀狻浚?）據(jù)圖分析可知，圖示是實驗的自變量是二氧化碳濃度和是否有鹽脅迫，因變量為RuBP羧化酶的活性，其余為無關(guān)變量，故需要采用葉齡一致的黃瓜葉片，在相同且適宜的光照強度下測得的RuBP羧化酶活性。據(jù)圖可知，當(dāng)土壤含鹽量升高（80mmol/L）、CO3濃度減?。?00umol/mol），RuBP羧化酶的活性減小。（3）根據(jù)表中數(shù)據(jù)分析，遭受鹽脅迫時黃瓜葉綠素含量明顯下降，所以導(dǎo)致植物光反應(yīng)減弱，光反應(yīng)中吸收光能減少，水的光解減慢，三碳化合物的還原減少，光合速率下降，有機物的積累減少，故選BD。（3）分析表中的數(shù)據(jù)，在低二氧化碳濃度、鹽脅迫下凈光合速率為17，低二氧化碳濃度、無鹽脅迫時凈光合速率為19，高二氧化碳、無鹽脅迫條件下凈光合速率為18，所以鹽脅迫環(huán)境中生長的黃瓜幼苗植株的干重最可能介于這兩組之間，即3.7。故選A。（4）據(jù)實驗結(jié)果可知，高濃度CO3可緩解鹽脅迫對黃瓜幼苗凈光合速率的抑制作用，原因可能是鹽脅迫條件下，提高CO3濃度，黃瓜幼苗的電子傳遞速率有所提升，從而使光反應(yīng)速率加快；同時RUBP羧化酶活性有所增強，從而使暗反應(yīng)速率加快，進而使光合速率上升?！军c睛】光合作用和呼吸作用是植物兩大重要的代謝活動，凈光合作用是常見的考點也是難點，對于光合作用的考查，通常結(jié)合圖形、實驗來考察，要注意對圖形、表格信息的處理能力的培養(yǎng)。10、限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）、DNA連接酶Ca2+/氯化鈣細菌的增殖速度細菌分解淀粉的能力菌株Ⅱ示例一：轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花。從細菌中克隆Bt蛋白基因，構(gòu)建重組載體，導(dǎo)入棉花細胞后進行組織培養(yǎng)。經(jīng)對再生植株中目的基因的檢測，獲得轉(zhuǎn)基因棉花。示例二：基因工程胰島素?？寺∪说囊葝u素基因，構(gòu)建重組載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌后，檢測目的基因，篩選高產(chǎn)菌株并進行培養(yǎng)，生產(chǎn)胰島素?！窘馕觥?/p>

基因工程的基本操作程序：目的基因的獲取→基因表達載體的構(gòu)建（核心）→將目的基因?qū)胧荏w細胞→目的基因的檢測與鑒定【詳解】（1）將目的基因與質(zhì)粒載體重組時，需要使用同一種限制酶（限制性核酸內(nèi)切酶）將目的基因與質(zhì)粒切出相同的黏性末端，再用DNA連接酶將目的基因與質(zhì)粒載體連接形成重組載體。（2）大腸桿菌經(jīng)過Ca2+溶液（氯化鈣）處理后能成為感受態(tài)細胞。（3）①菌落直徑越大，表明細菌數(shù)量越多，細菌增殖越快，因此菌落直徑的大小反映了細菌的增殖速度；淀粉被淀粉酶水解，在平板上形成以菌落為中心的透明圈，因此透明圈直徑的大小反映了細菌分解淀粉的能力。②H/C值越大，淀粉酶產(chǎn)量越高，因此菌株I淀粉酶產(chǎn)量最高。（4）題干要求從植物育種或人類疾病預(yù)防與治療方面舉一實例，并說明制備該轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的基本技術(shù)流程，可以舉例轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花和基因工程生產(chǎn)人的胰島素兩個方面闡述，舉例如下：示例一：轉(zhuǎn)基因抗蟲棉花。從細菌中克隆Bt蛋白基因，構(gòu)建重組載體，導(dǎo)入棉花細胞后進行組織培養(yǎng)。經(jīng)對再生植株中目的基因的檢測，獲得轉(zhuǎn)基因棉花。示例二：基因工程胰島素?？寺∪说囊葝u素基因，構(gòu)建重組載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌后，檢測目的基因，篩選高產(chǎn)菌株并進行培養(yǎng)，生產(chǎn)胰島素。【點睛】本題的難點在于最后一個小題，需要考生用精煉的語言闡述基因工程的實際應(yīng)用以及書寫流程，這就要求考生在平時學(xué)