人民衛(wèi)生出版社（第8版）

組織學(xué)與胚胎學(xué)

王世鄂

。人體解剖學(xué)與組織胚胎學(xué)系

緒論一、組織學(xué)的研究?jī)?nèi)容組織學(xué)（histology）：研究機(jī)體微細(xì)結(jié)構(gòu)及其相關(guān)功能的科學(xué)。它是以顯微鏡觀察組織切片為基本方法，又稱顯微解剖學(xué)。

二、內(nèi)容：1、基本組織（總論）：2、器官、系統(tǒng)（各論）：

上皮組織結(jié)締組織肌組織神經(jīng)組織

人體的組成200種Cell細(xì)胞（cell)

細(xì)胞外基質(zhì)

（由細(xì)胞產(chǎn)生的非細(xì)胞物質(zhì)）組織

Tissue器官organ系統(tǒng)人體4種組織按一定規(guī)律組合形成器官上皮組織

EpithelialTissue

結(jié)締組織ConnectiveTissue

肌組織

MuscularTissue神經(jīng)組織

NervousTissue基本組織形態(tài)相似，功能相近的細(xì)胞群和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成組織基本單位，新陳代謝、生長(zhǎng)發(fā)育、繁殖分化的形態(tài)基礎(chǔ)三、組織學(xué)常用計(jì)量單位１mm=1000μm，１μm=1000nm

問題

解決方法

觀察對(duì)象太小

放大

顯微鏡

觀察對(duì)象無色，無反差

染色（HE染色）

觀察對(duì)象生化成分不同

細(xì)胞化學(xué)、免疫組織化學(xué)

觀察對(duì)象是活體

培養(yǎng)四、組織學(xué)技術(shù)（一）一般光學(xué)顯微鏡術(shù)應(yīng)用一般光學(xué)顯微鏡觀察組織切片組織切片標(biāo)本—載玻片———蓋玻片————組織（lightmicroscope，LM）長(zhǎng)度單位：μm分辨率：0.2μm

石蠟切片術(shù)（Paraffinsectioning)

1.LightMicroscopy

,

LM

：用顯微鏡觀察組織切片為最常用方法。標(biāo)本要求：

保持生活狀態(tài)時(shí)的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

能透光。

易分辨不同結(jié)構(gòu)（1）HE染色的石蠟切片制作過程：取材、固定脫水、包埋

切片、染色

封片

取材和固定:

保持生活狀態(tài)時(shí)的組織結(jié)構(gòu)和成分。用固定劑如酒精、甲醛、混合固定劑，二甲苯酒精固定液

脫水：上行梯度酒精脫水，防止組織收縮。自動(dòng)脫水機(jī)包埋：自動(dòng)包埋機(jī)包埋材料：石蠟、火棉膠。

切片：切5

7m厚切片機(jī)MicrotomeEosin伊紅

酸性染料（粉紅色）

與被染物質(zhì)結(jié)合結(jié)合染成紅色（被染物質(zhì)）嗜酸性。

Hematoxylin

蘇木精堿性染料（藍(lán)色）與被染物質(zhì)結(jié)合染成紫藍(lán)色（被染物質(zhì)）嗜堿性。

染色：HE染色最常用

封片:

HE染色蘇木精：染色質(zhì)、核糖體伊紅：細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞外基質(zhì)封片

HE染色切片標(biāo)本

皮膚

卵巢（2）其他制片技術(shù)：涂片、鋪片、磨片等。

磨片

牙和骨等堅(jiān)硬組織可磨成薄片。

涂片血細(xì)胞和分離培養(yǎng)的細(xì)胞可直接涂在玻片上制成。血涂片

鋪片:疏松結(jié)締組織和腸系膜等軟組織可撕成薄片鋪在玻片上。鋪片磨片

銀染法：硝酸銀、氯化金等重金屬鹽，其微粒附著在細(xì)胞或組織結(jié)構(gòu)表面，而呈棕黑色或棕黃色。小腦蒲肯野細(xì)胞（3）特殊染色方法：銀染法、鐵蘇木精染色等激光掃描共聚焦顯微鏡技術(shù)共聚焦顯微鏡（二）電鏡技術(shù)(electronmicroscope，EM)

EM的原理和LM相似，但用電子束代替光線，磁場(chǎng)代替玻璃透鏡。

（二）電子顯微鏡術(shù)電子顯微鏡下才能看到的結(jié)構(gòu)稱超微結(jié)構(gòu)。1.透射電鏡：電子密度高：電子密度低：2.掃描電鏡：

分辨率：0.2nm計(jì)量單位：nm（納米）

透射電鏡（transmissionelectronmicroscope）：

觀察細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)

掃描電鏡（scanningelectronmicroscope)：

觀察組織或細(xì)胞表面的立體結(jié)構(gòu)中性粒細(xì)胞（透射電鏡）黑白反差結(jié)構(gòu)影像影像較黑稱電子密度高反之稱電子密度低（三）組織化學(xué)（細(xì)胞化學(xué)）術(shù)

Histochemistry（Cytochemistry）化學(xué)、物理、生物化學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)原理和技術(shù)組織學(xué)技術(shù)顯示組織和細(xì)胞內(nèi)化學(xué)成分的性質(zhì)、位置、量的變化與功能的關(guān)系。（1）概念：+

一般組織化學(xué)術(shù)免疫組織化學(xué)術(shù)原位雜交術(shù)（2）分類肝細(xì)胞的ACP（酸性磷酸酶）化學(xué)反應(yīng)有色沉淀1）一般組織化學(xué)技術(shù)PAS反應(yīng)顯示肝細(xì)胞內(nèi)糖原2）免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)Immunocytochemistry:

用免疫學(xué)的抗原與其抗體特異性結(jié)合的原理，顯示組織細(xì)胞內(nèi)的肽或蛋白質(zhì)。此法特異性強(qiáng)，靈敏度高，在基礎(chǔ)與臨床研究中得到廣泛應(yīng)用。直接法間接法Ag+AbAg—Ab+標(biāo)記抗體顯色免疫組織化學(xué)染色免疫熒光染色3）原位雜交：InSituHybridization

原理：根據(jù)核酸DNA、RNA中的互補(bǔ)堿基專一配對(duì)的原理。

檢測(cè)：細(xì)胞內(nèi)DNA和mRNA序列片段，原位研究細(xì)胞合成多肽或蛋白質(zhì)的基因轉(zhuǎn)錄物mRNA表達(dá)。原位雜交原理（四）4.組織培養(yǎng)技術(shù)

TissueCulture

將離體的細(xì)胞、組織在體外合適的條件下培養(yǎng)，使其生存和生長(zhǎng)的技術(shù)。研究各種理化因素對(duì)其生長(zhǎng)代謝的影響。條件：適宜的營(yíng)養(yǎng)、生長(zhǎng)因子、PH值、滲透壓、O2和CO2濃度、溫度等，還須嚴(yán)防微生物的污染。原代培養(yǎng)：首次培養(yǎng)的細(xì)胞。傳代培養(yǎng)：細(xì)胞增殖到一定密度，需進(jìn)行傳代再培養(yǎng)。培養(yǎng)液：培養(yǎng)基+5%~10%胎牛血清孵育液化的精液涂片培養(yǎng)的早期胚（四）圖像分析術(shù)：

（五）組織工程：TissueEngineering

組織工程是用細(xì)胞培養(yǎng)術(shù)在體外模擬構(gòu)建機(jī)體組織和器官的技術(shù)。四要素：種子細(xì)胞：生物材料支架：構(gòu)建組織或器官：移植：我國(guó)的曹誼林和Vacanti等在裸鼠背上成功的制造了人耳形和狗耳形。

三、組織胚胎學(xué)在醫(yī)學(xué)中的地位及學(xué)習(xí)方法

（一）地位

為什么要學(xué)習(xí)組織胚胎學(xué)?1.

組織學(xué)又叫微觀解剖學(xué)（Microanatomy），是解剖學(xué)知識(shí)的進(jìn)一步完善。2.

結(jié)構(gòu)是功能的基礎(chǔ)，學(xué)好組織學(xué)是學(xué)好生理學(xué)（Physiology）的基礎(chǔ)。3.

只有了解正常結(jié)構(gòu)，才能學(xué)習(xí)其異常變化。因此組織學(xué)是病理學(xué)（Pathology）的基礎(chǔ)。4.

是相關(guān)臨床課程基礎(chǔ)5.

組織胚胎學(xué)學(xué)成績(jī)不及格，必須補(bǔ)考、重修和留級(jí)。排卵、早期胚發(fā)生及其與女性生殖道關(guān)系模式圖子宮內(nèi)膜子宮肌層子宮外膜卵巢發(fā)育中的卵泡