2024年8月基因工程模擬練習(xí)題+參考答案解析一、單選題（共40題，每題1分，共40分）1.天然PstI限制性內(nèi)切酶的來源是：A、BacillusamyloliquefaciensB、EscherichiacoliC、HaemophilusInfluenzaeD、Provisenciastuartii正確答案：D答案解析：天然PstI限制性內(nèi)切酶來源于普羅威登斯菌（Provisenciastuartii）。選項(xiàng)A中Bacillusamyloliquefaciens是嗜淀粉芽孢桿菌；選項(xiàng)B中Escherichiacoli是大腸桿菌；選項(xiàng)C中HaemophilusInfluenzae是流感嗜血桿菌，均不符合。2.以質(zhì)粒為載體，將外源基因?qū)胧荏w菌的過程稱：A、轉(zhuǎn)化B、轉(zhuǎn)染C、感染D、轉(zhuǎn)導(dǎo)E、轉(zhuǎn)位正確答案：A答案解析：轉(zhuǎn)化是指將質(zhì)粒等外源DNA導(dǎo)入受體菌的過程，通過轉(zhuǎn)化可使受體菌獲得新的遺傳性狀。轉(zhuǎn)染一般指將病毒核酸導(dǎo)入細(xì)胞等。感染通常用于描述病毒等病原體侵入細(xì)胞等情況。轉(zhuǎn)導(dǎo)是利用噬菌體等載體將供體菌的基因轉(zhuǎn)移到受體菌。轉(zhuǎn)位一般指基因在基因組中的位置移動(dòng)等。3.EcoRⅠ切割DNA雙鏈產(chǎn)生：A、平端B、5’突出粘端C、3’突出粘端D、鈍性末端E、配伍末端正確答案：B答案解析：EcoRⅠ切割DNA雙鏈產(chǎn)生5’突出粘端。其識別序列為5’-GAATTC-3’，切割位點(diǎn)在G和A之間，切割后形成5’突出的粘性末端。4.DNA被某種酶切割后，電泳得到的電泳帶有些擴(kuò)散，下列原因中那一項(xiàng)不太可能？A、酶失活B、蛋白質(zhì)（如BSA）同DNA結(jié)合C、酶切條件不合適D、酶切反應(yīng)時(shí)酶濃度過低正確答案：A5.質(zhì)粒DNA和外源DNA各用兩種限制性內(nèi)切酶切開，經(jīng)連接轉(zhuǎn)化后獲得重組子，下列各組重組子中有可能含有兩種相反基因極性的是：A、ApaI/ClaIB、BamHI/BglIIC、BclI/SmaID、HindIII/KpnI正確答案：B6.在質(zhì)粒提取的步驟里，異戊醇的作用是：A、使蛋白質(zhì)脫水B、使DNA脫水C、幫助DNA進(jìn)入水相D、減少氣泡，有助于相的穩(wěn)定正確答案：D答案解析：異戊醇可以減少氣泡，有助于相的穩(wěn)定。在質(zhì)粒提取過程中，加入異戊醇能降低分子表面張力，使離心時(shí)形成的界面更清晰，減少氣泡對分層的影響，利于后續(xù)操作的順利進(jìn)行。7.在重組DNA技術(shù)中通常不涉及的酶是：A、限制性核酸內(nèi)切酶B、DNA聚合酶C、DNA連接酶D、反轉(zhuǎn)錄酶E、DNA解鏈酶正確答案：E答案解析：在重組DNA技術(shù)中，限制性核酸內(nèi)切酶用于切割DNA分子，獲得特定的DNA片段；DNA聚合酶用于DNA復(fù)制等過程；DNA連接酶用于連接DNA片段；反轉(zhuǎn)錄酶可將RNA反轉(zhuǎn)錄為DNA。而DNA解鏈酶主要作用是解開DNA雙鏈，在重組DNA技術(shù)中通常不涉及。8.哪一個(gè)載體更適用于150kBDNA片段的克??？A、質(zhì)粒B、λ載體C、BACD、YAC正確答案：C9.重組DNA技術(shù)中實(shí)現(xiàn)目的基因與載體DNA拼接的酶：A、DNA聚合酶B、RNA聚合酶C、DNA連接酶D、RNA連接酶E、限制性內(nèi)切正確答案：C答案解析：DNA連接酶能夠催化雙鏈DNA片段互補(bǔ)末端之間的磷酸二酯鍵形成，從而實(shí)現(xiàn)目的基因與載體DNA的拼接。DNA聚合酶主要用于DNA復(fù)制等過程；RNA聚合酶用于轉(zhuǎn)錄合成RNA；RNA連接酶在重組DNA技術(shù)中一般較少使用；限制性內(nèi)切酶是用于切割DNA的，產(chǎn)生粘性末端或平末端，為后續(xù)的拼接做準(zhǔn)備，但它本身不能直接實(shí)現(xiàn)拼接。10.如果沒有得到PCR產(chǎn)物，下面哪個(gè)不是導(dǎo)致擴(kuò)增失敗的原因?A、可能沒有加入酶B、DNA解鏈不充分C、人工合成的引物錯(cuò)誤D、減少循環(huán)周期次數(shù)正確答案：D答案解析：如果沒有得到PCR產(chǎn)物，擴(kuò)增失敗的原因可能有多種。選項(xiàng)A中沒有加入酶會(huì)導(dǎo)致無法進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)；選項(xiàng)B中DNA解鏈不充分會(huì)影響引物與模板的結(jié)合，進(jìn)而影響擴(kuò)增；選項(xiàng)C中人工合成的引物錯(cuò)誤也無法正確引導(dǎo)擴(kuò)增。而選項(xiàng)D減少循環(huán)周期次數(shù)一般不會(huì)直接導(dǎo)致擴(kuò)增失敗，只是可能會(huì)使擴(kuò)增產(chǎn)物量減少，不是導(dǎo)致完全沒有PCR產(chǎn)物的原因。11.不經(jīng)電泳分離直接將樣品點(diǎn)在硝酸纖維素膜上的技術(shù)是：A、Eastern雜交B、Northern雜交C、Western雜交D、斑點(diǎn)雜交正確答案：D答案解析：斑點(diǎn)雜交是將樣品直接點(diǎn)在硝酸纖維素膜上，而不是先進(jìn)行電泳分離，然后再進(jìn)行雜交檢測等后續(xù)操作，符合不經(jīng)電泳分離直接點(diǎn)樣的特點(diǎn)。Eastern雜交主要用于檢測蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作用等；Northern雜交是用于檢測RNA；Western雜交是用于檢測蛋白質(zhì)，這幾種雜交技術(shù)通常都需要先進(jìn)行電泳分離等操作。12.Klenow酶與DNA聚合酶相比，前者喪失了下面哪種酶的活性？A、5′→3′合成酶B、3′→5′外切酶C、5′→3′外切酶D、轉(zhuǎn)移酶正確答案：C答案解析：Klenow酶是DNA聚合酶I大片段，DNA聚合酶I具有5′→3′聚合酶活性、3′→5′外切酶活性和5′→3′外切酶活性，Klenow酶是DNA聚合酶I經(jīng)枯草桿菌蛋白酶切割后產(chǎn)生的大片段，它保留了5′→3′聚合酶活性和3′→5′外切酶活性，但喪失了5′→3′外切酶活性。13.經(jīng)電泳后將DNA轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上的技術(shù)是：A、Southern雜交B、斑點(diǎn)雜交C、Western雜交D、Eastern雜交正確答案：A答案解析：Southern雜交是將DNA經(jīng)電泳分離后轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜或尼龍膜上，然后與標(biāo)記的核酸探針進(jìn)行雜交，以檢測特定DNA片段的技術(shù)。斑點(diǎn)雜交是將DNA或RNA樣品直接點(diǎn)在硝酸纖維素膜或尼龍膜上進(jìn)行雜交。Western雜交是用于檢測蛋白質(zhì)的技術(shù)。Eastern雜交主要用于分析蛋白質(zhì)的糖基化等修飾。所以經(jīng)電泳后將DNA轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜上的技術(shù)是Southern雜交。14.蛋白質(zhì)的合成方向?yàn)椋篈、從C端→N端B、N端→C端C、定點(diǎn)雙向進(jìn)行D、以上都不對正確答案：B答案解析：蛋白質(zhì)合成是從N端向C端進(jìn)行的。在翻譯過程中，核糖體沿著mRNA移動(dòng)，按照密碼子的順序依次將氨基酸連接成多肽鏈，新加入的氨基酸會(huì)連接到正在延伸的多肽鏈的C末端，從而使得蛋白質(zhì)合成方向?yàn)镹端→C端。15.雙脫氧鏈末端終止法測序不需要：A、Klenow小片段B、引物C、dNTPD、標(biāo)記dNTPE、ddNTP正確答案：A答案解析：雙脫氧鏈末端終止法測序需要引物、dNTP、標(biāo)記dNTP、ddNTP，不需要Klenow小片段，Klenow小片段是DNA聚合酶I經(jīng)枯草桿菌蛋白酶裂解后產(chǎn)生的大片段，具有5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性，而雙脫氧鏈末端終止法測序一般用的是測序酶等，不是Klenow小片段。16.下列哪一種酶作用時(shí)需要引物？A、限制酶B、末端轉(zhuǎn)移酶C、反轉(zhuǎn)錄酶D、DNA連接酶正確答案：C答案解析：反轉(zhuǎn)錄酶以RNA為模板合成DNA時(shí)需要引物，此引物通常是一段RNA序列。限制酶識別特定序列并切割DNA，不需要引物；末端轉(zhuǎn)移酶是在DNA末端添加核苷酸，不需要引物；DNA連接酶連接DNA片段，不需要引物。17.PCR退火溫度一般是：A、95℃B、85℃C、72℃D、65℃E、55℃正確答案：E答案解析：PCR退火溫度一般在55℃-65℃之間，所以大于55℃符合要求，其他選項(xiàng)溫度過高不符合退火溫度范圍。18.下列關(guān)于建立cDNA文庫的敘述哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的：A、從特定組織或細(xì)胞中提取mRNAB、將特定細(xì)胞的DNA用限制性核酸內(nèi)切酶切割后，克隆到噬菌體或質(zhì)粒中，C、用逆轉(zhuǎn)錄酶合成mRNA的對應(yīng)單股DNAD、用DNA聚合酶，以單股DNA為模板合成雙鏈DNA正確答案：B答案解析：建立cDNA文庫是從特定組織或細(xì)胞中提取mRNA（A選項(xiàng)正確），然后用逆轉(zhuǎn)錄酶合成mRNA的對應(yīng)單股DNA（C選項(xiàng)正確），再用DNA聚合酶以單股DNA為模板合成雙鏈DNA（D選項(xiàng)正確），而不是將特定細(xì)胞的DNA用限制性核酸內(nèi)切酶切割后克隆到噬菌體或質(zhì)粒中，B選項(xiàng)錯(cuò)誤。19.人類基因組計(jì)劃的主要研究內(nèi)容不包括：A、遺傳圖分析B、物理圖分析C、序列圖分析D、蛋白質(zhì)功能分析E、轉(zhuǎn)錄圖分析正確答案：D答案解析：人類基因組計(jì)劃的主要內(nèi)容包括遺傳圖分析、物理圖分析、轉(zhuǎn)錄圖分析和序列圖分析。蛋白質(zhì)功能分析不屬于人類基因組計(jì)劃的主要研究內(nèi)容。20.同一種質(zhì)粒DNA，以三種不同形式存在，電泳時(shí)它們的遷移率是：A、OCDNA>SCDNA>LDNAB、SCDNA>LDNA>OCDNAC、LDNA>OCDNA>SCDNAD、SCDNA>OCDNA>LDNA正確答案：B21.多克隆位點(diǎn)：A、含有許多拷貝的克隆化基因B、使得對克隆所用限制酶的選擇具有靈活性C、含有許多拷貝的同一種限制酶位點(diǎn)D、使得對克隆所用的生物種類的選擇具有靈活性正確答案：B答案解析：多克隆位點(diǎn)是指載體上人工合成的含有多種限制酶識別序列的DNA片段，它可以插入外源DNA片段，使得對克隆所用限制酶的選擇具有靈活性。選項(xiàng)A中說含有許多拷貝的克隆化基因錯(cuò)誤；選項(xiàng)C中含有許多拷貝的同一種限制酶位點(diǎn)不準(zhǔn)確；選項(xiàng)D中說對克隆所用生物種類的選擇具有靈活性也不正確。22.第一個(gè)由重組大腸桿菌生產(chǎn)的人類蛋白（多肽）藥物是：A、胰島素B、干擾素C、白細(xì)胞介素D、生長激素正確答案：A答案解析：胰島素是第一個(gè)由重組大腸桿菌生產(chǎn)的人類蛋白（多肽）藥物。胰島素是一種蛋白質(zhì)激素，對調(diào)節(jié)血糖水平至關(guān)重要。通過基因工程技術(shù)，將胰島素基因?qū)氪竽c桿菌中，使其能夠表達(dá)并生產(chǎn)胰島素，為糖尿病患者提供了有效的治療藥物。生長激素、干擾素、白細(xì)胞介素等雖然也是重要的蛋白質(zhì)藥物，但不是第一個(gè)由重組大腸桿菌生產(chǎn)的。23.PCR主要的酶是：A、DNA連接酶B、反轉(zhuǎn)錄酶C、末端轉(zhuǎn)移酶D、堿性磷酸酶E、TaqDNA聚合酶正確答案：E答案解析：PCR技術(shù)中主要使用的酶是TaqDNA聚合酶，它具有耐高溫的特性，能在較高溫度下進(jìn)行DNA的擴(kuò)增反應(yīng)，而其他幾種酶在PCR過程中一般不發(fā)揮主要作用。24.轉(zhuǎn)化常指：A、噬菌體感染B、基因轉(zhuǎn)位C、攝取外來DNA，引起細(xì)胞生物學(xué)類型的改變D、產(chǎn)生點(diǎn)突變E、產(chǎn)生移碼突變正確答案：C答案解析：轉(zhuǎn)化是指受體菌直接攝取供體菌游離的DNA片段并整合到自己的基因組中，從而獲得供體菌部分遺傳性狀的過程，可引起細(xì)胞生物學(xué)類型的改變，符合選項(xiàng)C的描述。選項(xiàng)A噬菌體感染不是轉(zhuǎn)化；選項(xiàng)B基因轉(zhuǎn)位與轉(zhuǎn)化概念不同；選項(xiàng)D產(chǎn)生點(diǎn)突變和選項(xiàng)E產(chǎn)生移碼突變與轉(zhuǎn)化的定義不符。25.與mRNAACG相對應(yīng)的tRNA的反密碼子是：A、UGCB、TGCC、GCAD、CGU正確答案：D26.用免疫化學(xué)法篩選重組體的原理是：A、根據(jù)外源基因的表達(dá)B、根據(jù)載體基因的表達(dá)C、根據(jù)mRNA同DNA的雜交D、根據(jù)DNA同DNA的雜交正確答案：A27.由mRNA合成cDNA需要：A、Klenow小片段B、DNA連接酶C、Klenow大片段D、反轉(zhuǎn)錄酶E、堿性磷酸酶正確答案：D答案解析：反轉(zhuǎn)錄酶是以mRNA為模板合成cDNA的關(guān)鍵酶，它能催化以mRNA為模板合成互補(bǔ)DNA鏈的反應(yīng)。Klenow小片段、Klenow大片段主要用于DNA的合成等其他相關(guān)反應(yīng)，DNA連接酶用于連接DNA片段，堿性磷酸酶用于去除核酸末端的磷酸基團(tuán)等，均不是由mRNA合成cDNA直接需要的酶。28.多數(shù)限制性核酸內(nèi)切酶切割后的DNA末端為：A、平行末端B、3’-突出末端C、5’-突出末端D、粘性末端E、缺口末端正確答案：D答案解析：多數(shù)限制性核酸內(nèi)切酶切割后的DNA末端為粘性末端，即雙鏈DNA被酶切后，產(chǎn)生的兩個(gè)末端的堿基序列互補(bǔ)，能夠通過堿基配對重新結(jié)合，形成類似粘性的結(jié)構(gòu)。29.PCR反應(yīng)體系與雙脫氧末端終止法測序體系不同的是缺少：A、模板B、引物C、DNA聚合酶D、ddNTPE、緩沖液正確答案：D答案解析：PCR反應(yīng)體系中需要模板、引物、DNA聚合酶、緩沖液等成分來擴(kuò)增特定DNA片段。而雙脫氧末端終止法測序體系是利用ddNTP（雙脫氧核苷酸）隨機(jī)終止DNA鏈的延伸來進(jìn)行測序，在PCR反應(yīng)體系中不需要ddNTP，所以PCR反應(yīng)體系與雙脫氧末端終止法測序體系不同的是缺少ddNTP。30.在基因工程中通常所用的質(zhì)粒存在于：A、細(xì)菌染色體B、酵母染色體C、細(xì)菌染色體外D、酵母染色體外E、病毒DNA外正確答案：C答案解析：質(zhì)粒是細(xì)菌染色體外能夠自主復(fù)制的小型環(huán)狀雙鏈DNA分子，存在于細(xì)菌染色體外。A選項(xiàng)細(xì)菌染色體錯(cuò)誤；B選項(xiàng)酵母染色體外一般是酵母人工染色體等，不是質(zhì)粒；D選項(xiàng)同理酵母染色體外不是質(zhì)粒；E選項(xiàng)病毒DNA外也不正確，質(zhì)粒存在于細(xì)菌中而非病毒相關(guān)。31.下列哪一種不是產(chǎn)生星號活性的主要原因？A、甘油含量過高B、含有非鎂離子的二價(jià)陽離子C、反應(yīng)體系中含有有機(jī)溶劑D、酶切反應(yīng)時(shí)酶濃度過低正確答案：D答案解析：星號活性是指在非理想的反應(yīng)條件下，限制酶可能會(huì)切割一些與識別序列相似但不完全相同的序列，從而產(chǎn)生非特異性的切割條帶。甘油含量過高、反應(yīng)體系中含有有機(jī)溶劑、含有非鎂離子的二價(jià)陽離子等都可能導(dǎo)致星號活性的產(chǎn)生。而酶切反應(yīng)時(shí)酶濃度過低通常不會(huì)直接導(dǎo)致星號活性，反而可能影響酶切效率，使酶切不完全。32.Maxam-Gilbert法與Sanger法測序的共同點(diǎn)是均需：A、電泳后放射自顯影讀圖B、化學(xué)裂解試劑C、Klenow酶D、dNTPE、引物正確答案：A33.關(guān)于宿主控制的限制修飾現(xiàn)象的本質(zhì)，下列描述中只有不恰當(dāng)?shù)氖牵篈、由作用于同一DNA序列的兩種酶構(gòu)成B、這一系統(tǒng)中的核酸酶都是Ⅱ類限制性內(nèi)切核酸酶C、這一系統(tǒng)中的修飾酶主要是通過甲基化作用對DNA進(jìn)行修飾D、不同的宿主系統(tǒng)具有不同的限制—修飾系統(tǒng)正確答案：B答案解析：宿主控制的限制修飾現(xiàn)象由作用于同一DNA序列的兩種酶構(gòu)成，修飾酶主要通過甲基化作用對DNA進(jìn)行修飾，且不同的宿主系統(tǒng)具有不同的限制—修飾系統(tǒng)。這一系統(tǒng)中的核酸酶主要是Ⅰ類和Ⅲ類限制性內(nèi)切核酸酶，并非Ⅱ類限制性內(nèi)切核酸酶，所以選項(xiàng)B不恰當(dāng)。34.Southern印跡的DNA探針雜交：A、只與序列完全相同的RNA片段B、可與任何含有相同序列的DNA片段C、可與任何含有互補(bǔ)序列的DNA片段D、可與用某些限制性核酸內(nèi)切酶切DNA片段E、只與含有互補(bǔ)序列RNA片段正確答案：C答案解析：Southern印跡的DNA探針雜交原理是利用核酸分子堿基互補(bǔ)配對原則，探針可與任何含有互補(bǔ)序列的DNA片段進(jìn)行雜交。35.下列三聯(lián)體密碼中，合成蛋白質(zhì)的起始密碼是：A、AUUB、AUGC、UAAD、CAA正確答案：B36.在簡并引物的3′端盡量使用具有簡并密碼的氨基酸，這是因?yàn)椋篈、TAq酶具有一定的不精確性B、便于排除錯(cuò)誤堿基的摻入C、易于退火D、易于重組連接正確答案：A37.DNA的結(jié)構(gòu)對轉(zhuǎn)化的影響很大，一般說來，轉(zhuǎn)化效率最高的是：A、完整的線性雙鏈DNAB、單鏈線性DNAC、完整的環(huán)狀雙鏈DNAD、開口的雙鏈環(huán)狀DNA正確答案：A38.PCR反應(yīng)過程中，引物延伸所需溫度一般是：A、95℃B、82℃C、72℃D、62℃E、55℃正確答案：C答案解析：引物延伸溫度一般為72℃左右，在該溫度下，DNA聚合酶具有較高的活性，能夠以引物為起始點(diǎn)，沿著模板鏈合成新的DNA鏈。39.第一個(gè)用于構(gòu)建重組體的限制性核酸內(nèi)切酶是：A、EcoRIB、EcoBC、EcoRIID、EcoRV正確答案：A答案解析：限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)并用于構(gòu)建重組體的，它能夠識別特定的DNA序列并進(jìn)行切割，為基因工程的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。40.PCR實(shí)驗(yàn)的特異性主要取決于：A、DNA聚合酶的種類B、反應(yīng)體系中模板DNA的量C、引物序列的結(jié)構(gòu)和長度D、四種dNTP的濃度E、循環(huán)周期的次數(shù)正確答案：C答案解析：引物是PCR特異性的關(guān)鍵因素，引物序列的結(jié)構(gòu)和長度決定了引物與模板DNA結(jié)合的特異性，進(jìn)而影響PCR反應(yīng)的特異性。DNA聚合酶種類主要影響反應(yīng)效率等；模板DNA量影響擴(kuò)增產(chǎn)物量；四種dNTP濃度影響反應(yīng)進(jìn)行；循環(huán)周期次數(shù)影響產(chǎn)物數(shù)量，但都不如引物序列對特異性影響大。二、判斷題（共20題，每題1分，共20分）1.溫度敏感突變型是非常有用的，在這些突變型中，可以通過對溫度的改變控制這些突變體中異常表型的出現(xiàn)。A、正確B、錯(cuò)誤正確答案：A2.PCR既能用于擴(kuò)增天然存在的基因序列，又能重新設(shè)計(jì)天然基因序列的兩個(gè)末端。因此，任意兩個(gè)天然存在的基因序列都能快速有效地?cái)U(kuò)增，且能拼接在一起。A、正確B、錯(cuò)誤正確答案：A3.人工感受態(tài)和自然感受態(tài)的細(xì)胞都能吸收線性和環(huán)狀單鏈DNA。A、正確B、錯(cuò)誤正確答案：B4.促紅細(xì)胞生長素基因能在大腸桿菌中表達(dá)，也可以用大腸桿菌的基因工程菌生產(chǎn)人的促紅細(xì)胞生長素。A、正確B、錯(cuò)誤正確答案：B5.尼龍膜是核酸雜交的一種固體支持物，具有同DNA結(jié)合能力強(qiáng)、韌性強(qiáng)，可反復(fù)洗脫使用，并且雜交信號本底低等優(yōu)點(diǎn)，就是成本高。A、正確B、錯(cuò)誤正確答案：B6.如果細(xì)菌的某種表型特征在UV處理下喪失后不再恢復(fù)，這種表型有可能是質(zhì)粒賦予的。A、正確B、錯(cuò)誤正確答案：A7.氯霉素?cái)U(kuò)增DNA時(shí)，加氯霉素的時(shí)間是重要的，因?yàn)榧拥锰纾鷶?shù)不夠，加入時(shí)間過遲，菌齡過老，容易自溶。A、正確B、錯(cuò)誤正確答案：A8.穿梭載體是指