T/GDSWJSXXX-XXXX細(xì)胞制劑安全應(yīng)用快檢技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了細(xì)胞制劑安全應(yīng)用快檢技術(shù)的分類、快檢流程規(guī)范、結(jié)果判定與報(bào)告、細(xì)胞應(yīng)用的安全風(fēng)險(xiǎn)及規(guī)避。本文件適用于干細(xì)胞庫檢。2規(guī)范性引用文件本文件沒有規(guī)范性引用文件。3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1干細(xì)胞stemcell具有自我更新和多向分化潛能的細(xì)胞。3.2快檢技術(shù)rapiddetectiontechnique在較短時(shí)間內(nèi)（通常數(shù)小時(shí)至數(shù)天）得出檢測(cè)結(jié)果，且滿足準(zhǔn)確性、重復(fù)性等要求，用于評(píng)估干細(xì)胞質(zhì)量和安全性的技術(shù)方法。4分類4.1庫檢（種子庫檢測(cè)）4.1.1對(duì)細(xì)胞庫中細(xì)胞質(zhì)量的評(píng)估，確保細(xì)胞滿足質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，具有良好的生長(zhǎng)和穩(wěn)定性。4.1.2庫檢包括以下部分，保證細(xì)胞庫中細(xì)胞質(zhì)量，為細(xì)胞產(chǎn)品生產(chǎn)和應(yīng)用提供可靠的種子細(xì)胞。a)細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查，觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常；b)細(xì)胞活性檢測(cè)，評(píng)估細(xì)胞生長(zhǎng)能力；c)細(xì)胞純度檢測(cè)，確保無污染；d)細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性檢測(cè)，評(píng)估基因突變或染色體異常。4.2批次檢測(cè)對(duì)每個(gè)生產(chǎn)批次的細(xì)胞產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè)以確保整個(gè)批次的細(xì)胞質(zhì)量一致且符合標(biāo)準(zhǔn)。批次檢應(yīng)包括對(duì)細(xì)胞的基因穩(wěn)定性、表型一致性以及功能活性的評(píng)估。通過批次檢，確保每個(gè)批次的細(xì)胞產(chǎn)品在質(zhì)量上沒有顯著差異，從而保證臨床或研究應(yīng)用的一致性和可靠性。4.3放行檢測(cè)2T/GDSWJSXXX-XXXX在細(xì)胞產(chǎn)品準(zhǔn)備出廠或使用前，進(jìn)行最終的質(zhì)量檢測(cè)。確認(rèn)細(xì)胞產(chǎn)品在儲(chǔ)存和處理過程中沒有發(fā)生任何質(zhì)量下降或污染。這一階段的檢測(cè)通常包括對(duì)細(xì)胞的活性、純度、無菌性以及細(xì)胞功能的評(píng)估。只有通過放行檢的細(xì)胞產(chǎn)品才能被正式批準(zhǔn)用于臨床或研究用途。5快檢流程規(guī)范5.1干細(xì)胞庫檢項(xiàng)目干細(xì)胞庫檢項(xiàng)目見表1。表1庫檢項(xiàng)目T/GDSWJSXXX-XXXX3表1庫檢項(xiàng)目（續(xù)）5.2檢測(cè)流程5.2.1樣本采集應(yīng)符合以下要求：a)操作環(huán)境：必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行，確保操作環(huán)境無菌，降低樣本被污染的風(fēng)險(xiǎn)；b)器具選擇：依據(jù)干細(xì)胞庫類型和儲(chǔ)存方式挑選專用采樣器具；c)來源確定：根據(jù)治療或研究需求，確定干細(xì)胞的來源；T/GDSWJSXXX-XXXX4d)無菌采集：在無菌環(huán)境下進(jìn)行干細(xì)胞采集，確保采集設(shè)備和容器為無菌狀態(tài)，避免外部污染。同時(shí)，在操作過程中盡量減少細(xì)胞暴露于空氣中的時(shí)間。5.2.2樣本處理進(jìn)行分離與純化，采用密度梯度離心、磁珠分選等方法對(duì)采集到的干細(xì)胞進(jìn)行分離與純化，剔除雜質(zhì)細(xì)胞，得到高純度的干細(xì)胞。5.2.3樣本運(yùn)輸與保存5.2.4樣本采集后應(yīng)立刻放入專用運(yùn)輸箱，根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目要求維持低溫環(huán)境。5.2.5運(yùn)輸時(shí)間應(yīng)不超過24h，減少樣本在運(yùn)輸過程中可能出現(xiàn)的變化，保障檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性。5.2.6若不能及時(shí)檢測(cè)，干細(xì)胞懸液4℃短期保存應(yīng)不超24h，長(zhǎng)期保存應(yīng)置于-80℃或液氮中。細(xì)胞培養(yǎng)上清-20℃保存，且應(yīng)避免反復(fù)凍融，防止影響檢測(cè)結(jié)果。5.2.7檢測(cè)操作庫檢應(yīng)嚴(yán)格按照相應(yīng)的儀器操作規(guī)程和試劑說明書進(jìn)行操作。在操作過程中，注意避免交叉污染，確保加樣準(zhǔn)確性和反應(yīng)條件的一致性。同時(shí)，設(shè)置陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和空白對(duì)照，對(duì)檢測(cè)過程進(jìn)行質(zhì)量控制。5.2.8質(zhì)量控制5.2.8.1定期校準(zhǔn)和維護(hù)儀器設(shè)備，建立相關(guān)記錄檔案。每次使用前檢查儀器性能，確保正常工作。5.2.8.2使用標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控，微生物檢測(cè)用已知濃度標(biāo)準(zhǔn)菌株作陽性對(duì)照，無菌生理鹽水或無細(xì)胞培養(yǎng)基作陰性對(duì)照。5.2.8.3遺傳穩(wěn)定性檢測(cè)用已知突變類型和含量的標(biāo)準(zhǔn)DNA樣本作對(duì)照。定期開展人員比對(duì)和實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)實(shí)驗(yàn)，評(píng)估檢測(cè)人員操作水平和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力一致性。6結(jié)果判定與報(bào)告6.1結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢測(cè)中，細(xì)胞鑒別結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)圖譜或已知特征完全匹配、細(xì)胞活力達(dá)標(biāo)且增殖能力正常，判定為合格；微生物污染檢測(cè)結(jié)果為陰性、內(nèi)毒素含量低于規(guī)定限量，判定為合格；遺傳穩(wěn)定性檢測(cè)未發(fā)現(xiàn)染色體異常和關(guān)鍵基因突變，判定為合格。6.2報(bào)告內(nèi)容報(bào)告應(yīng)包括以下內(nèi)容：a)樣本信息（干細(xì)胞庫名稱、編號(hào)、樣本采集時(shí)間、部位、細(xì)胞類型等）；b)檢測(cè)項(xiàng)目；c)檢測(cè)方法（儀器設(shè)備型號(hào)、試劑品牌和生產(chǎn)廠家等）；d)檢測(cè)結(jié)果（原始數(shù)據(jù)和最終結(jié)果）；e)結(jié)果判定（明確合格或不合格）；f)檢測(cè)單位；g)檢測(cè)時(shí)間。7細(xì)胞應(yīng)用的安全風(fēng)險(xiǎn)及規(guī)避T/GDSWJSXXX-XXXX57.1細(xì)胞應(yīng)用的安全風(fēng)險(xiǎn)離體培養(yǎng)后的細(xì)胞回輸體內(nèi)均存在安全風(fēng)險(xiǎn)，包括但不限于：a)細(xì)胞的來源風(fēng)險(xiǎn)（自體/同種異體）；b)細(xì)胞體外培養(yǎng)制備操作風(fēng)險(xiǎn)；c)培養(yǎng)細(xì)胞回輸后的風(fēng)險(xiǎn)；d)內(nèi)源病毒存在的潛在風(fēng)險(xiǎn)；e)外源因子污染的風(fēng)險(xiǎn)。7.2細(xì)胞應(yīng)用的風(fēng)險(xiǎn)規(guī)避方式7.2.1細(xì)胞制備過程7.2.1.1細(xì)胞制備對(duì)操作人員的專業(yè)技能和熟練度要求高，操作失誤會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)和質(zhì)量。7.2.1.2應(yīng)保證健康的供體，若供體攜帶病原體或存在潛在健康問題，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞制備失敗或引入安全隱患。7.2.1.3應(yīng)提供嚴(yán)謹(jǐn)?shù)难邪l(fā)方案、過硬的質(zhì)量管理、先進(jìn)的研發(fā)硬件以及熟練的操作人員。7.2.2細(xì)胞質(zhì)檢過程7.2.2.1制定科學(xué)合理的樣本采集方案，確保樣本采集的隨機(jī)性和代表性。增加樣本采集數(shù)量和采樣點(diǎn)，對(duì)不同部位、不同培養(yǎng)批次的細(xì)胞進(jìn)行采樣檢測(cè)。在樣本采集、運(yùn)輸和儲(chǔ)存過程中，嚴(yán)格控制條件，避免樣本受到污染或發(fā)生質(zhì)量變化。在研發(fā)方案中，詳細(xì)規(guī)劃樣本采集的策略和要求，確保樣本能夠真實(shí)反映整批細(xì)胞的質(zhì)量。7.2.2.2優(yōu)化檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境，配備溫濕度調(diào)節(jié)設(shè)備、空氣凈化系統(tǒng)等，確保檢測(cè)環(huán)境符合要求。定期對(duì)檢測(cè)環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測(cè)和清潔消毒，減少環(huán)境因素對(duì)檢