34DB34/T4315—2022甜葉菊組培快繁技術(shù)規(guī)程TechnicalregulationsfortissuecultureandrapidpropagationofSteviarebaudiana2022-10-26發(fā)布2022-11-26實(shí)施安徽省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I1本文件規(guī)定了甜葉菊[Steviarebaudiana（Bertoni）Hemsl.]組培快繁的組培設(shè)施、培養(yǎng)基配4.2準(zhǔn)備室4.2.2配置高壓蒸汽滅菌鍋、微波爐、托盤、水浴鍋、蒸餾水器、冰箱、培養(yǎng)箱、電子分析天平、電4.3接種室4.3.2配置超凈工作臺(tái)、雙筒實(shí)體顯微鏡、空調(diào)、紫外燈、空氣凈化裝置、組培滅菌器、鑷子、剪刀4.4培養(yǎng)室24.5溫室溫室建造按JB/T10594的規(guī)定執(zhí)行。可選擇玻璃溫室或薄膜溫室，溫度可控范圍15℃~32℃,5.1培養(yǎng)基類型5.2培養(yǎng)基配制6.2接種工具滅菌6.3超凈工作臺(tái)滅菌將滅菌的培養(yǎng)基和接種工具放置在超凈工作臺(tái)上，接通電源，打開超凈工作臺(tái)上的紫外燈滅菌min～30min，先啟動(dòng)風(fēng)機(jī)，再關(guān)閉紫3將選取的外植體用2‰～5‰洗衣粉溶液清洗莖段表面污垢后，在超凈工作臺(tái)上，用無菌濾紙吸干外植體表面水分，浸入70％乙醇中消乙醇倒去，用無菌水沖洗2次后，再浸入有效氯濃度27.4外植體接種將已消毒的外植體切除下端部分及上端幼葉，留取長(zhǎng)1.5cm～2.0cm帶側(cè)芽莖段備用。培養(yǎng)溫度為23℃~27℃,光照強(qiáng)度2000lx～3000lx，連續(xù)定時(shí)光照時(shí)間12h/d。7.6培養(yǎng)時(shí)間培養(yǎng)25d～30d。8.2培養(yǎng)條件8.3培養(yǎng)時(shí)間培養(yǎng)25d～30d。8.4培養(yǎng)代數(shù)4選取生長(zhǎng)健壯、長(zhǎng)勢(shì)均勻，苗高2.0cm～3.0cm的繼代培養(yǎng)苗，轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基中。9.2培養(yǎng)條件9.3培養(yǎng)時(shí)間培養(yǎng)18d～20d。10.1煉苗時(shí)期培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)組培苗長(zhǎng)出4～5條長(zhǎng)2.0cm～5.0cm不定根時(shí)，便可煉苗。10.2煉苗條件培養(yǎng)瓶放置在遮光率為7075％、相對(duì)濕度為7090％、溫度為20℃~30℃的溫室中，打10.3煉苗時(shí)長(zhǎng)煉苗2d～3d。用自來水將煉苗后的組培苗基部的培養(yǎng)基沖