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DB21SpeciesidentificationofMactrachinensis遼寧省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:丹東永明食品有限公司、中國科學(xué)院海洋本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:張濤、宋浩、李永明、李朝輝、楊靖華、胡博、楊紅生、周毅、張立1中國蛤蜊(種質(zhì))GB/T18654.2養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗第2部分:抽GB/T18654.12養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗第12部分:染色體組DB21/T1958-2012水產(chǎn)動物DNA鑒定線粒體COI基因序列法軟體動物門(Mollusca)、雙殼綱(Bivalvia)、5.1外部形態(tài)特征25.1.2色澤5.1.3絞合部左右兩殼各具一主齒,左主齒呈“人”字形,右主齒呈“八”字形。左殼前后方各1齒,單片,右后閉殼肌痕略大于前閉殼肌痕,在前后閉殼肌上方各有一5.2軟體部后閉殼肌大于前閉殼肌,略呈方柱形體,前閉殼5.2.4鰓身體左右各有鰓兩片,內(nèi)外鰓形狀不同,外鰓小于內(nèi)鰓,內(nèi)外鰓在背緣與內(nèi)臟囊相連,內(nèi)鰓的3自然條件下,1齡殼殼長可達(dá)20mm~30mm。4齡或5齡時,殼長可達(dá)50mm~60mm。中國蛤蜊年齡、123~504~605~60每年只有一個繁殖期,繁殖盛期為5月中旬~8月上旬。其繁殖季節(jié)隨著地理區(qū)域不同而存在差異,水溫14℃以上時,可以排精、產(chǎn)卵。排精和產(chǎn)卵時親貝雙殼微張,配子從出水管緩緩排出。精子乳白色呈煙霧狀,卵子粉紅色呈絲縷狀。分批產(chǎn)卵,殼長45mm的雌性個體,1次產(chǎn)卵量在70萬?!?00萬粒左右。卵沉性,排入水中的卵細(xì)胞不能立即4“TAGTAGCGCAATAAATTGTCCTTTAATTGGGGAAATGAATGAAAGGGTTGACGAGGGGGAAGCTATCTTTTTGGTATAGTTTGAAGTTTTCTTTTATGTGAAAAGACTTAGATTTTATAATTAGAAGAGAAGACCCCGGCGAGCTTGTTAAGGGTTACTAAGTTGAGGTAATTATTGATTTTTGTTGGGGCAACGCAAAGGGAAAAGAACTCCTTTGAGTTTTATAGGGATCCACTTAGAGTGAACAAAGCAAAAGCTACCGCGGGGATAACAGCGCAATTTCTTCAGAGAGCTCATATCGAAGAGG“ATCGACATCTTGAACGCATATTGCGGCTCCGGCTCAATGCCGAAGCCCCGCCTGTCCGAGGGTAGGCTAAACATAATCGCCCGTATCTGCCTGTCGAGGCACCGTTTCATTACGGTGAATCCAGCGCAGGGGCGACTTGGCGTTTCGCGCGAGCCTGTCTCGCCCGTTCGCTCGAGCTCTCCGCTCTCCCAGCAGGCCAACTCATTCAGTGGCGCAGGGACTGGGCCCGATCGGATCCAGTCTACCGTAGCTATCTGAAGGTCTCGCTGCGTTCTGCCGCCGTCCCTCTCGCCTCTTCGTGAGGCTCGATCGAGGTTGATGGCCACGACTAGCGCAACCGGCTCGATGTACAGCACTCTCACTGCGGCTTACCAGCCGCGGAGGTCGAGGAGCACCACGTCGCCGGGGAGTAACCCGTTCTCGCTCACTAGTTCGCTAGTAGCAGCTCGGGTTTGCGCGGTCTGTGCTTGGGGCAAGGAGCGGGCACCCAACCTATTCACTAGGTGAGTAGGCGGCGCACATAGTATAAAACAACCTACCTCGGATCAGACGAGACTACCCGCTGAATTTAAGCAT片段長度為627bp,檢測特征見圖3,片段的單倍型序列位點為:CATAAAGATATTGGCACTCTTTATTTCGTCTTTTCTTATTGGGCTGGGTTGGTAGGAACAGCTTTTAGCTCTATTATTCAGTTAGCTGTTCCTGGTGAGAGTCTTTTAGATGGGCAGCTTTATAATTTAGTTGTGACGGCGCATGCTTTAGTTATAATTTTTTTTTTAGTGATGCCAATAATGATGGGGGGTTTTGGGAATTGGTTAGTTCCTCTAATGTTAAAAGTTCCAGATATGAGGTTTCCTCGTATGAACAATATTAGGTTCTGACTTCTTCCTGTTTCTATTTTACTTCTATTTGCTTCGGCCTATGTTGAAAGAGGGGCAGGAACTGGTTGAACCATTTATCCTCCTCTGTCTAGGCATATAGGACATCCTGGACCGGCTATGGATTATGTTATTTTTTCTCTCCACGTAGGTGGTCTTTCTTCGATC5CTAGCATCTATTAATTTCTTTACAACTTTCCTAAGGATACGACTAAAGGTGATGTCTTTATATCGGGTTCCTTTGTTTGTTTGATGCTGTAACTAGGTTCTTGTTAGTAGTTGCTATACCTGTTTTGGCTGGCGCTCTTACTATGTTGTTAACAGATCGGAATTTCAA觀察100個左右的分散良好的中期分裂相,記數(shù)確定二倍體數(shù)。從中挑選10個分散良好、形態(tài)清晰取足肌肉30mg,剪碎至糜狀,使用DNA提取試65’-TGAGCGTGCTAAGGTAGC-3’5’-AGCCAACATCGAGGTCGC-3’5’-CACACTGAACATCGACAGCTTG-3’5’-GTTTCTTTTCCTCCGCTTACTG-3’),),8.3.5.1TAE(凝膠緩沖液和電泳緩沖液)7將Marker和PCR產(chǎn)物加入點樣孔,上樣完畢后,在室溫條件下以120V~150V電壓進(jìn)行電泳
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