紫外-可見分光光度法UV-visibleSpectrophotometerIodometry廣州衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院PART02紫外可見-分光光度法Iodometry紫外可見-分光光度法基于物質(zhì)吸收紫外或可見光引起分子中價(jià)電子躍遷、產(chǎn)生分子吸收光譜與物質(zhì)組分之間的關(guān)系建立起來的分析方法，稱為紫外可見分光光度法（UV-vis）。01選擇性高020304測量可以精確到10-7g/ml。快速簡便能進(jìn)行微量組分測定。準(zhǔn)確度好多種組分共存，無需分離直接測定某物質(zhì)。選擇性好特點(diǎn)儀器設(shè)備便宜，應(yīng)用廣泛，無機(jī)、有機(jī)物均可測定。Iodometry紫外可見-分光光度法一、基本原理1.透光率T光源I0透過光It吸收光Ia反射光IrI0=It+Ia+Ir計(jì)算公式：T=ItI0×100%T取值為0.0%~100.0%T=0.0%：光全吸收T=100.0%：光全透過Iodometry紫外可見-分光光度法一、基本原理2.吸光度AT與A關(guān)系：A∝1/T，T=0，A=∞，T=100%，A=0計(jì)算公式：A=lg1T=-lgT=lgI0ItA=-lgT,T=10-A二、光的吸收定律朗伯定律（1760年）Iodometry紫外可見-分光光度法A=k×L（液層厚度）比爾定律（1852年）A=k×c（溶液濃度）朗伯比爾定律：A=kcL一束平行單色光通過一均勻、非散射的吸光物質(zhì)溶液時(shí)，在入射光的波長、強(qiáng)度以及溶液溫度等保持不變時(shí)，該溶液的吸光度A與其濃度C及液層厚度L的乘積成正比。吸光系數(shù)k吸光系數(shù)：k=A/cL摩爾吸光系數(shù)

在一定λ下，c=1mol/L，L=1cm時(shí)的吸光度。百分吸光系數(shù)/比吸光系數(shù)E1cm1%一定λ下,c=1%(W/V)即1g/100ml，L=1cm時(shí)的吸光度。兩者關(guān)系Iodometry紫外可見-分光光度法吸光系數(shù)的特別說明摩爾吸光系數(shù)

A=kcL就轉(zhuǎn)變?yōu)锳=

cL注意：濃度C的單位必須是mol/l百分吸光系數(shù)EA=kcL就可以轉(zhuǎn)變?yōu)锳=EcL注意：濃度的單位必須是g/100mlIodometry紫外可見-分光光度法吸光系數(shù)的意義

一定條件下是一個(gè)特征常數(shù)。溫度和波長一定時(shí)。ε僅與物質(zhì)本身的性質(zhì)有關(guān)，與待測物濃度c和液層厚度L無關(guān)；Iodometry紫外可見-分光光度法

可作為定性和定量分析依據(jù)：同一物質(zhì)在不同波長時(shí)ε值不同。不同物質(zhì)在同一波長時(shí)ε值不同。12練一練Iodometry紫外可見-分光光度法1.某物質(zhì)的摩爾濃度為C，在一定條件下用1cm的吸收池測得吸光度為A，則摩爾吸光系數(shù)為：（

）CaB.A/cC.c/A

D.cM2.某物質(zhì)的吸光系數(shù)與（）有關(guān)。A該物質(zhì)溶液的濃度B.物質(zhì)溶液的密度C.液層厚度D.該物質(zhì)本身的性質(zhì)BD練一練Iodometry紫外可見-分光光度法安絡(luò)血的摩爾質(zhì)量為236g/mol，將其配成100ml含0.4962mg的溶液，盛于1cm的吸收池中，在λmax處測定得A值為0.557，試求安絡(luò)血的

和。Iodometry紫外可見-分光光度法吸收光譜（吸收曲線）定義以A為縱坐標(biāo)，λ為橫坐標(biāo)，繪制的λ~A曲線。術(shù)語①吸收峰：λmax②吸收谷：λmin③肩峰：λsh④末端吸收Iodometry紫外可見-分光光度法吸收曲線的移動(dòng)λmax向長波方向移動(dòng)稱為紅移，或長移。λmax向短波方向移動(dòng)稱為藍(lán)移(或紫移)或短移。吸收強(qiáng)度即摩爾吸光系數(shù)ε增大或減小的現(xiàn)象分別稱為增色效應(yīng)或減色效應(yīng)Iodometry紫外可見-分光光度法吸收曲線的應(yīng)用用作定性定量分析。不同物質(zhì)相同濃度，其吸收曲線形狀,λmax不同同一物質(zhì)的吸收光譜特征值相同；同一物質(zhì)相同濃度的吸收曲線重合；同一物質(zhì)不同濃度，吸收曲線形狀相似，λmax相同Iodometry紫外可見-分光光度法偏離光的吸收定律的原因依據(jù)光的吸收定律，A