DB11北京市市場監(jiān)督管理局發(fā)布 羅伏兵、李剛、苗燕、劉曉冬、張碩、李志軍、張淼潔、沈光年、李靜、史記、申宏旺、獸醫(yī)生物安全二級實驗室安全技術管理規(guī)范本文件適用于北京市獸醫(yī)生物安全二級實驗室的安全4.1.1應有足夠的人力資源承擔實驗室所提供服務范圍內），4.1.3應建立人員管理程序并對實驗室人員能力要求的確定、選擇、培訓、監(jiān)督、授4.1.4應制定人員準入制度，并主動告知所有員工、來訪者、4.1.5應建立人員健康監(jiān)護程序，應為員工提供必要的免疫計劃、定期的健康4.1.6應為員工提供符合國家相關產(chǎn)品要求的適用防護用品（器材4.1.7員工的工作量和工作時間安排不應影響實驗室活動安全監(jiān)督員、內審員、設備管理員等崗位，并設置4.2.2應設立生物安全委員會，負責咨詢、指導、評估、監(jiān)督實驗室的生物安全相關4.2.3需要時，應設立實驗動物福利倫理），數(shù)組成，至少應由實驗動物專家、獸醫(yī)、實驗動物管理人員、使用實驗動物的檢測人員、公4.2.4應設立安全管理部門承擔實驗室安全相關的管理職責，a)實驗室人員應具有獸醫(yī)或相關專業(yè)背景，并應提供相關專業(yè)背景人員具有從事獸醫(yī)實驗室檢測b)有顏色視覺障礙的人員不應操作涉及到c)技術負責人、授權簽字人及檢測結果意見解釋人員應具有獸醫(yī)專業(yè)中級及以上職稱（或同）；e)特種設備安全管理人員和作業(yè)人員應當按照注：國家對特種設備實行目錄管理。部分實驗室的壓力蒸汽滅菌器屬于h)從事實驗動物操作的人員應確認沒有傳染病和其他影響i)從事實驗室動物操作的人員應了解操作對象的習性，并熟悉動物實4.3.1人員，包括委員會委員、簽約人員、外部機構人員或代表實驗室的個人，應對4.3.3在身體狀態(tài)許可的情況下，應同意接受實驗室的免疫計劃并按照實驗室健4.3.7應主動識別任何危險和不符合規(guī)4.4.1可收集進入實驗室的工作人員相4.4.2可進行心理健康管理。需要時，由專業(yè)人員對工作人員開展心理評估和心理疏4.4.3在進行人員背景調查及心理4.5.1應針對所有人員開展培訓，包括運輸4.5.2實驗室應識別各崗位的培訓需求，并制定培訓計劃，培）；4.5.3人員應經(jīng)上崗考核確認具備相應能力4.5.5應根據(jù)活動范圍內常發(fā)或可能發(fā)生的安全事故，每年組織不少于4.7.1質量監(jiān)督員應制定質量監(jiān)督計劃，宜采用觀察現(xiàn)場試驗、核查檢測記錄和報告4.7.2安全監(jiān)督員應制定安全監(jiān)督計劃，對實驗室人員出入、個人防護裝備使用、實工作、關鍵防護設備維護檢測、廢棄物處置等情況進行監(jiān)督、監(jiān)控，保證實驗室安全計劃注：當人員能力允許的情況下，質量監(jiān)督員和安全監(jiān)督員可由一人兼任，合并制定質量監(jiān)4.7.3安全監(jiān)督員對內務工作的監(jiān)控應包括定期4.8.1人員離職后，應交回相關文件和物品4.8.3應妥善保管離職人員檔案，應依據(jù)實驗室記錄保存h)有關確認員工能力的證據(jù)，應有能力評價的日期和承認該員工能力的應配備滿足工作需要的安全防護設備、實驗儀器和設備、輔5.2.1采購前應根據(jù)預定用途明確儀器和5.2.2應依據(jù)法律法規(guī)和機構的要求制定采購方案，包括招標類采購方案和5.2.3應按照儀器和設備功能指標、運行指標，供應商的管理體系，供應商提供安5.2.4應依據(jù)采購方案進行儀器和設備的采購。如采購的設備為特種設備時，應采5.3.1.3特種設備的出廠資料應至少包括安全技術規(guī)范要求的設計文件5.3.2.1安裝地點的環(huán)境條件應滿足儀器和設備的使用要求，其安裝位5.3.2.2生物安全柜的安裝條件應滿足其設計要求。若生物安全柜的排5.3.2.3生物安全柜應置于遠離人員、物品流動以及可能會擾亂生物安5.3.2.4在有氣流控制的房間里，生物安全柜應安裝于空氣氣流方向的物安全柜前窗操作口、局部排風裝置氣流應與房間氣流方向一致，避免房間氣流對其產(chǎn)生橫向5.3.2.5壓力蒸汽滅菌器應安裝在實驗室或其所在的建筑內，宜與實驗5.3.3.1應保證儀器和設備的硬件及軟件5.3.3.2通風櫥、需要管道排風的生5.3.3.3應記錄并收集其安裝文件，安裝及組裝中觀察到的任何5.3.4.1安裝完成后，應核查儀器設備與相關設施的連接是否正確、可路錯誤連接損壞實驗室設施。應核查安裝位置和空間是否滿足儀器操作、維5.3.4.2首次通電試機前要進行相關檢查，嚴防因供電、供水、送排風5.3.5.1性能驗收包括固定參數(shù)驗收、功5.3.5.2固定參數(shù)驗收主要核查儀器和設備的固定不變的參數(shù)，a)關鍵防護設備生物安全性能應符合RB/T199的要求；核查應按程序，在儀器設備實際運行的場地測試數(shù)據(jù)處理的安全性，如存儲、備份、路5.4.2屬于特種設備的壓力蒸汽滅菌器，安裝前應督促安裝單位向轄區(qū)特種設備安特種設備安裝告知，特種設備的安裝應由具有相應資質的單5.4.3屬于特種設備的壓力蒸汽滅菌器，應先取得特種設備安全監(jiān)督管理部門授予a)當測量準確度或測量不確定度影響b)為建立報告結果的計量溯源性，要求對設備進行作區(qū)潔凈度、報警和聯(lián)鎖功能（適用于安裝壓力蒸汽滅菌器應進行年度的維護檢驗，檢期檢驗。未經(jīng)定期檢驗或者檢驗不合格的特種設備，不應199的要求。經(jīng)確認不符合要求的壓力蒸汽滅菌器，應立即停止使用，5.5.3.1應在儀器設備的顯著位置標示其唯一性標識。需要檢定、校準以標識，以識別標準狀態(tài)或有效期。移液器5.5.3.3特種設備登記標志、特種設備定期檢驗標志應5.5.4.1當儀器和設備投入使用或重新投入使用前5.5.4.2當儀器和設備驗收完后投入使用，儀器設備性能驗收即為儀5.5.4.3當儀器和設備停用后重新投入使用，使用前應參照儀器設備性5.5.5.1應建立儀器和設備運行中檢查及管理的要求。儀器和設備應定5.5.5.2當需要利用期間核查以保持對設備性能的信心時，應按程序進5.5.5.4當儀器和設備在運行中檢查發(fā)現(xiàn)未能達到運行指標或安全要求劑對儀器和設備進行擦拭、噴霧消毒，離心機轉子或離心桶等配件注：可使用指示劑對過氧化氫氣體消毒等方法對儀器設備的消毒效果進行監(jiān)測和評價，消毒效果評價可參照消毒技術修前應按照本標準5.5.6.3對儀器和設備進行消毒。關鍵部位或影響性能的維修，在a)達到或超過設計使用期限，主要部件或結構已損壞，不能達到最低使用要求b)經(jīng)技術鑒定，確屬質量問題或損壞嚴重無法修復及修復費用超過、接近5.5.8.3實驗室應制定儀器和設備報廢的申請、審批、報廢、處置流程5.6.1檔案應包括儀器和設備的基本資料和記錄。儀器和設備檔案的基本要求是能5.6.2實驗室應保存對實驗室活動有影響的儀器和設備、關鍵防護設備的檔案。適b)制造商名稱、型式標識、系列號（編號）或其他）；）；5.6.3應建立實驗室關鍵儀器設備臺賬，臺賬內容包括：儀器和設備名稱、型號、5.6.4應妥善保管報廢儀器和設備的檔案，應依據(jù)實驗室記錄保存期限處置報廢6.1.1應配置滿足實驗室活動及安全防護所需的實驗室材料，包括實驗室材、菌毒種、標準物質、個人防護用品、消毒產(chǎn)品、實驗動物等易耗品或易變6.1.2應根據(jù)實驗活動風險評估的要求，配置6.2.2應依據(jù)法律法規(guī)和機構的要求制定采購方案,6.2.3應按照材料的技術參數(shù)，應用條件，供應商的管理體系，供應商提6.3.1.1材料的外觀驗收包括品名、規(guī)格、等級、數(shù)量、生產(chǎn)6.3.2.1應有文件化的驗收規(guī)定，對技術6.3.2.2應確保所有與安全相關的實驗室材料經(jīng)檢查或證實符6.3.2.3試劑、耗材等產(chǎn)品性能的驗收應包括技術參數(shù)及指標6.4.1應制定存貨管理制度，并按照各種材料6.4.2菌毒種、暫存的高致病性病原微生物陽性樣本應實行雙人雙鎖保管6.4.4化學品需滿足存放禁忌、溫度、濕度，以及治安防范要求，并6.4.5危險化學品應儲存在專用儲存間或專用倉庫內，專用儲存間和專用6.4.6易制毒化學品、易制爆危險化學品應實行雙人雙鎖保管制度，建立6.4.7對于長期不使用且對檢測結果有重要影響的材料（如標準菌株等），6.5.3易制毒化學品、易制爆危險化學品6.5.5使用后的實驗動物應進行無害化處理，7.1.1實驗室應有計劃、申請、批準、7.1.2宜根據(jù)行業(yè)發(fā)展動態(tài)、市場需求、預期收益、自身發(fā)展等情況7.1.3選擇的檢測方法應符合動物病原微生物實7.1.6生物制品企業(yè)質檢實驗室宜選擇《獸藥質量標準》（生物制品7.2.1實驗室負責人應對新項目進行計劃安7.2.2新項目應通過生物安全活動審批和新項目內部技術評審后，方驗的新項目應依次通過生物安全活動審批、實驗動物倫理審查、內部技術評審后，方可正式開展7.2.3項目負責人應按要求提交新項目生物安全活動申請。生物安全批新項目生物安全活動申請應考慮但不限于注：本條款中的高致病性病原微生物的實驗活動是指在《動物病原微生物實驗活動生物安全要求細則》中規(guī)定的高致病性病原微生物的未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料實驗c)檢測項目的作業(yè)指導書。作業(yè)指導書應為實驗人員提供如何在風險最小情況下進行工作的詳細7.2.5適用時，項目負責人應按要求提交實驗動物倫理審查申請。實b)項目負責人、動物實驗操作人員的姓名、專業(yè)培訓經(jīng)歷、實驗動物或動物實驗資質培訓證書編7.2.6項目負責人應按要求提交新項目內部技術評審申請。技術負責室負責人負責批準正式開展新項目。新項目內部技術評審申請應考慮但不限b)檢測項目的作業(yè)指導書，作業(yè)指導書應保證檢測活動操作27025方法確認的要求，方法確認方案見附錄H；樣品在建筑物內或同一場地建筑物之間傳遞時，應樣品應按照國家規(guī)定和標準進行審批、包裝7.3.3.2接收和打開樣品的人員應了解樣品對身體健7.3.3.3經(jīng)評估存在生物安全風險的樣品內層容器應在生物7.3.3.4應按照實驗項目作業(yè)指導書進行檢測操7.3.3.5應建立針對未知風險材料操作的程序，在不具備條7.3.3.7實驗結束時，應對利器盒、不可回收的污染材料（7.3.4.1實驗結束后，應采用經(jīng)確認有效的方式對存在污取過氧化氫氣體消毒等確認有效的方式進行定期消毒。每次定期消毒均應監(jiān)測和評價7.3.5.1將實驗動物飼養(yǎng)在可靠的專用籠具或防護裝置內，7.3.5.3個體防護裝備應考慮方便操作、耐受動物的抓咬和7.3.5.5盡量限制使用針頭、注射器或其他銳器，宜7.3.5.7宜在生物安全柜或隔離裝置內從事涉及產(chǎn)生氣溶膠等。如果不能在生物安全柜或相當?shù)母綦x裝置內進行操作，應組合使用個體防護裝備和其他的7.3.5.9應制定適宜的出入程序，減少動物飼養(yǎng)室和7.3.5.12實驗結束，應將動物尸體裝入防漏的塑料袋或7.3.5.13動物實驗管理及技術要求包括動物實驗室（動物獲取、動物運輸、隔離檢疫、動物保定、動物麻醉和鎮(zhèn)痛、仁慈終點、廢棄7.4.1項目結束后，項目負責人應提交項目實施安全情況報告。報告7.4.2生物安全委員會應對項目安全報告進行評審，并提出生物安全7.4.3對無明顯活動結束期的檢測項目每年至少開展一次生物安全活7.4.5對于無明顯活動結束期的動物實），驗室安全計劃制定前提出實驗動物倫理審查7.5.1檢測項目宜每五年開展一次定期驗證，以保證實驗室能夠正確7.5.3如檢測方法已廢止，實驗室應及時廢止并收回作業(yè)指導書等受8.1.1實驗室使用者應根據(jù)法律法規(guī)要求，在風險評估的基礎上，提出室內局，見附錄J。病理學檢測室的布局可分為標本檢查室、常規(guī)技術室理檔案室。實驗室應建立與其病理診斷項目相適應的設施及環(huán)境條件。血清學檢測室可設置8.1.4實驗室應設置應急照明系統(tǒng)，應急照明必須足以允許安全停止時，教學、科研、醫(yī)療、測試等使用單位，可使用儲存室或者儲存8.2.1.1實驗室入口處應有標識，明確說明生物防護級別、操作的名、緊急聯(lián)絡方式和國際通用的生物危險符號；適用時，應同時8.2.1.2所有操作開關應有明確的功能指示標識，必要時，還應8.2.2.1應建立內務管理的程序，包括內務工作所用清潔劑和消毒8.2.2.4應指定專人使用經(jīng)核準8.2.2.6應在安全處置后對被污染的區(qū)域8.2.2.7應制定日常清潔（包括消毒滅菌）計劃和定期消毒滅菌計8.2.2.8實驗室的內務管理規(guī)程和所用材8.2.2.9實驗室規(guī)程、工作習慣或材料的改變可能對內務人員有潛8.2.3.1實驗室建筑設施的運行維護范圍應涵蓋圍護結構、通風空8.2.3.2應結合建筑設施建造情況和使用運行情況，制定日常巡檢行安全操作規(guī)程，按時保質進行保養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)隱患應及時排除和維修。對于較為復雜且長c)定期對長期停止使用（三個月或半d)必要時，每日對實驗室設備間、自控(資料性)生物安全柜安裝位置示例A.1A2型生物安全柜安裝位置示例A2型生物安全柜在有氣流控制的生物安全二級實驗室安裝位置示例見圖A.1。送風口圖A.1A2型生物安全柜在有氣流控制的生物安全二級實驗室安裝位置示例獸醫(yī)實驗室應對檢定或校準的儀器設備的計量溯源結果進行確認并形成文件，確認滿足要求后方B.2.1.1核查法定計量機構出具證書上的授權證號；政府授權的或認可的校B.2.1.2實施檢定的設備應出具檢B.2.2.1實驗室應將檢定/校準得到的檢測設備的計量溯源結果，與相應檢測方法中的計量要求進行B.2.2.2檢測方法對儀器設備的準確度等級有明確規(guī)定的，實驗室應確認計B.2.2.3檢測方法對儀器設備的準確度等級沒有明確規(guī)定的，實驗室可依據(jù)規(guī)程規(guī)定應能達到的要求對儀器設備是否符B.2.2.4儀器設備某些指標或某些測量范圍經(jīng)檢定或校準后不符合檢定規(guī)程驗室的使用范圍之內，而實驗室所使用的技術要求和量程都符合要求，仍可評價判定其為符合計量要只要其修正后的計量溯源結果符合實驗室預期使用的計B.2.3.1檢測實驗室應對計量溯源結B.2.3.2檢測實驗室應對計量溯源結果確認不合格的儀器設備，分析其不合——對校準結果不符合高精度檢測要求或關鍵量值不滿足檢測要求的設備，可降級使用或限制范檢測實驗室應保留計量溯源結果確認的記錄，計量溯源結果確認過程應注明日期并由授權人審查￡校準證書編號：□是￡否□是￡否￡是￡是￡否￡否是否符合要求￡是￡否是否使用了修正值、修正因子￡是￡否￡校準/檢定結果滿足要求￡根據(jù)證書、報告數(shù)據(jù)、結果判定該設備能正常使用￡根據(jù)證書、報告數(shù)據(jù)、結果判定該設備需降級使用￡其他：Ⅲ測±0.03；吸光度重復性（%1.0；靈敏度R校準證書編號：XXX￡檢定證書編號：￡檢定機構授權號：R校準機構認可編號：XXXR是￡否R是￡否是否有不確定度信息R是￡否是否能溯源至國家基準R是￡否是否符合要求R是￡否是否使用了修正值、修正因子￡是R否R校準/檢定結果滿足要求￡根據(jù)證書、報告數(shù)據(jù)、結果判定該設備能正常使用￡根據(jù)證書、報告數(shù)據(jù)、結果判定該設備需降級使用￡其他：校準）之間，其功能或計量特性能夠持續(xù)滿足相應規(guī)范或獸醫(yī)實驗室需要期間核查的儀器設備主要包括分析天平、移液器、pH計、酶標儀、梯儀器設備內置自校檢查、儀器設備說明書列明的其他技術指標等項器設備是否需要進行期間核查，判斷依據(jù)包括但實施期間核查的人員應了解需期間核查儀器設備的檢定/校準周期、使用頻率、維修情況等，根據(jù)儀器設備檢定/校準周期、使用頻率、維修情況等，確定需要進行期間核查的儀器設備和核查性的物質。無強烈的機械振動和電磁干擾。天平置于穩(wěn)定、平坦、無振動的臺E.6.1.1核查移液器塑料件外殼表面應光滑、平整；不應有明顯的縮E.6.1.2核查移液器主體應有以下標記：制造廠名稱或標簽、產(chǎn)品名E.6.3.2.3垂直握住移液器，將按鈕按到核查位置，此時將在液面下2mm～3mm處，緩慢放松按按到第一停止點，等待1s～2s，再將按鈕完全按下，然E.6.3.2.5將稱量杯放入電子天平上，記錄此時電子天平顯%%V20——標準溫度20℃時的移液器的實m——被移液器所排出的蒸餾水表觀質量，單位為克（g℃℃℃E.6.3.3.2移液器容量相對誤差計算見公式(2)。E=(V-V平×100V——標稱容量，單位為微升(μL);移液器的容量重復性計算見公式(3)和(4)。Vi——單次測量值與被測量的平均值之差，單位為微升(μL);S——重復性。E.7期間核查結果處理移液器外觀核查和容量性核查項目均符合要求的，準予繼續(xù)使用；發(fā)現(xiàn)有不合格項目時，分析判斷原因，按規(guī)定程序進行相應的維護或維修，然后再次進行期間核查，直至核查合格，若維護或維修結果仍不合格，按規(guī)定程序做出降級使用或停用報廢等處理意見。并對之前該移液器涉及的檢測報告進行分析。制定本方案，對未獲農(nóng)業(yè)農(nóng)村主管部門批準的試劑盒檢測方法馬傳染性貧血病ELISF.3.1.1與標準方法瓊脂凝膠免疫擴散F.3.2.1.1分析敏感性樣品盤制備：可選用馬傳性血清，將該標準陽性血清從1：2逐級倍比稀釋至1：2048，每個稀釋度個稀釋度的血清樣品各一份構成一組樣品，共制備兩組F.3.2.1.2分析特異性樣品盤制備：滿足馬傳染病毒可能有交叉反應的至少5種血清樣品，如馬流感病毒陽性血清樣品、馬皰疹病毒陽性血清樣品等，F(xiàn).3.2.1.3檢測：用馬傳染性貧血病ELISA檢測方法及馬傳染性貧血病AGID方法分別對樣品盤進行檢F.3.2.2.1樣品盤制備：樣品盤應包括F.3.2.4.1比對樣品制備：馬傳染性貧2份，分別將其等分成3份小樣。取來自上述不同樣品的小樣各1份，6份小樣制成1組F.3.2.4.2