DB21T 3458-2021 利用KASP 標記鑒定蔬菜雜交種純度技術規(guī)程_第1頁
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CCSB04DB21TechnicalRegulationforidentificationofthepurityofvegetablehybridsbyKASPmarker遼寧省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I本文件起草人：王玉剛、黃勝楠、冀瑞琴、劉志勇、李承彧、章云、任杰、孫云霞、張迎歡、本文件發(fā)布實施后，任何單位和個人如有問題和意見建議，均可以通過來電和來函等方式進行反饋，我們將及時答復并認真處理，根據(jù)實際情況依法進行評估歸口管理部門通訊地址：遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳（沈陽市和平區(qū)太原北街2號），聯(lián)系電話：1利用KASP標記鑒定蔬菜雜交種純度技術規(guī)程本文件適用于已完成全基因組測序的蔬菜作物雜交種純度快下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）GB/T3543（所有部分）農(nóng)作物種子檢驗NY/T2472西瓜品種鑒定技術規(guī)程SNY/T2473結(jié)球甘藍品種鑒定技術規(guī)程NY/T2474黃瓜品種鑒定技術規(guī)程SNY/T2475辣椒品種鑒定技術規(guī)程S全基因組重測序Whole-genomeRese指對已知基因組序列的物種進行不同個體的基因組測序，并在此基礎上對個體或群體進行差異入缺失位點（InDel）、結(jié)構變異位點（SV，StructureVariation）和拷貝數(shù)NumberVariation)。KASP技術TheKompetitiveAlleleSp指可在廣泛的基因組DNA樣品中，對SNPs（EDTA：乙二胺四乙酸（EthyleneDiaminTris-HCl：三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽（Trishydrochlor2KASP：競爭性等位基因特異性PCR（KompetitiPCR：聚合酶鏈式反應（PolymeraseChainReact按照NY/T2471～2476給出的方法，借鑒番茄、西瓜、結(jié)球甘藍、黃根據(jù)雙親重測序篩選的SNP和InDel位置信息，設計特異正向引物兩條，通用反向引物一條。SNP引物設計網(wǎng)站http://www.Tris-HCl（1M），氯化鈉，EDTA31擴增結(jié)束后，利用實時熒光定量PCR儀檢測熒光信號并3N——檢測樣品種子數(shù)。4首先將兩對特異正向引物和通用反向引物分別

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