2025年江西省贛州市紅旗實(shí)驗(yàn)中學(xué)高三下學(xué)期聯(lián)合考試生物試題注意事項(xiàng)1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認(rèn)真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)選項(xiàng)的方框涂滿、涂黑；如需改動(dòng)，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號(hào)等須加黑、加粗．一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列關(guān)于水稻植株相關(guān)激素的敘述正確的是（）A．生長期水稻植株中細(xì)胞分裂素的合成只受相應(yīng)基因的調(diào)控B．水稻植株的同一細(xì)胞膜上可能含有多種植物激素的受體C．水稻植株產(chǎn)生的乙烯對其它植物的果實(shí)沒有催熟作用D．水稻植株患惡苗病的原因是其體內(nèi)產(chǎn)生了過多的赤霉素2．圖為某種由常染色體上一對等位基因控制的隱性遺傳病系譜圖（深色代表的個(gè)體是該遺傳病患者，其余為表現(xiàn)型正常個(gè)體）。已知Ⅱ－1、Ⅲ－1和Ⅲ－4都是純合子，下列推斷正確的是A．Ⅰ－2和Ⅰ－4一定都是純合子B．Ⅱ－3和Ⅱ－4為雜合子的概率不同C．Ⅳ－1和Ⅳ－2基因型相同的概率為7/12D．Ⅳ－1和Ⅳ－2結(jié)婚，后代患病的概率是1/643．驅(qū)蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的檸檬型香氣，從而達(dá)到驅(qū)蚊且對人體無害的效果。驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的。下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的敘述，錯(cuò)誤的是A．驅(qū)蚊草的培育屬于細(xì)胞工程育種，優(yōu)點(diǎn)是克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B．驅(qū)蚊草培育過程要用到纖維素酶、果膠酶、PEG等試劑或電刺激等方法C．驅(qū)蚊草培育過程不同于植物組織培養(yǎng)，無細(xì)胞脫分化和再分化的過程D．驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，育種原理是染色體數(shù)目變異4．若馬的毛色受常染色體上一對等位基因控制，棕色馬與白色馬交配，均為淡棕色馬，隨機(jī)交配，中棕色馬：淡棕色馬：白色馬=1：2：1。下列敘述正確的是A．馬的毛色性狀中，棕色對白色為完全顯性B．中出現(xiàn)棕色、淡棕色和白色是基因重組的結(jié)果C．中相同毛色的雌雄馬交配，其子代中雌性棕色馬所占的比例為3/8D．中淡棕色馬與棕色馬交配，其子代基因型的比例與表現(xiàn)型的比例相同5．下列關(guān)于人體骨骼肌細(xì)胞中細(xì)胞呼吸的敘述，正確的是（）A．厭氧呼吸時(shí)有機(jī)物中的能量主要轉(zhuǎn)化為熱能B．人體細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的CO2來自細(xì)胞溶膠和線粒體C．線粒體內(nèi)膜含有與ATP合成和電子傳遞有關(guān)的酶D．厭氧呼吸第二階段是對丙酮酸進(jìn)一步氧化形成乳酸6．特異性免疫是特異性化學(xué)物質(zhì)引起的機(jī)體特異性免疫應(yīng)答，以下說法正確的是（）A．HIV識(shí)別輔助性T細(xì)胞體現(xiàn)了細(xì)胞間有細(xì)胞通訊的作用B．單抗可用來研究相應(yīng)抗原蛋白的細(xì)胞學(xué)分布及功能C．同一個(gè)體的漿細(xì)胞和巨噬細(xì)胞功能不同，根本原因是DNA不同D．過敏反應(yīng)是免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能過弱引起的機(jī)體功能紊亂二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）鱗翅目昆蟲家蠶的性別決定方式為ZW型。家蠶體表有斑紋和無斑紋由位于常染色體上的基因A、a控制。斑紋的顏色深淺受基因B、b影響。在育種實(shí)驗(yàn)中，以純合無斑紋品種甲為母本，純合深斑紋品種乙為父本進(jìn)行雜交，F(xiàn)1全為無斑紋。F1雌雄交配，F(xiàn)2性狀分離比情況如下表：無斑紋深斑紋淺斑紋雌性611雄性620請分析回答以下問題：（1）在有斑紋和無斑紋的性狀中，_______為顯性。已知斑紋由色素分子堆積產(chǎn)生，可推測A基因控制合成的酶能夠催化色素分子_______（填“合成”或“分解”）。（2）B、b基因位于_______染色體上。F1雄性個(gè)體的基因型為_______。F2中無斑紋家蠶基因型共有___________種。（3）雄蠶產(chǎn)絲量高、絲質(zhì)好。生產(chǎn)實(shí)踐中利用A、a和B、b兩對基因設(shè)計(jì)雜交組合，可以根據(jù)子代體表斑紋特征把雌性和雄性區(qū)分開。選擇基因型為______的雌蠶與基因型為____________的雄蠶雜交，子代中性狀為_______的個(gè)體即為雄蠶。8．（10分）人類是乙型肝炎病毒的唯一宿主，肝硬化、肝癌多從乙肝發(fā)展而來。接種乙肝疫苗是預(yù)防乙肝病毒感染的最有效方法。下圖為“乙肝基因工程疫苗”的生產(chǎn)和使用過程。質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因可使細(xì)菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X-gal，從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色，若無該基因，菌落則成白色。（1）過程①需要用到限制酶和_____________酶。根據(jù)質(zhì)粒和目的基因所在DNA上酶切位點(diǎn)的分布情況，如果過程①用一種限制酶應(yīng)選_____________，如果用兩種限制酶應(yīng)選_____________。（2）在該項(xiàng)目中青霉素抗性基因作為_____________基因；目的基因的具體功能是_____________。（3）在培養(yǎng)大腸桿菌的通用培養(yǎng)基中還應(yīng)額外加入青霉素和X-gal，培養(yǎng)一段時(shí)間挑選出_____________（藍(lán)色/白色）的菌落進(jìn)一步培養(yǎng)獲得大量目的菌。（4）血源性“乙型肝炎疫苗”是取用乙肝病毒感染者的血液，用高速離心提純血液中的乙肝病毒，之后再滅活，制成乙肝疫苗，具有一定的感染風(fēng)險(xiǎn)。用基因工程疫苗接種比血源性疫苗更安全，試從疫苗的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)解釋原因：__________________________。9．（10分）基因定點(diǎn)整合可替換特定基因，該技術(shù)可用于單基因遺傳病的治療。苯丙酮尿癥是由PKU基因突變引起的，將正常PKU基因定點(diǎn)整合到PKU基因突變的小鼠胚胎干細(xì)胞的染色體DNA上，替換突變基因，可用來研究該病的基因治療過程。定點(diǎn)整合的過程是：從染色體DNA上突變PKU基因兩側(cè)各選擇一段DNA序列HB1和HB2，根據(jù)其堿基序列分別合成HB1和HB2，再將兩者分別與基因、連接，中間插入正常PKU基因和標(biāo)記基因，構(gòu)建出如圖所示的重組載體。重組載體和染色體DNA中的HB1和HB2序列發(fā)生交換，導(dǎo)致兩者之間區(qū)域發(fā)生互換，如圖所示。（1）構(gòu)建重組載體時(shí)，常用的工具酶有________。該實(shí)驗(yàn)用小鼠胚胎干細(xì)胞作為PKU基因的受體細(xì)胞以培育出轉(zhuǎn)基因小鼠，除了胚胎干細(xì)胞能大量增殖外，還因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞_________。（2）為獲得小鼠的胚胎干細(xì)胞，可將小鼠囊胚中的_________取出，并用_________處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中大部分細(xì)胞會(huì)貼附在培養(yǎng)瓶的表面生長，這種現(xiàn)象稱為___________。（3）用圖中重組載體轉(zhuǎn)化胚胎干細(xì)胞時(shí)，會(huì)出現(xiàn)PKU基因錯(cuò)誤整合。錯(cuò)誤整合時(shí)，載體的兩個(gè)中至少會(huì)有一個(gè)與一起整合到染色體DNA上。已知含有的細(xì)胞具有G418的抗性，、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡。轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞依次在含有G418及同時(shí)含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，在雙重選擇下存活下來的是__________的胚胎干細(xì)胞，理由是_________。（4）將篩選得到的胚胎干細(xì)胞培育成小鼠，從個(gè)體生物學(xué)水平檢測，若小鼠__________，說明PKU基因成功表達(dá)。10．（10分）甜米酒是蒸熟的糯米拌上酒酵（一些微生物）發(fā)酵而成的一種有甜味的米酒。（1）根據(jù)甜米酒的口味推測，甜米酒的前期發(fā)酵需要能產(chǎn)生______________酶和____________酶的微生物，而后期發(fā)酵在___________（填有氧或無氧）條件下進(jìn)行，后期發(fā)酵得到的產(chǎn)物有___________________________________。（2）如何根據(jù)發(fā)酵時(shí)間降低甜米酒的甜度？____________________________________________。（3）如果用固定有酵母細(xì)胞的凝珠膠用于制酒，要將固定好的酵母細(xì)胞置于______℃下進(jìn)行發(fā)酵；一般來說，采用_________________法固定細(xì)胞，因?yàn)開______________________________。11．（15分）轉(zhuǎn)染是指利用一定手段使外源基因進(jìn)入細(xì)胞中并穩(wěn)定表達(dá)的過程。腺病毒載體常用于外源基因的轉(zhuǎn)染，這在基因治療、疫苗研發(fā)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的可視化監(jiān)控方面有著廣闊的應(yīng)用前景。回答下列問題。（l）腺病毒營____活，用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上具有____識(shí)別和結(jié)合的部位，是外源基因在受體細(xì)胞中啟動(dòng)表達(dá)的關(guān)鍵。（2）構(gòu)建腺病毒載體時(shí)，先用同種限制酶對腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割，可獲得相同的____，再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的___。（3）通過腺病毒載體將藍(lán)色熒光基因轉(zhuǎn)染山羊耳緣成纖維細(xì)胞，利用藍(lán)色熒光直觀監(jiān)控細(xì)胞的體外培養(yǎng)過程。首先將山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或_______處理得到單個(gè)成纖維細(xì)胞，培養(yǎng)至貼滿瓶壁時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為________。這時(shí)，重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行_______培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)使用的合成培養(yǎng)基，通常需加入___等一些天然成分，以滿足細(xì)胞對營養(yǎng)物質(zhì)的全面需求。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、B【解析】【分析】激素名稱合成部位生理作用應(yīng)用赤霉素主要是未成熟的種子、幼根和幼芽促進(jìn)細(xì)胞伸長，從而引起植株增高；促進(jìn)種子萌發(fā)和果實(shí)發(fā)育促進(jìn)矮生性植物莖稈伸長；解除種子休眠，提早用來播種細(xì)胞分裂素主要是根尖促進(jìn)細(xì)胞分裂和組織分化蔬菜貯藏中，常用它來保持蔬菜鮮綠，延長貯藏時(shí)間乙烯廣泛存在于多種植物的組織中，成熟的果實(shí)中更多促進(jìn)果實(shí)成熟促進(jìn)香蕉、鳳梨等果實(shí)成熟脫落酸根冠、萎蔫的葉片等，將要脫落的器官和組織

中含量多抑制細(xì)胞分裂，抑制植物的生長，也能抑制種子的萌發(fā)；促進(jìn)葉和果實(shí)的衰老和脫落落葉或棉鈴在未成熟前的大量脫落【詳解】A、植物激素的合成也受環(huán)境因子變化的影響，A錯(cuò)誤；B、同一植物細(xì)胞上可能含有多種激素的受體，其生命活動(dòng)受多種激素的共同調(diào)節(jié)，B正確；C、水稻植株產(chǎn)生的乙烯對其它植物的果實(shí)也有催熟作用，C錯(cuò)誤；D、植物激素是植物體內(nèi)產(chǎn)生的對植物生長發(fā)育具有調(diào)節(jié)作用的微量有機(jī)物，水稻植株本身產(chǎn)生的赤霉素不會(huì)很多，D錯(cuò)誤。故選B。2、C【解析】

分析系譜圖，圖示為某種單基因常染色體隱性遺傳病的系譜圖（用A、a表示），則Ⅰ-1和Ⅰ-3的基因型均為aa，Ⅱ-2、Ⅱ-3、Ⅱ-4、Ⅱ-5的基因型均為Aa，Ⅲ-3的基因型及概率為1/3AA、2/3Aa?！驹斀狻竣瘢?和Ⅰ－4都可能是純合子AA或雜合子Aa，A錯(cuò)誤；由于父親是患者aa，所以Ⅱ－3和Ⅱ－4都肯定為雜合子Aa，B錯(cuò)誤；已知Ⅱ－1、Ⅲ－1和Ⅲ－4都是純合子AA，且Ⅱ-2、Ⅱ-3、Ⅱ-4的基因型均為Aa，Ⅲ-3的基因型及概率為1/3AA、2/3Aa，則Ⅳ－1是雜合子Aa的概率=1/2×1/2=1/4，Ⅳ－2是雜合子Aa的概率=2/3×1/2=1/3，因此Ⅳ－1和Ⅳ－2基因型相同的概率=1/4×1/3+3/4×2/3=7/12，C正確；Ⅳ－1和Ⅳ－2結(jié)婚，后代患病的概率=1/4×1/3×1/4=1/48，D錯(cuò)誤。【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握基因的分離定律及其實(shí)質(zhì)，能夠根據(jù)遺傳方式和表現(xiàn)型寫出遺傳圖譜中相關(guān)個(gè)體的基因型，并結(jié)合題干要求進(jìn)行相關(guān)的計(jì)算。3、C【解析】

1、植物體細(xì)胞雜交的具體過程：

2、植物體細(xì)胞雜交的原理：染色體數(shù)目變異。

3、植物體細(xì)胞雜交的意義：在克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙、培育作物新品種方面所取得的重大突破?！驹斀狻緼、驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的，采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，屬于細(xì)胞工程育種，其優(yōu)點(diǎn)是能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，A正確；

B、要獲得天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體，需要采用酶解法(纖維素酶、果膠酶)，誘導(dǎo)天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體的融合可采用化學(xué)法（PEG等試劑）或物理法(電刺激等)，B正確；

C、驅(qū)蚊草培育過程不同于植物組織培養(yǎng)，但需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，因此有愈傷組織和試管苗形成，C錯(cuò)誤；

D、驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，育種原理是染色體數(shù)目變異，D正確。

故選C。4、D【解析】

分析題中信息：“棕色馬與白色馬交配，均為淡棕色馬，隨機(jī)交配，中棕色馬：淡棕色馬：白色馬=1：2：1?！笨芍R的毛色的控制屬于不完全顯性?！驹斀狻緼、馬的毛色性狀中，棕色對白色為不完全顯性，A錯(cuò)誤；B、中出現(xiàn)棕色、淡棕色和白色是基因分離的結(jié)果，B錯(cuò)誤；C、中相同毛色的雌雄馬交配，其子代中棕色馬所占的比例為1/4+2/4×1/4=3/8，雌性棕色馬所占的比例為3/16，C錯(cuò)誤；D、中淡棕色馬與棕色馬交配，其子代基因型的比例為1:1，,表現(xiàn)型為淡棕色馬與棕色馬，比例為1:1，D正確。故選D?！军c(diǎn)睛】一對等位基因的遺傳遵循基因分離定律，根據(jù)題中信息可知，馬毛色遺傳屬于不完全顯性，然后再依據(jù)基因分離定律寫出每種表現(xiàn)型對應(yīng)的基因型，即可得出準(zhǔn)確答案。5、C【解析】

人體骨骼肌細(xì)胞能進(jìn)行需氧呼吸和厭氧呼吸兩個(gè)過程，其中需氧呼吸分為三個(gè)階段，厭氧呼吸分為兩個(gè)階段。【詳解】A、厭氧呼吸產(chǎn)生的有機(jī)物中的能量少部分釋放出來（有部分轉(zhuǎn)化為熱能），大部分儲(chǔ)存在分解不徹底的有機(jī)物中，A錯(cuò)誤；

B、人體細(xì)胞呼吸產(chǎn)生的CO2來自有氧呼吸的第二階段，產(chǎn)生場所是線粒體基質(zhì)，B錯(cuò)誤；

C、線粒體內(nèi)膜是需氧呼吸第三階段的場所，線粒體內(nèi)膜含有與ATP合成和電子傳遞有關(guān)的酶（線粒體中與檸檬酸循環(huán)有關(guān)的酶分布在線粒體基質(zhì)中和線粒體內(nèi)膜上），C正確；

D、人體細(xì)胞中厭氧呼吸第二階段是對丙酮酸進(jìn)一步還原形成乳酸，D錯(cuò)誤。

故選C。【點(diǎn)睛】解答此題需要明確人體厭氧呼吸的產(chǎn)物是乳酸，故CO2只能在需氧呼吸的過程中產(chǎn)生。6、B【解析】

當(dāng)病原體侵入體內(nèi)發(fā)生感染時(shí)，巨噬細(xì)胞便會(huì)吞噬入侵的病原體，將它們消化。病原體（如細(xì)菌）被消化，其上的抗原分子被降解成肽，然后與巨噬細(xì)胞的MHC蛋白結(jié)合，形成抗原—MHC復(fù)合體。這種復(fù)合體移動(dòng)到細(xì)胞的表面呈遞出來。這些巨噬細(xì)胞細(xì)胞膜上的抗原—MHC復(fù)合體，一旦與人體中已經(jīng)存在的淋巴細(xì)胞上的相應(yīng)的受體結(jié)合，便會(huì)在其他因素的輔助下，促使淋巴細(xì)胞分裂，產(chǎn)生大量的淋巴細(xì)胞，啟動(dòng)免疫應(yīng)答。【詳解】A、HIV是病毒無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，所以不能體現(xiàn)細(xì)胞間有細(xì)胞通訊的作用，A錯(cuò)誤；B、單抗具有靈敏度高，特異性強(qiáng)的特點(diǎn)，故可用來研究相應(yīng)抗原蛋白的細(xì)胞學(xué)分布及功能，B正確；C、同一個(gè)體的漿細(xì)胞和巨噬細(xì)胞功能不同，根本原因是選擇性表達(dá)的結(jié)果，其內(nèi)的核DNA是相同的，C錯(cuò)誤；D、過敏反應(yīng)是免疫系統(tǒng)的防衛(wèi)功能過強(qiáng)引起的機(jī)體功能紊亂，D錯(cuò)誤。故選B。二、綜合題：本大題共4小題7、無斑紋分解Z或性AaZBZb8aaZBWaaZbZb深斑紋【解析】

鳥類、鱗翅目昆蟲、部分兩棲類和爬行類的性別決定方式屬于ZW型，此類性別決定的特點(diǎn)是雌性個(gè)體細(xì)胞內(nèi)有兩條異型的性染色體ZW，雄性個(gè)體細(xì)胞內(nèi)有兩條同型的性染色體ZZ?！驹斀狻浚?）由純合無斑紋甲為母本，純合深斑紋乙為父本進(jìn)行雜交，F(xiàn)1全為無斑紋，可推出無斑紋為顯性；已知色素分子堆積產(chǎn)生斑紋，可推測A基因控制合成的酶能夠催化色素分子分解，導(dǎo)致含A基因的個(gè)體無斑紋。（2）分析F2的性狀分離比可知，F(xiàn)2中雌、雄個(gè)體表現(xiàn)型不同，說明該性狀與性別相關(guān)聯(lián)，而A、a位于常染色體上，則B、b基因位于Z或性染色體上；結(jié)合題干分析可知，當(dāng)A基因存在時(shí)，所有個(gè)體表現(xiàn)為無斑紋，aaZB_表現(xiàn)為深斑紋，aaZb_表現(xiàn)為淺斑紋。由此可推出，母本甲的基因型為AAZbW、父本乙的基因型為aaZBZB，F(xiàn)1雄性個(gè)體的基因型為AaZBZb，F(xiàn)1雌性個(gè)體的基因型為AaZBW，F(xiàn)2中無斑紋家蠶基因型為A_ZBW（2種）、A_ZbW（2種）、A_ZBZ_（4種），共有8種基因型。（3）若要根據(jù)子代體表斑紋特征把雌性和雄性區(qū)分開，可設(shè)計(jì)深斑紋雌性個(gè)體與淺斑紋雄性個(gè)體雜交，即基因型為aaZBW的雌蠶與基因型為aaZbZb的雄蠶雜交，子代基因型為aaZBZb（深斑紋）、aaZbW（淺斑紋），性狀為深斑紋的個(gè)體即為雄蠶。【點(diǎn)睛】本題著重考查了ZW型性別決定方式的伴性遺傳，意在考查考生能識(shí)記并理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，并且具有一定的分析能力和理解能力，能應(yīng)用所學(xué)知識(shí)分析解題。8、DNA連接BamHIBamHI和EcoRI標(biāo)記控制病毒蛋白外殼的合成白色該疫苗不含遺傳物質(zhì)，不會(huì)出現(xiàn)病毒感染和增殖【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)—抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。圖中表示的是通過基因工程獲得疫苗和產(chǎn)生相應(yīng)抗體的過程圖，過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，過程②表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，過程③表示目的基因的表達(dá)?！驹斀狻浚?）過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，需要用到限制酶和DNA連接酶。根據(jù)質(zhì)粒和目的基因所在DNA上酶切位點(diǎn)的分布情況，有兩種選擇限制酶的方案，只選擇BamHⅠ既能將目的基因切下，也能切割質(zhì)粒，在獲取目的基因和切割質(zhì)粒時(shí)，使目的基因和質(zhì)粒兩端產(chǎn)生相同的黏性末端，而在連接酶作用會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化、目的基因自身與自身連接、質(zhì)粒自身與自身連接、目的基因與質(zhì)粒連接多種情況，需要篩選；用兩種限制酶切割，質(zhì)粒和目的基因兩端不會(huì)形成相同黏性末端，在連接酶作用下不會(huì)發(fā)生環(huán)化還可以防止反向連接，最終在連接酶作用下只會(huì)出現(xiàn)目的基因與質(zhì)粒成功重組和沒有進(jìn)行重組的質(zhì)粒，如果過程①用一種限制酶則應(yīng)選BamHI，如果用兩種限制酶應(yīng)選BamHI和EcoRI。（2）在該項(xiàng)目中青霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，便于篩選鑒定；根據(jù)圖中④目的基因最終產(chǎn)生乙肝病毒外殼進(jìn)行接種，說明該目的基因具體功能是控制病毒蛋白外殼的合成。（3）在培養(yǎng)大腸桿菌的通用培養(yǎng)基中還應(yīng)額外加入青霉素和X-gal，根據(jù)題干信息“選用質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因可使細(xì)菌利用加入培養(yǎng)基的物質(zhì)X-gal，從而使菌落顯現(xiàn)出藍(lán)色，若無該基因，菌落則成白色”可知，由于構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，將質(zhì)粒的lacZ基因破壞，故導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能利用培養(yǎng)基的物質(zhì)X-gal，從而菌落成無色，培養(yǎng)一段時(shí)間挑選出白色的菌落進(jìn)一步培養(yǎng)即可獲得大量目的菌。（4）血源性“乙型肝炎疫苗”是取用乙肝病毒感染者的血液，用高速離心提純血液中的乙肝病毒，之后再滅活，制成乙肝疫苗，滅活的乙肝病毒中含遺傳物質(zhì)，具有一定的感染風(fēng)險(xiǎn)，而用基因工程疫苗接種比血源性疫苗更安全，主要是因?yàn)閳D示的基因工程疫苗中不含遺傳物質(zhì)，不會(huì)出現(xiàn)病毒感染和增殖?！军c(diǎn)睛】本題主要考察學(xué)生對于基因工程的理解應(yīng)用，對于抗原本質(zhì)的認(rèn)識(shí)，解題關(guān)鍵在于對一種限制酶切割后再連接所出現(xiàn)情況的推理，能夠理解限制酶切割后產(chǎn)生末端的特點(diǎn)。9、限制酶和DNA連接酶具有全能性內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞胰蛋白酶或膠原蛋白酶貼壁生長正確互換整合正確互換整合后的染色體上只有只有，無、，具有G418抗性，故能在含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中生長，錯(cuò)誤互換整合后的細(xì)胞中染色體DNA上含有和至少1個(gè)，而、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)，故在含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中錯(cuò)誤整合的細(xì)胞死亡尿液中霉臭味顯著降低【解析】

DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運(yùn)載體。構(gòu)建重組載體時(shí)，首先需用限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和運(yùn)載體，再用DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體形成重組載體。胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)），因此獲取的胚胎干細(xì)胞應(yīng)取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)。結(jié)合題圖可知，正?；Q后的染色體DNA上只有，而無、；錯(cuò)誤整合時(shí)，載體的兩個(gè)中至少會(huì)有一個(gè)與一起整合到染色體DNA上，故由于正確互換后的細(xì)胞染色體上有，無、，故對G418有抗性，可在含G418的培養(yǎng)液中正常生活，而錯(cuò)誤互換后的染色體DNA上由于含有至少1個(gè)，而、的產(chǎn)物都能使細(xì)胞死亡，故錯(cuò)誤互換的細(xì)胞不能生存，據(jù)此分析?！驹斀狻浚?）構(gòu)建重組載體時(shí)，常用的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶。實(shí)驗(yàn)用小鼠胚胎干細(xì)胞作為PKU基因的受體細(xì)胞，除了胚胎干細(xì)胞能大量增殖外，還因?yàn)榕咛ジ杉?xì)胞具有全能性。（2）為獲得小鼠的胚胎干細(xì)胞，可將小鼠囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞取出，并用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理使其分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中大部分細(xì)胞會(huì)貼附在培養(yǎng)瓶的表面生長，這種現(xiàn)象稱為貼壁生長。（3）已知含有的細(xì)胞具有G418的抗性，、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)而使細(xì)胞死亡，據(jù)分析可知，正確互換后的染色體上只有只有，無、，錯(cuò)誤互換后的細(xì)胞中染色體DNA上含有和至少1個(gè)，因此，轉(zhuǎn)化后的胚胎干細(xì)胞依次在含有G418及同時(shí)含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，在雙重選擇下存活下來的是正?；Q整合的胚胎干細(xì)胞，原因是：正確互換后的染色體上只有只有，無、，具有G418抗性，故能在含有G418及同時(shí)含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中生長，錯(cuò)誤互換后的細(xì)胞中染色體DNA上含有和至少1個(gè)，而、的產(chǎn)物都能把DHPG轉(zhuǎn)化成有毒物質(zhì)，因此在含有G418和DHPG的培養(yǎng)液中死亡。（4）苯丙酮尿癥是由于苯丙氨酸代謝途徑中的酶缺陷，使得苯丙氨酸不能轉(zhuǎn)變成為酪氨酸，導(dǎo)致苯丙氨酸及其酮酸蓄積，并從尿中大量排出，主要表現(xiàn)為智力低下，尿液中有霉臭味，將篩選得到的胚胎干細(xì)胞培育成小鼠，若PKU基因成功表達(dá)，則從個(gè)體生物學(xué)水平檢測，小鼠尿液中霉臭味顯著降低?！军c(diǎn)睛】本題考查了基因工程和胚胎工程等相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生能夠識(shí)記胚胎干細(xì)胞的來源，明確基因表達(dá)載體構(gòu)建過程及目的基因的表達(dá)和檢測，本題難點(diǎn)在于序列交換后細(xì)胞的篩選。10、淀粉酶麥芽糖酶無氧酒精和二氧化碳延長發(fā)酵時(shí)間25包埋法細(xì)胞體積大，難以被吸附或者結(jié)合【解析】

1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在無氧條件下，反應(yīng)式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。2、固定化技術(shù)包括包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法（交聯(lián)法）。由于細(xì)胞相對于酶來說更大，難以被吸附或結(jié)合，因此多采用包埋法，固定化酶常用物理吸附法?！驹斀狻浚?）制作甜米酒時(shí)，首先將糯米中的淀粉分解成葡萄糖，該過程需要能產(chǎn)生淀粉酶和麥芽糖酶