10一、項目來源根據(jù)《廣西標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會關(guān)于下達(dá)2023年第四十二批團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)制定項目計劃的通知》（桂標(biāo)協(xié)〔2023〕145號），《壯藥材山風(fēng)種子繁育技術(shù)規(guī)程》由廣西壯族自治區(qū)藥用植物園提出，廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司、廣東漢潮中藥科技有限公司、廣西壯族自治區(qū)藥用植物園共同起草，項目編號為2023-4202。二、項目背景及目的意義1、目的意義近年來，國家非常重視中醫(yī)藥的創(chuàng)新和傳承發(fā)展，非常重視藥材規(guī)范化種植，提出要圍繞中藥種植、生產(chǎn)、使用全過程，充分發(fā)揮科技支撐引領(lǐng)作用，加快促進(jìn)中藥材種業(yè)發(fā)展，大力推進(jìn)中藥材規(guī)范種植，提升中藥飲片和中成藥質(zhì)量，推動中藥產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展。廣西作為中草藥資源大省，中草藥資源非常豐富，是我國“天然藥庫”和“中藥材之鄉(xiāng)”，蘊(yùn)藏著中藥資源種類7506種，居全國第二，擁有眾多具壯、瑤等少數(shù)民族特色的中草藥，中藥、民族藥產(chǎn)業(yè)成為廣西重要支柱產(chǎn)業(yè)之一。為進(jìn)一步促進(jìn)中藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展，近年廣西充分利用得天獨(dú)厚的生態(tài)環(huán)境和中草藥資源優(yōu)勢，通過強(qiáng)化頂層設(shè)計、標(biāo)準(zhǔn)制定、產(chǎn)業(yè)融合等模式，大力發(fā)展中草藥人工種植，以推動中藥材產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展，助力鄉(xiāng)村振興。本項目開展“壯藥材山風(fēng)種子繁育技術(shù)規(guī)程”團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)研究和編制，符合國家和廣西中藥發(fā)展有關(guān)政策規(guī)定，通過開展種子繁育技術(shù)研究及技術(shù)規(guī)范制定，解決山風(fēng)種子在自然條件下發(fā)芽率低的關(guān)鍵技術(shù)難題，解決山風(fēng)種子繁育技術(shù)和種植無技術(shù)規(guī)范可依的局面，有利于保護(hù)山風(fēng)種質(zhì)資源的遺傳多樣性，進(jìn)一步加強(qiáng)廣西境內(nèi)各地區(qū)的山風(fēng)種質(zhì)資源的管理與利用，并為廣西地區(qū)山風(fēng)的大面積人工栽培打下良好基礎(chǔ)，促進(jìn)壯藥材山風(fēng)可持續(xù)發(fā)展，為增加藥農(nóng)收入和促進(jìn)鄉(xiāng)村振興，同時可推進(jìn)山風(fēng)有關(guān)制劑再創(chuàng)新和做強(qiáng)做優(yōu)做大，創(chuàng)造更加良好的經(jīng)濟(jì)效益。2、必要性壯藥材山風(fēng)為菊科植物馥芳艾納香BlumeaaromaticaDC.的干燥全草，又名艾納香、香艾、香艾納，屬多年生粗壯草本或亞灌木狀植物，被銀白色絨毛覆蓋，具有香氣。山風(fēng)性溫，味辛、微苦，歸肺、肝經(jīng)，壯醫(yī)認(rèn)為其能調(diào)龍路火路、祛火毒、除濕毒、止癢，常用于風(fēng)濕骨痛、濕疹、外傷出血等，具有抗菌、消炎、消腫、止痛、止癢、順氣等功能，為廣西壯族地區(qū)民間和臨床常用草藥，是廣西民族藥（壯藥）“華佗風(fēng)痛寶片”、“華佗風(fēng)痛寶膠囊”、“祛風(fēng)濕藥酒”的主要原料之一。近年來，隨著我國醫(yī)藥市場的不斷擴(kuò)容，山風(fēng)需求也不斷增加，目前華佗風(fēng)痛寶片、華佗風(fēng)痛寶膠囊、祛風(fēng)濕藥酒需要山風(fēng)約60（噸/年），其他科研研究、醫(yī)療機(jī)構(gòu)制劑、臨床及民間用藥約20噸，年消耗山風(fēng)總量約80噸，藥材來源均為野生品，直接為山風(fēng)產(chǎn)地的藥農(nóng)增收約160萬元。但隨著墾荒和氣候、土壤環(huán)境惡化，加上野生山風(fēng)資源遭到過度采集，野生資源越來越緊缺且質(zhì)量日益下降，嚴(yán)重阻礙了山風(fēng)藥材及其制劑的發(fā)展，亟待人工繁育種植加以解決。根據(jù)文獻(xiàn)報道，山風(fēng)種子在自然條件下發(fā)芽率極低，目前廣西山風(fēng)繁育技術(shù)研究主要集中在組織培養(yǎng)技術(shù)方面，以廣西壯族自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)《山風(fēng)組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程》為例，但是目前文獻(xiàn)關(guān)于山風(fēng)種子繁育少有報道，且缺乏改善種子發(fā)芽率的繁育技術(shù)的相關(guān)研究的文獻(xiàn)報道。種子繁育具有的優(yōu)勢，種子貯存、運(yùn)輸方便，種子繁殖具有繁殖系數(shù)大、利于馴化和新品種培育的特點(diǎn)，是不可忽視的繁育方式，而且廣西地區(qū)的山風(fēng)的種質(zhì)資源尚且未有詳細(xì)的保護(hù)與管理，即使相關(guān)栽培的研究，其母株依然為野生資源，沒有得到規(guī)范化管理，這不利于山風(fēng)栽培技術(shù)的可持續(xù)發(fā)展。因此為解決山風(fēng)資源緊缺問題，廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司擬聯(lián)合廣東漢潮中藥科技有限公司、廣西壯族自治區(qū)藥用植物園組成標(biāo)準(zhǔn)制定小組，開展團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《壯藥材山風(fēng)種子繁育技術(shù)規(guī)程》的研究、制定，通過收集山風(fēng)種質(zhì)資源，開展種子發(fā)芽技術(shù)研究，進(jìn)行種子繁育種苗，解決山風(fēng)種子自然條件下發(fā)芽率低的關(guān)鍵技術(shù)難題，促進(jìn)山風(fēng)規(guī)模化人工種植，滿足制劑生產(chǎn)和臨床、科研等需求。三、項目編制過程（一）成立標(biāo)準(zhǔn)編制工作組團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《壯藥材山風(fēng)種子繁育技術(shù)規(guī)程》獲得立項后，廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司、廣東漢潮中藥科技有限公司、廣西壯族自治區(qū)藥用植物園成立了標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組，組長黃若干，副組長吳祿祥、張占江、馬恩耀，組員唐春風(fēng)、周淑瑤、藍(lán)曉東、周勁松、黃寶優(yōu)、鐘林靜、蘇虹惠、江紫薇、張悅、彭玉德、陳路、覃佩莉、黃平權(quán)，標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組實行目標(biāo)責(zé)任制和組長負(fù)責(zé)制，制訂科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)难芯亢推鸩菥帉懛桨?，項目組成員分工明確、責(zé)任到人。具體分工見下表：表1編制工作組人員名單序號姓名性別年齡職務(wù)/職稱從事專業(yè)工作單位責(zé)任分工1黃若干男50副主任藥師藥學(xué)廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司標(biāo)準(zhǔn)整體方案設(shè)計、實施管理2吳祿祥男36制藥工程師制藥工程廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司標(biāo)準(zhǔn)整體方案設(shè)計3張占江男47研究員藥用植物保育與可持續(xù)利用研究廣西壯族自治區(qū)藥用植物園技術(shù)指導(dǎo)4馬恩耀男32主管藥師中藥學(xué)廣東漢潮中藥科技有限公司技術(shù)指導(dǎo)、種子繁育研究5唐春風(fēng)女45主管藥師種質(zhì)資源評價廣西壯族自治區(qū)藥用植物園種子繁育研究6藍(lán)曉東女32工程師化工與制藥廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司收集整理文獻(xiàn)資料、藥材標(biāo)本及種子收集7周勁松男48高級工程師中藥學(xué)廣東漢潮中藥科技有限公司技術(shù)指導(dǎo)、種子繁育研究8黃寶優(yōu)男45高級工程師藥用植物資源與保育廣西壯族自治區(qū)藥用植物園種子繁育研究9周淑瑤女26初級工程師遺傳育種廣東漢潮中藥科技有限公司種子繁育研究10鐘林靜女28初級工程師林業(yè)工程廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司種子繁育研究11蘇虹惠女25初級工程師藥學(xué)廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司種子繁育研究12江紫薇女24初級工程師中藥資源廣東漢潮中藥科技有限公司種子繁育研究13張悅女23初級工程師中藥資源廣東漢潮中藥科技有限公司種子繁育研究14彭玉德男43高級工程師藥用種質(zhì)資源保育廣西壯族自治區(qū)藥用植物園種子繁育研究15陳路男43副主任藥師中藥學(xué)廣西壯族自治區(qū)藥用植物園種子繁育研究16覃佩莉女58高級工程師藥學(xué)廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司種子繁育研究17黃平權(quán)男58教授級高級工程師中藥學(xué)廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司種子繁育研究18藍(lán)祖栽男57副主任技師中藥資源廣西壯族自治區(qū)藥用植物園種子繁育研究（二）收集整理文獻(xiàn)資料標(biāo)準(zhǔn)編制工作組經(jīng)查閱，收集了國內(nèi)有關(guān)山風(fēng)繁育技術(shù)相關(guān)文獻(xiàn)資料。主要有：DB45/T1855-2018,山風(fēng)組培苗生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程[S]劉紅昌,魏志局,王華磊等.貴州艾納香種苗繁育技術(shù)探討[J].農(nóng)技服務(wù),2015,32(07):26-27.江興龍,潘俊鋒,司健.艾納香人工栽培技術(shù)[J].林業(yè)科技開發(fā),2005(02):68-70.羅娜.艾納香栽培技術(shù)[J].現(xiàn)代園藝,2016(01):55-56.官玲亮,龐玉新,王丹等.中國民族特色藥材艾納香研究進(jìn)展[J].植物遺傳資源學(xué)報,2012,13(04):695-698.《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（2022年第22號）（三）研討確定標(biāo)準(zhǔn)主體內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)編制工作組在對收集的資料進(jìn)行整理研究后，組織組員召開標(biāo)準(zhǔn)編制會議，根據(jù)實際情況對標(biāo)準(zhǔn)整體框架及關(guān)鍵性問題進(jìn)行了研究探討，最終確定標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容包括范圍、規(guī)范性引用文件、術(shù)語和定義、種質(zhì)要求、種子育苗、大田苗圃育苗、種苗出圃、包裝、標(biāo)簽、運(yùn)輸和儲存、檔案管理。（四）標(biāo)準(zhǔn)的主要起草過程前期研究基礎(chǔ)該標(biāo)準(zhǔn)立項后，根據(jù)自治區(qū)對民族藥材產(chǎn)業(yè)高質(zhì)量發(fā)展戰(zhàn)略，廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司、廣東漢潮中藥科技有限公司和廣西壯族自治區(qū)藥用植物園標(biāo)準(zhǔn)制定小組立即著手進(jìn)行有關(guān)山風(fēng)種子繁育技術(shù)方面的省內(nèi)外調(diào)研、國家標(biāo)準(zhǔn)和地方標(biāo)準(zhǔn)查新工作，在大量收集和整理有關(guān)種子繁育技術(shù)的相關(guān)資料后，按照制定標(biāo)準(zhǔn)的要求進(jìn)行分類整理，同時由廣西壯族自治區(qū)藥用植物園和廣東漢朝中藥科技有限公司的實驗人員在溫室內(nèi)和室外育種科研基地開展種子繁殖實驗，為本項目地方標(biāo)準(zhǔn)的制定提供了大量詳實的實驗數(shù)據(jù)。成立起草小組，開展基礎(chǔ)工作標(biāo)準(zhǔn)制定方案下達(dá)后，項目承擔(dān)單位及時成立了標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組，討論了標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)容提綱以及工作計劃，查閱了國內(nèi)同類標(biāo)準(zhǔn)及資料，并進(jìn)行了收集、整理和對比分析，在相關(guān)研究成果的基礎(chǔ)上由廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司和廣西壯族自治區(qū)藥用植物園專業(yè)技術(shù)人員確立制定《壯藥材山風(fēng)種子繁育技術(shù)規(guī)程》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)。明確編制提綱，確定標(biāo)準(zhǔn)框架在擬定標(biāo)準(zhǔn)編制工作進(jìn)度后，2022年1月至2022年12月在溫室內(nèi)和室外育種科研基地完成種子繁殖和病蟲害防治工作基礎(chǔ)上，2023年由廣西白云山盈康藥業(yè)有限公司在上述基地開展了種子質(zhì)量綜合評價試驗，最終總結(jié)出山風(fēng)種子繁育技術(shù)方法。標(biāo)準(zhǔn)編制工作組通過認(rèn)真研究討論，提出了制定提綱，敲定了制定規(guī)范的框架。起草標(biāo)準(zhǔn)文本，征求意見并形成標(biāo)準(zhǔn)送審稿2023年7月，起草小組認(rèn)真查閱了標(biāo)準(zhǔn)修訂的有關(guān)文件，對標(biāo)準(zhǔn)的格式、內(nèi)容、術(shù)語表達(dá)方式等進(jìn)行了深入學(xué)習(xí)，嚴(yán)格遵循GB/T1.1－2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則》所規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)編寫要求，起草了“壯藥材山風(fēng)種子繁育技術(shù)規(guī)程”制定初稿，2023年8月，起草工作小組對標(biāo)準(zhǔn)的草案進(jìn)行了數(shù)次修改，形成了征求意見稿。四、標(biāo)準(zhǔn)制定原則1、實用性原則本文件中有關(guān)廣西山風(fēng)種子繁育技術(shù)規(guī)程內(nèi)容及要求的規(guī)定，是在充分收集相關(guān)資料和文獻(xiàn)，依托組織培養(yǎng)實驗室和溫室進(jìn)行制定，符合當(dāng)前山風(fēng)生產(chǎn)與應(yīng)用技術(shù)的發(fā)展水平，具有較強(qiáng)的實用性和可操作性。2、協(xié)調(diào)性原則在標(biāo)準(zhǔn)編寫過程中注意了廣西山風(fēng)種子繁育技術(shù)相關(guān)法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的協(xié)調(diào)問題，在內(nèi)容上與現(xiàn)行法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)一致。3、規(guī)范性原則本文件嚴(yán)格按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的要求和規(guī)定編寫本文件的內(nèi)容，保證標(biāo)準(zhǔn)的編寫質(zhì)量。4、前瞻性原則本技術(shù)規(guī)程，具有較強(qiáng)的創(chuàng)新性和可操作性，具有以下優(yōu)點(diǎn)：（1）利用1/2MS培養(yǎng)基繁育種子，提高種子發(fā)芽率；（2）利用山風(fēng)種子為材料，探究繁育技術(shù)，彌補(bǔ)了山風(fēng)種子繁育技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)空白；（3）山風(fēng)種子繁育技術(shù)有利于廣西山風(fēng)種質(zhì)資源的保存與管理。五、標(biāo)準(zhǔn)主要章節(jié)內(nèi)容及確定依據(jù)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)《廣西山風(fēng)種子繁育技術(shù)規(guī)程》技術(shù)內(nèi)容主要依據(jù)為《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（2022年），主要章節(jié)內(nèi)容包括：術(shù)語和定義、種質(zhì)要求、種子育苗、煉苗、大田苗圃育苗、起苗包裝等。其適用于廣西地區(qū)山風(fēng)種植區(qū)的種子繁育。標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容及依據(jù)來源說明如下：術(shù)語和定義山風(fēng)在壯族等少數(shù)民族地區(qū)有著悠久的用藥歷史，是一種重要的民間草藥，具有祛風(fēng)、除濕、止癢、止血等功效。標(biāo)準(zhǔn)編制工作組在查閱總結(jié)了相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)、著作、論文、科技期刊等文獻(xiàn)資料的基礎(chǔ)上，對廣西山風(fēng)種子繁育技術(shù)所涉及的概念進(jìn)行統(tǒng)一定義、確立術(shù)語。壯藥材山風(fēng)又名馥芳艾納香、香艾、香艾納，為菊科植物馥芳艾納香BlumeaaromaticaDC.的干燥全草；壯藥材山風(fēng)種子為山風(fēng)植株生長經(jīng)開花結(jié)實形成的種子，為瘦果，圓柱形，長約1毫米，被棕紅或淡褐色柔毛；壯藥材山風(fēng)種苗為山風(fēng)種子播種繁殖用于田地移栽的幼苗。圖1野生山風(fēng)資源種質(zhì)要求根據(jù)文獻(xiàn)和山風(fēng)的生長特性，山風(fēng)種子的母株宜選擇植株生長健壯、茂盛、無病蟲害、葉量大，葉片較厚，葉背密被絨毛，莖粗壯，根系豐富的，并待種子成熟期采種，于每年12月-次年3月，當(dāng)種子種毛散開時采收，放于陰涼處留待育苗。種子育苗文獻(xiàn)報道山風(fēng)種子在自然環(huán)境下發(fā)芽率極低，因此本技術(shù)規(guī)程旨在改善種子發(fā)芽率問題。種子自然環(huán)境下發(fā)芽受到當(dāng)?shù)毓庹?、溫度、水分、土壤等因素的影響，而利用組織培養(yǎng)實驗室和培養(yǎng)基，人工控制一系列影響因素，以有效提高山風(fēng)的發(fā)芽率，經(jīng)試驗研究，同批次種子發(fā)芽率從3%提高至18%。配制含8g/L瓊脂和30g/L蔗糖的1/2MS固體培養(yǎng)基，利用滅菌鍋進(jìn)行高溫高壓滅菌。使用75%酒精消毒種子1分鐘，并使用移液器吹打種子，使酒精充分接觸種子，棄酒精后，加入無菌水吹打沖洗，重復(fù)3次，加入0.1%升汞消毒5分鐘，再用無菌水沖洗3次。用鑷子將消毒后的種子夾至滅菌濾紙上吸取多余的水分，再將種子大量撒入培養(yǎng)基。培養(yǎng)溫度約23℃，濕度在40%-60%之間，光照12h。表1山風(fēng)種子發(fā)芽基質(zhì)與消毒試劑對發(fā)芽率的影響基質(zhì)配比消毒試劑發(fā)芽率組培瓶污染/病蟲害情況1/2MS固體培養(yǎng)基75%酒精與0.1%升汞20%污染輕度黃泥：營養(yǎng)土：蛭石=1：1：175%酒精3%幼苗葉片易發(fā)黑，需及時剪除河沙75%酒精1%種子在沙床發(fā)霉嚴(yán)重MS固體培養(yǎng)基75%酒精與0.1%升汞15%污染輕度1/2MS固體培養(yǎng)基75%酒精1%種子消毒措施不完善，污染嚴(yán)重圖2組培室環(huán)境圖3山風(fēng)種子圖41/2MS培養(yǎng)基種子育苗圖41/2MS培養(yǎng)基種子育苗煉苗以草木灰、營養(yǎng)土、蛭石、黃泥作為煉苗基質(zhì)，按照表2不同配比配制煉苗基質(zhì)，并將基質(zhì)進(jìn)行高溫高壓滅菌。將已在培養(yǎng)基長成高約3cm的幼苗移栽于含煉苗基質(zhì)的育苗盆。通過比較，當(dāng)基質(zhì)體積比為營養(yǎng)土：蛭石：黃泥=1：1：1（基質(zhì)Ⅱ）時候山風(fēng)幼苗生長情況最好，在遮光率達(dá)50%-70%的溫室培養(yǎng)煉苗，保持基質(zhì)濕潤，兩周后，幼苗可長高至約8cm。而基質(zhì)Ⅰ和基質(zhì)Ⅲ可能由于黃泥或草木灰占比較多，透氣性差，導(dǎo)致山風(fēng)植株生長情況不佳，出現(xiàn)黃色病葉，容易枯死。最終選擇營養(yǎng)土：蛭石：黃泥=1：1：1（基質(zhì)Ⅱ）作為煉苗基質(zhì)表2山風(fēng)種子育苗基質(zhì)配比基質(zhì)草木灰營養(yǎng)土蛭石黃泥Ⅰ1013Ⅱ0111Ⅲ3011圖5煉苗培養(yǎng)大田苗圃育苗大田苗圃的大氣環(huán)境應(yīng)符合GB3095-2012《環(huán)境空氣質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》二級或以上要求。灌溉水質(zhì)應(yīng)符合GB5084—2005《農(nóng)田灌溉水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)》要求。盡管山風(fēng)幼苗已經(jīng)過煉苗，但山風(fēng)幼苗依然不適宜暴曬，需要搭建遮蔭棚，大田苗圃遮蔭率需達(dá)50%。在3-4月春季陰雨天時，將山風(fēng)組培苗移栽于溫室中煉苗兩周后，在苗高8cm左右時，將苗移栽到營養(yǎng)袋中,緩苗后,澆透水再移栽到大田苗圃環(huán)境中，大田苗圃的土壤濕度應(yīng)保持在60%–