ICS65.020.01

CCSB05

13

河北省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB13/T5709—2023

基于酚酸類成分的蒲公英質(zhì)量評(píng)價(jià)

技術(shù)規(guī)程

2023-05-06發(fā)布2023-06-06實(shí)施

河北省市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB13/T5709—2023

基于酚酸類成分的蒲公英質(zhì)量評(píng)價(jià)

技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了基于酚酸類成分的蒲公英質(zhì)量評(píng)價(jià)技術(shù)的樣本處理、供試品溶液制備、酚酸類成

分含量測定、質(zhì)量等級(jí)評(píng)定等。

本文件適用于基于酚酸類成分的蒲公英質(zhì)量評(píng)價(jià)技術(shù)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用

文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）

適用于本文件。

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T8855新鮮水果和蔬菜的取樣方法

《中華人民共和國藥典》（一部、四部）

3術(shù)語和定義

本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。

4樣本處理

樣本采集

按GB/T8855采集一定量的蒲公英地上莖葉部分，備用。

樣本處理

蒲公英洗凈、除雜，60℃烘干，干蒲公英含水量≤13%，含水量按《中華人民共和國藥典》通

則0832第二法測定；粉碎并通過6號(hào)篩，篩下物制成蒲公英干粉樣本，移至干燥器中，備用。

5供試品溶液的制備

按附錄A制備供試品溶液。

6酚酸類成分含量的測定

按附錄A分別測定菊苣酸（Cichoricacid,C22H18O12）、咖啡酸（Caffeicacid,C9H8O4）、綠原

酸（Chlorogenicacid,C16H18O9）和單咖啡酰酒石酸（Caftaricacid,C13H12O9）的含量。

7蒲公英質(zhì)量評(píng)價(jià)

酚酸類成分含量分級(jí)

按蒲公英酚酸類成分含量，對(duì)照表1劃分各成分含量的級(jí)別。

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表1蒲公英酚酸類成分含量（%）分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

含量級(jí)別

酚酸類成分

12345

單咖啡酰酒石酸≥0.4000.399～0.3000.299～0.2000.199～0.100<0.100

綠原酸≥0.2500.249～0.1500.149～0.0850.084～0.030<0.030

咖啡酸≥0.0450.044～0.0350.034～0.0250.024～0.015<0.015

菊苣酸≥0.7500.749～0.6500.649～0.5000.499～0.300<0.300

蒲公英質(zhì)量指數(shù)

按公式（1）計(jì)算蒲公英質(zhì)量指數(shù)。

Gi

QI100.........................（1）

45

式中：

QI——蒲公英質(zhì)量指數(shù)；

Gi——蒲公英酚酸類成分含量級(jí)別；

4——蒲公英酚酸類成分指標(biāo)總數(shù)量；

5——蒲公英質(zhì)量級(jí)數(shù)值。

蒲公英質(zhì)量等級(jí)評(píng)定

以蒲公英質(zhì)量指數(shù)（QI）為分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，將蒲公英質(zhì)量劃分為5個(gè)等級(jí)。見表2。

表2質(zhì)量指數(shù)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

質(zhì)量指數(shù)分級(jí)

0～251

25.0～452

45.0～603

60.0～754

75.0～1005

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DB13/T5709—2023

A

A

附錄A

（規(guī)范性）

蒲公英酚酸類成分含量的測定

A.1范圍

適用于蒲公英莖葉部分的單咖啡酰酒石酸（Caftaricacid,C13H12O9）、綠原酸（Chlorogenic

acid,C16H18O9）、咖啡酸（Caffeicacid,C9H8O4）和菊苣酸（Cichoricacid,C22H18O12）等酚酸類成

分的含量測定。

A.2原理

試樣中的酚酸類成分經(jīng)甲醇溶液酸性纖維素酶輔助超聲提取過濾后，高效液相色譜分離，用紫

外檢測器測定，外標(biāo)法定量。

A.3試劑和材料

除另有說明外，所用試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水應(yīng)符合GB/T6682中一級(jí)水的規(guī)定。

A.3.1甲醇：色譜純。

A.3.250%甲醇溶液：取甲醇和水按體積比1:1（V/V）比例配制。

A.3.3磷酸：色譜純。

A.3.40.2%磷酸水溶液：取2mL磷酸（以純磷酸體積計(jì)算）置于1L的定量瓶中，用水定容。

A.3.5酸性纖維素酶：酶活性≥4000U/g。

A.3.60.1%酸性纖維素酶水溶液：稱取酸性纖維素酶0.20g（精確至0.01g），加水200mL定容并

同時(shí)用鹽酸溶液將pH值調(diào)為4.0，搖勻。

A.3.7微孔濾膜：0.45μm有機(jī)溶劑膜。

A.3.8標(biāo)準(zhǔn)品：見表A.1。

表A.1標(biāo)準(zhǔn)品

序號(hào)中文名英文名CAS號(hào)純度

1單咖啡酰酒石酸Caftaricacid67879-58-7≥98%

2綠原酸Chlorogenicacid327-97-9≥98%

3咖啡酸Caffeicacid331-39-5≥98%

4菊苣酸Cichoricacid6537-80-0≥98%

A.3.9標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

A.3.9.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液

稱取表A.1中一定量（精確至0.1mg）的各標(biāo)準(zhǔn)品，用50%甲醇溶液分別溶解，逐一配制成1mg/mL

的各標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，避光4℃臨時(shí)保存，現(xiàn)用現(xiàn)配。

A.3.9.2標(biāo)準(zhǔn)工作液

取一定體積的各標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液，根據(jù)檢測需要，用50%甲醇溶液分別梯度稀釋至少5個(gè)工作濃度，

避光4℃臨時(shí)保存，現(xiàn)配現(xiàn)用。

A.4儀器和設(shè)備

A.4.1高效液相色譜儀：配有紫外檢測器。

A.4.2超聲波儀：超聲波功率100W～400W。

A.4.3分析天平：感量0.01g、0.1mg。

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DB13/T5709—2023

A.4.4離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥4000rpm/min。

A.4.5水浴震蕩器。

A.5測定

A.5.1供試品溶液的制備

稱取0.75g（精確至0.01g）的蒲公英干粉試樣，放入50mL具塞離心試管中，加入0.1%酸性纖

維素酶水溶液15mL，60℃震蕩水浴30min。再加入15mL甲醇并置于超聲波儀中超聲提取30min，

水溫66℃。用50%甲醇溶液補(bǔ)足散失部分。將試樣的提取液離心4000rpm，離心時(shí)間10min，取上

清液用0.45μm濾膜過濾，濾液為供試品溶液，供高效液相色譜儀測定。

A.5.2色譜參考條件

a)色譜柱：C18色譜柱，長250mm，內(nèi)徑4.6mm，粒徑5μm（或相當(dāng)）；

b)檢測波長：327nm；

c)流動(dòng)相：甲醇+0.2%的磷酸水溶液，按體積比35:65（V/V）；

d)流速：1mL/min；

e)柱溫：35℃；

f)進(jìn)樣體積：5μL。

A.5.3上機(jī)測定

取供試品溶液和各標(biāo)準(zhǔn)工作溶液分別進(jìn)樣，得到色譜峰面積響應(yīng)值，在線性范圍內(nèi)，用外標(biāo)法

作多點(diǎn)校準(zhǔn)，測定的試樣濃度應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。以保留時(shí)間定性，峰面積定量。標(biāo)準(zhǔn)品溶液和

供試品溶液色譜圖見圖A.1和A.2。

A.6平行試驗(yàn)

按以上步驟對(duì)同一試樣進(jìn)行平行測定。

A.7定量結(jié)果計(jì)算

按公式A.1分別計(jì)算單咖啡酰酒石酸、綠原酸、咖啡酸和菊苣酸等4種酚酸類成分含量。

CV

W.........................（A.1）

m10000

式中：

W——試樣中某個(gè)被測成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，單位為百分含量（%）；

C——試液色譜峰對(duì)應(yīng)的某個(gè)被測成分濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；

V——提取溶劑總體積，單位為毫升（mL）；