景德鎮(zhèn)市重點中學2025屆高考生物四模試卷注意事項1．考生要認真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于探索DNA是遺傳物質(zhì)實驗的相關(guān)敘述，正確的是（）A．艾弗里實驗證明從S型肺炎雙球菌中提取的DNA可以使小鼠死亡B．艾弗里實驗中在培養(yǎng)R型菌的培養(yǎng)基中添加S型菌的DNA后只長S型菌C．赫爾希和蔡斯實驗中，用32P標記噬菌體的DNA，如果離心前保溫時間過長，會導致上清液中的放射性升高D．赫爾希和蔡斯實驗中所使用的T2噬菌體的核酸類型與人類免疫缺陷病毒相同2．科學家對煙草細胞分別施加適宜濃度的生長素和細胞分裂素，處理后48h內(nèi)的實驗結(jié)果如圖。敘述正確的是（）A．細胞分裂素處理后12-24h期間淀粉增加量最多B．生長素與細胞分裂素對煙草細胞淀粉積累的調(diào)控具有協(xié)同作用C．缺少生長素會導致煙草細胞在實驗時間內(nèi)都不能積累淀粉D．若進一步探究這兩種激素對煙草細胞淀粉積累的復合影響，可增設“同時添加生長素與細胞分裂素”實驗組3．當人體注射了用禽流感病毒蛋白制備的疫苗后，體內(nèi)不會發(fā)生的反應是A．吞噬(巨噬)細胞處理和呈遞抗原B．產(chǎn)生針對該禽流感病毒蛋白的抗體C．效應T細胞消滅被疫苗感染的細胞D．形成能識別禽流感病毒的記憶細胞4．某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。下列關(guān)于土壤中分解尿素的細菌分離和計數(shù)的相關(guān)敘述，正確的是（）A．分解尿素的細菌是以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源的B．倒平板時應將打開的培養(yǎng)皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C．培養(yǎng)基中KH2PO4等的作用之一是作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定D．若實驗組菌落平均數(shù)為37個/平板，空白對照平板上有3個菌落，則本組菌落數(shù)的平均值為34個/平板5．下列關(guān)于基因工程技術(shù)的敘述，錯誤的是（）A．限制性核酸內(nèi)切酶均能特異性識別特定的核苷酸序列B．某些基因可通過病毒的侵染將目的基因?qū)胧荏w細胞中C．載體質(zhì)粒通常采用抗生素合成基因作為篩選標記基因D．抗蟲基因即使成功插入到植物細胞染色體上也未必能正常表達6．在適宜條件下，用不同濃度的某除草劑分別處理甲和乙兩種雜草的葉片，并加入氧化還原指示劑，根據(jù)指示劑顏色變化顯示放氧速率，結(jié)果如圖所示。下列敘述錯誤的是（）A．需要先建立指示劑顏色變化與放氧速率關(guān)系的數(shù)學模型B．相同濃度時顏色變化快的品種受除草劑抑制效果更顯著C．與品種乙相比，除草劑對品種甲光合速率的抑制較強D．除草劑濃度為K時，品種甲的葉綠體仍可發(fā)生CO2固定7．下圖是某植物在晴天和陰天兩種不同的環(huán)境條件下，凈光合速率隨時間變化的曲線，下列敘述正確的是A．由a～b段可以看出，此時限制葉片光合速率的主要環(huán)境因素是光照強度和CO2濃度B．在f～h對應時段，植物體內(nèi)有機物總量的變化情況是先減少后增加C．h～i段的變化可能與植物體內(nèi)脫落酸的含量增加有關(guān)D．j點時，葉肉細胞內(nèi)光合速率等于呼吸速率8．（10分）關(guān)于細胞學說的建立，下列說法正確的是（）A．英國科學家虎克最終建立了細胞學說B．德國科學家施萊登和施旺是細胞的發(fā)現(xiàn)者和命名者C．德國科學家魏爾肖的名言是“所有的細胞都來源于先前存在的細胞”D．細胞學說揭示了生物的統(tǒng)一性和多樣性二、非選擇題9．（10分）阿爾茨海默是一種神經(jīng)退行性疾病，科研人員為了探究發(fā)病機理和治療方案，進行了如下研究。（1）研究發(fā)現(xiàn)，患者腦部的神經(jīng)元數(shù)量及神經(jīng)元之間的_____（結(jié)構(gòu)）明顯減少。進一步研究證實這是由于神經(jīng)元_____（填“胞體”、“樹突”或“軸突”）內(nèi)的核糖體上合成的β﹣淀粉樣蛋白（Aβ）異常積累而引發(fā)細胞損傷導致?？蒲腥藛T推斷這種異常積累可能與_____Aβ的酶C表達量下降有關(guān)。（2）科研人員提取正常人和患者的神經(jīng)元DNA，對酶C基因進行測序，測序結(jié)果完全一致，說明酶C基因表達量的改變不是_____導致。（3）科研人員分別提取正常人和患者神經(jīng)元的酶C基因啟動子的DNA片段，再分別用具有相同識別序列（CCGG）的HpaⅡ和MspⅠ酶切（但HpaⅡ不能切割甲基化的胞嘧啶）。結(jié)果顯示正常人該DNA片段用MspⅠ切割后產(chǎn)生的片段數(shù)目與用HpaⅡ切割后產(chǎn)生的片段數(shù)目的差值_____（大于/小于）患者的相應差值，說明患者細胞中酶C基因啟動子甲基化程度更高。10．（14分）干擾素是動物體內(nèi)的一種蛋白質(zhì)，可用于治療病毒的感染和癌癥。長期以來，人們利用相關(guān)病毒誘導白細胞產(chǎn)生干擾素再從血液中提取，但每升血只能提取0.05μg。1982年，我國科學家通過基因工程等技術(shù)開發(fā)研制出我國首個基因工程藥物——重組人干擾素。回答下列相關(guān)問題。（1）相對于從基因組文庫中獲取干擾素基因，從已病毒免疫的白細胞中提取mRNA，再反轉(zhuǎn)錄并構(gòu)建的cDNA文庫中獲取的干擾素基因，更易在大腸桿菌中合成正常干擾素。從基因表達的角度分析，其原因是_____。（2）天然的干擾素很難在體外保存，但通過蛋白質(zhì)工程可得到“可保存的干擾素”。蛋白質(zhì)工程以_____和_____的關(guān)系為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)。（3）在構(gòu)建該基因表達載體時，需同時用限制酶HindⅢ和BstⅠ處理目的基因和質(zhì)粒，主要目的是_____。（4）質(zhì)粒中LacZ基因編碼的半乳糖苷酶，能催化生成藍色物質(zhì)從而將細菌染成藍色。在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中，未被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌的生長現(xiàn)象是_____，含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌的生長現(xiàn)象是_____，含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌的生長現(xiàn)象是_____，從而獲得所需重組細胞。（注：若能正常生長需要寫出菌落特征）（5）轉(zhuǎn)基因細菌產(chǎn)生的干擾素可能會成為某些人的過敏原，存在潛在風險。有科學家將干擾素基因轉(zhuǎn)入小鼠基因組，獲得膀胱生物反應器，最終在尿液中獲得干擾素。在該操作中，應使干擾素基因在_____細胞中特異性表達。11．（14分）凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵性酶，研究人員利用基因工程技術(shù)，將編碼該酶的基因轉(zhuǎn)移到了微生物細胞中并使之表達。如圖表示EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶在質(zhì)粒和含凝乳酶基因的外源DNA片段上的切割位點．回答下列問題：（1）根據(jù)圖中EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶的切割位點分析，該工程中最不適宜用來切割外源DNA獲取目的基因的限制酶是_____，將切割后的質(zhì)粒和目的基因連接起來需要_____酶．構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在目的基因前要加上特殊的啟動子，它是_____識別和結(jié)合的部位。（2）工業(yè)化生產(chǎn)過程中，若采用重組大腸桿菌生產(chǎn)凝乳酶，該過程中將目的基因?qū)舜竽c桿菌前，常常用_____處理細胞，使之處于一種能吸收周圍環(huán)境中的DNA分子的生理狀態(tài)，這種細胞稱為_____細胞。（3）研究發(fā)現(xiàn)，如果將該凝乳酶第20位和第24位氨基酸改變?yōu)榘腚装彼?，其催化能力將提?倍。科學家可以生產(chǎn)上述高效凝乳酶的現(xiàn)代生物工程技術(shù)是_____。該生物工程技術(shù)對蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的設計和改造，必須通過基因來完成，原因是_____。12．山雞椒是我國野生芳香植物，其果實、花、葉和根等各器官中均含有一定的精油。山雞椒精油的主要成分是檸檬烯和檸檬醛。請回答下列問題：（1）提取山雞椒精油與玫瑰精油的方法相同，常采用的方法是____________________，提取原理是____________________，形成油水混合物，冷卻后，混合物又重新分出油層和水層。此方法不適用于胡蘿卜素的提取，原因是____________________。（2）獲得山雞椒精油與水的混合物后，向液體中加入__________可加速油水分層。然后再利用分液漏斗可將這兩層液體分開，分離得到的油層中還含有一定的水分，一般可以加入一些__________除去油層中的水分，__________后除去固體物質(zhì)即可得到山雞椒精油。（3）分別提取山雞椒果實和葉片的精油，其出油率如圖所示，由圖中結(jié)果分析，最適合作提取山雞椒精油原料的是____________________，原因是____________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

1.艾弗里從S型活菌體內(nèi)提取DNA、RNA、蛋白質(zhì)和莢膜多糖，將它們分別和R型活菌混合培養(yǎng)，結(jié)果只有S型菌DNA和R型活菌的培養(yǎng)基上出現(xiàn)S型菌的菌落，這是一部分R型菌轉(zhuǎn)化產(chǎn)生有毒的、有莢膜的S型菌所致，并且它們的后代都是有毒、有莢膜的。2.赫爾希和蔡斯T2噬菌體侵染細菌的實驗：用放射性同位素32P或放射性同位素35S分別標記DNA和蛋白質(zhì)，直接單獨去觀察它們的作用。【詳解】A、艾弗里實驗證明從S型肺炎雙球菌中提取的DNA可以使R型細菌轉(zhuǎn)化為S型細菌，而不是S型細菌的DNA能使小鼠死亡，A錯誤；B、艾弗里實驗中在培養(yǎng)R型菌的培養(yǎng)基中添加S型菌的DNA后，培養(yǎng)基上出現(xiàn)R型、S型菌兩種菌落，B錯誤；C、赫爾希和蔡斯實驗中，用32P標記噬菌體的DNA，如果離心前保溫時間過長，部分細菌裂解釋放出子代噬菌體，會導致上清液中的放射性升高，C正確；D、T2噬菌體的核酸是DNA，人類免疫缺陷病毒（HIV）的核酸是RNA，D錯誤。故選C?！军c睛】關(guān)于肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗有兩個，一個是格里菲斯的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實驗，另一個是體外轉(zhuǎn)化實驗（艾弗里的體外轉(zhuǎn)化實驗）。R型菌轉(zhuǎn)化成S型菌的原因是S型菌DNA與R型菌DNA實現(xiàn)重組，表現(xiàn)出S型菌的性狀，此變異屬于基因重組。2、D【解析】

分析題圖：加入生長素后，淀粉的積累沒有明顯變化，說明生長素與淀粉積累無關(guān)；與未加激素相比較，加入細胞分裂素會促進淀粉的積累。【詳解】A、加細胞分裂素組在36-48h內(nèi)曲線的斜率最大，說明這段時間淀粉的增加量最多，A錯誤；B、總體來看，生長素與細胞分裂素對煙草細胞淀粉積累的作用效果相反，B錯誤；C、加入生長素才會導致不能積累淀粉，C錯誤；D、探究兩種激素對煙草細胞淀粉積累的復合影響時，需同時添加2種激素到同一實驗組中，D正確。故選D。3、C【解析】A.在特異性免疫發(fā)生的時都有吞噬（巨噬）細胞處理和呈遞抗原，A不符合題意；B.產(chǎn)生針對該禽流感病毒蛋白的抗體，在疫苗注射后會發(fā)生，B不符合題意；C.禽流感病毒蛋白制備的疫苗只有抗原的特點沒有侵染細胞的特點，故效應T細胞消滅被疫苗感染的細胞不會發(fā)生，C符合題意；D.形成能識別禽流感病毒的記憶細胞，會在體內(nèi)發(fā)生，D不符合題意。故選C。4、C【解析】

土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗中，需要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，計數(shù)的關(guān)鍵是經(jīng)梯度稀釋后的倍數(shù)要合適，計數(shù)時通常選擇菌落數(shù)在30-300之間的實驗組平板進行計數(shù)。【詳解】A、分解尿素的細菌是異養(yǎng)型，不能以CO2作為碳源，A錯誤；B、倒平板時，不能將打開的培養(yǎng)皿蓋放到一邊，以免微生物污染，正確的做法是：用左手將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約10～20mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋，B錯誤；C、無機鹽可以作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定，所以培養(yǎng)基中KH2PO4等的作用之一是作為緩沖劑保持pH穩(wěn)定，C正確；D、在完全正確的操作情況下，空白對照組中不應出現(xiàn)菌落。若空白對照組出現(xiàn)菌落，說明操作過程中存在微生物污染，屬于實驗失誤，所有實驗數(shù)據(jù)均不應采用，D錯誤。故選C。5、C【解析】

DNA重組技術(shù)至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體?；蚬こ痰幕静僮鞑襟E主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細胞；④目的基因的檢測與鑒定．構(gòu)建基因表達載體時，需要用同種限制酶切割含有目的基因的DNA和運載體DNA，再用DNA連接酶連接形成重組DNA分子。【詳解】A、限制性核酸內(nèi)切酶具有識別特定核苷酸序列的能力，即具有專一性，A正確；B、病毒也可以作為運載體，將目的基因?qū)胧荏w細胞中，B正確；C、載體質(zhì)粒通常采用抗生素抗性基因作為篩選標記基因，C錯誤；D、抗蟲基因即使成功地插入到植物細胞染色體上也未必能正常表達，需要進行檢測和鑒定，D正確。故選C。6、B【解析】

葉片光合作用時水被分解，產(chǎn)生氧氣，氧化還原指示劑遇氧氣后顏色發(fā)生變化，指示劑顏色變化越快，放氧速率高，光合作用越強?！驹斀狻緼、指示劑遇到氧氣才會變色，所以要先建立指示劑顏色變化與放氧速率關(guān)系的數(shù)學模型，A正確；B、指示劑顏色變化越快，放氧速率高，說明光合作用受到的抑制作用弱，B錯誤；C、相同除草劑濃度下甲的放氧速率低于乙，說明除草劑對品種甲光合速率的抑制較強，C正確；D、由于放氧速率屬于凈光合速率，當凈光合速率為0時，真光合速率=呼吸速率（不為0），所以仍然有CO2固定，D正確。故選B?！军c睛】本題考查光合作用和呼吸作用的綜合知識，意在考查識圖和題干信息的理解能力，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；具有對一些生物學問題進行初步探究的能力，包括運用觀察、實驗與調(diào)查、建立模型等科學研究方法。7、C【解析】

陰天條件下，光照較弱，溫度較低，光照強度和溫度成為限制葉片光合速率的主要環(huán)境因素，A錯誤；在f～h對應時段，凈光合速率大于0，有機物總量一直在積累，B錯誤；.h～i段氣孔關(guān)閉，脫落酸能誘導氣孔關(guān)閉，因此h～i段的變化可能與植物體內(nèi)脫落酸的含量增加有關(guān)，C正確；j點時，植物光合作用速度等于呼吸作用，因此葉肉細胞內(nèi)光合速率大于葉肉細胞內(nèi)呼吸速率，D錯誤?！究键c定位】光反應、暗反應過程的能量變化和物質(zhì)變化【名師點睛】凈光合速率=總光合速率-呼吸速率，當凈光合速率大于0時，表明此時的光合作用強度大于呼吸作用強度；小于0時，則表明光合作用小于呼吸作用?！驹斀狻空堅诖溯斎朐斀?！8、C【解析】

細胞學說的主要內(nèi)容：（1）細胞是一個有機體，一切動植物都是由細胞發(fā)育而來，并由細胞和細胞產(chǎn)物所構(gòu)成。（2）細胞是一個相對獨立的單位，既有它自己的生命，又對與其他細胞共同組成的整體的生命起作用。揭示了細胞的統(tǒng)一性和生物體結(jié)構(gòu)的統(tǒng)一性。（3）新細胞可以從老細胞中產(chǎn)生。細胞的發(fā)現(xiàn)者和命名者是英國科學家羅伯特?胡克（RobertHooke），而細胞學說是由施萊登和施旺建立的，揭示了細胞和生物的統(tǒng)一性。提出“所有的細胞都來源于先前存在的細胞”是德國科學家魏爾肖?！驹斀狻緼、英國科學家虎克是細胞的發(fā)現(xiàn)者，A錯誤；B、細胞的發(fā)現(xiàn)者和命名者是英國科學家羅伯特?胡克，B錯誤；C、德國科學家魏爾肖的提出“所有的細胞都來源于先前存在的細胞”，C正確；D、細胞學說只揭示了生物的統(tǒng)一性，未揭示生物的多樣性，D錯誤。故選C?！军c睛】熟知細胞的發(fā)現(xiàn)、細胞學說的建立、內(nèi)容和發(fā)展的基礎知識是解答問題的關(guān)鍵。二、非選擇題9、突觸胞體降解（或“分解”）基因突變小于【解析】

1、神經(jīng)元之間的結(jié)構(gòu)是突觸，記憶是人的大腦皮層的高級功能，長期記憶可能與新突觸的建立有關(guān)。神經(jīng)元由細胞體和突起兩部分組成，突起又分為樹突和軸突，樹突短而多，軸突長而少。2、提取正常人和患者神經(jīng)元的酶C基因啟動子的DNA片段，再分別用具有相同識別序列（CCGG）的HpaⅡ和MspⅠ酶切（但HpaⅡ不能切割甲基化的胞嘧啶）。若患者細胞中酶C基因啟動子甲基化程度更高，則正常人該DNA片段用MspⅠ切割后產(chǎn)生的片段數(shù)目與用HpaⅡ切割后產(chǎn)生的片段數(shù)目的差值小于患者的相應差值?！驹斀狻浚?）神經(jīng)元之間的結(jié)構(gòu)是突觸，核糖體存在于神經(jīng)元的胞體內(nèi)；阿爾茨海默是一種神經(jīng)退行性疾病，患者神經(jīng)元核糖體上合成的β﹣淀粉樣蛋白（Aβ）異常積累而引發(fā)細胞損傷導致，所以科研人員推斷這種異常積累可能與降解Aβ的酶C表達量下降有關(guān)。（2）科研人員提取正常人和患者的神經(jīng)元DNA，對酶C基因進行測序，測序結(jié)果完全一致，說明酶C基因表達量的改變不是基因突變所致。（3）根據(jù)“具有相同識別序列（CCGG）的HpaⅡ和MspⅠ酶切（但HpaⅡ不能切割甲基化的胞嘧啶）”、“患者細胞中酶C基因啟動子甲基化程度更高”，說明：①兩種酶具有相同識別序列（CCGG）；②正常人體內(nèi)的胞嘧啶也會發(fā)生甲基化。假如“酶C基因啟動子的DNA片段”具有5個CCGG序列，甲基化了1個，這樣正常人用MspⅠ切割后產(chǎn)生的片段數(shù)目（6）與用HpaⅡ切割后產(chǎn)生的片段（5），則兩者的差值是6﹣5=1；因為結(jié)論是“患者細胞中酶C基因啟動子甲基化程度更高”，假如“酶C基因啟動子的DNA片段”具有5個CCGG序列，甲基化了3個，這樣患者用MspⅠ切割后產(chǎn)生的片段數(shù)目（6）與用HpaⅡ切割后產(chǎn)生的片段（3），則兩者的差值是6﹣3=3；說明正常人該DNA片段用MspⅠ切割后產(chǎn)生的片段數(shù)目與用HpaⅡ切割后產(chǎn)生的片段數(shù)目的差值小于患者的相應差值，即1＜3。【點睛】本題借助于阿爾茨海默癥考查神經(jīng)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)、基因的轉(zhuǎn)錄、限制酶的作用特點，綜合性較強，難度適中。10、從基因組文庫中獲得的干擾素基因有內(nèi)含子，在大腸桿菌中干擾素基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對應的RNA序列不能被切除，無法表達出干擾素蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律生物功能防止目的基因和載體任意連接（或自身環(huán)化或反向連接）無法生長正常生長，菌落呈藍色正常生長，菌落呈白色（或無色）膀胱上皮【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）從基因組文庫中獲得的干擾素基因有內(nèi)含子，在大腸桿菌中干擾素基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物中與內(nèi)含子對應的RNA序列不能被切除，無法表達出干擾素。因此相對于從基因組文庫中獲取干擾素基因，從已病毒免疫的白細胞中提取mRNA，再反轉(zhuǎn)錄并構(gòu)建的cDNA文庫中獲取的干擾素基因，更易在大腸桿菌中合成正常干擾素。（2）蛋白質(zhì)工程以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律和生物功能的關(guān)系為基礎，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)。（3）在構(gòu)建該基因表達載體時，需同時用限制酶HindⅢ和BstⅠ處理目的基因和質(zhì)粒，主要目的是防止目的基因和載體任意連接（或自身環(huán)化或反向連接）。（4）用限制酶HindⅢ和BstⅠ處理質(zhì)粒時，破壞了lacZ基因，導致半乳糖苷酶不能合成，而半乳糖苷酶能催化生成藍色物質(zhì)從而將細菌染成藍色。在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中，未被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌不含四環(huán)素抗性基因，無法生長；含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌含有四環(huán)素抗性基因，能正常生長，含有l(wèi)acZ基因，菌落呈藍色；含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌含有四環(huán)素抗性基因能正常生長，lacZ基因被破壞，菌落呈白色（或無色）。（5）要獲得膀胱生物反應器，最終在尿液中獲得干擾素，應使干擾素基因在膀胱上皮細胞中特異性表達?！军c睛】本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能正確分析題圖，再運用圖中信息準確答題，屬于考綱理解和應用層次的考查，有一定難度。11、EcoRⅠDNA連接酶RNA聚合酶Ca2+感受態(tài)蛋白質(zhì)工程基因決定蛋白質(zhì)【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）含有目的基因的外源DNA分子上含有EcoRⅠ、BamHⅠ、PstⅠ三種限制酶的切割位點，其中EcoRⅠ的切割位點位于目的基因上，用該酶切割會破壞目的基因，因此不能用該酶切割；將切割后的質(zhì)粒和目的基因連接起來需要DNA連接酶．啟動子是RNA聚合