廣東省師大附中2025屆高考生物全真模擬密押卷注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于高中生物教材實驗的敘述正確的是（）A．花生子葉薄片用蘇丹Ⅲ染液染色前，需用50%的酒精洗去雜質(zhì)B．探究酶的專一性實驗中，自變量可以是酶的種類或底物的種類C．光合色素提取實驗中，葉片研磨時應(yīng)加入二氧化硅以防止色素被破壞D．驗證活細(xì)胞吸收物質(zhì)的選擇性實驗中，未煮過的玉米籽粒不會被紅墨水染色2．某實驗小組進(jìn)行“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化”實驗時，同樣實驗條件下分別在4個試管中進(jìn)行培養(yǎng)(如表)，均獲得了“S”型增長曲線。在這個實驗過程中，下列有關(guān)該實驗的說法錯誤的是（）分組項目Ⅰ號試管Ⅱ號試管Ⅲ號試管Ⅳ號試管起始酵母菌數(shù)(個)10×1035×1035×10310×103培養(yǎng)液體積(mL)105105A．4個試管內(nèi)種群的增長速率都是先增大、后減小到零B．Ⅰ號試管內(nèi)的環(huán)境阻力最大，因此最先達(dá)到K值C．試管內(nèi)的種群數(shù)量，Ⅲ號試管晚于其他三支試管開始下降D．營養(yǎng)條件并非是影響酵母菌種群數(shù)量動態(tài)變化的唯一因素3．下列組成細(xì)胞的化合物中，與酵母菌的遺傳物質(zhì)的元素組成相同的是（）A．磷脂 B．糖原 C．胰蛋白酶 D．丙酮酸4．某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時，列表比較了動植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容，你認(rèn)為有幾處錯誤()植物細(xì)胞工程動物細(xì)胞工程技術(shù)手段植物組織培養(yǎng)植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞培養(yǎng)和融合特殊處理酶解法去除細(xì)胞壁胰蛋白酶處理制備細(xì)胞懸浮液融合方法物理方法化學(xué)方法物理方法化學(xué)方法生物方法典型應(yīng)用人工種子微型繁殖單克隆抗體的制備等培養(yǎng)液區(qū)別植物激素誘導(dǎo)脫分化和再分化動物血清或血漿A．0處 B．1處 C．2處 D．3處5．利用DNA指紋技術(shù)進(jìn)行親子鑒定具有極高的準(zhǔn)確率，下列不能作為該項技術(shù)的科學(xué)依據(jù)的是A．基因在染色體上呈線性排列B．不同DNA分子具有特定的堿基排列順序C．同一個體不同體細(xì)胞中的核DNA是相同的D．子代的染色體一半來自父方一半來自母方6．下列關(guān)于酶和ATP的敘述，正確的是（）A．酶應(yīng)在其最適溫度條件下保存，以長期維持活性B．活細(xì)胞中的放能反應(yīng)一般與ATP水解反應(yīng)相聯(lián)系C．活細(xì)胞內(nèi)合成的酶都要經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體加工D．ATP的合成需要酶參與，酶的合成需要ATP參與7．將人的紅細(xì)胞移入低滲溶液后，很快吸水膨脹而溶血，而水生動物的卵母細(xì)胞在低滲溶液中不膨脹。后來科學(xué)家從人的紅細(xì)胞的細(xì)胞膜上成功分離出一種具有通道作用的蛋白質(zhì)——水通道蛋白，下列相關(guān)敘述正確的是（）A．水分子從低滲溶液單方向進(jìn)入高滲溶液中B．人的紅細(xì)胞與水生動物的卵母細(xì)胞的吸水方式相同C．人的紅細(xì)胞通過水通道蛋白吸收水的速率大于自由擴(kuò)散吸收水的速率D．紅細(xì)胞吸水膨脹是因為組成細(xì)胞膜的磷脂和蛋白質(zhì)分子都具有流動性8．（10分）向正在進(jìn)行有氧呼吸的細(xì)胞懸液中分別加入a，b，c，d四種抑制劑，下列說法正確的是A．若a能抑制丙酮酸分解，則使葡萄糖的消耗增加B．若b能抑制葡萄糖分解，則使丙酮酸增加C．若C能抑制ATP形成，則使ADP的消耗增加D．若d能抑制[H]氧化成水，則使O2的消耗減少二、非選擇題9．（10分）下圖表示動物利用食物的過程：請回答下列有關(guān)問題。（1）恒溫動物的④/③值一般___________（填“高于”“等于”或“低于”）變溫動物。提高圈養(yǎng)動物生長量一般需___________（填“提高”或“降低”）③/②值。食肉哺乳動物的③/②值一般___________（填“高于”“等于”或“低于”）草食哺乳動物，原因是______________________。（2）能量沿食物鏈流動時，所具有的兩個特點是______________________。如果圖示為草食性動物，請分析生產(chǎn)者所固定的太陽能為什么不能100%地流入到這一營養(yǎng)級。______________________。10．（14分）細(xì)胞自噬是指細(xì)胞利用溶酶體選擇性清除自身受損、衰老的細(xì)胞器，或降解過剩的生物大分子，供細(xì)胞回收利用的正常生命過程?；卮鹣铝袉栴}。(1)真核細(xì)胞中，構(gòu)成蛋白質(zhì)的多肽鏈錯誤折疊，可能成為細(xì)胞自噬的對象，這種蛋白質(zhì)的錯誤折疊過程可能發(fā)生在___________(填細(xì)胞器)中。通常，細(xì)胞中具有正常生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)需要有正確的氨基酸序列和___________結(jié)構(gòu)。(2)自噬過程主要依賴于溶酶體內(nèi)水解酶的作用，水解酶的最適pH為5，若少量溶酶體破裂，水解酶溢出一般不會損傷細(xì)胞結(jié)構(gòu)，其原因是______________________。(3)研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞內(nèi)的介導(dǎo)分子可結(jié)合過剩的蛋白質(zhì)進(jìn)入溶酶體，而過剩的蛋白質(zhì)不與介導(dǎo)分子結(jié)合很難進(jìn)入溶酶體，該現(xiàn)象說明介導(dǎo)分子與溶酶體膜受體蛋白之間存在___________。哺乳動物在冬眠時細(xì)胞內(nèi)介導(dǎo)分子明顯增多，從細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)利用的角度分析，合理的解釋是______________________。11．（14分）乙烯具有促進(jìn)果實成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的兩個關(guān)鍵酶。利用反義DNA技術(shù)（原理如圖1），可以抑制這兩個基因的表達(dá)，從而使番茄具有耐儲存、宜運輸?shù)膬?yōu)點。圖2為融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反義表達(dá)載體的結(jié)構(gòu)示意圖。（1）圖2中的2A11為特異性啟動子，則2A11應(yīng)在番茄的____________（器官）中表達(dá)。（2）從番茄成熟果實中提取___________為模板，利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進(jìn)行拼接構(gòu)成融合基因并擴(kuò)增。（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點，用限制酶____________對上述兩個基因進(jìn)行酶切，再串聯(lián)成融合基因，相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶_______________進(jìn)行切割，確保融合基因能夠插入載體中。（4）為了實現(xiàn)圖1中反義基因的效果，應(yīng)將融合基因_______（正向/反向）插入在啟動子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將表達(dá)載體與農(nóng)桿菌菌液混合后，接種在含有___的培養(yǎng)基中，可篩選出含有反義融合基因的農(nóng)桿菌，再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因番茄。（5）在檢測番茄細(xì)胞中是否存在反義融合基因時，____________（填“能”/“不能”）用放射性物質(zhì)標(biāo)記的ACC氧化（合成）酶基因片段做探針進(jìn)行檢測，理由是____________。12．下圖為某草原上幾類主要生物的食物關(guān)系及能量流經(jīng)第二營養(yǎng)級的示意圖，請分析回答下列問題：（1）從生態(tài)系統(tǒng)成分看，該草原除了題圖食物鏈中出現(xiàn)的以外，還包括：__________、____________。該草原生態(tài)系統(tǒng)的功能為能量流動、物質(zhì)循環(huán)及___________。（2）鼠的糞便中仍含有一部分能量，這些能量屬于________的同化量。若鼬通過捕食鼠和鳥獲得能量比例為1∶3，則鼬的同化量增加4kg，至少需要消耗草________kg。（3）圖中B表示______________________________。除了圖中所示，第二營養(yǎng)級同化的能量還有一部分的流向是_____________________________。（4）下圖是對鼬進(jìn)行種群密度調(diào)查后繪出的種群增長速率曲線。在t1～t2時期鼬種群的出生率________（填“大于”“等于”或“小于”）死亡率。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

1、脂肪需要使用蘇丹Ⅲ（蘇丹Ⅳ）染色，使用酒精洗去浮色以后在顯微鏡下觀察，可以看到橘黃色（紅色）的脂肪顆粒。2、提取綠葉中色素時，需要加入無水乙醇（丙酮）、SiO2、CaCO3，其中無水乙醇（丙酮）的作用是提取色素，SiO2的作用是使研磨更充分，CaCO3的作用是防止色素被破壞?！驹斀狻緼、花生子葉薄片用蘇丹Ⅲ染液染色后，需用50%的酒精洗去雜質(zhì)，A錯誤；B、探究酶的專一性實驗中，自變量可以是酶的種類也可以是底物的種類，B正確；C、光合色素提取實驗中，葉片研磨時應(yīng)加入碳酸鈣以防止色素被破壞，C錯誤；D、先縱切玉米籽粒，在用紅墨水染色，沖洗后觀察其顏色變化，胚乳細(xì)胞是死細(xì)胞，煮過的玉米胚乳與未煮過的均被染成紅色，D錯誤。故選B。2、B【解析】

邏輯斯蒂增長是指在資源有限、空間有限和受到其他生物制約條件下的種群增長方式，其增長曲線很像字母S，又稱S形增長曲線。種群的邏輯斯蒂增長總是受到環(huán)境容納量（K）的限制，環(huán)境容納量是指在長時間內(nèi)環(huán)境所能維持的種群最大數(shù)量。酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關(guān)，我們可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時間為坐標(biāo)軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況?！驹斀狻緼、4個試管均獲得了“S”型增長曲線，因此種群的增長速率都是先增大、后減小到零，A正確；B、IV號試管內(nèi)培養(yǎng)液體積最少，起始菌數(shù)量最多，因此環(huán)境阻力最大，最先達(dá)到K值，B錯誤；C、III號試管內(nèi)培養(yǎng)液體積最多，起始菌數(shù)量最少，晚于其他三支試管開始下降，C正確；D、酵母菌種群數(shù)量動態(tài)變化受營養(yǎng)條件、氧氣濃度、溫度、接種量等影響，D正確。故選B。3、A【解析】

細(xì)胞生物的遺傳物質(zhì)是DNA，組成元素為C、H、O、N、P。酶的本質(zhì)為蛋白質(zhì)，組成元素是C、H、O、N，有的含有P。【詳解】A、磷脂的組成元素為C、H、O、N、P，酵母菌的遺傳物質(zhì)為DNA，組成元素為C、H、O、N、P，A正確；B、糖原的組成元素是C、H、O，與酵母菌的遺傳物質(zhì)的元素組成不同，B錯誤；C、胰蛋白酶基本組成元素是C、H、O、N，與酵母菌的遺傳物質(zhì)的元素組成不同，C錯誤；D、丙酮酸的組成元素是C、H、O，與酵母菌的遺傳物質(zhì)的元素組成不同，D錯誤。故選A。4、A【解析】

細(xì)胞工程包括植物細(xì)胞過程和動物細(xì)胞工程，植物細(xì)胞過程包括植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)；動物細(xì)胞工程包括動物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、動物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備?！驹斀狻考夹g(shù)手段，植物細(xì)胞過程包括植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交；動物細(xì)胞工程包括動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合等，正確；特殊處理：植物體細(xì)胞雜交時，采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁；動物細(xì)胞培養(yǎng)時，需要采用胰蛋白酶處理，制成細(xì)胞懸液，正確；融合方法：誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合的方法有物理（離心、振動和電激等）和化學(xué)方法（聚乙二醇）；誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有物理、化學(xué)和生物方法（滅活的病毒），正確；應(yīng)用：植物細(xì)胞工程技術(shù)可應(yīng)用于制備人工種子、微型繁殖等；動物細(xì)胞工程中的動物細(xì)胞融合技術(shù)可以用于制備單克隆抗體，正確；培養(yǎng)液：植物細(xì)胞工程中的培養(yǎng)基中需要用生長素和細(xì)胞分裂素以影響愈傷組織的生長和分化；動物細(xì)胞工程的培養(yǎng)液中需要加入動物血清、血漿等天然成分，正確。因此，以上說法都是正確的，故選A。【點睛】解答本題的關(guān)鍵是識記植物細(xì)胞工程和動物細(xì)胞工程的技術(shù)手段、采用的方法、具體應(yīng)用等知識，能列表比較兩者，并能結(jié)合所學(xué)的知識作出準(zhǔn)確的判斷。5、A【解析】

本題主要考查DNA的結(jié)構(gòu)、來源及與染色體的關(guān)系的相關(guān)知識，因為組成DNA的堿基排列順序具有多樣性，故DNA具有多樣性；特定的DNA有特定的堿基排列順序，故DNA又有特異性。【詳解】A.無論是否有親子關(guān)系，真核生物的核基因在染色體上都呈線性排列，不能作為親子鑒定的依據(jù)，A符合題意；B.不同DNA分子具有特定的堿基排列順序，故DNA具有特異性，可以作為親子鑒定的依據(jù)，B不符合題意；C.同一個體不同體細(xì)胞是有絲分裂而來，故核DNA是相同的，可以作為親子鑒定的依據(jù)，C不符合題意；D.子代的染色體一半來自父方一半來自母方，即核DNA一半來自于父親，一半來自于母親，攜帶父母雙方的遺傳物質(zhì)，故可以作為親子鑒定的依據(jù)，D不符合題意。故選A?！军c睛】需注意本題要求選擇不能作為該項技術(shù)的科學(xué)依據(jù)的選項。DNA具有多樣性和特異性，不同生物的DNA不相同，同一個體的不同細(xì)胞的核DNA相同，每個個體均含有來自雙親的遺傳物質(zhì)，這些均可以作為親子鑒定的依據(jù)。6、D【解析】

1、酶是由活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化活性的有機(jī)物，其中大部分是蛋白質(zhì)、少量是RNA；酶的特點：高效性、專一性、作用途徑溫和；酶的作用機(jī)理是降低化學(xué)反應(yīng)的活化能。2、ATP的中文名稱叫三磷酸腺苷，其結(jié)構(gòu)簡式為A-P～P～P，其中A代表腺苷，P代表磷酸基團(tuán)，-代表普通磷酸鍵，～代表高能磷酸鍵；水解時遠(yuǎn)離A的磷酸鍵易斷裂，釋放大量的能量，供給各項生命活動，所以ATP是新陳代謝所需能量的直接來源?！驹斀狻緼、酶應(yīng)在其低溫度條件下保存，A錯誤；B、活細(xì)胞中的放能反應(yīng)一般與ATP合成反應(yīng)相聯(lián)系，B錯誤；C、酶化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)或RNA，蛋白質(zhì)類的酶可能需要內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的加工，而RNA類的酶不需要，C錯誤；D、ATP的合成需要酶的參與，酶的合成也需要ATP參與，D正確。故選D。7、C【解析】

據(jù)題意可知，水生動物的卵母細(xì)胞在低滲溶液不膨脹。而紅細(xì)胞細(xì)胞膜上有一種水通道蛋白，在低滲溶液中，很快吸水膨脹而溶血，說明水的吸收與水通道蛋白有關(guān)?！驹斀狻緼、水分子的進(jìn)出是雙方向的，但總體是低滲溶液進(jìn)入高滲溶液中，A錯誤；B、人的紅細(xì)胞吸水與水生動物的卵母細(xì)胞的吸水方式不同，B錯誤；C、人的紅細(xì)胞存在水通道蛋白介導(dǎo)的協(xié)助擴(kuò)散，在低滲溶液中很快就吸水漲破，可知人的紅細(xì)胞通過水通道蛋白吸收水的速率大于自由擴(kuò)散吸收水的速率，C正確；D、紅細(xì)胞吸水膨脹是因為存在水通道蛋白介導(dǎo)的協(xié)助擴(kuò)散，D錯誤。故選C。8、D【解析】

有氧呼吸是指細(xì)胞在氧的參與下，通過多種酶的催化作用，把葡萄糖等有機(jī)物徹底氧化分解，產(chǎn)生二氧化碳和水，釋放能量，生成大量ATP的過程?！驹斀狻緼、在有氧呼吸過程中，若抑制丙酮酸分解，則丙酮酸的數(shù)量的消耗減少，葡萄糖的消耗減少，A錯誤；B、若抑制葡萄糖分解成丙酮酸，則丙酮酸的數(shù)量減少，B錯誤；C、若抑制ATP的形成，則使ADP的消耗減少，C錯誤；D、若抑制[H]氧化成水，則使O2的消耗減少，D正確。故選D?？键c：本題考查有氧呼吸過程的知識。意在考查能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。二、非選擇題9、低于提高高于植物中的纖維素很難被動物消化吸收單向流動、逐級遞減生產(chǎn)者所固定的太陽能一部分用于自身的呼吸消耗、一部分被被分解者利用、一部分未被利用【解析】

分析圖示，①表示動物獲取的食物量，②表示食入量，③表示食入量中被同化的量，而④是同化后除了呼吸作用以外積累的有機(jī)物的量，圖中每一部分都有未被下一環(huán)節(jié)利用的能量【詳解】（1）恒溫動物的體溫是恒定的，不會隨著環(huán)境溫度的變化而變化，所以需要消耗更多的能量維持體溫，所以有機(jī)物的積累量（④/③）較少，其比值一般低于變溫動物；③/②值越大，代表動物食入的能量被同化成自己的能量越多，所以提高圈養(yǎng)動物生長量一般需提高③/②的比值；植物中的纖維素很難被動物消化吸收，故肉食動物的③/②比草食動物的高些。（2）能量沿食物鏈流動時，具有單向流動、逐級遞減兩個特點。生產(chǎn)者所固定的太陽能一部分用于自身的呼吸消耗、一部分被被分解者利用、一部分未被利用，故不能100%地流入到下一營養(yǎng)級?！军c睛】本題考查生態(tài)系統(tǒng)的能量流動功能的相關(guān)知識點，意在考查學(xué)生對所學(xué)知識的理解與掌握程度，培養(yǎng)了學(xué)生分析圖形、獲取信息、解決問題的能力。10、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)空間pH改變，水解酶性降低特異性識別（或識別）冬眠動物不再進(jìn)食，需要介導(dǎo)分子引導(dǎo)過剩的生物大分子自噬，為細(xì)胞生命活動提供（游離的小分子）營養(yǎng)物質(zhì)【解析】

溶酶體是單層膜形成的泡狀結(jié)構(gòu)，“消化車間”，內(nèi)含多種水解酶，能分解衰老、損傷的細(xì)胞器，吞噬并且殺死侵入細(xì)胞的病毒和細(xì)菌?！驹斀狻浚?）真核細(xì)胞中，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可以對核糖體上合成的蛋白質(zhì)進(jìn)行初步加工，故構(gòu)成蛋白質(zhì)的多肽鏈錯誤折疊，可能發(fā)生在核糖體中。通常，細(xì)胞中具有正常生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)需要有正確的氨基酸序列和空間結(jié)構(gòu)，才能發(fā)揮正常的生理功能。（2）若少量溶酶體破裂，水解酶溢出，由于pH改變，水解酶性降低，故一般不會損傷細(xì)胞結(jié)構(gòu)。（3）過剩的蛋白質(zhì)需要與介導(dǎo)分子結(jié)合才能進(jìn)入溶酶體，說明介導(dǎo)分子與溶酶體膜受體蛋白之間存在特異性識別。冬眠動物不再進(jìn)食，需要介導(dǎo)分子引導(dǎo)過剩的生物大分子自噬，為細(xì)胞生命活動提供（游離的小分子）營養(yǎng)物質(zhì)，故哺乳動物在冬眠時細(xì)胞內(nèi)介導(dǎo)分子明顯增多?！军c睛】由于溶酶體內(nèi)外的pH不同。故推測其中的少量的水解酶釋放不破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。11、果實RNAXbalBamHl和Sacl反向卡那霉素不能番茄細(xì)胞內(nèi)本來存在ACC合成酶基因，能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交【解析】

分析題意和題圖：番茄細(xì)胞中原有靶基因控制合成的ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細(xì)胞合成乙烯的兩個關(guān)鍵酶。圖1所示為反義基因轉(zhuǎn)錄成的RNA可與靶基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA形成RNA雙鏈，使靶mRNA不能與核糖體結(jié)合或被RNA酶降解，從而阻止了ACC氧化酶和ACC合成酶的合成，影響細(xì)胞中乙烯的合成，使番茄具有耐儲存、宜運輸?shù)膬?yōu)點。圖2所示的基因表達(dá)載體的組成包括復(fù)制原點、啟動子、終止子、標(biāo)記基因和目的基因，目的基因插入點在啟動子和終止子之間。【詳解】（1）乙烯具有促進(jìn)果實成熟的作用，因此圖2中的2A11為特異性啟動子，則2A11應(yīng)在番茄的果實中表達(dá)。（2）從番茄成熟果實中提取RNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進(jìn)行拼接構(gòu)成融合基因并擴(kuò)增。（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點，要將兩個基因融合，需用同一種限制酶即XbaⅠ酶對上述兩個基因進(jìn)行酶切，再用DNA連接酶串聯(lián)成融合基因，這樣融合基因上有三個限制酶切點：BamHⅠ、XbaⅠ、SacⅠ，其中限制酶BamHⅠ、SacⅠ分別位于融合基因的兩端，因此相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶BamHl和Sacl進(jìn)行切割，確保融合基因能夠插入載體中。（4）反義融合基因是由番茄果實細(xì)胞中的靶基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA反轉(zhuǎn)錄形成的，因此為了實現(xiàn)圖1中反義基因的效果，應(yīng)將融合基因反向插入在啟動子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將表達(dá)載體與農(nóng)桿菌