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生物化學(xué)實(shí)驗(40或24學(xué)時)學(xué)習(xí)通超星期末考試章節(jié)答案2024年下列對堿性磷酸酶性質(zhì)的描述,正確的是(A)。
答案:堿性磷酸酶在33%丙酮溶液中溶解常用的酶活力單位?
答案:U(指特定條件(25℃,其它為最適條件)下,在1分鐘內(nèi)能轉(zhuǎn)化1微摩爾底物的酶量)、;Kat(在最適條件下,1秒鐘能使1摩爾底物轉(zhuǎn)化的酶量)。1Kat=6×107U,1U=16.67n比活力概念及意義;比活力用每毫克蛋白所含的酶活力單位數(shù)表示。比活力=酶活力單位數(shù)/酶蛋白質(zhì)量酶的比活力比活力代表酶制劑的純度。對于同一種酶來說,比活力愈大,表示酶的純度愈高。從某細(xì)胞中提取的一種蛋白水解酶的粗提液300mL含有150mg蛋白質(zhì),總活力為360單位。經(jīng)過一系列純化以后得到的4mL酶制品(含有0.08mg蛋白),總活力為288單位。請問回收率是多少?純化了多少倍?
答案:比活力=酶活力單位數(shù)/酶蛋白質(zhì)量
;純化倍數(shù)
=純化后的比活力
/
粗抽提液比活力=(288/0.08)/(360/150)=1500
;產(chǎn)率(回收率)=純化后的總活力單位
/
粗抽提液總活力單位=288/360=0.8=80%在常規(guī)的電泳緩沖液中(pH8.5)),制備好的凝膠板平行放于電泳槽中,蛋白質(zhì)(等電點(diǎn)為pH4-5)點(diǎn)樣孔靠近正極。
答案:錯血清脂蛋白用蘇丹紅染色。
答案:錯線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數(shù)成反比,分子越大則所受阻力越大,也越難于在凝膠孔隙中移動,因而遷移得越慢。
答案:對蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì),其等電點(diǎn)為pH4-5,在常規(guī)的電泳緩沖液中(pH約8.5),蛋白質(zhì)分子帶負(fù)電荷,在電場中向正極移動。
答案:對根據(jù)有無支持體,電泳分為()電泳和()電泳。
答案:自由/無支持體;區(qū)帶/有支持體瓊脂糖凝膠電泳可以將血清脂蛋白區(qū)分出(),但是實(shí)驗中由于前β-脂蛋白含量過低往往看不到這條帶。
答案:乳糜微粒;β-脂蛋白;前β-脂蛋白;α-脂蛋白下列()因素可以影響帶電粒子在電場中的遷移速度。
答案:帶電量;分子大小、形狀;緩沖液離子強(qiáng)度;電場強(qiáng)度;緩沖液pH值;電滲血清脂蛋白瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗,()操作正確。
答案:融膠-倒膠-拔梳-點(diǎn)樣電泳
答案:帶電顆粒(離子、膠?;蚍肿樱┰谕饧与妶鲎饔孟?,向帶相反電荷的電極做定向移動的現(xiàn)象。脫氧核糖核蛋白(DNP)存在于細(xì)胞核,微溶于高鹽溶液(1molVL),溶于低鹽溶液(0.14molV/L)。()
答案:錯在細(xì)胞中,DNA和RNA都是以與蛋白質(zhì)結(jié)合的狀態(tài)存在的。()
答案:對二苯胺可用來鑒定RNA。
答案:錯SDS在DNA的提取過程中去除DNA上結(jié)合的蛋白質(zhì)用苔黑酚法定量RNA,應(yīng)在()處測吸光度值。
答案:670nm關(guān)于動物肝臟DNA的提取步驟,以下說法正確的有()
答案:DNA提取過程應(yīng)避免過酸、過堿、高溫及機(jī)械張力損傷。肝臟DNA提取時,以下哪種濃度的鹽溶液可以最大程度地溶解DNA?()
答案:1molVL有關(guān)從動物肝臟中提取DNA的實(shí)驗描述,(
)是錯誤。
答案:0.14mol/L氯化鈉可使RNA核蛋白沉淀唾液淀粉酶的最適PH為8.0
答案:錯對唾液淀粉酶活性的描述,錯誤的是()。
答案:Cl—是唾液淀粉酶的抑制劑關(guān)于酶的抑制劑的敘述正確的是()
答案:酶的抑制劑中一部分是酶的變性劑以下哪項不是酶的特性()
答案:能加速化學(xué)反應(yīng)但不改變反應(yīng)平衡點(diǎn)酶的活化和去活化循環(huán)中,酶的磷酸化和去磷酸化位點(diǎn)通常在酶的哪一種氨基酸殘基上?()
答案:絲氨酸雙縮脲反應(yīng)是肽和蛋白質(zhì)所特有的反應(yīng),所以二肽也有雙縮脲反應(yīng)
答案:錯雙縮脲反應(yīng)既可以用于蛋白質(zhì)含量檢測也可以用于氨基酸含量的檢測。
答案:錯蛋白質(zhì)分子中含有許多肽鍵(-CONH-)在堿性溶液中能與Cu2+反應(yīng)產(chǎn)生紫紅色化合物,因此可以采用比色法測定蛋白質(zhì)含量。
答案:對常用測定蛋白質(zhì)含量的方法有()。
答案:凱氏定氮法;雙縮脲法(Biuret法);Folin-酚試劑法(Lowry法);紫外吸收法;考馬斯亮藍(lán)法(Bradford法)某物質(zhì)的吸光系數(shù)與下列哪個因素有關(guān)
答案:測定波長下列分子中,可發(fā)生雙縮脲反應(yīng)的是
答案:肽和蛋白質(zhì)雙縮脲測定血清中蛋白質(zhì)含量的實(shí)驗中,選用比色的波長為()。
答案:540nm酶不能影響它所催化反應(yīng)的平衡的到達(dá)時間。
答案:錯丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制作用實(shí)驗中用到的石蠟油用于隔絕空氣。
答案:對Km是酶的特征性常數(shù)之一。
答案:對丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制屬于(),能與底物競爭與()結(jié)合,形成酶-抑制劑復(fù)合物,從而阻礙底物與酶活性中心的結(jié)合,使酶的活性受到抑制。其抑制程度與底物和抑制劑的相對比例有關(guān),只要()底物濃度,底物可取代活性中心的抑制劑。
答案:競爭性抑制;酶活性中心;加大/提高競爭性抑制劑的抑制程度與下列哪種因素有關(guān)()。
答案:底物濃度;抑制劑濃度;酶與底物親和力的大小;酶與抑制劑親和力的大小關(guān)于Km值的意義,不正確的是()。
答案:Km值與酶所催化的底物無關(guān);Km值等于反應(yīng)速度為最大速度一半時的酶的濃度丙二酸抑制琥珀酸脫氫酶是()。
答案:競爭性抑制酶的競爭性抑制的動力學(xué)效應(yīng)是()。
答案:Km值增大,max不變
請結(jié)合丙二酸抑制琥珀酸脫氫酶的實(shí)驗,簡述競爭性抑制作用的原理。
答案:(1)有些抑制劑化學(xué)結(jié)構(gòu)與酶的底物結(jié)構(gòu)相似,可與底物競爭結(jié)合酶的活性中心,使酶的活性降低甚至喪失,這種抑制制作用稱為競爭性抑制作用。(2)琥珀酸脫氫酶是機(jī)體內(nèi)參與糖代謝三羧酸循環(huán)的一種重要的脫氫酶,其輔基為FAD。它能催化琥珀酸脫氫生成延胡索酸,F(xiàn)AD接受氫生成FADH2。體外實(shí)驗機(jī)體中的琥珀酸脫氫酶在缺氧的情況下,可使琥珀酸脫氫生成延胡索酸,脫下之氫可將藍(lán)色的甲烯藍(lán)還原成無色的甲烯白。這樣,便可以顯示琥珀酸脫氫酶的作用。(3)琥珀酸脫氫酶活性越高,甲烯藍(lán)脫色所需的時間越短。由于甲烯白易被空氣中的氧氣氧化成甲烯藍(lán),所以實(shí)驗需要在無氧條件下進(jìn)行。實(shí)驗過程中加一層液體石蠟以隔絕空氣。丙二酸與琥珀酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)很相似,能和琥珀酸競爭與琥珀酸脫氫酶結(jié)合,從而抑制琥珀酸的脫氫作用。其抑制程度與抑制劑和底物二者的濃度有關(guān)。若琥珀酸脫氫酶已與丙二酸結(jié)合,則不能再催化琥珀酸脫氫。相對增加琥珀酸的濃度,則可減輕丙二酸的抑制作用。這種現(xiàn)象符合競爭性抑制的特點(diǎn)。本實(shí)驗通過加入不同濃度的琥珀酸和丙二酸來觀察丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制作用。競爭性抑制作用
答案:有些抑制劑與底物的結(jié)構(gòu)相似,能與底物競爭酶的活性中心,從而阻礙酶-底物復(fù)合物的形成,這種抑制作用稱為競爭性抑制作用。凝膠層析是按照組分的親和力進(jìn)行分離的將組分分離純化的。
答案:錯在一定條件下,某種物質(zhì)的Rf值是常數(shù),因此可以通過比較混合氨基酸樣品與已知氨基酸的Rf值,確定混合氨基酸樣品中的氨基酸種類。
答案:對Rf值決定于被分離物質(zhì)在兩相間的分配系數(shù)以及兩相間的體積比。
答案:對氨基酸在濾紙上移動的速率可以用Rf值表示,Rf是指溶劑前緣至原點(diǎn)的距離/色斑中心至原點(diǎn)的距離。
答案:錯氨基酸紙層析實(shí)驗,其中的濾紙是固定相,水分是流動相。
答案:錯紙層析法是應(yīng)用最廣泛的一種()層析。該方法以為()支持物,濾紙上吸附著()是經(jīng)常用的固定相,以()作為流動相。
答案:分配;濾紙;水;有機(jī)溶劑因為手的汗液中含有多種()和肽,遇()后起顯色反應(yīng),該方法可被法醫(yī)學(xué)利用采集犯罪嫌疑人在現(xiàn)場留下來的指紋。
答案:氨基酸;茚三酮影響Rf的因素包括()、()、()和()等因素。
答案:物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和分子極性;層析溶劑;pH值;溫度所有的層析系統(tǒng)都由()組成。
答案:固定相;流動相
根據(jù)層析原理,可將層析分為()。
答案:吸附層析;分配層析;離子交換層析;親和層析;凝膠層析關(guān)于離子交換層析的描述下列哪一項不正確()。
答案:
陽離子交換劑常可離解出帶正電的基團(tuán)
凝膠層析分離混合物的基本原理是()。
答案:分子篩作用在層析技術(shù)中,分配系數(shù)是指()。
答案:一種化合物在固相與流動相中的分配達(dá)到平衡時的濃度比層析法
答案:層析法也叫色譜法,是利用混合物中各組成部分物理、化學(xué)和生物學(xué)性質(zhì)的差異(如吸附力、分子形狀及大小、分子親和力、分配系數(shù)等),使各組成部分在兩相(一相為固定的,稱為固定相;另一相流過固定相,稱為流動相)中的分布程度不同,從而使各組成部分以不同的速度移動而達(dá)到分離的目的。奧氏吸管上只有一個刻度,放液時必須吹出最后殘留在吸量管尖端的液體。
答案:對在溶液的pH值小于蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)時,蛋白質(zhì)與重金屬離子結(jié)合成鹽而沉出。
答案:錯低溫可以延緩乙醇的變性作用,而使蛋白由于脫水沉淀出來。
答案:對蛋白質(zhì)變性一定會出現(xiàn)沉淀。
答案:錯蛋白質(zhì)沉淀說明蛋白質(zhì)已經(jīng)變性
答案:錯有機(jī)溶劑使溶液介電常數(shù)變小,增加離子靜電引力,導(dǎo)致分子聚集。
答案:對pH大于PI,蛋白質(zhì)帶負(fù)電。
答案:對pH=pI時,蛋白質(zhì)溶解度最大
答案:錯水化層和雙層電是蛋白質(zhì)穩(wěn)定的兩個主要因素
答案:對以下()現(xiàn)象與蛋白質(zhì)變性有關(guān)。
答案:汞中毒早期服用雞蛋清或者牛奶;提取動物DNA時,使用SDS;使用75%酒精進(jìn)行體表消毒關(guān)于吸量管的選用,描述正確的是()。
答案:若取整數(shù)量液體且吸取量需要準(zhǔn)確,選用相應(yīng)刻度的吸量管;若加入同種液體但量不同時,選用同與最大的取液量接近的刻度吸管;
若加入等量的同種液體,選用與取液量之和最接近的刻度吸管關(guān)于蛋白質(zhì)變性的敘述正確的是()。
答案:蛋白質(zhì)變性后易于沉降,但不一定沉降,沉降的蛋白質(zhì)也不一定變性以下有關(guān)刻度吸量管的使用方法描述,不正確的操作是()。
答案:尖端殘留液體需要吹出蛋白質(zhì)變性后,其理化性質(zhì)及生物學(xué)性質(zhì)發(fā)生改變,但下列()除
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