CCSB4121TechnicalSpecificationsfortheCollection,PreservationandTrans在提交反饋意見(jiàn)時(shí)，請(qǐng)將您知道的相關(guān)專(zhuān)利連同支持性文件一并附上。IDB21/TXXX—XXXX前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語(yǔ)和定義 3.1 3.2 3.3 3.4 4總體要求 4.1采樣原則 4.2無(wú)菌操作及安全防護(hù) 5采樣前準(zhǔn)備 5.1采樣人員 5.2采樣物品和工具 5.2.1防護(hù)物品 5.2.2采樣工具 5.2.3其他物品 5.2.4金屬器械 6樣品采集 6.1血樣 6.1.1采血部位和方法 6.1.2血樣樣品的處理 6.2病原學(xué)檢測(cè)組織樣品 6.3鈍緣軟蜱 6.4其他樣品 7樣品包裝 8樣品的保存和運(yùn)輸 9監(jiān)測(cè) 10廢棄物處理 DB21/TXXX—XXXX本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專(zhuān)利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專(zhuān)利的責(zé)任。本文件由由遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口。本文件歸口。本文件起草單位：本文件主要起草人：本文件發(fā)布實(shí)施后，任何單位和個(gè)人如有問(wèn)題和意見(jiàn)建議，均可以通過(guò)來(lái)電和來(lái)函等方式進(jìn)行反饋，我們將及時(shí)答復(fù)并認(rèn)真處理，根據(jù)實(shí)際情況依法進(jìn)行評(píng)估及復(fù)審。歸口管理部門(mén)聯(lián)系方式：遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳（沈陽(yáng)市和平區(qū)太原北街2號(hào)聯(lián)系電話文件起草單位聯(lián)系方式：1DB21/TXXX—XXXX非洲豬瘟監(jiān)測(cè)樣品采集、保存及運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范本文件規(guī)定了非洲豬瘟監(jiān)測(cè)樣品總體要求、采集前準(zhǔn)備、樣品采集、樣品包裝、樣品的保存與運(yùn)輸、監(jiān)測(cè)及廢棄物處理。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB/T18648非洲豬瘟診斷技術(shù)NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范NY/T561動(dòng)物炭疽診斷技術(shù)《中華人民共和國(guó)動(dòng)物防疫法》（2021年修訂版）《高致病性動(dòng)物病原微生物菌（毒）種或者樣本運(yùn)輸包裝規(guī)范》（中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第503《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》（2024年修訂）《非洲豬瘟疫情應(yīng)急實(shí)施方案（第六版）》（農(nóng)牧發(fā)〔2024〕17號(hào)）《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范（試行）》（農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2015〕31號(hào)）《病死及病害動(dòng)物無(wú)害化處理技術(shù)規(guī)范》（農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2017〕25號(hào)）《炭疽防治技術(shù)規(guī)范》（農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2007〕12號(hào)）3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1監(jiān)測(cè)采取規(guī)定的方法，持續(xù)對(duì)特定群體中疫病的發(fā)生、流行、分布及相關(guān)因素進(jìn)行觀察和檢測(cè)的過(guò)程。2DB21/TXXX—XXXX3.2樣品取自動(dòng)物或環(huán)境，擬通過(guò)檢驗(yàn)檢測(cè)反映動(dòng)物個(gè)體、群體和環(huán)境有關(guān)狀況的材料和物品。3.3采樣按照規(guī)定的程序和要求，從動(dòng)物或環(huán)境取得一定量的樣本，并經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)奶幚?，留做待檢樣品和留樣樣品的過(guò)程。3.4滅菌應(yīng)用物理或化學(xué)方法殺滅物品上所有病原微生物、非病原微生物和芽孢的方法。4總體要求4.1采樣原則4.1.1發(fā)生急性死亡的生豬，如懷疑是炭疽，則不得解剖，并按照《炭疽防治技術(shù)規(guī)范》和《獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》的規(guī)定個(gè)體防護(hù)和實(shí)驗(yàn)操作要求采集血樣和實(shí)驗(yàn)操作，炭疽血液涂片按照NY/T561中染色鏡檢，排除炭疽陽(yáng)性后方可開(kāi)展非洲豬瘟檢測(cè)樣品采樣。4.1.2采集死亡動(dòng)物的病料及活體采樣時(shí)，應(yīng)符合動(dòng)物倫理的相關(guān)規(guī)定，動(dòng)物撲殺應(yīng)符合動(dòng)物福利。4.1.3做好環(huán)境消毒，動(dòng)物組織及采樣廢棄物妥善處理，避免污染環(huán)境，防止擴(kuò)散傳播。4.2無(wú)菌操作及安全防護(hù)4.2.1采樣過(guò)程注意無(wú)菌操作，采樣所需的刀、剪刀、鑷子、離心管、自封袋、PBS緩沖液等應(yīng)事先高壓滅菌，樣品分類(lèi)、單獨(dú)保存。4.2.2采樣人員應(yīng)做好個(gè)人防護(hù)，必要時(shí)穿防護(hù)服佩戴一次性手套和口罩。5采樣前準(zhǔn)備5.1采樣人員5.1.1具備相關(guān)專(zhuān)業(yè)知識(shí)。5.1.2明確采樣目的、樣品類(lèi)型、樣品數(shù)量。5.1.3具備熟練的采樣技能，可正確使用采樣器械。5.2采樣物品和工具5.2.1防護(hù)物品N95口罩、一次性PE手套、乳膠手套、防護(hù)帽、護(hù)目鏡、防護(hù)服、膠靴等。3DB21/TXXX—XXXX5.2.2采樣工具棉拭子、離心管、裝有磷酸緩沖鹽溶液(phosphatebuffersaline,PBS)的離心管、真空采樣管、10mL注射器、剪刀、鑷子、75%酒精、棉球、樣品箱等，可根據(jù)實(shí)際需要增減采樣器具。5.2.3其他物品采樣單、簽字筆、記號(hào)筆、密封袋、封口膜、冰袋等。5.2.4金屬器械可采用103kPa高壓30min，或160℃干熱2h滅菌。臨用時(shí)75%酒精擦拭，或用時(shí)進(jìn)行火焰消6樣品采集6.1血樣6.1.1采血部位和方法根據(jù)豬只大小確定采血部位，常采用耳靜脈、前腔靜脈、尾靜脈，采血方法按照NY/T541規(guī)定進(jìn)行操作。6.1.2血樣樣品的處理血清無(wú)菌采集5mL血液樣品，室溫下傾斜30°靜置2至4h，有血清析出時(shí)，無(wú)菌剝離血凝塊，然后置于4℃冰箱過(guò)夜，待大部分血清析出時(shí)收集血清，必要時(shí)低速離心（1000g離心10～15min）分離出血清，冷藏運(yùn)輸。到達(dá)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室后，冷凍保存，避免反復(fù)凍融。全血樣品無(wú)菌采集5mL乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝血，采集過(guò)程要輕輕上下顛倒混勻血液和抗凝劑，防止血液凝固的同時(shí)避免溶血。6.2病原學(xué)檢測(cè)組織樣品用常規(guī)解剖器械剝離皮膚，體腔用消毒器械剝開(kāi)，所需樣品按無(wú)菌操作方法采集。首選脾臟，其次為扁桃體、淋巴結(jié)、腎臟、骨髓等，每塊組織單獨(dú)放入已消毒處理的容器中，注明日期、組織名稱(chēng)。6.3鈍緣軟蜱查找豬圈的墻邊、墻縫、屋頂，或挖掘豬圈地面，查看豬體表面，將收集的鈍緣軟蜱放入有螺旋蓋4DB21/TXXX—XXXX的樣品瓶/管中，放入少量土壤，蓋內(nèi)襯以紗布。6.4其他樣品口鼻拭子的采集應(yīng)符合NY/T541中的規(guī)定；糞便樣品采集應(yīng)符合GB/T25169中的規(guī)定；污水樣品采集應(yīng)符合GB/T27522中的規(guī)定；土壤樣品用無(wú)菌鑷子取2g～5g裝入無(wú)菌離心管中，做好標(biāo)記。7樣品包裝7.1采集的樣品嚴(yán)格按照《高致病性動(dòng)物病原微生物菌（毒）種或者樣本運(yùn)輸包裝規(guī)范》執(zhí)行。7.2樣品外包裝須貼上封條，封條上應(yīng)有采樣人的簽章，并注明貼封日期、標(biāo)注放置方向。8樣品的保存和運(yùn)輸樣品保存及運(yùn)輸，應(yīng)符合NY/T541和《非洲豬瘟疫情應(yīng)急實(shí)施方案（第六版）》中的規(guī)定。9監(jiān)測(cè)9.1按GB/T18648中的熒光PCR檢測(cè)方法檢測(cè)非洲豬瘟病毒核酸。9.2按GB/T18648中的間接ELISA、阻斷ELISA或夾心ELISA抗體檢測(cè)方法檢測(cè)非洲豬瘟感染抗體。10廢棄物處理10.1采樣使用過(guò)的器械，如一次性器械應(yīng)進(jìn)行生物安全無(wú)害化處理，可重復(fù)使用的器械應(yīng)先消毒