2024～2025學(xué)年度第二學(xué)期期中教學(xué)質(zhì)量檢測高二生物試題注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名，考生號，座號填寫在相應(yīng)位置，認(rèn)真核對條形碼上的姓名，考生號和座號，并將條形碼粘貼在指定位置上。2．選擇題答案必須使用2B鉛筆《按填涂樣例》正確填涂；非選擇題答案必須使用0.5毫米黑色簽字筆書寫，繪圖時，可用2B鉛筆作答，字體工整、筆跡清晰。3．請按照題號在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙，試題卷上答題無效。保持卡清潔，不折疊，不破損。一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題給出的四個選項中，只有一個選項是最符合題目要求的。1.科研人員嘗試?yán)弥参锝M織培養(yǎng)技術(shù)從紅豆杉的愈傷組織中提取紫杉醇，流程圖如下。下列敘述正確的是（）A.細(xì)胞懸浮培養(yǎng)與繼代是為了快速獲得更多的薄壁細(xì)胞B.用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，利于原生質(zhì)體融合C.在愈傷組織中加入PEG，可獲得染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞D.采用非胚性愈傷組織的目的是再分化成植株2.非對稱細(xì)胞融合技術(shù)是指利用射線照射某原生質(zhì)體，破壞其細(xì)胞核，用蕊香紅6G處理另一原生質(zhì)體，使其細(xì)胞質(zhì)失活，然后誘導(dǎo)兩原生質(zhì)體融合。研究者利用該技術(shù)獲得了抗三嗪類除草劑（蕓苔葉綠體基因控制）的蘿卜新品種。下列敘述錯誤的是（）A.原生質(zhì)體可用酶解法處理植物體細(xì)胞獲得B.可通過加入過量的培養(yǎng)液終止原生質(zhì)體融合C.原生質(zhì)體活力可通過質(zhì)壁分離與復(fù)原實驗進(jìn)行檢測D.借助核移植技術(shù)或轉(zhuǎn)基因技術(shù)也可獲得上述蘿卜新品種3.某動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞貼壁生長至接觸抑制時，需分裝培養(yǎng)，實驗操作過程如圖。下列敘述錯誤的是（）A.①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離 B.②加培養(yǎng)液的目的是促進(jìn)細(xì)胞增殖C.③分裝時需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度 D.整個過程需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行4.波爾山羊享有“世界山羊之王”的美譽，具有生長速度快、肉質(zhì)細(xì)嫩等優(yōu)點。生產(chǎn)中常采用胚胎工程技術(shù)快速繁殖波爾山羊。下列敘述錯誤的是（）A.選擇遺傳性狀優(yōu)良的健康波爾母山羊進(jìn)行超數(shù)排卵處理B胚胎移植前可采集滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)檢測C.普通品質(zhì)的健康杜泊母綿羊不適合作為受體D.生產(chǎn)中對提供精子的波爾公山羊無需篩選5.某同學(xué)以洋蔥為實驗材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定實驗，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.洋蔥切碎后加入95%酒精作為研磨液，快速研磨B研磨液用濾紙過濾后，于4℃冰箱中靜置后再取上清液C.離心研磨液是為了加速DNA的沉淀D.用二苯胺試劑鑒定DNA時，需進(jìn)行沸水浴加熱并冷卻處理6.一種天然蛋白t-PA能高效降解因血漿纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥，但是心?；颊咦⑸浯髣┝康膖-PA會誘發(fā)顱內(nèi)出血。研究證實，將t-PA第84位的半胱氨酸（密碼子：ACA）換成絲氨酸（密碼子：UCU），能顯著降低其誘發(fā)出血的副作用。據(jù)此，先對天然t-PA基因的堿基序列進(jìn)行改造，然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達(dá)該改造后的基因，可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白。下列說法正確的是（）A.改造后的基因中決定第84位絲氨酸的模板鏈的堿基序列應(yīng)設(shè)計為AGAB.構(gòu)建重組質(zhì)粒時需要選用限制酶XmaⅠ和NheⅠ切割質(zhì)粒pCLY11C.使用T4DNA連接酶不能將t-PA改良基因與質(zhì)粒pCLY11連接D.成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞在含有新霉素的培養(yǎng)基上能存活，且呈現(xiàn)藍(lán)色7.基因芯片的測序原理是：先將各不相同的已知序列的八核苷酸探針分別固定在玻片的方格中，再與帶熒光標(biāo)記的待測DNA單鏈進(jìn)行雜交，通過確定熒光強度最強的探針位置與對應(yīng)序列，推出待測序列，如圖所示。下列敘述正確的是（）A.上述測序方法是基于DNA-RNA分子雜交實現(xiàn)的B.通過給探針標(biāo)記熒光也可達(dá)到與上圖同樣的效果C.應(yīng)洗去未與探針結(jié)合的待測DNA分子后再檢測熒光D.根據(jù)圖示結(jié)果可推出待測序列為5'-ATACGTTAGATC-3'8.某研究小組利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將綠色熒光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如圖甲所示。實驗得到能正常表達(dá)兩種蛋白質(zhì)的雜合子雌雄小鼠各1只，交配以期獲得Gata3-GFP基因純合子小鼠。為了鑒定交配獲得的4只新生小鼠的基因型，設(shè)計了引物1和引物2用于PCR擴增，PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖乙所示。下列敘述正確的是（）A.翻譯時先合成GFP蛋白，再合成Gata3蛋白B.2號條帶的小鼠是野生型，4號條帶的小鼠是Gata3-GFP基因純合子C.若用引物1和引物3進(jìn)行PCR，不能鑒定新生小鼠的雜合子和純合子情況D.設(shè)計引物僅擴增Gata3基因編碼區(qū)，獲得32個符合要求的DNA片段至少需經(jīng)過5次循環(huán)9.下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物與安全性的敘述，正確的是（）A.轉(zhuǎn)基因培育的植物，理論上目的基因只存在于特定的組織中B.轉(zhuǎn)基因技術(shù)與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)均可打破生殖隔離，實現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種，培育出雜種新物種C.種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時，常間行種植普通棉花以供害蟲取食，其主要目的是保護(hù)物種多樣性D.轉(zhuǎn)基因花粉中若有毒蛋白或過敏蛋白，則它有通過食物鏈傳遞而引發(fā)人類食品安全問題的可能10.非洲疾控中心于2024年8月13日宣布猴痘疫情為非洲公共衛(wèi)生緊急事件。猴痘是由猴痘病毒（雙鏈DNA病毒）引起傳染病。除猴痘外，許多傳染病也是由微生物感染造成的。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.病毒的核酸、外殼、包膜都是由病毒的遺傳物質(zhì)控制合成的B.可根據(jù)病毒核酸的單雙鏈來判斷其遺傳物質(zhì)是DNA還是RNAC.肺炎支原體和猴痘病毒都是結(jié)構(gòu)簡單的生物，都不含有細(xì)胞壁和細(xì)胞器D.與猴痘病毒相比，流感病毒的遺傳物質(zhì)更容易發(fā)生變異11.羊肉中富含蛋白質(zhì)、脂肪酸和鐵、鈉、鈣等無機鹽，是滋補佳品。鄒城有冬至喝羊湯的悠久傳統(tǒng)。下列敘述正確的是（）A.羊肉煮久了的湯建議少喝，容易引起尿酸高，因為其脂肪含量高B.缺Ca會引起神經(jīng)、肌肉細(xì)胞的興奮性降低，多食羊肉會使肌肉強壯C.羊肉皮下脂肪中的脂肪酸一般為飽和脂肪酸，室溫時呈固態(tài)D.羊肉和豬肉口感不同的根本原因在于其蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)不同12.S-腺苷甲硫氨酸（SAM）核糖開關(guān)是存在于細(xì)菌中的一種RNA結(jié)構(gòu)元件。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)SAM濃度過高時，過多的SAM會與SAM核糖開關(guān)結(jié)合，從而抑制包括SAM合成相關(guān)基因在內(nèi)的遺傳物質(zhì)的表達(dá)。下列敘述錯誤的是（）A.SAM核糖開關(guān)內(nèi)部部分核苷酸間可能形成氫鍵B.SAM與SAM核糖開關(guān)之間可通過肽鍵結(jié)合C.上述過程中存在負(fù)反饋調(diào)節(jié)D.促進(jìn)SAM合成相關(guān)基因的表達(dá)可能會抑制細(xì)菌的生命活動13.初步研究表明，β-AP（β-淀粉樣蛋白）沉積是Alzheimer型老年癡呆的主要病理特征。β-AP是由前體蛋白-APP（一種含695個氨基酸的跨膜蛋白）在病理狀態(tài)下異常加工而成的。APP形成β-AP的過程如圖所示。根據(jù)上述信息，下列推論正確的是（）A.APP形成一個β-AP需要消耗4個水分子B.一個β-AP分子中至少含有38個肽鍵C.Alzheimer型老年癡呆是由前體蛋白-APP結(jié)構(gòu)異常導(dǎo)致的D.促進(jìn)β-水解酶和γ-水解酶的合成可緩解Alzheimer型老年癡呆的癥狀14.遷移體是我國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)的一種新的細(xì)胞器，是細(xì)胞遷移過程中由尾部收縮絲的尖端或交叉點產(chǎn)生的膜性細(xì)胞器，能在細(xì)胞之間傳遞。線粒體胞吐（MEx）是指線粒體通過進(jìn)入遷移體被釋放到細(xì)胞外的過程。實驗小組為了研究MEx以及K蛋白在MEx中的作用，設(shè)計了相關(guān)實驗，實驗結(jié)果如下表所示。下列敘述錯誤的是（）組別ABCD藥物CCCP—+—+敲除K基因——++遷移體中線粒體的相對含量10801011注：藥物CCCP能誘導(dǎo)線粒體受損，“+”表示進(jìn)行相關(guān)操作，“－”表示不進(jìn)行相關(guān)操作。A.磷脂雙分子層構(gòu)成了遷移體膜基本支架B.遷移體可能具有介導(dǎo)細(xì)胞之間的信息交流的功能C.MEx常作為線粒體受損的重要指標(biāo)D.K蛋白的作用可能是抑制需要胞吐的線粒體進(jìn)入遷移體中15.研究發(fā)現(xiàn)，生物膜融合存在以下機制：不同生物膜上的蛋白質(zhì)相互作用形成螺旋狀的復(fù)合蛋白，使磷脂分子失去穩(wěn)定進(jìn)而重排形成融合孔，最后實現(xiàn)生物膜的相互融合，過程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）A.膜蛋白1、2形成螺旋狀結(jié)構(gòu)涉及自身構(gòu)象的變化B.自然界中正常情況下，膜蛋白1、2都來自同一個生物體C.胰島素或乙酰膽堿可通過囊泡與細(xì)胞膜融合釋放，從而傳遞信息D.研究具包膜的病毒與細(xì)胞膜融合的機制，能為該種病毒藥物的研發(fā)提供一種新思路二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。每小題給出的四個選項中，有的只有一個選項正確，有的有多個選項正確，全部選對的得3分，選對但不全的得1分，有選錯的得0分。16.細(xì)胞融合技術(shù)有著廣泛應(yīng)用，如圖為細(xì)胞融合的簡略過程。據(jù)圖分析，下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.獲得體細(xì)胞雜交植株乙屬于無性生殖B.乙過程可用PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合和細(xì)胞壁的再生C.丙過程中，為篩選出產(chǎn)生抗流感病毒的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需用特定抗體去檢測并呈陽性D.若a和b分別是基因型為AaBB、aaBb植株的花粉細(xì)胞，則去壁后兩兩融合可得到6種基因型細(xì)胞17.種間體細(xì)胞核移植（iSCNT）將供體動物體細(xì)胞與來自不同種、科、目或綱的家畜（馴養(yǎng)動物）的去核卵母細(xì)胞融合并激活，以獲得較多的重構(gòu)胚，進(jìn)而獲得動物個體，是體細(xì)胞核移植（SCNT）中極具潛力的研究方向之一。下列敘述正確的是（）A.同一動物體經(jīng)iSCNT技術(shù)獲得的多個重構(gòu)胚中，遺傳物質(zhì)可能不完全相同B.iSCNT技術(shù)的原理是動物細(xì)胞核具有全能性，操作過程中可用Ca2+激活重構(gòu)胚C.iSCNT技術(shù)必須將供體細(xì)胞的細(xì)胞核取出，然后注入去核的卵母細(xì)胞D.若從動物體內(nèi)采集到的體細(xì)胞數(shù)目較少，可用添加動物血清的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)18.關(guān)于“DNA片段的擴增及電泳鑒定”實驗，下列敘述錯誤的是（）A.PCR技術(shù)操作過程中的每個循環(huán)都需經(jīng)歷一次降溫和兩次升溫B.凝膠載樣緩沖液中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，便于在紫外燈下觀察C.待指示劑前沿遷移到達(dá)凝膠加樣孔邊緣時需停止電泳以防DNA跑出凝膠D.若擴增結(jié)果不止一條帶，可能的原因是退火溫度過高19.脂筏模型被認(rèn)為是對細(xì)胞膜流動鑲嵌模型的重要補充：脂筏是質(zhì)膜上富含膽固醇和鞘磷脂的微結(jié)構(gòu)域，其中的膽固醇就像膠水一樣，對鞘磷脂親和力很高，并特異吸收或排出某些蛋白質(zhì)（如某些跨膜蛋白質(zhì)、酶等），形成一些特異蛋白聚集的區(qū)域。推測下列敘述錯誤的是（）A.圖中脂筏跨膜蛋白可能代表運輸物質(zhì)的蛋白質(zhì)，其跨膜區(qū)段的氨基酸具有較強的親水性B.“脂筏模型”比“流動鑲嵌模型”更能代表生物膜的特性C.脂筏模型表明脂質(zhì)和蛋白質(zhì)在膜上的分布是不均勻的D.脂筏區(qū)域在動植物細(xì)胞中都有廣泛分布20.肝臟是哺乳動物合成膽固醇的主要場所，餐后膽固醇的合成量會增加，其調(diào)節(jié)機制如圖所示，圖中mTORC1、AMPK、USP20、HMGCR均為調(diào)節(jié)代謝過程的酶，HMGCR是膽固醇合成的關(guān)鍵酶，mTORC1能促進(jìn)USP20磷酸化，USP20磷酸化后使HMGCR穩(wěn)定發(fā)揮催化作用。結(jié)合下圖，以下敘述錯誤的是（）A.圖中合成膽固醇的原料為乙酰-CoA，合成膽固醇的細(xì)胞器為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)B.細(xì)胞內(nèi)葡萄糖濃度增加可通過抑制AMPK進(jìn)而提高mTORC1的活性C.進(jìn)食后胰島素分泌增多，與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合后可抑制USP20磷酸化D.用抑制磷酸化的藥物作用USP20可以提高膽固醇的水平三、非選擇題：本題包括5小題，共55分。21.科學(xué)家將主效耐堿基因AT1導(dǎo)入小麥的愈傷組織，從而獲得了小麥的耐鹽堿組織，實驗過程用到的部分結(jié)構(gòu)如下圖。請據(jù)圖回答下列問題：（1）已知A位點和B位點分別是起始密碼子和終止密碼子對應(yīng)的基因位置，擴增基因選用的引物組合應(yīng)為______。AT1基因以b鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈，為了使AT1基因按照正確的方向與質(zhì)粒連接，在引物1的______端添加______的酶切位點。（2）擴增AT1基因時，一般要向PCR反應(yīng)緩沖液中添加，目的是______。進(jìn)行農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時，需要將AT1基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中，原因是______。（3）培育轉(zhuǎn)基因植株時，將愈傷組織轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基上，發(fā)現(xiàn)只生根不生芽，可能的原因是______。22.為研制丙肝病毒包膜蛋白的單克隆抗體，某研究者以小鼠為實驗材料設(shè)計了以下實驗流程。請回答下列問題：（1）融合之前的兩種細(xì)胞中，能通過動物細(xì)胞培養(yǎng)大量增加數(shù)量的是______，培養(yǎng)液中還需要添加10%胎牛血清（FBS）等，添加血清的作用是______。（2）誘導(dǎo)細(xì)胞融合時利用病毒表面含有糖蛋白和一些酶，能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使得細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的______重新排布，細(xì)胞發(fā)生融合。篩選1利用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，該培養(yǎng)基對______和______生長具有抑制作用。（3）篩選2的目的是______。經(jīng)選擇、培養(yǎng)，最終在培養(yǎng)液中提取分離得到A1、A2、A3等多種抗丙肝病毒包膜蛋白的單克隆抗體。（4）為確定A1、A2、A3的抗原結(jié)合位點是否相同，將等量A1、A2、A3分別固定于反應(yīng)體系中并結(jié)合丙肝病毒包膜蛋白，再分別加入酶E標(biāo)記的A1、A2、A3，反應(yīng)后洗掉未結(jié)合抗體，加入酶E的底物（可被酶E催化發(fā)生顯色反應(yīng)），通過與對照組比較顏色變淺的程度計算出結(jié)合抑制率，結(jié)果如表（以抑制率50%為界值進(jìn)行實驗數(shù)據(jù)分析）。該實驗所得結(jié)論是______。抑制率（%）E酶標(biāo)抗體A1A2A3固相抗體A1612333A2187156A327637323.水體中的雌激素能使斑馬魚細(xì)胞產(chǎn)生E蛋白，激活卵黃蛋白原（vtg）基因的表達(dá)，因此斑馬魚可用于監(jiān)測環(huán)境雌激素污染程度。為了實現(xiàn)可視化監(jiān)測，科學(xué)家將圖1中的vtg基因與圖2中Luc基因載體連接，形成vtg-Luc基因重組載體，成功培育了轉(zhuǎn)基因斑馬魚，當(dāng)極微量雌激素污染水體，斑馬魚的肝臟就發(fā)出熒光。Luc表示熒光素酶基因（無啟動子），Kanr為卡那霉素抗性基因，ori為復(fù)制起點，BamHI、BclI、HindIII、BsrGI為限制酶，→表示轉(zhuǎn)錄方向。注：圖1DNA片段不含有圖2所示限制酶的識別序列（1）為使vtg基因與Luc基因載體形成重組載體，選用限制酶_________切割Luc基因載體可降低“空載”概率。通過PCR技術(shù)獲取vtg基因時，需設(shè)計合適的引物。依據(jù)圖示信息，推測引物1包含的堿基序列為5′_________3′。（寫出已知的所有堿基序列）（2）將“vtg-Luc基因重組載體”導(dǎo)入大腸桿菌中進(jìn)行擴增，為便于篩選，應(yīng)將大腸桿菌接種在含_________的培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)基因成功的斑馬魚只在肝臟中發(fā)出熒光指示污染，其原因是_________。（3）Luc基因載體上有一段P2A序列，其功能如圖所示，據(jù)此推測P2A的作用______。（4）進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，E蛋白能與vtg基因啟動子的特定序列結(jié)合，啟動該基因的表達(dá)。已知vtg基因啟動子含區(qū)域1和區(qū)域2，為研究E蛋白的結(jié)合位點，設(shè)計如下實驗：用限制酶將啟動子切割成含區(qū)域1和區(qū)域2的兩個片段，將兩個酶切片段分別與Luc基因載體連接，連接位點位于Luc基因的上游，形成兩種重組載體。將重組載體分別導(dǎo)入斑馬魚的_______，待發(fā)育成熟后，往水體中添加________進(jìn)行檢測。24.蛋白質(zhì)是生命活動的承擔(dān)者，不同蛋白質(zhì)起作用的部位不同?；卮鹣旅娴南嚓P(guān)問題。（1）下圖為某種胰島素的結(jié)構(gòu)示意圖。假設(shè)21種氨基酸的平均相對分子質(zhì)量為128，由51個氨基酸組成的胰島素的相對分子質(zhì)量約為______。胰島素的生理作用體現(xiàn)了蛋白質(zhì)能夠______機體的生命活動。（2）科學(xué)家為了研究某些蛋白質(zhì)是否能進(jìn)入細(xì)胞核，選取了一種病毒蛋白A（該蛋白由708個氨基酸構(gòu)成，能夠進(jìn)入到宿主細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)）進(jìn)行了如下實驗：將蛋白A上某些氨基酸刪除后，檢測蛋白A在細(xì)胞內(nèi)的位置。實驗結(jié)果如圖：蛋白A可以通過______（結(jié)構(gòu)）進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，采用______法能夠定位蛋白A在細(xì)胞內(nèi)的位置。根據(jù)上述實驗結(jié)果，推測蛋白A中負(fù)責(zé)細(xì)胞核定位的序列為______。為驗證上述推測，需要在上述實驗結(jié)果的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步補充完成下列實驗設(shè)計。第一步：選擇一種______（填“細(xì)胞質(zhì)蛋白X”或“細(xì)胞核蛋白X”）．第二步：向選取的蛋白質(zhì)添加上述實驗結(jié)果推測的蛋白A中負(fù)責(zé)細(xì)胞核定位的序列。第三步：檢測蛋白X在細(xì)胞內(nèi)的定位。若實驗結(jié)果為______，則推測成立。25.蛋白質(zhì)分選有兩條途徑，如圖1所示。途徑1是在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中完成多肽鏈的合成，然后轉(zhuǎn)運至細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的特定部位以及線粒體、過氧化物酶體（一種單層膜細(xì)胞器）。圖1中字母表示各類蛋白質(zhì)，甲、乙、丙代表細(xì)胞器。途徑2涉及囊泡的融合過程，囊泡膜上v-SNARE與靶膜上t-SNARE結(jié)合形成SNARE蛋白復(fù)合體后，再與SNAPs結(jié)合形成融合復(fù)合體，該復(fù)合體促進(jìn)囊泡與靶膜的融合，如圖2．回答下列問題：（1）若d類蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合才發(fā)揮作用，該類蛋白質(zhì)可能是______（答出3種）。圖1中，乙、丙分別代表______。圖2過程體現(xiàn)了生物膜具有______功能。（2）真核細(xì)胞合成分泌蛋白的過程中，能產(chǎn)生囊泡的細(xì)胞器有______，囊泡的轉(zhuǎn)運需要依托細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中特殊的網(wǎng)架結(jié)構(gòu)為______。（3）生物膜不能自發(fā)地融合，只有除去親水膜表面的水分子使膜之間的距離近至1.5nm時才可能發(fā)生膜的融合，據(jù)圖2分析發(fā)揮此作用的蛋白質(zhì)主要是______。（4）據(jù)圖分析，蛋白質(zhì)存在分選途徑的意義是______。

2024～2025學(xué)年度第二學(xué)期期中教學(xué)質(zhì)量檢測高二生物試題注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名，考生號，座號填寫在相應(yīng)位置，認(rèn)真核對條形碼上的姓名，考生號和座號，并將條形碼粘貼在指定位置上。2．選擇題答案必須使用2B鉛筆《按填涂樣例》正確填涂；非選擇題答案必須使用0.5毫米黑色簽字筆書寫，繪圖時，可用2B鉛筆作答，字體工整、筆跡清晰。3．請按照題號在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙，試題卷上答題無效。保持卡清潔，不折疊，不破損。一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題給出的四個選項中，只有一個選項是最符合題目要求的。1.科研人員嘗試?yán)弥参锝M織培養(yǎng)技術(shù)從紅豆杉的愈傷組織中提取紫杉醇，流程圖如下。下列敘述正確的是（）A.細(xì)胞懸浮培養(yǎng)與繼代是為了快速獲得更多的薄壁細(xì)胞B.用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，利于原生質(zhì)體融合C.在愈傷組織中加入PEG，可獲得染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞D.采用非胚性愈傷組織的目的是再分化成植株【答案】A【解析】【分析】1、植物組織培養(yǎng)的過程:離體的植物組織、器官或細(xì)胞(外植體)脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育植株(新植體)。2、植物組織培養(yǎng)技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑(快繁技術(shù)、作物脫毒、人工種子)、作物新品種的培育(單倍體育種、突變體的利用)、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斀狻緼、細(xì)胞懸浮培養(yǎng)與繼代培養(yǎng)可以使細(xì)胞大量增殖，薄壁細(xì)胞代謝旺盛，有利于紫杉醇的合成與積累，所以這樣做是為了快速獲得更多的薄壁細(xì)胞，A正確；B、在該流程中用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，目的是將愈傷組織分散成單個細(xì)胞，便于后續(xù)的懸浮振蕩培養(yǎng)等操作，而不是為了原生質(zhì)體融合，B錯誤；C、PEG（聚乙二醇）常用于誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，在愈傷組織中加入PEG不能獲得染色體數(shù)目加倍的細(xì)胞，C錯誤；D、采用非胚性愈傷組織的目的是從其細(xì)胞中提取紫杉醇，而不是再分化成植株，D錯誤。故選A。2.非對稱細(xì)胞融合技術(shù)是指利用射線照射某原生質(zhì)體，破壞其細(xì)胞核，用蕊香紅6G處理另一原生質(zhì)體，使其細(xì)胞質(zhì)失活，然后誘導(dǎo)兩原生質(zhì)體融合。研究者利用該技術(shù)獲得了抗三嗪類除草劑（蕓苔葉綠體基因控制）的蘿卜新品種。下列敘述錯誤的是（）A.原生質(zhì)體可用酶解法處理植物體細(xì)胞獲得B.可通過加入過量的培養(yǎng)液終止原生質(zhì)體融合C.原生質(zhì)體活力可通過質(zhì)壁分離與復(fù)原實驗進(jìn)行檢測D.借助核移植技術(shù)或轉(zhuǎn)基因技術(shù)也可獲得上述蘿卜新品種【答案】C【解析】【分析】植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將雜種細(xì)胞培育成雜種植株?！驹斀狻緼、植物體細(xì)胞的細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，用纖維素酶和果膠酶處理植物體細(xì)胞可去除細(xì)胞壁，進(jìn)而獲得原生質(zhì)體，A正確；B、加入過量的培養(yǎng)液可降低PEG濃度，使原生質(zhì)體融合終止，B正確；C、原生質(zhì)體沒有細(xì)胞壁，不能發(fā)生質(zhì)壁分離，C錯誤；D、由題意可知：利用射線照射某原生質(zhì)體，破壞其細(xì)胞核，不對其細(xì)胞質(zhì)造成破壞，可以保留葉綠體中的抗性基因；用蕊香紅6G處理另一原生質(zhì)體，使其細(xì)胞質(zhì)失活，使新品種性狀受蘿卜的核基因控制，然后誘導(dǎo)兩原生質(zhì)體融合。據(jù)此可推知：借助核移植技術(shù)或轉(zhuǎn)基因技術(shù)也可獲得上述蘿卜新品種，D正確。故選C。3.某動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞貼壁生長至接觸抑制時，需分裝培養(yǎng)，實驗操作過程如圖。下列敘述錯誤的是（）A.①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離 B.②加培養(yǎng)液的目的是促進(jìn)細(xì)胞增殖C.③分裝時需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度 D.整個過程需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行【答案】B【解析】【分析】動物細(xì)胞培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)。（3）溫度和PH：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的PH）。【詳解】A、①加消化液的目的是使細(xì)胞與瓶壁分離，A正確；B、②加培養(yǎng)液，多次加培養(yǎng)液先洗去殘留的消化酶，然后終止消化液的消化作用，并對細(xì)胞加以稀釋，B錯誤；C、③分裝時需調(diào)整到合適的細(xì)胞密度，因為若密度過大細(xì)胞直接仍存在接觸抑制，C正確；D、動物細(xì)胞培養(yǎng)需要無菌無毒環(huán)境，因此整個過程需要在無菌、無毒條件下進(jìn)行，D正確。故選B。4.波爾山羊享有“世界山羊之王”的美譽，具有生長速度快、肉質(zhì)細(xì)嫩等優(yōu)點。生產(chǎn)中常采用胚胎工程技術(shù)快速繁殖波爾山羊。下列敘述錯誤的是（）A.選擇遺傳性狀優(yōu)良的健康波爾母山羊進(jìn)行超數(shù)排卵處理B.胚胎移植前可采集滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)檢測C.普通品質(zhì)的健康杜泊母綿羊不適合作為受體D.生產(chǎn)中對提供精子的波爾公山羊無需篩選【答案】D【解析】【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑葚或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對胚胎進(jìn)行移植。⑤移植后的檢查。對受體母牛進(jìn)行是否妊娠的檢查?！驹斀狻緼、選擇遺傳性狀優(yōu)良健康波爾母山羊作為供體，進(jìn)行超數(shù)排卵處理，A正確；B、胚胎移植前，采集部分滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)檢測，B正確；C、作為受體的杜泊母山羊只需具備健康的體質(zhì)和正常繁殖能力即可，但山羊和綿羊是不同的物種，具有生殖隔離，不能將山羊的胚胎移植到綿羊子宮發(fā)育，即普通品質(zhì)的健康杜泊母綿羊不適合作為受體，C正確；D、生產(chǎn)中需選擇品質(zhì)良好的波爾公山羊提供精子，D錯誤。故選D。5.某同學(xué)以洋蔥為實驗材料進(jìn)行DNA的粗提取與鑒定實驗，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.洋蔥切碎后加入95%酒精作為研磨液，快速研磨B.研磨液用濾紙過濾后，于4℃冰箱中靜置后再取上清液C.離心研磨液是為了加速DNA的沉淀D.用二苯胺試劑鑒定DNA時，需進(jìn)行沸水浴加熱并冷卻處理【答案】D【解析】【分析】DNA的粗提取與鑒定的實驗原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；②DNA不容于酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離；③DNA對于酶、高溫和洗滌劑的耐受性，蛋白酶能水解蛋白質(zhì)，但是不能水解DNA，蛋白質(zhì)不能耐受較高溫度，DNA能耐受較高溫度洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜，但是對DNA沒有影響；④在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍(lán)色。【詳解】A、在DNA粗提取實驗中，研磨時應(yīng)加入洗滌劑和食鹽，而不是95%酒精，95%酒精用于DNA的析出，A錯誤；B、研磨液應(yīng)用紗布過濾，而不是濾紙，濾紙會吸附DNA導(dǎo)致其損失，B錯誤；C、離心研磨液的目的是使細(xì)胞碎片等雜質(zhì)沉淀在離心管底部，從而獲取含有DNA的上清液，而不是加速DNA的沉淀，C錯誤；D、用二苯胺試劑鑒定DNA時，需進(jìn)行沸水浴加熱，加熱后冷卻觀察顏色變化，D正確。故選D。6.一種天然蛋白t-PA能高效降解因血漿纖維蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和腦血栓的急救藥，但是心梗患者注射大劑量的t-PA會誘發(fā)顱內(nèi)出血。研究證實，將t-PA第84位的半胱氨酸（密碼子：ACA）換成絲氨酸（密碼子：UCU），能顯著降低其誘發(fā)出血的副作用。據(jù)此，先對天然t-PA基因的堿基序列進(jìn)行改造，然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達(dá)該改造后的基因，可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白。下列說法正確的是（）A.改造后的基因中決定第84位絲氨酸的模板鏈的堿基序列應(yīng)設(shè)計為AGAB.構(gòu)建重組質(zhì)粒時需要選用限制酶XmaⅠ和NheⅠ切割質(zhì)粒pCLY11C.使用T4DNA連接酶不能將t-PA改良基因與質(zhì)粒pCLY11連接D.成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞在含有新霉素的培養(yǎng)基上能存活，且呈現(xiàn)藍(lán)色【答案】A【解析】【分析】1、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等；2、蛋白質(zhì)工程是在基因工程基礎(chǔ)上延伸出的第二代基因工程，因為是對現(xiàn)有蛋白質(zhì)的改造或制造新的蛋白質(zhì)，所以必須通過基因修飾或基因合成實現(xiàn)。通過蛋白質(zhì)工程生產(chǎn)出來的蛋白質(zhì)更加符合人類生產(chǎn)和生活的需要?！驹斀狻緼、由題意可知，是將t-PA第84位的半胱氨酸（密碼子：ACA）換成絲氨酸（密碼子：UCU），絲氨酸密碼子為UCU，根據(jù)堿基互補配對原則，模板鏈堿基序列為AGA，A正確；B、根據(jù)堿基互補配對原則，t-PA基因的左端黏性末端為CCGG-，為XmaⅠ酶切得到，t-PA基因的右端黏性末端為GATC-，為BglⅡ酶切得到，質(zhì)粒需要用相同的酶進(jìn)行酶切以得到與目的基因相同的黏性末端，因此質(zhì)粒需選用限制酶XmaⅠ和BglⅡ切割質(zhì)粒pCLY11，B錯誤；C、T4DNA連接酶能連接黏性末端，還可以連接平末端，使用T4DNA連接酶能將t-PA改良基因與質(zhì)粒pCLY11連接，C錯誤；D、t-PA能高效降解因血漿纖維蛋白凝聚而成的血栓，成功轉(zhuǎn)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞在培養(yǎng)基上會出現(xiàn)具有抗性的白色菌落，D錯誤。故選A。7.基因芯片的測序原理是：先將各不相同的已知序列的八核苷酸探針分別固定在玻片的方格中，再與帶熒光標(biāo)記的待測DNA單鏈進(jìn)行雜交，通過確定熒光強度最強的探針位置與對應(yīng)序列，推出待測序列，如圖所示。下列敘述正確的是（）A.上述測序方法是基于DNA-RNA分子雜交實現(xiàn)的B.通過給探針標(biāo)記熒光也可達(dá)到與上圖同樣的效果C.應(yīng)洗去未與探針結(jié)合的待測DNA分子后再檢測熒光D.根據(jù)圖示結(jié)果可推出待測序列為5'-ATACGTTAGATC-3'【答案】C【解析】【分析】基因芯片測序原理是將已知序列的八核苷酸探針固定在玻片方格中，與帶熒光標(biāo)記的待測DNA單鏈雜交，通過確定熒光強度最強的探針位置與對應(yīng)序列推出待測序列，因此該測序方法是基于DNA-DNA分子雜交實現(xiàn)的?！驹斀狻緼、因為是已知序列的探針與待測DNA單鏈雜交，所以上述測序方法是基于DNA-DNA分子雜交實現(xiàn)的，A錯誤；B、由題干可知是給待測DNA單鏈標(biāo)記熒光，若給探針標(biāo)記熒光，則無法區(qū)分與待測DNA單鏈結(jié)合的不同探針，B錯誤；C、若不洗去未與探針結(jié)合的待測DNA分子，會干擾對與探針結(jié)合的待測DNA分子的熒光檢測，所以應(yīng)洗去未與探針結(jié)合的待測DNA分子后再檢測熒光，C正確；D、根據(jù)圖示，待測DNA單鏈可以與1～5探針結(jié)合，1～5探針的堿基序列連在一起是5'-ATACGTTAGATC-3'，待測序列為5'-GATCTAACGTAT-3'，D錯誤。故選C。8.某研究小組利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將綠色熒光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如圖甲所示。實驗得到能正常表達(dá)兩種蛋白質(zhì)的雜合子雌雄小鼠各1只，交配以期獲得Gata3-GFP基因純合子小鼠。為了鑒定交配獲得的4只新生小鼠的基因型，設(shè)計了引物1和引物2用于PCR擴增，PCR產(chǎn)物電泳結(jié)果如圖乙所示。下列敘述正確的是（）A.翻譯時先合成GFP蛋白，再合成Gata3蛋白B.2號條帶的小鼠是野生型，4號條帶的小鼠是Gata3-GFP基因純合子C.若用引物1和引物3進(jìn)行PCR，不能鑒定新生小鼠的雜合子和純合子情況D.設(shè)計引物僅擴增Gata3基因編碼區(qū)，獲得32個符合要求的DNA片段至少需經(jīng)過5次循環(huán)【答案】C【解析】【分析】PCR技術(shù)是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫，是一項根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)?！驹斀狻緼、據(jù)圖可知，因啟動子在左側(cè)，轉(zhuǎn)錄從左向右，而翻譯方向從mRNA的5'-3'，Gata3蛋白在GFP蛋白的左側(cè)，所以翻譯時先合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白，A錯誤；B、整合GFP基因后，核酸片段變長，2號個體只有大片段，所以是Gata3-GFP基因純合子，4號個體只有小片段，是野生型，B錯誤；C、若用引物1和引物3進(jìn)行PCR，雜合子和Gata3-GFP基因純合子都能擴增出相應(yīng)的片段，則不能鑒定新生小鼠的雜合子和純合子，C正確；D、在PCR過程中，前兩次循環(huán)不能得到符合要求的DNA片段，需要經(jīng)過第3次循環(huán)才能獲得2個符合要求的DNA片段，經(jīng)過第4次循環(huán)，會得到8個符合要求的DNA片段，經(jīng)過第5次循環(huán)，會得到22個符合要求的DNA片段，經(jīng)過第6次循環(huán)，會得到52個符合要求的DNA片段，計算公式為2n-2n（n代表循環(huán)次數(shù)），所以要獲得32個符合要求的DNA片段至少需經(jīng)過6次循環(huán)，D錯誤。故選C。9.下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物與安全性的敘述，正確的是（）A.轉(zhuǎn)基因培育的植物，理論上目的基因只存在于特定的組織中B.轉(zhuǎn)基因技術(shù)與植物體細(xì)胞雜交技術(shù)均可打破生殖隔離，實現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種，培育出雜種新物種C.種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時，常間行種植普通棉花以供害蟲取食，其主要目的是保護(hù)物種多樣性D.轉(zhuǎn)基因花粉中若有毒蛋白或過敏蛋白，則它有通過食物鏈傳遞而引發(fā)人類食品安全問題的可能【答案】D【解析】【分析】轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的正確做法是趨利避害，不能因噎廢食?！驹斀狻緼、轉(zhuǎn)基因培育的植物，理論上目的基因存在于所有體細(xì)胞中，A錯誤；B、轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育的物種和原來的非轉(zhuǎn)基因生物屬于同一物種，B錯誤；C、種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，常間行種植普通棉花是為了降低害蟲的抗性基因進(jìn)化的頻率，C錯誤；D、轉(zhuǎn)基因花粉中若有毒蛋白或過敏蛋白，則它有通過食物鏈傳遞而引發(fā)人類食品安全問題的可能，D正確。故選D。【點睛】10.非洲疾控中心于2024年8月13日宣布猴痘疫情為非洲公共衛(wèi)生緊急事件。猴痘是由猴痘病毒（雙鏈DNA病毒）引起的傳染病。除猴痘外，許多傳染病也是由微生物感染造成的。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.病毒的核酸、外殼、包膜都是由病毒的遺傳物質(zhì)控制合成的B.可根據(jù)病毒核酸的單雙鏈來判斷其遺傳物質(zhì)是DNA還是RNAC.肺炎支原體和猴痘病毒都是結(jié)構(gòu)簡單的生物，都不含有細(xì)胞壁和細(xì)胞器D.與猴痘病毒相比，流感病毒的遺傳物質(zhì)更容易發(fā)生變異【答案】D【解析】【分析】病毒屬于非細(xì)胞生物，主要由核酸和蛋白質(zhì)外殼構(gòu)成，依賴活的宿主細(xì)胞才能完成生命活動。【詳解】A、新形成的猴痘病毒的包膜是由宿主細(xì)胞細(xì)胞膜分離出來的，不是病毒的遺傳物質(zhì)控制合成的，A錯誤；B、病毒的核酸包括雙鏈DNA、單鏈DNA、雙鏈RNA、單鏈RNA等不同類型，因此僅從核酸的單雙鏈無法判斷該病毒的遺傳物質(zhì)是DNA還是RNA，B錯誤；C、肺炎支原體是原核生物，不含細(xì)胞壁，但含有核糖體，C錯誤；D、流感病毒遺傳物質(zhì)為單鏈RNA，不穩(wěn)定，所以更容易發(fā)生突變，猴痘病毒的遺傳物質(zhì)是雙鏈DNA，穩(wěn)定，不易發(fā)生突變，D正確。故選D。11.羊肉中富含蛋白質(zhì)、脂肪酸和鐵、鈉、鈣等無機鹽，是滋補佳品。鄒城有冬至喝羊湯的悠久傳統(tǒng)。下列敘述正確的是（）A.羊肉煮久了的湯建議少喝，容易引起尿酸高，因為其脂肪含量高B.缺Ca會引起神經(jīng)、肌肉細(xì)胞的興奮性降低，多食羊肉會使肌肉強壯C.羊肉皮下脂肪中的脂肪酸一般為飽和脂肪酸，室溫時呈固態(tài)D.羊肉和豬肉口感不同的根本原因在于其蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)不同【答案】C【解析】【分析】無機鹽大多數(shù)以離子形式存在，有些無機鹽是某些大分子化合物的組成成分；許多無機鹽對于維持細(xì)胞和生物體的生命活動具有重要作用，有些無機鹽對于維持酸堿平衡和滲透壓具有重要作用?！驹斀狻緼、脂肪含有的元素為C、H、O，尿酸不是因為食物脂肪較高食物導(dǎo)致的，而是其他含N物質(zhì)在體內(nèi)代謝形成的，A錯誤；B、神經(jīng)細(xì)胞Na+內(nèi)流產(chǎn)生興奮，人體內(nèi)Na缺乏會引起神經(jīng)、肌肉細(xì)胞的興奮性降低，引起肌肉酸痛無力等，B錯誤；C、動物細(xì)胞內(nèi)的脂肪酸通常是飽和脂肪酸，室溫呈固態(tài)，C正確；D、羊肉和豬肉口感不同的直接原因在于其蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)不同，根本原因在于其基因的不同，D錯誤。故選C。12.S-腺苷甲硫氨酸（SAM）核糖開關(guān)是存在于細(xì)菌中的一種RNA結(jié)構(gòu)元件。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)SAM濃度過高時，過多的SAM會與SAM核糖開關(guān)結(jié)合，從而抑制包括SAM合成相關(guān)基因在內(nèi)的遺傳物質(zhì)的表達(dá)。下列敘述錯誤的是（）A.SAM核糖開關(guān)內(nèi)部部分核苷酸間可能形成氫鍵B.SAM與SAM核糖開關(guān)之間可通過肽鍵結(jié)合C.上述過程中存在負(fù)反饋調(diào)節(jié)D.促進(jìn)SAM合成相關(guān)基因的表達(dá)可能會抑制細(xì)菌的生命活動【答案】B【解析】【分析】基因的表達(dá)：基因通過指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成來控制性狀的過程稱為基因的表達(dá)?！驹斀狻緼、SAM核糖開關(guān)是RNA結(jié)構(gòu)元件，RNA內(nèi)部部分核苷酸間可能形成氫鍵，A正確；B、SAM是氨基酸，而SAM核糖開關(guān)是RNA結(jié)構(gòu)元件，二者之間不通過肽鍵結(jié)合，B錯誤；C、由題意可知，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)SAM濃度過高時，過多的SAM會與SAM核糖開關(guān)結(jié)合，從而抑制包括SAM合成相關(guān)基因在內(nèi)的遺傳物質(zhì)的表達(dá)，說明上述過程中存在負(fù)反饋調(diào)節(jié)，有利于調(diào)節(jié)遺傳物質(zhì)的表達(dá)，C正確；D、由題意可知，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)SAM濃度過高時，過多的SAM會與SAM核糖開關(guān)結(jié)合，從而抑制包括SAM合成相關(guān)基因在內(nèi)的遺傳物質(zhì)的表達(dá)，推測促進(jìn)SAM合成相關(guān)基因的表達(dá)可能會抑制細(xì)菌的生命活動，D正確。故選B。13.初步研究表明，β-AP（β-淀粉樣蛋白）沉積是Alzheimer型老年癡呆的主要病理特征。β-AP是由前體蛋白-APP（一種含695個氨基酸的跨膜蛋白）在病理狀態(tài)下異常加工而成的。APP形成β-AP的過程如圖所示。根據(jù)上述信息，下列推論正確的是（）A.APP形成一個β-AP需要消耗4個水分子B.一個β-AP分子中至少含有38個肽鍵C.Alzheimer型老年癡呆是由前體蛋白-APP結(jié)構(gòu)異常導(dǎo)致的D.促進(jìn)β-水解酶和γ-水解酶的合成可緩解Alzheimer型老年癡呆的癥狀【答案】B【解析】【分析】分析題圖：圖示表示APP形成β-AP的過程，該過程是在病理狀態(tài)下進(jìn)行的，由題圖知APP形成-β-AP的過程中需要β分泌酶和Y分泌酶的催化作用，β-AP分子是由前體蛋白APP中的第597位氨基酸到635位氨基酸形成的、其含有的氨基酸數(shù)=635-597+1-39個，而β-AP分子沉積是Alzheimer型者年癡呆的主要病理特征?！驹斀狻緼、從圖中可知，APP形成β-AP是在β-水解酶和γ-水解酶作用下進(jìn)行切割的，這是水解反應(yīng)，會消耗水分子，APP被切割形成β-AP是斷開了2個肽鍵，斷開一個肽鍵消耗1分子水，所以形成一個β-AP需要消耗2個水分子，A錯誤；B、由圖可知β-AP是由597-635位氨基酸形成的，氨基酸數(shù)為635-597+1=39個，根據(jù)肽鍵數(shù)=氨基酸數(shù)-1，所以一個β-AP分子中至少含有39-1=38個肽鍵，B正確；C、β-AP沉積是Alzheimer型老年癡呆的主要病理征，老年癡呆者記憶力降低，記憶與大腦皮層有關(guān)，因此β-AP的作用效果可能是引起大腦功能異常，C錯誤；D、因為β-AP是由APP在β-水解酶和γ-水解酶作用下異常加工形成的，促進(jìn)β-水解酶和γ-水解酶的合成會使更多的APP加工成β-AP，會加重Alzheimer型老年癡呆的癥狀，而不是緩解，D錯誤。故選B。14.遷移體是我國科學(xué)家發(fā)現(xiàn)的一種新的細(xì)胞器，是細(xì)胞遷移過程中由尾部收縮絲的尖端或交叉點產(chǎn)生的膜性細(xì)胞器，能在細(xì)胞之間傳遞。線粒體胞吐（MEx）是指線粒體通過進(jìn)入遷移體被釋放到細(xì)胞外的過程。實驗小組為了研究MEx以及K蛋白在MEx中的作用，設(shè)計了相關(guān)實驗，實驗結(jié)果如下表所示。下列敘述錯誤的是（）組別ABCD藥物CCCP—+—+敲除K基因——++遷移體中線粒體的相對含量10801011注：藥物CCCP能誘導(dǎo)線粒體受損，“+”表示進(jìn)行相關(guān)操作，“－”表示不進(jìn)行相關(guān)操作。A.磷脂雙分子層構(gòu)成了遷移體膜的基本支架B.遷移體可能具有介導(dǎo)細(xì)胞之間的信息交流的功能C.MEx常作為線粒體受損的重要指標(biāo)D.K蛋白的作用可能是抑制需要胞吐的線粒體進(jìn)入遷移體中【答案】D【解析】【分析】細(xì)胞膜的主要組成成分是蛋白質(zhì)和脂質(zhì)，其次還有少量糖類；脂質(zhì)中主要是磷脂，磷脂雙分子層構(gòu)成膜的基本骨架；蛋白質(zhì)是生命活動的主要承擔(dān)者和體現(xiàn)者，細(xì)胞膜的功能復(fù)雜程度與細(xì)胞膜上蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量有關(guān)，功能越復(fù)雜的細(xì)胞，蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量越多。【詳解】A、遷移體是一種具有膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，生物膜的基本支架都是磷脂雙分子層，A正確；B、根據(jù)題意分析，帶有熒光的遷移體能在不同細(xì)胞之間傳遞，說明遷移體可能具有介導(dǎo)細(xì)胞之間信息交流的功能，B正確；C、根據(jù)實驗結(jié)果可知，當(dāng)線粒體受損時，遷移體中含有更多的線粒體，說明遷移體釋放的主要是受損的線粒體，其意義在于維持細(xì)胞內(nèi)部環(huán)境的相對穩(wěn)定，因此MEx可作為線粒體受損的重要指標(biāo)，C正確；D、對比B組和D組可知，敲除K基因后，遷移體中線粒體的數(shù)量減少，說明K蛋白的作用可能是促使受損線粒體進(jìn)入遷移體中，D錯誤。故選D。15.研究發(fā)現(xiàn)，生物膜融合存在以下機制：不同生物膜上的蛋白質(zhì)相互作用形成螺旋狀的復(fù)合蛋白，使磷脂分子失去穩(wěn)定進(jìn)而重排形成融合孔，最后實現(xiàn)生物膜的相互融合，過程如圖所示。下列敘述錯誤的是（）A.膜蛋白1、2形成螺旋狀結(jié)構(gòu)涉及自身構(gòu)象的變化B.自然界中正常情況下，膜蛋白1、2都來自同一個生物體C.胰島素或乙酰膽堿可通過囊泡與細(xì)胞膜融合釋放，從而傳遞信息D.研究具包膜的病毒與細(xì)胞膜融合的機制，能為該種病毒藥物的研發(fā)提供一種新思路【答案】B【解析】【分析】1、生物膜流動鑲嵌模型：（1）磷脂雙分子層構(gòu)成膜的基本支架，這個支架是可以流動的；（2）蛋白質(zhì)分子有鑲嵌在磷脂雙分子層表面，有的部分或全部嵌入磷脂雙分子層中，有的橫跨整個磷脂雙分子層．大多數(shù)蛋白質(zhì)也是可以流動的；（3）在細(xì)胞膜的外表，少數(shù)糖類與蛋白質(zhì)結(jié)合形成糖蛋白。除糖蛋白外，細(xì)胞膜表面還有糖類與脂質(zhì)結(jié)合形成糖脂；2、細(xì)胞膜主要是由磷脂構(gòu)成的富有彈性的半透性膜，對于動物細(xì)胞來說，其膜外側(cè)與外界環(huán)境相接觸。其主要功能是選擇性地交換物質(zhì)，吸收營養(yǎng)物質(zhì)，排出代謝廢物，分泌與運輸?shù)鞍踪|(zhì)?！驹斀狻緼、從圖中可以看出膜蛋白1和膜蛋白2相互作用形成螺旋狀復(fù)合蛋白，這個過程必然涉及膜蛋白1、2自身構(gòu)象的變化，A正確；B、在受精過程中，精子和卵細(xì)胞的膜融合，此時膜蛋白1、2分別來自不同的細(xì)胞（來自不同生物體），并非自然界中正常情況下膜蛋白1、2都來自同一個生物體，B錯誤；C、胰島素屬于分泌蛋白，通過囊泡與細(xì)胞膜融合釋放到細(xì)胞外發(fā)揮作用；乙酰膽堿是神經(jīng)遞質(zhì)，也是通過突觸小泡與突觸前膜融合釋放，從而傳遞信息，C正確；D、研究具包膜的病毒與細(xì)胞膜融合的機制，就可以針對這個融合機制來研發(fā)藥物，阻止病毒與細(xì)胞膜的融合，從而為該種病毒藥物的研發(fā)提供新思路，D正確。故選B。二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。每小題給出的四個選項中，有的只有一個選項正確，有的有多個選項正確，全部選對的得3分，選對但不全的得1分，有選錯的得0分。16.細(xì)胞融合技術(shù)有著廣泛應(yīng)用，如圖為細(xì)胞融合的簡略過程。據(jù)圖分析，下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A.獲得體細(xì)胞雜交植株乙屬于無性生殖B.乙過程可用PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合和細(xì)胞壁的再生C.丙過程中，為篩選出產(chǎn)生抗流感病毒的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需用特定抗體去檢測并呈陽性D.若a和b分別是基因型為AaBB、aaBb植株的花粉細(xì)胞，則去壁后兩兩融合可得到6種基因型細(xì)胞【答案】BC【解析】【分析】據(jù)圖分析，圖中甲是有性雜交產(chǎn)生的后代，則a、b分別表示精子和卵細(xì)胞；乙是植物體細(xì)胞雜交產(chǎn)生的后代，則a、b表示兩種植物細(xì)胞，融合前需要用酶解法去掉細(xì)胞壁；丙是單克隆抗體，是B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞分泌的。【詳解】A、體細(xì)胞雜交植株乙的培育過程沒有經(jīng)過兩性生殖細(xì)胞的結(jié)合，屬于無性生殖，A正確；B、PEG（聚乙二醇）可以誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，但不能誘導(dǎo)細(xì)胞壁的再生，細(xì)胞壁的再生是在后續(xù)的培養(yǎng)過程中自然發(fā)生的，B錯誤；C、在制備單克隆抗體的丙過程中，為了篩選出能產(chǎn)生抗流感病毒的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，需要用特定的流感病毒抗原去檢測，只有能與抗原特異性結(jié)合（即檢測呈陽性）的雜交瘤細(xì)胞才是符合要求的，C錯誤；D、基因型為AaBB的植株產(chǎn)生的花粉細(xì)胞基因型為AB、aB，基因型為aaBb的植株產(chǎn)生的花粉細(xì)胞基因型為aB、ab，去壁后兩兩融合，同種花粉細(xì)胞融合得到的基因型有AABB、aaBB、aabb，不同種花粉細(xì)胞融合得到的基因型有AaBB、AaBb、aaBb，共6種基因型細(xì)胞，D正確。故選BC17.種間體細(xì)胞核移植（iSCNT）將供體動物體細(xì)胞與來自不同種、科、目或綱的家畜（馴養(yǎng)動物）的去核卵母細(xì)胞融合并激活，以獲得較多的重構(gòu)胚，進(jìn)而獲得動物個體，是體細(xì)胞核移植（SCNT）中極具潛力的研究方向之一。下列敘述正確的是（）A.同一動物體經(jīng)iSCNT技術(shù)獲得的多個重構(gòu)胚中，遺傳物質(zhì)可能不完全相同B.iSCNT技術(shù)的原理是動物細(xì)胞核具有全能性，操作過程中可用Ca2+激活重構(gòu)胚C.iSCNT技術(shù)必須將供體細(xì)胞的細(xì)胞核取出，然后注入去核的卵母細(xì)胞D.若從動物體內(nèi)采集到的體細(xì)胞數(shù)目較少，可用添加動物血清的固體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)【答案】A【解析】【分析】1、動物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動物一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新的胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)，其原理是動物細(xì)胞核具有全能性。2、重構(gòu)胚是指人工重新構(gòu)建的胚胎，具有發(fā)育成為完整個體的能力?？梢杂梦锢砘蚧瘜W(xué)方法（如電刺激、Ca2+載體、乙醇和蛋白酶合成抑制劑等）激活重構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程?！驹斀狻緼、同一動物體經(jīng)iSCNT技術(shù)獲得多個重構(gòu)胚時，由于供體細(xì)胞的遺傳物質(zhì)相同，但去核卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中也含有少量遺傳物質(zhì)，而不同的去核卵母細(xì)胞其細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)可能存在差異，所以多個重構(gòu)胚的遺傳物質(zhì)可能不完全相同，A正確；B、種間體細(xì)胞核移植（iSCNT）技術(shù)的原理是動物細(xì)胞核具有全能性，操作過程中可用Ca2+載體激活重構(gòu)胚，B錯誤；C、在iSCNT技術(shù)中，一般采用顯微注射法將供體細(xì)胞直接注入去核的卵母細(xì)胞，而不是先將供體細(xì)胞的細(xì)胞核取出再注入，這樣可以減少對細(xì)胞核的損傷，C錯誤；D、動物體細(xì)胞培養(yǎng)時，若細(xì)胞數(shù)目較少，應(yīng)用添加動物血清的液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，而不是固體培養(yǎng)基，因為動物細(xì)胞在液體環(huán)境中才能更好地生長和代謝，D錯誤。故選A。18.關(guān)于“DNA片段的擴增及電泳鑒定”實驗，下列敘述錯誤的是（）A.PCR技術(shù)操作過程中的每個循環(huán)都需經(jīng)歷一次降溫和兩次升溫B.凝膠載樣緩沖液中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，便于在紫外燈下觀察C.待指示劑前沿遷移到達(dá)凝膠加樣孔邊緣時需停止電泳以防DNA跑出凝膠D.若擴增結(jié)果不止一條帶，可能的原因是退火溫度過高【答案】BCD【解析】【分析】PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。電泳的原理：待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、性狀不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。【詳解】A、PCR技術(shù)每個循環(huán)包括變性（升溫使DNA雙鏈解旋）、退火（降溫使引物結(jié)合到單鏈DNA）、延伸（升溫使DNA聚合酶合成新DNA鏈），所以每個循環(huán)需經(jīng)歷一次降溫、兩次升溫，A正確；B、凝膠載樣緩沖液中的指示劑能與DNA分子結(jié)合，在300nm的紫外燈下能被檢測出來，B錯誤；C、電泳時，待指示劑前沿遷移到距離凝膠末端（不是加樣孔邊緣）合適位置時停止電泳，防止DNA跑出凝膠，C錯誤；D、退火溫度過高，引物與模板結(jié)合不充分、特異性增強，可能只擴增出一條帶；若退火溫度過低，引物與模板非特異性結(jié)合增多，可能出現(xiàn)不止一條帶，D錯誤。故選BCD。19.脂筏模型被認(rèn)為是對細(xì)胞膜流動鑲嵌模型的重要補充：脂筏是質(zhì)膜上富含膽固醇和鞘磷脂的微結(jié)構(gòu)域，其中的膽固醇就像膠水一樣，對鞘磷脂親和力很高，并特異吸收或排出某些蛋白質(zhì)（如某些跨膜蛋白質(zhì)、酶等），形成一些特異蛋白聚集的區(qū)域。推測下列敘述錯誤的是（）A.圖中脂筏跨膜蛋白可能代表運輸物質(zhì)的蛋白質(zhì)，其跨膜區(qū)段的氨基酸具有較強的親水性B.“脂筏模型”比“流動鑲嵌模型”更能代表生物膜的特性C.脂筏模型表明脂質(zhì)和蛋白質(zhì)在膜上的分布是不均勻的D.脂筏區(qū)域在動植物細(xì)胞中都有廣泛分布【答案】ABD【解析】【分析】細(xì)胞膜的流動鑲嵌模型：（1）磷脂雙分子層構(gòu)成膜的基本支架，這個支架是可以流動的；（2）蛋白質(zhì)分子有的鑲嵌在磷脂雙分子層表面，有的部分或全部嵌入磷脂雙分子層中，有的橫跨整個磷脂雙分子層。大多數(shù)蛋白質(zhì)也是可以流動的；（3）在細(xì)胞膜的外表，少數(shù)糖類與蛋白質(zhì)結(jié)合形成糖蛋白。除糖蛋白外，細(xì)胞膜表面還有糖類與脂質(zhì)結(jié)合形成糖脂。【詳解】A、圖中脂筏跨膜蛋白可能代表運輸物質(zhì)的通道蛋白，其跨膜區(qū)段的氨基酸與磷脂分子的疏水段接觸，說明其具有較強的疏水性，A錯誤；B、由題意可知，脂筏模型認(rèn)為膜的部分區(qū)域流動性因含有大量膽固醇而降低，“流動鑲嵌模型”更能代表所有生物膜的特性，B錯誤；C、脂筏是富含膽固醇和鞘磷脂區(qū)域，還能特異聚集某些蛋白質(zhì)，表明脂質(zhì)和蛋白質(zhì)在膜上分布不均勻，C正確；D、由題意可知，脂筏區(qū)域富含膽固醇，膽固醇是動物細(xì)胞膜的重要組成成分，植物細(xì)胞膜不含膽固醇，因此脂筏區(qū)域在動物細(xì)胞中廣泛分布，而植物細(xì)胞中不含膽固醇，D錯誤。故選ABD。20.肝臟是哺乳動物合成膽固醇的主要場所，餐后膽固醇的合成量會增加，其調(diào)節(jié)機制如圖所示，圖中mTORC1、AMPK、USP20、HMGCR均為調(diào)節(jié)代謝過程的酶，HMGCR是膽固醇合成的關(guān)鍵酶，mTORC1能促進(jìn)USP20磷酸化，USP20磷酸化后使HMGCR穩(wěn)定發(fā)揮催化作用。結(jié)合下圖，以下敘述錯誤的是（）A.圖中合成膽固醇的原料為乙酰-CoA，合成膽固醇的細(xì)胞器為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)B.細(xì)胞內(nèi)葡萄糖濃度增加可通過抑制AMPK進(jìn)而提高mTORC1的活性C.進(jìn)食后胰島素分泌增多，與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合后可抑制USP20磷酸化D.用抑制磷酸化的藥物作用USP20可以提高膽固醇的水平【答案】CD【解析】【分析】題圖分析，在細(xì)胞內(nèi)利用乙酰-CoA合成膽固醇，同時葡萄糖進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，抑制AMPK的作用，而AMPK可以抑制mTORC1，而mTORC1能促進(jìn)膽固醇的合成，進(jìn)而表現(xiàn)為餐后膽固醇含量增加?！驹斀狻緼、從圖中可看出，合成膽固醇的原料是乙酰-CoA，該過程中經(jīng)過了一系列反應(yīng)，反應(yīng)發(fā)生的細(xì)胞器為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，A正確；B、細(xì)胞內(nèi)葡萄糖濃度增加，進(jìn)入肝細(xì)胞的葡萄糖增加，抑制AMPK活性，而AMPK抑制mTORC1，可見，細(xì)胞內(nèi)葡萄糖濃度增加可通過抑制AMPK進(jìn)而提高mTORC1的活性，B正確；C、進(jìn)食后胰島素分泌增多，與細(xì)胞膜上的受體結(jié)合后可激活mTORC1，活化后的mTORC1促進(jìn)USP20磷酸化，C錯誤；D、由于磷酸化的USP20使HMGCR穩(wěn)定催化乙酰-CoA合成膽固醇，因此USP20基因缺失或其藥理抑制作用可以降低膽固醇的水平，D錯誤。故選CD。三、非選擇題：本題包括5小題，共55分。21.科學(xué)家將主效耐堿基因AT1導(dǎo)入小麥的愈傷組織，從而獲得了小麥的耐鹽堿組織，實驗過程用到的部分結(jié)構(gòu)如下圖。請據(jù)圖回答下列問題：（1）已知A位點和B位點分別是起始密碼子和終止密碼子對應(yīng)的基因位置，擴增基因選用的引物組合應(yīng)為______。AT1基因以b鏈為轉(zhuǎn)錄模板鏈，為了使AT1基因按照正確的方向與質(zhì)粒連接，在引物1的______端添加______的酶切位點。（2）擴增AT1基因時，一般要向PCR反應(yīng)緩沖液中添加，目的是______。進(jìn)行農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法時，需要將AT1基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中，原因是______。（3）培育轉(zhuǎn)基因植株時，將愈傷組織轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基上，發(fā)現(xiàn)只生根不生芽，可能的原因是______?！敬鸢浮浚?）①.引物1和4②.5'③.PstⅠ（2）①.激活DNA聚合酶②.T-DNA可轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上（3）培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素比值高，有利于根的分化，抑制芽的形成【解析】【分析】基因工程基本操作程序：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【小問1詳解】已知A位點和B位點分別是起始密碼子和終止密碼子對應(yīng)的基因位置，為保證擴增的基因片段中含有轉(zhuǎn)錄形成的起始密碼子和終止密碼子的堿基序列，在擴增基因時應(yīng)選用的引物組合為引物1和4，DNA復(fù)制時子鏈的延伸方向為5′→3′端，因此在引物1的5′端加入PstI的酶切位點，在引物4的5′端加入SmaI的酶切位點，這樣有利于對目的基因和載體進(jìn)行雙酶切后重組載體的連接；【小問2詳解】Mg2+是DNA聚合酶的激活劑，在PCR反應(yīng)中，它能增強DNA聚合酶的活性，幫助DNA聚合酶正確識別和結(jié)合模板，促進(jìn)dNTP（脫氧核糖核苷三磷酸）聚合形成新的DNA鏈，從而保證PCR反應(yīng)順利進(jìn)行；Ti質(zhì)粒的T-DNA具有可轉(zhuǎn)移的特性，它能夠整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上。將AT1基因插入T-DNA中，隨著T-DNA轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞染色體DNA，就可以使目的基因（AT1基因）穩(wěn)定地整合到受體細(xì)胞基因組中，實現(xiàn)目的基因的穩(wěn)定遺傳和表達(dá)；【小問3詳解】在植物組織培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素的比值影響細(xì)胞分化的方向，比值適中時促進(jìn)愈傷組織的形成，比值低時有利于芽的分化抑制根的形成，比值高時，有利于根的分化抑制芽的形成，所以，將愈傷組織轉(zhuǎn)接到誘導(dǎo)生芽的培養(yǎng)基上，發(fā)現(xiàn)只生根不生芽，可能的原因是培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素比值高，有利于根的分化，抑制芽的形成。22.為研制丙肝病毒包膜蛋白的單克隆抗體，某研究者以小鼠為實驗材料設(shè)計了以下實驗流程。請回答下列問題：（1）融合之前的兩種細(xì)胞中，能通過動物細(xì)胞培養(yǎng)大量增加數(shù)量的是______，培養(yǎng)液中還需要添加10%胎牛血清（FBS）等，添加血清的作用是______。（2）誘導(dǎo)細(xì)胞融合時利用的病毒表面含有糖蛋白和一些酶，能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使得細(xì)胞互相凝聚，細(xì)胞膜上的______重新排布，細(xì)胞發(fā)生融合。篩選1利用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，該培養(yǎng)基對______和______生長具有抑制作用。（3）篩選2的目的是______。經(jīng)選擇、培養(yǎng)，最終在培養(yǎng)液中提取分離得到A1、A2、A3等多種抗丙肝病毒包膜蛋白的單克隆抗體。（4）為確定A1、A2、A3的抗原結(jié)合位點是否相同，將等量A1、A2、A3分別固定于反應(yīng)體系中并結(jié)合丙肝病毒包膜蛋白，再分別加入酶E標(biāo)記的A1、A2、A3，反應(yīng)后洗掉未結(jié)合抗體，加入酶E的底物（可被酶E催化發(fā)生顯色反應(yīng)），通過與對照組比較顏色變淺的程度計算出結(jié)合抑制率，結(jié)果如表（以抑制率50%為界值進(jìn)行實驗數(shù)據(jù)分析）。該實驗所得結(jié)論是______。抑制率（%）E酶標(biāo)抗體A1A2A3固相抗體A1612333A2187156A3276373【答案】（1）①.骨髓瘤細(xì)胞②.提供未知的細(xì)胞生長所必需的營養(yǎng)成分（2）①.蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子②.未融合的親本細(xì)胞③.融合的具有同種核的細(xì)胞（3）獲得分泌抗丙肝病毒包膜蛋白抗體的雜交瘤細(xì)胞（4）A2、A3結(jié)合同一抗原位點，A1結(jié)合另一抗原位點【解析】【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【小問1詳解】融合之前兩種細(xì)胞為骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞，其中骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖，能通過動物細(xì)胞培養(yǎng)大量增加數(shù)量，動物細(xì)胞培養(yǎng)時，培養(yǎng)液中添加血清的作用是提供未知的細(xì)胞生長所必需的營養(yǎng)成分?！拘?詳解】誘導(dǎo)細(xì)胞融合時，病毒與細(xì)胞膜上糖蛋白作用，使得細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞發(fā)生融合。篩選1利用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，該培養(yǎng)基對未融合的親本細(xì)胞（骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞）和融合的具有同種核的細(xì)胞（骨髓瘤細(xì)胞-骨髓瘤細(xì)胞融合細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞-B淋巴細(xì)胞融合細(xì)胞）生長具有抑制作用?！拘?詳解】篩選2的目的是從融合的雜交瘤細(xì)胞中篩選出能分泌特定抗體（抗丙肝病毒包膜蛋白抗體）的雜交瘤細(xì)胞?！拘?詳解】據(jù)表可知，A2、A3的抑制率相同，A2、A3與A1的抑制率不同，則說明A2、A3結(jié)合同一抗原位點，A1結(jié)合另一抗原位點。23.水體中的雌激素能使斑馬魚細(xì)胞產(chǎn)生E蛋白，激活卵黃蛋白原（vtg）基因的表達(dá)，因此斑馬魚可用于監(jiān)測環(huán)境雌激素污染程度。為了實現(xiàn)可視化監(jiān)測，科學(xué)家將圖1中的vtg基因與圖2中Luc基因載體連接，形成vtg-Luc基因重組載體，成功培育了轉(zhuǎn)基因斑馬魚，當(dāng)極微量雌激素污染水體，斑馬魚的肝臟就發(fā)出熒光。Luc表示熒光素酶基因（無啟動子），Kanr為卡那霉素抗性基因，ori為復(fù)制起點，BamHI、BclI、HindIII、BsrGI為限制酶，→表示轉(zhuǎn)錄方向。注：圖1DNA片段不含有圖2所示限制酶的識別序列（1）為使vtg基因與Luc基因載體形成重組載體，選用限制酶_________切割Luc基因載體可降低“空載”概率。通過PCR技術(shù)獲取vtg基因時，需設(shè)計合適的引物。依據(jù)圖示信息，推測引物1包含的堿基序列為5′_________3′。（寫出已知的所有堿基序列）（2）將“vtg-Luc基因重組載體”導(dǎo)入大腸桿菌中進(jìn)行擴增，為便于篩選，應(yīng)將大腸桿菌接種在含_________的培養(yǎng)基中，轉(zhuǎn)基因成功的斑馬魚只在肝臟中發(fā)出熒光指示污染，其原因是_________。（3）Luc基因載體上有一段P2A序列，其功能如圖所示，據(jù)此推測P2A的作用______。（4）進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，E蛋白能與vtg基因啟動子的特定序列結(jié)合，啟動該基因的表達(dá)。已知vtg基因啟動子含區(qū)域1和區(qū)域2，為研究E蛋白的結(jié)合位點，設(shè)計如下實驗：用限制酶將啟動子切割成含區(qū)域1和區(qū)域2的兩個片段，將兩個酶切片段分別與Luc基因載體連接，連接位點位于Luc基因的上游，形成兩種重組載體。將重組載體分別導(dǎo)入斑馬魚的_______，待發(fā)育成熟后，往水體中添加________進(jìn)行檢測?！敬鸢浮浚?）①.BclI和HindⅢ②.5'-TGATCAAACTAT-3'（2）①.卡那霉素②.vtg基因在肝臟中特異性表達(dá)（3）有助于序列兩側(cè)的基因表達(dá)成獨立的蛋白質(zhì)（4）①.受精卵②.雌激素和熒光素【解析】【分析】基因工程的步驟：（1）提取目的基因：基因組文庫中獲取、cDNA文庫中獲取。（2）目的基因與運載體結(jié)合：將目的基因與運載體結(jié)合的過程，實際上是不同來源的DNA重新組合的過程。如果以質(zhì)粒作為運載體，首先要用一定的限制酶切割質(zhì)粒，使質(zhì)粒出現(xiàn)一個缺口，露出黏性末端。然后用同一種限制酶切斷目的基因，使其產(chǎn)生相同的黏性末端（部分限制性內(nèi)切酶可切割出平末端，擁有相同效果）。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞是實施基因工程的第三步。目的基因的片段與運載體在生物體外連接形成重組DNA分子后，下一步是將重組DNA分子引入受體細(xì)胞中進(jìn)行擴增。（4）目的基因的檢測和表達(dá)?！拘?詳解】由圖可知，限制酶BsrGI會破壞Luc，因此不能選擇BsrGI，Luc基因載體上存在兩個BamHI識別位點，因此不能選擇BamHI，為防止目的基因和載體的自身環(huán)化和反向連接，因此需選用兩種限制酶，即選擇BelI、HindIII切割Luc基因載體可降低“空載”概率