驗證部2019.6.27GMP清潔驗證法規(guī)解讀？清潔驗證和清潔確認區(qū)別，適用范圍？清潔驗證策略-目標殘留物的選擇？接受標準計算？取樣方法和取樣點選擇？清潔驗證方法學驗證（取樣方法和檢驗方法）清洗驗證狀態(tài)的維護？規(guī)范清潔驗證方案編寫？清潔驗證中常見問題分析討論？培訓內容簡介EMA（歐洲藥品管理局）清潔驗證FDATR29清潔驗證幾個概念殘留總量：所有共線設備（與藥品接觸）內表面上殘留量的總和。殘留總量有可能轉移到分散到下批生產的藥品中去。殘留總量的單位：ug、mg20mg殘留水平（污染水平）：是濃度的描述，表示每單位藥品（制劑、原料藥）中殘留物的重量。殘留水平的單位：ug/Kg、mg/mg、ppm、ppb0.1mg/mg清潔驗證中殘留總量和殘留水平的關系：殘留總量=殘留水平（下批產品）*批量（下批產品）殘留水平是研究污染程度的指標，是清潔驗證中首要計算的參數(shù)。殘留總量是從檢驗角度出發(fā)要確定的其中一個參數(shù)。幾個概念殘留水平殘留總量殘留水平=10ppm或者100ppm一、幾個概念清潔驗證：有文件和記錄證明所批準的清潔規(guī)程能有效清潔設備，使之符合藥品生產的要求。清潔確認：也叫“清潔效果確認”，是指用來證明生產設備經一次清潔操作后可以用于后續(xù)生產的文件。分析區(qū)別兩個概念：清潔確認：說明的問題是設備上的殘留或微生物等在接受范圍內→不會污染下批產品。清潔驗證：說明的問題是清潔規(guī)程有效→保證設備上的殘留在接受的范圍內→不會污染下批產品。一、幾個概念

現(xiàn)在有這樣的生產計劃：比如某車間計劃生產4批A產品，接下來生產8批B產品，防止交叉污染，采取下面兩個措施：一、采用清潔確認方法,請問在第幾批取樣檢查？為什么？二、采用清潔驗證方法，（一般連續(xù)三批）請問，請問第四批A生產結束后需要檢查設備殘留來確認A殘留不會影響B(tài)產品質量？

第八章清潔驗證第三十八條為確認與產品直接接觸設備的清潔操作規(guī)程的有效性，應當進行清潔驗證。應當根據(jù)所涉及的物料，合理地確定活性物質殘留、清潔劑和微生物污染的限度標準。第三十九條在清潔驗證中，不能采用反復清洗至清潔的方法。目視檢查是一個很重要的標準，但通常不能作為單一可接受標準使用。（清潔確認？）二、10版GMP的要求（附錄：確認與驗證）清潔確認：每次清潔時，按批準的清潔方法進行清潔并取樣檢測，直到達到預期的結果為止。第四十條清潔驗證的次數(shù)應當根據(jù)風險評估確定，通常應當至少進行連續(xù)三次。清潔驗證計劃完成需要一定的時間，驗證過程中每個批次后的清潔效果需及時進行確認。必要時，企業(yè)在清潔驗證后應當對設備的清潔效果進行持續(xù)確認。第四十一條驗證應當考慮清潔方法的自動化程度。當采用自動化清潔方法時，應當對所用清潔設備設定的正常操作范圍進行驗證；當使用人工清潔程序時，應當評估影響清潔效果的各種因素，如操作人員、清潔規(guī)程詳細程度（如淋洗時間等），對于人工操作而言，如果明確了可變因素，在清潔驗證過程中應當考慮相應的最差條件。二、10版GMP的要求（附錄：確認與驗證）第四十二條活性物質殘留限度標準應當基于毒理試驗數(shù)據(jù)或毒理學文獻資料的評估建立。如使用清潔劑，其去除方法及殘留量應當進行確認?？山邮軜藴蕬斂紤]工藝設備鏈中多個設備潛在的累積效應。第四十三條應當在清潔驗證過程中對潛在的微生物污染進行評價，如需要，還應當評價細菌內毒素污染。應當考慮設備使用后至清潔前的間隔時間以及設備清潔后的保存時限對清潔驗證的影響。二、10版GMP的要求（附錄：確認與驗證）第四十四條當采用階段性生產組織方式時，應當綜合考慮階段性生產的最長時間和最大批次數(shù)量，以作為清潔驗證的評價依據(jù)。第四十五條當采用最差條件產品的方法進行清潔驗證模式時，應當對最差條件產品的選擇依據(jù)進行評價，當生產線引入新產品時，需再次進行評價。如多用途設備沒有單一的最差條件產品時，最差條件的確定應當考慮產品毒性、允許日接觸劑量和溶解度等。每個使用的清潔方法都應當進行最差條件驗證。在同一個工藝步驟中，使用多臺同型設備生產，企業(yè)可在評估后選擇有代表性的設備進行清潔驗證。驗證策略：產品分組法和設備分組法，也叫括號法和矩陣法二、10版GMP的要求（附錄：確認與驗證）第四十六條清潔驗證方案應當詳細描述取樣的位置、所選取的取樣位置的理由以及可接受標準第四十七條應當采用擦拭取樣和（或）對清潔最后階段的淋洗液取樣，或者根據(jù)取樣位置確定的其他取樣方法取樣。擦拭用的材料不應當對結果有影響。如果采用淋洗的方法，應當在清潔程序的最后淋洗時進行取樣。企業(yè)應當評估取樣的方法有效性。第四十八條對于處于研發(fā)階段的藥物或不經常生產的產品，可采用每批生產后確認清潔效果的方式替代清潔驗證。每批生產后的清潔確認應當根據(jù)本附錄的相關要求進行。第四十九條如無法采用清潔驗證的方式來評價設備清潔效果，則產品應當采用專用設備生產。二、10版GMP的要求（附錄：確認與驗證）

清潔工藝開發(fā)階段

方案準備階段方案實施階段驗證狀態(tài)維持階段

清潔SOP

制訂培訓

設備取樣點選擇表面積計算確定待檢測物與合格標準選定參照物清潔劑的殘留

驗證方案制訂培訓

檢驗方法方法開發(fā)驗證

方案執(zhí)行清潔取樣化驗

合格？

驗證報告

原因分析

日常監(jiān)控

再驗證

變更管理

否

是流程圖

否

是

是

三、清潔驗證策略（思路、方法）三、清潔驗證策略清潔規(guī)程制定制定清潔規(guī)程是清潔驗證的先決條件。通常參照設備的說明書制定詳細的規(guī)程，規(guī)定每一臺設備的清潔程序，對每次更換品種和更換批次的清洗方法進行規(guī)范，保證每個操作人員都能以可重復的方式對其清洗，并獲得相同的清潔效果。從保證清潔重現(xiàn)性及驗證結果的可靠性出發(fā)，清潔規(guī)程至少應對以下方面做出規(guī)定：?清潔開始前對設備必要的拆卸要求，清潔完成后的裝配要求。?所用清潔劑的名稱、成分和規(guī)格。?清潔溶液的濃度和數(shù)量。?清潔溶液的配制方法。三、清潔驗證策略清潔規(guī)程制定?清潔溶液接觸設備表面的時間、溫度、流速等關鍵參數(shù)。?淋洗要求。?生產結束至開始清潔的最長時間。?連續(xù)生產的最長時間。?已清潔設備用于下次生產前的最長存放時間。?更換品種時清潔方法、設備拆卸程度；更換批次時清潔方法、設備拆卸程度，對于不必要每批都進行清潔的產品要進行風險評估，基于以往歷史數(shù)據(jù)確定可以連續(xù)生產的批次。三、清潔驗證策略1、分組法

分組法是綜合考慮所有產品/設備后對其進行分組，選取組內代表性的產品/設備來替代整組進行驗證的策略產品分組：ABCDEFG2、設備分組：設備分組要求組內設備相似，并且清潔工藝相同。在清潔驗證中，設備分組是一種將需清潔驗證的設備合理分組，避免多余測試的有效方法ABC

DE

三、清潔驗證策略三、清潔驗證策略（目標殘留物選擇）評估依據(jù)：1、最難清潔（經驗法）2、在所用溶劑中的溶解度3、允許日接觸劑量（PDE）4、最低治療劑量清潔難度建議通過與操作人員和主管溝通進行該項研究，可以采用了一份標準化問卷，讓操作人員和主管在問卷中標出答案，從問卷統(tǒng)計中找出最難清潔物質，容易----1級中等----2級難清潔-------3級這些數(shù)據(jù)是生產部按規(guī)定的清潔方法進行清潔后的經驗值三、清潔驗證策略（目標殘留物選擇）

溶解度Solubility三、清潔驗證策略（目標殘留物選擇）PDE三、清潔驗證策略（目標殘留物選擇）三、清潔驗證策略（目標殘留物選擇）最低治療劑量產品名稱清潔難度溶解度PDE治療劑量A2123B4233C1123三、清潔驗證策略（目標殘留物選擇）四、殘留計算方法方法一、基于最低日治療量1/1000（活性成分的醫(yī)學）（適用于非高毒性活性）方法二、默認濃度（10ppm、100ppm）方法三、基于毒理學（PDE/ADE法、LD50法）（高毒高致敏）NOEL：無明顯作用水平方法一、基于最低日治療劑量的1/1000BasedonDrugActiveDose公式：PADT29L---公用設備允許殘留總量，mgMTDDprevious---清潔前產品最低日治療劑量A活性成分，mgLDDnext-----清潔后要生產的產品B制劑的最大日治療劑量，mgMBSnext------清潔后要生產的產品B制劑的最小批量，kg制劑？API？四、殘留計算產品名稱活性成分活性成分含量最小日劑量MTD最大日劑量MDD批量Aa3%2mg10mg100kgBb6%5mg20mg50kgCc8%50mg150mg250kg方法一、基于最低日治療劑量的1/1000計算舉例四、殘留計算ABCAN/A300mg267mgB1500mgN/A667mgC15000mg7500mgN/A清洗前產品清洗后產品方法一、基于最低日治療劑量的1/1000計算舉例

四、殘留計算產品之間公用設備表面積產品名稱公用面積A+B200,000cm2B+C100,000cm2C+A80,000cm2四、殘留計算方法一、基于最低日治療劑量的1/1000計算舉例

按擦拭面積為100cm2，計算每個棉簽的殘留限度ABCA目視潔凈150ug/100cm2330ug/100cm2B500ug/100cm2目視潔凈667ug/100cm2C1250ug/100cm2500ug/100cm2目視潔凈清洗前產品清洗后產品方法一、基于最低日治療劑量的1/1000計算舉例

四、殘留計算方法二、默認限度法DefaultLimits1、無論是對于制劑還是API生產，最廣泛使用的默認限度是4μg/cm2。這一水平常被作為上限。2、對于制劑來說，最常用的默認限度為10ppm。公式：（ppm=mg/kg）L---公用設備允許殘留總量，mgMBSnext------清潔后要生產的產品B制劑的最小批量，kg舉例：四、殘留計算方法三、基于毒性（ADE法、LD50）ARLBasedonToxicity公式（ADE法）ADE：可接受日暴露量（患者終身每天暴露于該濃度，但對健康的不良影響仍處于可接受風險水平）NOAL：無可見損害作用水平BW：服用下一產品患者體重UFC：綜合不確定度MF：基于毒理學家判斷的因子PK：與給藥途徑相關的藥代動力學因子LDDnext：清潔后要生產的產品B制劑的最大日劑量,mgMACO：代表產品A能進入到產品B中而不致引起風險的最大量四、殘留計算方法三、基于毒性（ADE法、LD50）ARLBasedoToxicity公式（LD50）SDI：殘留每日安全攝入量NOAL：無可見損害作用水平BW：服用下一產品患者體重（70kg）MF1：基于毒理學家判斷的因子MF2：修正因子LDDnext：清潔后要生產的產品B制劑的最大日劑量,mgMACO：代表產品A能進入到產品B中而不致引起風險的最大量四、殘留計算其他方法：對基因毒殘留物，在沒有NOEL數(shù)據(jù)的情況下，可用毒理學原則的閾值來確定SDI，一般為1.5μg/天。四、殘留計算清潔劑殘留（LD50）ARLBasedonToxicity公式（LD50）SDI：殘留每日安全攝入量NOAL：無可見損害作用水平BW：服用下一產品患者體重（70kg）MF1：基于毒理學家判斷的因子（2000）MF2：修正因子（外用制劑10-100，固體制劑100-1000，注射劑1000-10000）LDDnext：清潔后要生產的產品B制劑的最大日劑量,mgMACO：代表產品A能進入到產品B中而不致引起風險的最大量四、殘留計算計算殘留限度是一些特殊情況討論1、后續(xù)生產產品的多樣性（批量，公用面積，劑量）①矩陣排列組合，選擇最小的作為限度標準，②另一種方式是限定生產順序，避免最差。2、后續(xù)生產產品未知①直接檢測殘留，評估殘留，確定后續(xù)產品②基于目前產品構成最差條件，確定后續(xù)產品四、殘留計算微生物、內毒殘留水平微生物限度可以考慮產品、劑型、清潔方法的特點以及環(huán)境級別等因素。如果沒有特殊因素考慮，參考中國2010GMP附錄1中的表面微生物限度要求。對于任何有內毒素限度要求的產品，都需要關注轉移至成品的內毒素殘留。通常測量最終沖洗水中的內毒素，限度通常和WFI標準（0.25EU/mL）相同。如果通過加熱除去設備上的熱原，內毒素將失去活性，則不需要測量已清潔設備的內毒素殘留。四、殘留計算清潔驗證中如何確定合適取樣方法和取樣點是驗證方案的關鍵內容之一，必須由合適的理由來確認取樣點，此取樣點應能夠代表設備的“最臟點”。（1）取樣方法的確認方法分為棉簽直接表面擦拭、淋洗液沖洗和安慰劑取樣。

擦拭取樣的優(yōu)點是能對最難清潔部位直接取樣，通過考察有代表性的最難清潔部位的殘留物水平評價整套生產設備的清潔狀況。通過選擇適當?shù)牟潦萌軇?、擦拭工具和擦拭方法，可將清洗過程中未溶解的，已“干結”在設備表面或溶解度很小的物質擦拭下檢驗的結果能直接反映出各取樣點的清潔狀況。五、取樣方法和取樣點的選擇

擦拭取樣的缺點是很多情況下須拆卸設備后方能接觸到取樣部位，對取樣工具、溶劑、取樣人員的操作等都有一定的要求，總的來說比較復雜。

沖洗法取樣是指在相關設備表面采用流動的溶劑（水，含水溶液，有機溶劑或者水/有機溶劑混合物）去除殘留物，然后再檢測沖洗液中殘留量。沖洗樣本的采集應考慮溶解度，位置，沖洗時間以及沖洗體積。淋洗取樣法為大面積取樣方法，其優(yōu)點是取樣面大，對不便拆卸或不宜經常拆卸的設備也能取樣。因此其適用于擦采用擦拭取樣時要根據(jù)殘留物限度和檢測方法的線性范圍計算擦拭面積。五、取樣方法和取樣點的選擇拭取樣不易接觸到的表面，尤其適用于設備表面平坦、管道多且長的的生產設備。淋洗水樣品的缺點是溶解與流體力學原理，當溶劑不能在設備表面形成湍流進而有效溶解殘留物時，或者殘留物不溶于水或“干結”在設備表面時，淋洗水就難以反映真實的情況。兩種方法：最終沖洗過程“抓取”樣本（CIP）；獨立沖洗取樣。必須由經過培訓的人員進行取樣，并且必須按照批準的測試方案進行。執(zhí)行取樣的人員同執(zhí)行清潔操作的人員不能為同一人。

根據(jù)自己車間設備情況選擇取樣方法：GMP指南上說道盡量采用擦拭取樣方法。一般我們結合兩種方法。單獨使用沖洗取樣被認為不科學。五、取樣方法和取樣點的選擇（2）取樣點的確認最難清潔部位選擇：這些部位應在清潔難度和殘留水平方面代表著對清潔規(guī)程最大程度的挑戰(zhàn)。1、死角2、清潔劑不易接觸的部位（帶密封圈的管道連接處）3、壓力，流速迅速變換的部位（岔管，支管、管徑有小變大）4、容易吸附殘留處（內表面不光滑）五、取樣方法和取樣點的選擇通常清潔驗證方法驗證包括取樣方法驗證和檢驗方法驗證。1、棉簽取樣方法的驗證取樣過程需經過驗證，通過回收率試驗驗證取樣過程的回收率和重現(xiàn)性。通常取樣回收率和檢驗方法回收率結合進行？，綜合回收率一般（企業(yè)可以根據(jù)實際情況確定）不低于50％，多次取樣回收率的相對標準偏差應不大于20％。

棉簽取樣過程的驗證實際上是對取樣棉簽、溶劑的選擇、取樣人員操作、殘留物轉移到取樣棉簽、樣品溶出(萃取)過程的全面考察。

六、清潔驗證方法學驗證

2、淋洗取樣方法的驗證通常淋洗法限度檢查不需做回收率驗證；定量檢查應做回收率驗證，可以利用淋洗溶劑沖洗已知量（在限度附近）的分析物確定回收率，回收率通常應不低于95%。淋洗的取樣方法為根據(jù)淋洗水流經設備的線路，選擇淋洗線路相對最下游的一個或幾個排水口為取樣口。分別按照微生物檢驗樣品和化學檢驗樣品的取樣規(guī)程收集清潔程序最后一步淋洗即將結束時的水樣。淋洗法樣品可對沖洗液直接檢測也可對沖洗液做稀釋后檢測；無論直接檢測還是稀釋檢測都應在接到樣品后首先將樣品同空白溶劑做視覺檢查，確定是否有顏色差異和異物存在；如果有上述現(xiàn)象發(fā)生，可直接判定樣品不合格。六、清潔驗證方法學驗證限度檢查法定量檢查法專屬性√√精密度X√線性/范圍X√回收率√√檢測限和定量限檢測限驗證*定量限驗證*樣品溶液的穩(wěn)定性√√系統(tǒng)適應性√(一份標準品)√(兩份標準品)檢查方法參數(shù)分析方法學驗證六、清潔驗證方法學驗證在清洗驗證完成之后，清洗規(guī)程需要遵循變更控制的流程及進行日常的監(jiān)控。

關于產品、設備及規(guī)程的任何變更必須遵循變更控制流程對變更對驗證狀態(tài)的影響進行評估。評估清洗驗證是否持續(xù)地符合企業(yè)及法規(guī)的標準（某些更新的要求）對清洗驗證的回顧進行書面記錄以確認清洗操作仍然處于驗證的狀態(tài)清洗驗證回顧的頻率由各個企業(yè)自主決定（一般的回顧頻率為最多1年)七、清潔驗證狀態(tài)的維護清潔驗證方案編寫有兩種方法可用于組織和編寫驗證文件，常見的方法是引用其他文件相關要素的詳細內容。例如，將擦拭取樣布點寫在驗證方案中，而取樣點的選擇依據(jù)在另一個文件中，則可以在驗證方案中引用該文件的相應內容。由于方案中只需要詳細說明項目需完成的操作，相關支持信息引用即可，這種編寫方法可以使方案更加流暢。另一種方法是將方案特定要素的所有相關信息全部描述清晰，驗證方案執(zhí)行者可直接獲取明確的信息。企業(yè)應當根據(jù)自身的知識管理系統(tǒng)選擇適當?shù)姆椒?。七、清潔驗證方案設計八、清潔驗證常見問題討論問題1、在研發(fā)批或臨床批的生產中，可能不知道后續(xù)產品會是什么，這種情況下，怎么做？答：一種方式是清潔后檢測殘留，直到確定了后續(xù)生產產品后才允許設備的使用。進行殘留評估，決定檢測出來的殘留是否可接受。如果檢測出來的殘留無法接受，應重新清潔設備并再次進行清潔效果確認。第二種方式是基于生產的產品類型，為后續(xù)產品建立一些最差條件。這些”最差條件”數(shù)值被用于設定限度，同時設備清潔后需要符合這些數(shù)值。當確定了后續(xù)生產產品時，合適的做法是確認該后續(xù)產品的相關參數(shù)沒有超出最條件數(shù)值范圍。問題2、制劑中可能存在不止一種活性成分怎么算殘留限度答：這種情況下，至少有兩種選擇。其一是對所有的活性成分都設定限度并在清潔驗證方案中測量每個活性成分殘留。另一種在不同的活性成分中確定“最差條件”，并基于這一組活性成分中最低的殘留限度，只對“最差條件”的活性成分設定限度。判斷“最差條件”活性成分，需要考慮清潔難易程度，在清潔溶劑中的溶解能力以及活性成分的濃度。八、清潔驗證常見問題討論問題4、壓片機清潔驗證時，取樣位置評估的是什么位置？答：設備取樣位置評估，一般考慮幾個因素，包括有死角處，如變徑處及不可拆卸部位，難清潔部位等，不同材質也需要考慮。沖頭是模具，一般為專用部件，可以不考慮化學殘留。問題5、做清潔驗證時，全自動高速輥板鋁塑泡罩包裝機，這類設備還會做嗎？或者能提供指南，直接或間接說明，這類設備不需要再考慮？因為已經包