流式細(xì)胞術(shù)簡介

張林西

生命科學(xué)研究中心流式細(xì)胞術(shù)簡介0Background流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)（FlowCytometry，F(xiàn)CM）是70年代發(fā)展起來的一種快速對單細(xì)胞定量分析和分選的新技術(shù)，能定量分析細(xì)胞的生物化學(xué)成分。其檢測速度之快、統(tǒng)計學(xué)精度之高，是其他的方法無可比擬的?？赏瑫r從一個細(xì)胞中測得多種參數(shù)（如DNA、RNA、蛋白質(zhì)、細(xì)胞體積等）進行多參數(shù)分析，為細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的研究提供了強有力的手段。在80年代，流式細(xì)胞術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)和臨床醫(yī)學(xué)的研究，使之成為切實可行的有效的研究方法。流式細(xì)胞術(shù)簡介FCM在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中得到廣泛推廣應(yīng)用。例如在免疫學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、腫瘤學(xué)、病理學(xué)、放射生物學(xué)等學(xué)科。并形成了獨特的學(xué)科分支，諸如流式免疫學(xué)、流式遺傳學(xué)、流式病理學(xué)、流式細(xì)胞酶學(xué)等。近年來，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，多種新的熒光探針的不斷出現(xiàn)，使FCM技術(shù)的應(yīng)用范圍不斷擴大，特別是各種各樣的熒光探針標(biāo)記的單克隆抗體和其它蛋白質(zhì)的出現(xiàn)，為FCM研究各種組織細(xì)胞膜和細(xì)胞內(nèi)抗原、腫瘤性蛋白等開辟了新途徑。新的腫瘤標(biāo)志物的不斷出現(xiàn)，大大提高了FCM在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的的研究水平。其發(fā)展速度之快，應(yīng)用層出不窮。流式細(xì)胞術(shù)簡介

FCM是集現(xiàn)代電子物理技術(shù)、激光技術(shù)、電子計算機技術(shù)和流體力學(xué)等于一身的高科技儀器，開創(chuàng)了熒光技術(shù)的又一個嶄新的領(lǐng)域。近年來，此項技術(shù)發(fā)展十分迅速。具有更高靈敏度、更高分辨率、雙激光、多熒光參數(shù)分析的儀器不斷問世，并在朝著經(jīng)濟實用、操作簡便、小巧精制、自動化程度高的方向發(fā)展。確信，流式細(xì)胞分析技術(shù)進一步與其它技術(shù)的結(jié)合，將極大的推動生物醫(yī)學(xué)的發(fā)展。流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介FirstcommercialFCM流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介FCMpapers流式細(xì)胞術(shù)簡介一、流式細(xì)胞儀

品牌、型號簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介1.BD(BecktonDickinson)公司▲1973年第一臺：FACS

I（FluorescenceActivatedCellSorter）▲1980年中國第一臺：FACSII▲市場占有率：全球75%，中國70%

2.BeckmanCoulter公司：逐年增多趨勢??？流式細(xì)胞儀主要廠商流式細(xì)胞術(shù)簡介熒光激活細(xì)胞分選儀（Fluorescenceactivatedcellsorter,FACS）名稱介紹

流式細(xì)胞儀的發(fā)展，從開始的設(shè)想到第一臺儀器的問世，經(jīng)歷了幾十年的時間。隨著現(xiàn)代激光技術(shù)、電子檢測技術(shù)和電子計算機技術(shù)的迅速發(fā)展，該技術(shù)在近些年來有了迅速的發(fā)展，成為目前比較完善的細(xì)胞分析工具。

流式細(xì)胞術(shù)簡介1.臨床型（臺式機）特點：光路調(diào)節(jié)系統(tǒng)固定，自動化程度高，操作簡便，易掌握2.科研型（大型機）特點：分辨率高，選配多種波長和類型激光器，可感興趣細(xì)胞分選到特定培養(yǎng)孔或板上，適用于科研。新型儀器特點：儀器選2-4根激光，可檢測13種熒光參數(shù)，15種參數(shù)。適用于高速分選和多色分析。自動化程度很高，提高工作效率。流式細(xì)胞儀分類：流式細(xì)胞術(shù)簡介FACSAnalyzerFACSⅡFACSⅢFACS420,440FACSstarFACScanFACSstar+FACSsortFACSVantageFACSCaliburFACSVantageSEBDLSRⅠFACSVantageDiVaBDLSRⅡFACSAriaFACScanto流式細(xì)胞計的進展B-D公司流式細(xì)胞計系列流式細(xì)胞術(shù)簡介EPICSXL/XL-MCL臺式機

CytomicsTMFC500系列——最新型EPICSAltra細(xì)胞分選儀——大型科研型

Coulter公司不同型號流式細(xì)胞儀流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介FACSCaliburLSRIIFACSAriaFACSCountFACSVantage&DiVaFACSCantoBD公司不同型號流式細(xì)胞儀流式細(xì)胞術(shù)簡介FACSCalibur(單激光）流式細(xì)胞術(shù)簡介FACSCalibur流式細(xì)胞術(shù)簡介BDFACSCaliburSystem

流式細(xì)胞術(shù)簡介本儀器系統(tǒng)（TheBDFACSCaliburTMsystem）是BD公司的另一個第一：唯一的四色、雙激光臺式機，可進行細(xì)胞分析及分選。特別為更大范圍的應(yīng)用而設(shè)計。本儀器是一個完全的同時進行多參數(shù)分析系統(tǒng)。本儀器系統(tǒng)結(jié)合了唯一的雙激光技術(shù)、自動化的上樣功能及強大的軟件，可滿足臨床實驗室高度工作效率的需要。本系統(tǒng)的可調(diào)節(jié)及創(chuàng)新性技術(shù)還可以為研究者提供廣泛的研究需要及靈活型需求。本儀器能夠滿足目前的臨床及研究需求。它的靈活性可達到你將來的需求。流式細(xì)胞術(shù)簡介本系統(tǒng)：容納3色或4色熒光BDFACStationTM

數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)靈活性及可升級性流式細(xì)胞術(shù)簡介BDLSR流式細(xì)胞術(shù)簡介BDLSRIISystem流式細(xì)胞術(shù)簡介本儀器系統(tǒng)（TheBDLSRII）可最多配置4根激光、具有檢測高達18色的能力。本儀器可配置488nm,405nm,633nm,and355nmUV激光。本儀器核心是新的數(shù)字化電子元件。本電子元件在16,384分散水平可數(shù)字化信號達到1千萬次／秒，這樣擴大了通道處理能力及增加了檢測的敏感性。電子死亡時間被消除了，可進行更精確的熒光測量。這樣增進了熒光測量線性、補償及量化。BDLSRIISystem高達18色檢測；數(shù)字化獲取及分心系統(tǒng)；靈活性及將來的可升級性。激光選擇:355nmUV,405nm,633nm流式細(xì)胞術(shù)簡介BDFACSArrayBioanalyzerSystem流式細(xì)胞術(shù)簡介BDFACSArrayBioanalyzerSystem:快速的微量滴定板sampler*

6參數(shù)檢測（包括散射光及熒光）；直觀的軟件系統(tǒng)；數(shù)字化信號處理，可高達15,000／秒。臺式組合結(jié)構(gòu)。流式細(xì)胞術(shù)簡介BDFACSCanto?Tomorrow’sflowcytometer...today!

流式細(xì)胞術(shù)簡介BDFACSCanto?flowcytometerBD公司自從1974年第一臺商用流式細(xì)胞儀問世一直致力于流式細(xì)胞儀的創(chuàng)新。BDFACSCanto?benchtopflowcytometer繼承了這個傳統(tǒng)。它的主要特這是：1.真6色容納能力——從少量的樣品量中獲取每個細(xì)胞更多的信息。2.敏感性(<50MESFPE,<100MESFFITC*)——解決最微弱的events。3.快速(10,000events/sec)—加速稀少事件的獲取。4.Lowcarryover(<0.1%)—使樣品污染最小化。5.更換透鏡鍵盤化—不用工具更換濾光片。6.Fixedopticalalignment—免除用戶調(diào)節(jié)。7.日常管理自動化—為科研節(jié)約更多時間。流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介BDFACSVantageSEflowcytometrysystem流式細(xì)胞術(shù)簡介BDFACSVantageSEflowcytometrysystemHigh-performance,high-speedcellsorterTheBDFACSVantageTMSEflowcytometrysystemisthesuperiorcell-sortinginstrumentfortheresearchlaboratory.Forover25years,BDcellsortershavebeenthegoldstandardandarefoundinleadinguniversity,pharmaceutical,andbiotechnologyresearchfacilitiesthroughouttheworld.流式細(xì)胞術(shù)簡介Tomeettheresearchdemandsoftoday,wehaveimprovedtheBDFACSVantageTMandaddedoptionsthatcustomizeit.TheresultistheBDFACSVantageSE,aflowcytometerthatperformswithmaximumflexibilityandreliability.Allofthistechnologyisaccessiblethroughafamiliaruserinterfaceandefficientergonomicdesign.TheBDFACSVantageSEflowcytometrysystemisfullymodular,fortheneedsoftodayandbeyond.多色分析及分選；BDFACStationTMSystem數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)；靈活性及可升級性；非矩形分選窗口。流式細(xì)胞術(shù)簡介FACSVantageDiVa流式細(xì)胞術(shù)簡介FACSAria流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介TheBDFACSAriaTMcellsortersetsanewstandardforhighperformanceflowcytometry.

Basedonarevolutionarynewdesignininstrumentation,thiseasy-to-usebenchtopsystemdelivershigh-speedsortingandmulticoloranalysis.

TheBDFACSAriainstrumentisthefirstbenchtopsorterthatincorporatesafixed-alignmentcuvetteflowcell.

Thisnewflowcellprovidessuperiorfluorescencesensitivity.

Thefixedopticalsystemoffersfreedomfrominstrumentmaintenanceandalignment.

SortsetupandsortmonitoringfeaturesinthesystemsoftwaremaketheBDFACSAriainstrumenteasytouse.

BDTMAccuDropisintegratedintothesystemforquickandaccuratedrop-delaydetermination.

Streammonitoring

ofthebreakoffpointandclogdetectionareincorporatedforwalkawaysorting.流式細(xì)胞術(shù)簡介·

第一個benchtop高速分選儀，有固定的線性流動細(xì)胞杯；·

Cuvette（小杯）flowcell更好的熒光敏感性；·

多至空氣制冷的3根激光（488-nm,633-nm,and407-nm波長）；·

數(shù)字化獲取速率高達70,000events/second；·

多色分析，最多可達到15個參數(shù)；·

2路和4路批量分選裝置；·

OptionalBDTMAutomatedCellDepositionUnit(ACDU)用來進行分選到BDMultiwellTM

板或光鏡的載玻片上；

·

可獲得的氣霧劑管理選擇（Available

BDTM）；·

無需特別的設(shè)備。流式細(xì)胞術(shù)簡介FCM自動細(xì)胞分離器流式細(xì)胞術(shù)簡介BDFACS?LyseWashAssistant

withLargerTankIVD流式細(xì)胞術(shù)簡介FeaturesoftheBDFACS?Lyse/WashAssistantwithLargerTankOption（特點）：·Lyses（溶解）·Mixes（混合）·Washes（洗滌）·Incubates（孵育）·Fixes（固定）·RemovesRBCs,hemoglobin,platelets,andunboundantibody（去除紅細(xì)胞、血紅蛋白、血小板和未結(jié)合的抗體）?！avesvaluabletimewhencomparedtomanualmethod（與手工方法比較，節(jié)省大量寶貴時間）?！rocessesfourfullloaderracks(160samples)withouthavingtochangefluids（處理160份樣本而不用更換液體）。流式細(xì)胞術(shù)簡介TheBDFACS?Lyse/WashAssistant（本系統(tǒng)）使樣本準(zhǔn)備自動化。它可溶解、混合、洗滌及固定樣品，使你輕松進行流式細(xì)胞儀分析。應(yīng)用更大的tanks選擇，可使實驗室效率顯著提高。你可同時運行4個loaderracks(160個樣本)而不必更換液體。較大的tanks可輕松與LWA（本儀器）融為一體，且較大的tanks垂直放置于一個箱體內(nèi)最大程度地節(jié)省了空間。選擇5個既定程序之一或創(chuàng)建多至10個客戶程序以滿足您實驗室的需要。同時可處理最多40份樣本。獲專利的細(xì)胞－洗滌技術(shù)省去了樣本需轉(zhuǎn)到離心機進行離心。這樣增加了自由時間同時提高了實驗室效率）。本儀器系統(tǒng)：強大的自動化樣本準(zhǔn)備解決方案。流式細(xì)胞術(shù)簡介BDMediMachineSystem流式細(xì)胞術(shù)簡介BDMedimachineSystemTheBDTMMedimachinesystemisasamplepreparationsystemfortheautomated,mechanicaldisaggregationofsolidanimalorplanttissuesforflowcytometricanalysis,cellculture,orDNAamplification.TheBDMedimachinesystemconsistsofthreecomponents:theMedimachine,Medicons,andFilcons.Variousporesizesofdisposable,sterile,andnon-sterileMediconsandFilconsallowtheoperatortooptimizeexperimentalconditionstosuitthetissueunderstudy,ensuringclean,viablepreparationsofsinglecells,cellclusters,orcellnuclei.Theprocedureisfastandsimple.FeaturesoftheBDMedimachineSystemPreparestissuequicklyandautomaticallyStandardizestissuedisaggregationIseasytouseCanbeusedwithorwithoutenzymes流式細(xì)胞術(shù)簡介BDFACSAriaIII流式細(xì)胞術(shù)簡介持續(xù)創(chuàng)新的流式細(xì)胞分選儀

BDFACSAriaIIIBDFACSAria?III是基于專利的穩(wěn)定性光路技術(shù)、卓越的多色分析和分選性能、非凡的自動化操作的基礎(chǔ)上創(chuàng)新而成最新一代流式細(xì)胞分選平臺，是BDFACSAria系列高端流式細(xì)胞分選儀在分選領(lǐng)域的最新成功力作。自2003年第一臺BDFACSAria問世以來，每一次更新?lián)Q代都使復(fù)雜的分選應(yīng)用擴展到更加寬廣的研究領(lǐng)域，拓展了更廣的應(yīng)用范圍?，F(xiàn)在，全新的BDFACSAriaIII功能更強大、性能更可靠、擁有超乎想象的可操作性。流式細(xì)胞術(shù)簡介詳細(xì)參數(shù)指標(biāo)全球第一臺臺式高速細(xì)胞分選儀，使用石英杯流動檢測池固定光路校準(zhǔn)技術(shù)，不需每日調(diào)整光路，儀器隨開隨用。石英杯流動檢測池?zé)晒鈾z測靈敏度度及佳，<125MESF;可以使用達三根激光：激光波長為488nm、633nm和407nm.獲取速度達70,000細(xì)胞/秒，分析速度達50,000細(xì)胞/秒;多色分析，分析參數(shù)可達15色之多;完全數(shù)字化電子處理系統(tǒng)，分辨率達262,144道，分選精度達1/32液滴;液流系統(tǒng)車裝載鞘液、廢液和洗液，液流自動控制系統(tǒng)，軟件自動清洗程序;進樣倉自動加壓，自動混勻樣本，自動沖洗進樣管路;噴嘴選擇70mm或100mm，滿足絕大多數(shù)細(xì)胞分選的要求，噴嘴拆換簡便、精確;兩管或四管分選，可以使用多種規(guī)格的收集管;配件BDACDU裝置，可以在微孔板或載波片上定量分選細(xì)胞;軟件自動儀器控制和計算分選設(shè)置，液滴監(jiān)控，自動檢查堵塞;樣本和分選細(xì)胞冷卻系統(tǒng);配件BDAMO，工作時控制浮質(zhì)，避免污染;工作無特殊環(huán)境要求，不需要額外輔助設(shè)備.流式細(xì)胞術(shù)簡介技術(shù)參數(shù)

BDFACSAria流式細(xì)胞分選儀為流式細(xì)胞儀高速分選和多色分析技術(shù)設(shè)定了更新更高的標(biāo)準(zhǔn)。儀器的設(shè)計采用全新理念，極大地簡化了高速分選和多色分析的操作和實驗要求。

BDFACSAria流式細(xì)胞儀是全球獨一無二的臺式高速細(xì)胞分選儀，使用石英杯流動檢測池固定光路校準(zhǔn)技術(shù)。其熒光檢測靈敏度度極佳，而儀器維護和調(diào)校卻非常簡單。

BDFACSAria流式細(xì)胞儀系統(tǒng)軟件的分選設(shè)定和監(jiān)測功能大大簡化了操作。儀器內(nèi)置的BDAccuDrop系統(tǒng)可以快速準(zhǔn)確地確定液滴延遲時間。液流監(jiān)測系統(tǒng)自動監(jiān)測液流斷點，檢查堵塞，實現(xiàn)了細(xì)胞分選的無人操作。流式細(xì)胞術(shù)簡介

流式細(xì)胞術(shù)是對單個細(xì)胞和其他生物微粒進行快速定量分析和分選的學(xué)問。這種分析和分選是一種過程。這個過程中經(jīng)過處理的細(xì)胞和微粒被包在鞘液中通過一個聚焦的光源被激發(fā)出散射光熒光，進而通過各種光學(xué)敏感元件測量這些光強度達到測量其物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)的目的，并可根據(jù)這些性質(zhì)分選出高純度的細(xì)胞亞群。實現(xiàn)這個過程的儀器叫流式細(xì)胞計。二、流式細(xì)胞術(shù)的一般介紹

1.什么是流式細(xì)胞術(shù)？流式細(xì)胞術(shù)簡介●流式細(xì)胞術(shù)（FlowCytometry，F(xiàn)CM）

利用流式細(xì)胞儀對處在快速直線流動狀態(tài)中的單細(xì)胞或生物顆粒進行多參數(shù)、快速定量分析，同時對特定群體加以分選的現(xiàn)代細(xì)胞分析技術(shù)?！窳魇郊?xì)胞儀（FlowCytometer)

集激光技術(shù)、電子物理技術(shù)、光電測量技術(shù)、電子計算機技術(shù)、細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)為一體的一種新型高科技儀器。流式細(xì)胞術(shù)簡介▲只要是單細(xì)胞懸液均可分析▲高速：分析速度最高達上萬個細(xì)胞/秒▲單細(xì)胞中同時測定多個參數(shù)▲精度高、準(zhǔn)確性好（與傳統(tǒng)熒光鏡相比）▲當(dāng)代最先進的細(xì)胞定量分析技術(shù)?！瑫r測定液相中多種可溶性成分：流式微球芯片技術(shù)2.FCM特點：流式細(xì)胞術(shù)簡介FSC—前向角散射光(ForwardLightScatter)SSC—側(cè)向角散射光(SideScatter)FL1—熒光1(Fluorescence1)FL2—熒光2(Fluorescence2)………FLn—熒光n(Fluorescencen)3.流式細(xì)胞計的參數(shù)(原理還要介紹）流式細(xì)胞術(shù)簡介

細(xì)胞的相對大小和截面積的大小。因為在前向主要為光的衍射作用，這一方向細(xì)胞經(jīng)過激光后形成衍射環(huán)。測量光波長定了，噴嘴和前向的距離不變后。細(xì)胞的大小和衍射環(huán)大小有一定關(guān)系。要注意FSC—SSC點圖，有時它含許多有意義的內(nèi)容。4.FSC的物理意義流式細(xì)胞術(shù)簡介

雙激光七參數(shù)流式細(xì)胞計光路示意圖流式細(xì)胞術(shù)簡介

三激光八參數(shù)流式細(xì)胞計光路示意圖流式細(xì)胞術(shù)簡介1細(xì)胞DNA含量、倍體及細(xì)胞周期分析；2細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度、pH測定。3檢測癌基因與抗癌基因表達在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中的作用；4細(xì)胞凋亡；5化療藥物作用機制及療效評價；6白細(xì)胞分型、白血病、淋巴瘤研究；7網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)，血小板疾病診斷；8HLA群體分析；9AIDS研究等。10細(xì)胞分選

三、主要功能及適用領(lǐng)域流式細(xì)胞術(shù)簡介▲細(xì)胞生物學(xué)▲免疫學(xué)▲遺傳學(xué)▲藥理學(xué)▲腫瘤學(xué)▲血液學(xué)▲病理學(xué)▲臨床檢驗▲植物學(xué)▲海洋生物學(xué)●流式細(xì)胞術(shù)應(yīng)用學(xué)科領(lǐng)域：流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介●臨床研究：1.淋巴細(xì)胞亞群測定（絕對數(shù)、相對數(shù)）2.血小板分析（活化、聚集、微粒、膜糖蛋白）3.網(wǎng)織紅細(xì)胞分析：派若寧Y標(biāo)記，測定Reticulocyte中RNA4.白血病、淋巴瘤免疫分型：多色標(biāo)記檢測膜或胞++質(zhì)內(nèi)抗原5.HLA-B27分析：強直性脊柱炎診斷參考依據(jù)6.PNH診斷（陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿）：檢測CD55、CD597.人類同種異體器官移植中應(yīng)用（供體選擇、術(shù)后排斥反應(yīng)監(jiān)測、指導(dǎo)臨床治療）8.細(xì)胞因子測定（腫瘤、腎炎、感染、自身免疫病、超敏反應(yīng)、移植排斥反應(yīng)等）9.AIDS診斷與治療：CD4+T數(shù)量減少、CD8+T中CD38分子數(shù)增多10.療效評價（寄生蟲、營養(yǎng)失調(diào)、創(chuàng)傷、手術(shù)、放化療、疫苗）11.flow-FISH法測定端粒長度：用熒光標(biāo)記核酸-（CCCTAA）3

端粒序列特異探針，應(yīng)用于腫瘤研究

流式細(xì)胞術(shù)簡介●基礎(chǔ)研究：1.淋巴細(xì)胞功能研究：Th1、Th2、Tc1、Tc2、NK1、NK2、NKT2.樹突狀細(xì)胞（DC）研究：3.造血干細(xì)胞研究4.細(xì)胞周期分析：G0G1、S、G2M期的DNA含量5.細(xì)胞DNA倍體性分析（腫瘤異倍體）6.細(xì)胞凋亡分析（Caspase-3、AnnexinⅤ/PI、TUNNEL、APO-BrdU、APO-DIRECT）7.凋亡相關(guān)蛋白分析（Fas、Bcl-2、P53）8.細(xì)胞功能研究（細(xì)胞內(nèi)PH值、細(xì)胞內(nèi)鈣離子流、細(xì)胞膜電位、線粒體膜電位）流式細(xì)胞術(shù)簡介9.多藥耐藥基因研究（MDR）：P170蛋白、MDR-1基因檢測10.腫瘤相關(guān)基因表達研究11.RNA測定12.DNA測定13.總蛋白測定14.癌基因、抑癌基因表達產(chǎn)物測定：(Myc基因組、ras基因組、P53、c-erbB2基因、HER-2/new蛋白）15.血管內(nèi)皮細(xì)胞研究流式細(xì)胞術(shù)簡介四、常見熒光素及其應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)簡介流式細(xì)胞術(shù)簡介常用熒光染料光譜流式細(xì)胞術(shù)簡介FLUOROCHROMEEX.EM.APPLICATIONIndo-1(unbound)335490CalciumFluxIndo-