臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范WS/T

503-2017臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范的范圍是？(P5)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范的術(shù)語和定義包括？(P6)可疑感染患者的采血指征是？(P7)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)如何進(jìn)行檢驗(yàn)申請(qǐng)？(P8)進(jìn)行血樣采集和培養(yǎng)瓶接種時(shí)，正確的采血時(shí)間是？(P9)進(jìn)行血樣采集和培養(yǎng)瓶接種時(shí)，正確的采集套數(shù)是？(P10)進(jìn)行血樣采集和培養(yǎng)瓶接種時(shí)，正確的采血量是？(P11)進(jìn)行血樣采集和培養(yǎng)瓶接種時(shí)，正確的采集方法是？(P12-14)血培養(yǎng)瓶如何進(jìn)行運(yùn)送？(P15)血培養(yǎng)瓶如何進(jìn)行接收？(P16)2內(nèi)

容臨床微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)血培養(yǎng)的操作方法有哪些？(P17)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)血培養(yǎng)加入添加劑的操作方法和流程是？(P18)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)血培養(yǎng)進(jìn)行手工培養(yǎng)法的操作方法和流程是？(P19-22)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)血培養(yǎng)進(jìn)行自動(dòng)化儀器培養(yǎng)法的操作方法和流程是？(P23)臨床微生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)血培養(yǎng)進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控法的操作方法和流程是？(P24)發(fā)生導(dǎo)管相關(guān)血流感染如何進(jìn)行血培養(yǎng)？(P25-27)發(fā)生感染性心內(nèi)膜炎，如何進(jìn)行血培養(yǎng)？(P28)血培養(yǎng)特殊病原體的處理流程是？(P29-30)血培養(yǎng)污染后的處理流程是？(P31)血培養(yǎng)報(bào)告程序是？(P32-33)3內(nèi)

容血培養(yǎng)安全防護(hù)包括？(P34-37)血培養(yǎng)菌株如何保存？(P38)4內(nèi)

容本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了血培養(yǎng)臨床微生物檢驗(yàn)的技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于開展血培養(yǎng)的臨床微生物實(shí)驗(yàn)室。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范WS/T

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1范圍）5下列術(shù)語和定義適用于本文件。一套血培養(yǎng)

one

set

of

blood

culture：從同一穿刺點(diǎn)采集的血液標(biāo)本，通常分別注入需氧和厭氧培養(yǎng)瓶。輸液港

access

ports：完全植入人體內(nèi)的閉合輸液裝置，包括尖端位于上腔靜脈的導(dǎo)管部分及埋植于皮下的注射座。血培養(yǎng)污染率

rate

of

blood

culture

contamination：污染的血培養(yǎng)標(biāo)本數(shù)占同期的血培養(yǎng)標(biāo)本總數(shù)的比例。計(jì)算公式∶（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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2

術(shù)語和定義）6可疑感染患者出現(xiàn)以下任一指征時(shí)，可考慮采集血培養(yǎng)∶a）體溫>38

℃或<36

℃;寒戰(zhàn);外固血白細(xì)胞計(jì)數(shù)增多（計(jì)數(shù)>10.0×109

/L，特別有"核左移"時(shí)）或減少（計(jì)數(shù)<4.0×109

/L）;呼吸頻率>20

次/min

或動(dòng)脈血二氧化碳分壓（PaCO2

）<32

mmHg;e）心率>90

次/min;f）皮膚黏膜出血;g）昏迷;h）多器官功能障礙;i）血壓降低;j）炎癥反應(yīng)參數(shù)如

C反應(yīng)蛋白、降鈣素原（PCT）、1，3-β-D-葡聚糖（G

試驗(yàn)）升高等。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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血樣采集和培養(yǎng)瓶接種

3.1

采血指征）7申請(qǐng)單應(yīng)明確標(biāo)識(shí)患者基本信息、申請(qǐng)醫(yī)師信息、標(biāo)本類型、采集部位申請(qǐng)項(xiàng)目、臨床診斷、采血時(shí)間，并盡可能提供其他治療相關(guān)信息，如抗菌藥物使用情況。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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3

血樣采集和培養(yǎng)瓶接種

3.2

檢驗(yàn)申請(qǐng)）8寒戰(zhàn)或發(fā)熱初起時(shí)采集?？咕幬飸?yīng)用之前采集最佳。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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3

血樣采集和培養(yǎng)瓶接種

3.3

采血時(shí)間）91.成人每次應(yīng)采集

2

套～3

套，每套從不同穿刺點(diǎn)進(jìn)行采集，2

d～5

d內(nèi)無需重復(fù)采集。如懷疑感染性心內(nèi)膜炎，應(yīng)重復(fù)采集多套。兒童通常僅采集需氧瓶。有以下高危因素時(shí)應(yīng)考慮厭氧瓶培養(yǎng)∶其母產(chǎn)褥期患腹膜炎，或慢性口腔炎或鼻竇炎、蜂窩組織炎、有腹腔感染的癥狀和體癥、咬傷、接受類固醇治療的粒細(xì)胞缺乏患兒?？紤]肺炎鏈球菌菌血癥時(shí)，宜同時(shí)做腦脊液培養(yǎng)。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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血樣采集和培養(yǎng)瓶接種

3.4

采集套數(shù)）101.成人每瓶采血量

8

mL～10

mL，或按照說明書采集；嬰幼兒及兒童采血量不應(yīng)超過患者總血量的

1%，具體采血量參考說明書。若采血量充足，注射器采集的血液先注入?yún)捬跗?，后注入需氧瓶，碟形針采集的血液反之。若采血量不足，?yōu)先注入需氧瓶。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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血樣采集和培養(yǎng)瓶接種

3.5

采血量）111.采集靜脈血;僅在評(píng)估導(dǎo)管相關(guān)性血流感染時(shí)采集導(dǎo)管血。血培養(yǎng)宜單獨(dú)采血，與其他檢測(cè)項(xiàng)目同時(shí)采血，應(yīng)先接種血培養(yǎng)瓶，以避免污染。采集前做好手衛(wèi)生，靜脈穿刺點(diǎn)選定后，去除血培養(yǎng)瓶的塑料瓶帽，切勿打開金屬封口環(huán)和膠塞，使用75%乙醇或

70%異丙醇消毒，自然干燥

60

s。注意采血前檢查血培養(yǎng)瓶是否完好無損、是否過期。在穿刺前或穿刺期間，為防止靜脈滑動(dòng)，應(yīng)戴無菌乳膠手套固定靜脈。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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血樣采集和培養(yǎng)瓶接種

3.6

采集方法）124.穿刺點(diǎn)皮膚消毒∶a）三步法∶第一步∶75%乙醇擦拭靜脈穿刺部位，待干

30

s

以上;第二步∶1%～2%碘酊作用

30

s

或

1%碘伏作用

60

s，從穿刺點(diǎn)向外畫圈消毒，消毒區(qū)域直徑達(dá)3

cm

以上;第三步∶75

%乙醇擦拭碘酊或碘伏消毒過的區(qū)域進(jìn)行脫碘。對(duì)碘過敏的患者，在第一步基礎(chǔ)上再用

75%乙醇消毒

60

s，待酒精揮發(fā)干燥后采血。b）一步法∶0.5%葡萄糖酸洗必泰作用

30

s（不適用于2

個(gè)月以內(nèi)的新生兒），或70%異丙醇消毒后自然干燥（適用于2個(gè)月以內(nèi)的新生兒）。注意穿刺點(diǎn)消毒后不可再碰觸。注∶

其他消毒劑需要進(jìn)行消毒能力和適用性驗(yàn)證后才可使用。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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血樣采集和培養(yǎng)瓶接種

3.6

采集方法）135.用注射器無菌穿刺取血后，勿換針頭（如行第二次穿刺，換針頭），直接注入血培養(yǎng)瓶，不應(yīng)將抗凝血注入血培養(yǎng)瓶。血液接種到培養(yǎng)瓶后，輕輕顛倒混勻以防血液凝固。完成工作后洗手。污染率評(píng)估;實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期對(duì)血培養(yǎng)污染率進(jìn)行評(píng)估，污染率應(yīng)控制在

3%以下。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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血樣采集和培養(yǎng)瓶接種

3.6

采集方法）141.血培養(yǎng)瓶應(yīng)在

2

h

之內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室孵育或上機(jī)；如不能及時(shí)送檢，應(yīng)將血培養(yǎng)瓶置于室溫下，切勿冷藏或冷凍。應(yīng)采用密封的塑料袋和硬質(zhì)防漏的容器運(yùn)送標(biāo)本。若運(yùn)送到參考實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)使用符合生物安全規(guī)定的包裝。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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血培養(yǎng)瓶運(yùn)送）15實(shí)驗(yàn)室收到血培養(yǎng)瓶后，應(yīng)盡快接收并評(píng)估和記錄標(biāo)本質(zhì)量（如采集時(shí)間、血標(biāo)本量、瓶數(shù)、轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)間和條件、申請(qǐng)單信息和標(biāo)識(shí)等），評(píng)估合格后立即孵育。若培養(yǎng)瓶延遲送檢而提示已有細(xì)菌生長，則應(yīng)直接進(jìn)行涂片鏡檢。經(jīng)評(píng)估后不合格血培養(yǎng)瓶（如血培養(yǎng)瓶標(biāo)識(shí)錯(cuò)誤或無標(biāo)識(shí)，破碎，損壞，滲漏，凝血等情況），應(yīng)拒收并盡快告知申請(qǐng)醫(yī)師。以下情況可以接收但應(yīng)告知申請(qǐng)醫(yī)師∶a）采血量不足;血培養(yǎng)瓶套數(shù)或瓶數(shù)不夠;成人樣本僅接種需氧或厭氧瓶。3.特殊情況∶實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有緊急預(yù)案，如在常規(guī)血培養(yǎng)系統(tǒng)故障時(shí)，如何對(duì)血培養(yǎng)瓶處理和孵育等。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范WS/T

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5

血培養(yǎng)瓶接收）161.添加劑手工培養(yǎng)法；自動(dòng)化儀器培養(yǎng)法；室內(nèi)質(zhì)控。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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6

實(shí)驗(yàn)室操作方法及流程）171.抗凝劑抗凝劑使用聚茴香腦磺酸鈉（SPS），濃度為

0.025%～0.05%。肝素、檸檬酸鹽和乙二胺四乙酸（EDTA）不能作為抗凝劑加入血培養(yǎng)瓶中，但在檢測(cè)分枝桿菌時(shí)，也可選用肝素或檸檬酸鹽抗凝。2.抗生素吸附劑推薦使用樹脂。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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6

實(shí)驗(yàn)室操作方法及流程

6.1

添加劑）181.培養(yǎng)基①傳統(tǒng)肉湯培養(yǎng)基傳統(tǒng)肉湯體積應(yīng)為

18

mL～100

mL。需氧培養(yǎng)基;胰酶消化大豆肉湯，腦心浸液肉湯，哥倫比亞肉湯。微需氧或厭氧菌培養(yǎng)需添加硫醇，硫基乙酸鹽；苛養(yǎng)菌培養(yǎng)需添加溶血素、維生素

K1

和

L

型半胱氨酸。②雙相培養(yǎng)基同時(shí)含有瓊脂和肉湯的血培養(yǎng)瓶，可用于成人或兒童患者的需氧菌、厭氧菌和分枝桿菌培養(yǎng)。血液注入后顛倒培養(yǎng)瓶，使血液和肉湯混合物沖刷瓊脂表面，再將培養(yǎng)瓶垂直孵育，觀察肉湯和瓊脂表面有無微生物生長。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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6

實(shí)驗(yàn)室操作方法及流程

6.2

手工培養(yǎng)法

）19③溶血肉湯培養(yǎng)基使微生物從裂解的血液中釋放出來后，通過離心將其與血液成分分離，沉淀物轉(zhuǎn)種固體培養(yǎng)基進(jìn)行孵育。④真菌培養(yǎng)基應(yīng)用上述三種培養(yǎng)基都可檢出酵母菌，但雙相真菌和絲狀真菌宜用雙相培養(yǎng)基和溶血肉湯培養(yǎng)基?？凤躐R拉色菌需要在培養(yǎng)基中添加油脂（如橄欖油）。⑤分枝桿菌培養(yǎng)基分枝桿菌如在傳統(tǒng)肉湯培養(yǎng)基中延長孵育時(shí)間也能生長。在肉湯中添加脂肪酸（如不飽和脂肪酸）、白蛋白和

CO2

更適合分枝桿菌生長。分枝桿菌中某些種（日內(nèi)瓦分枝桿菌和嗜血分枝桿菌）生長時(shí)需要添加劑（分枝桿菌生長素、溶血素、血紅蛋白或檸檬酸鐵胺）。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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6

實(shí)驗(yàn)室操作方法及流程

6.2

手工培養(yǎng)法

）202.培養(yǎng)方法①一般情況推薦

35

℃～37

℃孵育

7d，一些緩慢生長的苛養(yǎng)菌（如巴爾通體、李斯特菌屬、布魯菌屬和奴卡菌屬等）和雙相真菌需要更長的孵育時(shí)間。手工法應(yīng)每天或更頻繁地觀察肉眼可見的微生物生長，特別注意孵育

48

h

內(nèi)的生長跡象。使用明亮的熒光燈泡或白熾燈，觀察濁度、溶血、產(chǎn)氣、表面菌落形成和血液顏色的改變，發(fā)現(xiàn)有微生物生長跡象進(jìn)行涂片革蘭染色和轉(zhuǎn)種，根據(jù)涂片染色結(jié)果選擇培養(yǎng)基類型。②真菌酵母菌在需氧瓶中易生長，搖動(dòng)肉湯培養(yǎng)可提高酵母菌的檢出率。多數(shù)酵母菌孵育

2

d～5d可檢測(cè)出，某些酵母菌如新型隱球菌需延長孵育時(shí)間。懷疑雙相真菌或絲狀真菌感染，孵育時(shí)間需延長

2

w～4

w。雙相培養(yǎng)瓶在孵育的最初

24

h

內(nèi)，應(yīng)輕輕搖動(dòng)。27

℃～30

℃和

35

℃～37

℃同時(shí)孵育。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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實(shí)驗(yàn)室操作方法及流程

6.2

手工培養(yǎng)法

）212.培養(yǎng)方法①一般情況推薦

35

℃～37

℃孵育

7d，一些緩慢生長的苛養(yǎng)菌（如巴爾通體、李斯特菌屬、布魯菌屬和奴卡菌屬等）和雙相真菌需要更長的孵育時(shí)間。手工法應(yīng)每天或更頻繁地觀察肉眼可見的微生物生長，特別注意孵育

48

h

內(nèi)的生長跡象。使用明亮的熒光燈泡或白熾燈，觀察濁度、溶血、產(chǎn)氣、表面菌落形成和血液顏色的改變，發(fā)現(xiàn)有微生物生長跡象進(jìn)行涂片革蘭染色和轉(zhuǎn)種，根據(jù)涂片染色結(jié)果選擇培養(yǎng)基類型。②真菌酵母菌在需氧瓶中易生長，搖動(dòng)肉湯培養(yǎng)可提高酵母菌的檢出率。多數(shù)酵母菌孵育

2

d～5d可檢測(cè)出，某些酵母菌如新型隱球菌需延長孵育時(shí)間。懷疑雙相真菌或絲狀真菌感染，孵育時(shí)間需延長

2

w～4

w。雙相培養(yǎng)瓶在孵育的最初

24

h

內(nèi)，應(yīng)輕輕搖動(dòng)。27

℃～30

℃和

35

℃～37

℃同時(shí)孵育。③分枝桿菌：由于分枝桿菌繁殖緩慢，所有培養(yǎng)瓶應(yīng)至少孵育6

w。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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實(shí)驗(yàn)室操作方法及流程

6.2

手工培養(yǎng)法

）221.培養(yǎng)基商品化培養(yǎng)瓶包括需氧瓶、厭氧瓶、兒童瓶真菌培養(yǎng)瓶及分枝桿菌培養(yǎng)瓶。2.培養(yǎng)方法①一般情況：35

℃～37

℃孵育

5

d，一些緩慢生長的苛養(yǎng)菌（如巴爾通體

、李斯特菌屬和奴卡菌屬等）和雙相真菌需要延長孵育時(shí)間。自動(dòng)化血培養(yǎng)系統(tǒng)每間隔一定時(shí)間自動(dòng)通過電子感應(yīng)器檢測(cè)微生物生長代謝過程中產(chǎn)生的CO2

。濃度或氣壓變化，陽性報(bào)警后需要立即處理。對(duì)于已經(jīng)培養(yǎng)5

d

的陰性瓶不需要常規(guī)盲傳或終點(diǎn)轉(zhuǎn)種。②真菌：宜采用真菌培養(yǎng)瓶。③分枝桿菌：宜采用分枝桿菌培養(yǎng)瓶。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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6.3

自動(dòng)化儀器培養(yǎng)法）231.手工培養(yǎng)法對(duì)培養(yǎng)基、革蘭染色、鑒定試劑、藥敏試驗(yàn)、結(jié)果審核和報(bào)告解釋等每個(gè)項(xiàng)目制訂相應(yīng)的質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。2.自動(dòng)化儀器培養(yǎng)法按廠商推薦的方法進(jìn)行。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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6.4

室內(nèi)質(zhì)控

）241.短期外周導(dǎo)管的血培養(yǎng)采集

2

套外周靜脈血培養(yǎng)。無菌操作拔除導(dǎo)管，剪切導(dǎo)管尖端5

cm，采用

Maki半定量培養(yǎng)。結(jié)果解釋如下∶如1套或以上血培養(yǎng)陽性，并且導(dǎo)管尖端培養(yǎng)陽性（≥15

個(gè)菌落），血培養(yǎng)與導(dǎo)管尖端培養(yǎng)菌種相同，提示為導(dǎo)管相關(guān)性血流感染（CRBSI）;如1套或以上血培養(yǎng)陽性，并且導(dǎo)管尖端培養(yǎng)陰性，無法判斷;但如血培養(yǎng)分離株為金黃色葡萄球菌或念珠菌屬，并且沒有其他明確的感染源，提示為

CRBSI;如

2

套血培養(yǎng)陰性，但導(dǎo)管培養(yǎng)陽性，提示為導(dǎo)管定植;如

2

套血培養(yǎng)和導(dǎo)管尖端培養(yǎng)均為陰性，不考慮

CRBSI。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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實(shí)驗(yàn)室操作方法及流程

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導(dǎo)管相關(guān)血流感染）252.中心靜脈導(dǎo)管及靜脈輸液港（VAP）的血培養(yǎng)①保留導(dǎo)管的患者血培養(yǎng)至少采集

1套靜脈外周血培養(yǎng)，同時(shí)應(yīng)盡快采集等量的1套導(dǎo)管血培養(yǎng)。結(jié)果解釋如下;如

2

套血培養(yǎng)得到的菌株其鑒定結(jié)果和藥敏譜均相同，并且沒有其他明確感染源，提示為CRBSI。如

2

套血培養(yǎng)均陽性并且分離的菌種相同，導(dǎo)管血陽性報(bào)警時(shí)間比外周血陽性報(bào)警時(shí)間早≥120

min，又沒有其他明確感染源，則提示為

CRBSI（如導(dǎo)管血陽性報(bào)警時(shí)間比外周血陽性報(bào)警時(shí)間早<120

min；2

套血培養(yǎng)獲得鑒定與藥敏譜相同的分離株，也可能為

CRBSI）。如僅導(dǎo)管血培養(yǎng)陽性，提示導(dǎo)管有細(xì)菌定植或污染。如僅外周血培養(yǎng)陽性;不能確定為CRBSI。若血培養(yǎng)陽性株為金黃色葡萄葡球菌或念珠菌屬，并且沒有其他明確的感染源，則可能為

CRBSI。如

2套血培養(yǎng)均陰性，不考慮

CRBSI。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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實(shí)驗(yàn)室操作方法及流程

7

導(dǎo)管相關(guān)血流感染）26②擬拔除導(dǎo)管的患者血培養(yǎng)至少采集

1套外周血培養(yǎng)。無菌操作拔除導(dǎo)管，剪切導(dǎo)管尖端5

cm，采用

Maki半定量培養(yǎng)。結(jié)果解釋如下∶如

1套以上血培養(yǎng)和導(dǎo)管尖端培養(yǎng)陽性，并且菌種鑒定與藥敏譜相同，提示為

CRBSI。如

1

套以上血培養(yǎng)陽性且導(dǎo)管尖端培養(yǎng)陰性，若血培養(yǎng)陽性株為金黃色葡萄球菌或念珠菌屬，則可能為

CRSBI。如需要進(jìn)行確認(rèn)，要求進(jìn)一步采集其他外周血培養(yǎng)，獲得陽性且為同一菌種，沒有其他明確的感染源，提示為

CRBSI。如血培養(yǎng)陰性，導(dǎo)管尖端培養(yǎng)陽性，提示定植。如外周血培養(yǎng)和導(dǎo)管尖端培養(yǎng)均為陰性，不考慮

CRBSI。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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導(dǎo)管相關(guān)血流感染）271.采集血培養(yǎng)時(shí)機(jī)及數(shù)量：①急性心內(nèi)膜炎：應(yīng)立即采集血培養(yǎng)。宜在經(jīng)驗(yàn)用藥前

30

min

內(nèi)不同部位采集

2～3

套血培養(yǎng)。②亞急性心內(nèi)膜炎：宜每隔

0.5

h～1h采集1套血培養(yǎng)，不同部位共采集

3

套血培養(yǎng)。如

24h培養(yǎng)陰性，宜加做

2

套血培養(yǎng)。假陽性：假陽性最常見的原因是皮膚寄生菌污染。因此可疑感染性心內(nèi)膜炎患者采集血培養(yǎng)應(yīng)對(duì)采集點(diǎn)皮膚進(jìn)行徹底消毒，且不應(yīng)從留置導(dǎo)管處采血，避免出現(xiàn)假陽性結(jié)果。假陰性：假陰性最常見原因是在采血時(shí)患者已使用抗菌藥物，為降低假陰性，宜使用含樹脂的血培養(yǎng)瓶。另一個(gè)原因是營養(yǎng)變異鏈球菌（如毗鄰顆粒鏈菌、乏養(yǎng)菌屬）感染。孵育時(shí)間：常見病原體

5

d內(nèi)培養(yǎng)陽性。如培養(yǎng)

5

d仍陰性，而臨床懷疑感染性心內(nèi)膜炎，則應(yīng)傳種至不含抗菌藥物的巧克力平皿，5%

CO2

培養(yǎng)。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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感染性心內(nèi)膜炎）281.乏養(yǎng)菌屬和顆粒鏈菌屬：這類菌在大豆胰蛋白胨血瓊脂平板上不生長，次代培養(yǎng)時(shí)要求血培養(yǎng)基中補(bǔ)充吡哆醛或L

型半胱氨酸;或同時(shí)接種金黃色葡萄球菌，該菌呈"衛(wèi)星"生長現(xiàn)象;或采用巧克力培養(yǎng)基、厭氧血瓊脂等營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。巴爾通體：血培養(yǎng)陽性率低，推薦血清學(xué)和分子生物學(xué)方法檢測(cè)。布魯菌屬：大多數(shù)布魯菌需氧瓶培養(yǎng)

3

d

內(nèi)陽性，很少超過

7

d。彎曲菌屬：空腸彎曲菌可在血培養(yǎng)中出現(xiàn)，其在傳種后

42

℃生長較快，微需氧孵育48

h后可看到微小菌落。5.弗朗西斯菌屬：不同菌株生長速度不同，孵育時(shí)間不定。由于其菌體微小，形態(tài)多樣，革蘭染色易漏檢。土拉熱弗朗西斯菌可在標(biāo)準(zhǔn)血培養(yǎng)瓶中生長，初代培養(yǎng)可在標(biāo)準(zhǔn)羊血瓊脂生長，次代培養(yǎng)不生長。有些菌株初代僅在巧克力瓊脂平板生長。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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血培養(yǎng)特殊病原體的處理流程）296.HACEK

菌群：包括嗜血桿菌屬（H）、放線桿菌屬（A）、心桿菌屬（C）、艾肯菌屬（E）和金氏桿菌屬（K）。多數(shù)血培養(yǎng)可在

7d內(nèi)陽性報(bào)警。如高度懷疑心內(nèi)膜炎是由

HACEK

細(xì)菌引起的，而

5

d后血培養(yǎng)仍為陰性，應(yīng)延長培養(yǎng)時(shí)間或盲傳。螺桿菌屬：螺桿菌屬感染多發(fā)生于免疫缺陷患者中。血培養(yǎng)瓶通常孵育

5

d以上，并且在培養(yǎng)結(jié)束后，盲傳至血平板，微需氧孵育。軍團(tuán)菌屬：肺炎繼發(fā)菌血癥少見，孵育培養(yǎng)

5

d后，采用溶解-離心系統(tǒng)傳種于活性炭酵母浸膏（BCYE）培養(yǎng)基培養(yǎng)。鉤端螺旋體：血培養(yǎng)中難分離。支原體：人型支原體偶爾可從血培養(yǎng)中分離出來，添加補(bǔ)充明膠或精氨酸，可以提高檢出率，生長緩慢并采用專用培養(yǎng)基。可疑肺炎支原體和人型支原體感染血液可以直接接種

pH4.5

SP4

葡萄糖培養(yǎng)基。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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血培養(yǎng)特殊病原體的處理流程）301.即便嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，仍有

3%～5%的血培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)出皮膚（如表皮葡萄球菌、痤瘡丙酸桿菌、梭菌、類白喉棒狀桿菌）或周圍環(huán)境（如不動(dòng)桿菌屬、芽孢桿菌屬）中常見菌。這些菌大部分為污染菌，但出現(xiàn)以下情況考慮可能為致病菌∶不同部位血培養(yǎng)標(biāo)本培養(yǎng)出同一種菌;多次分離出同一種菌，且藥敏結(jié)果相同。污染菌不需做藥敏試驗(yàn)，但應(yīng)向臨床報(bào)告，并提示可能污染，如痤瘡丙酸桿菌（皮膚寄生菌）。血培養(yǎng)中兩種或兩種以上細(xì)菌生長，可能是復(fù)數(shù)菌菌血癥，如厭氧菌菌血癥時(shí)可能有多種病原菌感染;也可能是污染所致。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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血培養(yǎng)污染）311.血培養(yǎng)陽性報(bào)告程序①

一級(jí)報(bào)告（初步報(bào)告）血培養(yǎng)陽性，應(yīng)立即進(jìn)行涂片和革蘭染色，盡量在

1

h

內(nèi)報(bào)告給臨床醫(yī)師，包括∶患者姓名、陽性血培養(yǎng)瓶類型、瓶數(shù)、報(bào)警時(shí)間、涂片革蘭染色特性及形態(tài)，詢問患者目前感染情況和抗菌藥物使用情況并記錄，可向醫(yī)師提出治療建議。此外，還應(yīng)記錄報(bào)告時(shí)間、接收?qǐng)?bào)告者信息和報(bào)告者信息。同時(shí)將陽性培養(yǎng)液傳種適當(dāng)培養(yǎng)基。各單位可根據(jù)自身醫(yī)療需求，決定是否基于涂片結(jié)果用培養(yǎng)液進(jìn)行直接藥敏試驗(yàn)。②二級(jí)報(bào)告（補(bǔ)充報(bào)告）將初步鑒定結(jié)果及時(shí)報(bào)告醫(yī)師。如進(jìn)行直接藥敏試驗(yàn)，應(yīng)報(bào)告藥敏結(jié)果。③三級(jí)報(bào)告（終報(bào)告）包括菌種名稱、血培養(yǎng)陽性時(shí)間（以小時(shí)計(jì)算）和標(biāo)準(zhǔn)藥敏試驗(yàn)結(jié)果。注∶

隨著微生物快速診斷技術(shù)如基質(zhì)輔助激光解吸電藕飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALFI-TOF）的應(yīng)用，菌種鑒定結(jié)果有可能在第

1d或第

2d

即可報(bào)告。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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血培養(yǎng)報(bào)告程序）322.血培養(yǎng)陰性報(bào)告程序①

報(bào)告內(nèi)容∶"血培養(yǎng)經(jīng)××天培養(yǎng)陰性"。自動(dòng)化儀器細(xì)菌培養(yǎng)一般設(shè)定周期為5

d，真菌14

d，分枝桿菌42

d;手工法細(xì)菌培養(yǎng)一般周期設(shè)定為7

d，真菌14

d.分枝桿菌

60

d。②可在

72

h培養(yǎng)陰性后，發(fā)布初步報(bào)告，但應(yīng)說明"培養(yǎng)

3

d陰性，標(biāo)本將延長培養(yǎng)至××天，如為陰性可不重復(fù)報(bào)告"。如

72

h

后陽性，應(yīng)按血培養(yǎng)陽性報(bào)告程序處理，與臨床溝通并補(bǔ)發(fā)陽性報(bào)告。③手工法血培養(yǎng)在報(bào)告培養(yǎng)陰性前，宜將血培養(yǎng)液盲傳至血瓊脂平板和巧克力平板，于

CO，培養(yǎng)箱內(nèi)孵育

24

h，培養(yǎng)陰性后再報(bào)告。3.報(bào)告審核實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)陽性血培養(yǎng)涂片口頭報(bào)告。應(yīng)建立初步報(bào)告和最終報(bào)告的審核制度，并進(jìn)行定期匯總分析，對(duì)實(shí)驗(yàn)室信息系統(tǒng)（LIS）需進(jìn)行傳輸和性能驗(yàn)證。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)以上項(xiàng)目制訂標(biāo)準(zhǔn)操作流程。（來源：臨床微生物實(shí)驗(yàn)室血培養(yǎng)操作規(guī)范

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血培養(yǎng)報(bào)告程序）331.安全培訓(xùn)對(duì)實(shí)驗(yàn)室員工進(jìn)行安全培訓(xùn)，應(yīng)涵蓋所有實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)。實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證體系的核心內(nèi)容應(yīng)包括培訓(xùn)、監(jiān)測(cè)、事故報(bào)告、安全相關(guān)文件。實(shí)驗(yàn)室感染針刺傷感染;暴露的皮膚黏膜，接觸氣溶膠或微滴是主要感染途徑。禁止在污染區(qū)用嘴吹吸移液管、咬指甲、抽煙、飲食、摘戴隱形眼鏡、手或其他環(huán)境表面與眼、鼻、嘴接觸等。防護(hù)措施（1）洗手：在戴手套前、摘手套后、工作結(jié)束后、離開實(shí)驗(yàn)室和進(jìn)入清潔區(qū)時(shí)均應(yīng)洗手。如直接接觸血液或潛在的感染性物質(zhì)后應(yīng)