HJ

中華人民共和國國家生態(tài)環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)

HJ1295—2023

水生態(tài)監(jiān)測技術(shù)指南河流水生生物

監(jiān)測與評價(jià)(試行)

Technicalguidelinesforwaterecologicalmonitoring-aquaticorganism

monitoringandevaluationofrivers(ontrial)

本電子版為正式標(biāo)準(zhǔn)文本，由生態(tài)環(huán)境部環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)研究所審校排版。

2023-04-20發(fā)布2024-01-01實(shí)施

生態(tài)環(huán)境吾B發(fā)布

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目次

前言............................................................................ii

1適用范圍...............................................................................I

2規(guī)范性引用文件........................................................................1

3術(shù)語和定義.............................................................................I

4點(diǎn)位布設(shè)與監(jiān)測頻次........................二.........................................2

5監(jiān)測方法.............................................................................3

6質(zhì)量保證和質(zhì)量控制...................................................................4

7雨介方法...................................:............?..............................4

附錄A（資料性附錄）著生藻類監(jiān)測方法..................................................7

附錄B（資料性附錄）底棲動物測定結(jié)果計(jì)算..............................................11

附錄C（資料性附錄）IBI指數(shù)評價(jià)方法...................................................12

附錄D（資料性附錄）水生生物評價(jià)分級參照值.............................................15

附錄E（資料性附錄）底棲動物BMWP科級記分列表......................................16

附錄F（資料性附錄）底棲動物耐污值列表................................................18

附錄G（資料性附錄）硅藻的指示值和敏感值列表..........................................26

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_”?，■—1—

刖三

為貫徹《中華人民共和國環(huán)境保護(hù)法》《中華人民共和國水虧染防治法》《中華人民共和國長江保

護(hù)法》《中華人民共和國黃河保護(hù)法》，防治生態(tài)環(huán)境污染，改善生態(tài)環(huán)境質(zhì)量，規(guī)范河流水生態(tài)監(jiān)測

中水生生物監(jiān)測與評價(jià)工作,制定本標(biāo)準(zhǔn)。

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了河流（不包括河口）水生態(tài)監(jiān)測中水生生物監(jiān)測點(diǎn)位布設(shè)與監(jiān)測頻次、監(jiān)測方法、質(zhì)

量保證和質(zhì)量控制、評價(jià)方法等技術(shù)內(nèi)容。

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A~附錄G為資料性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。

本標(biāo)準(zhǔn)由生態(tài)環(huán)境部生態(tài)環(huán)境監(jiān)測司、法規(guī)與標(biāo)準(zhǔn)司組織制訂。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位：中國環(huán)境監(jiān)測總站、遼寧省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心、中國環(huán)境科學(xué)研究院、生態(tài)

環(huán)境部長江流域生態(tài)環(huán)境監(jiān)督管理局生態(tài)環(huán)境監(jiān)測與科學(xué)研究中心、黑龍江省生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心、哈爾

濱師范大學(xué)、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)。

本標(biāo)準(zhǔn)生態(tài)環(huán)境部2023年4月20日批準(zhǔn)。

本標(biāo)準(zhǔn)自2024年1月1日起實(shí)施。

本標(biāo)準(zhǔn)由生態(tài)環(huán)境部解釋。

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的區(qū)域性單元。

3.6

生物完整性biologicalintegrity

水生生態(tài)系統(tǒng)具備支持和維護(hù)區(qū)域內(nèi)平衡的、完整的、自適應(yīng)的生物群落的能力，生物群落具有與

自然生境狀態(tài)相適應(yīng)的物種組成、多樣性和功能組織。

3.7

生物完整性指數(shù)indexofbiologicalintegrity（IBI）

對人類活動干擾引起的生物完整性變化敏感的多個(gè)生物學(xué)指標(biāo)或參數(shù)的綜合指數(shù)，用于描述生態(tài)系

統(tǒng)的生物群落完整性狀況。

4點(diǎn)位布設(shè)與監(jiān)測頻次

4.1前期調(diào)查

4.1.1調(diào)查收集水文、氣候、地質(zhì)（包括沉積類型）、演資料。如河流寬度、河床結(jié)構(gòu)、河流濱岸

芍形態(tài)，水位、水深、水量、流速及流向等歷史水文狀態(tài)變化資料，降水量、蒸發(fā)量資料。

4.1.2調(diào)查污染物的時(shí)空分布情況。如河流周圍城市和人口分布、工業(yè)布局、工業(yè)污染源及其排放口、

城市生活排水、農(nóng)田退水，農(nóng)藥、化肥的使用種類、數(shù)量和使用時(shí)間等。

4.13調(diào)查攔河閘壩的概況。如閘壩的類型和分布等。

4.1.4調(diào)直河流沿岸土地利用現(xiàn)狀。如耕地、林地、草地、建設(shè)用地、未利用土地（沙地、戈壁、鹽

堿地、裸土地等），特別是植被破壞和水土流失情況。

4.1.5調(diào)查水資源、水體功能和各類水功能區(qū)的分布,特別是飲用水源地和重點(diǎn)水源保護(hù)區(qū)的分布。

4.1.6調(diào)查采樣點(diǎn)交通狀況和可達(dá)性等。

4.2點(diǎn)位布設(shè)

4.2.1布設(shè)原則

421.1代表性原則：監(jiān)測點(diǎn)位宜具有空間代表性，覆蓋典型生境，反映區(qū)域環(huán)境污染特征及人為活

動的影響，可滿足監(jiān)測的需求。監(jiān)測點(diǎn)位宜全面覆蓋流域或區(qū)域范圍，避開局部特殊區(qū)域（如死水區(qū)、

回水區(qū)和排污口）。

4.2.1.2一致性原則：監(jiān)測河段宜與水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測點(diǎn)位所在河段保持一致，宜方便獲取水文和水質(zhì)

監(jiān)測數(shù)據(jù)。

4.2.13可行性原則：宜以最少的點(diǎn)位獲取具有代表性的監(jiān)測信息，同時(shí)兼顧采樣的可行性和便捷性。

<2.1.4延續(xù)性原則：宜沿用歷史監(jiān)測點(diǎn)位，保持監(jiān)測數(shù)據(jù)的連續(xù)性和可比性。

4.2.1.5安全性原則：監(jiān)測點(diǎn)位的布設(shè)應(yīng)保障監(jiān)測人員與設(shè)備的安全。

4.2.2布設(shè)方法

4.2.2.1根據(jù)區(qū)域內(nèi)河流形態(tài)、水文狀況、水環(huán)境質(zhì)量、水生生物分布等因素的差異，將河流分為不

同的河段，開展初期監(jiān)測。初期監(jiān)測河段長度，可涉水河流宜小于10km,不可涉水河流宜小于50km,

江河干流可根據(jù)實(shí)際情況適當(dāng)增加河段長度。可根據(jù)初期監(jiān)測的結(jié)果，確定生物群落結(jié)構(gòu)具有顯著差異

的河段作為監(jiān)測河段。

4.2.2.2每個(gè)河段布設(shè)2~5個(gè)監(jiān)測點(diǎn)位。以監(jiān)測點(diǎn)位為中心確定采樣河段，采樣河段的上游起點(diǎn)和下

游終點(diǎn)設(shè)置方法見表I。不可涉水河流也可按河寬倍數(shù)的方法確定采樣河段。在采樣河段內(nèi)選擇適于水

2

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生生物生存的生境采集水生生物樣品。

表【監(jiān)測點(diǎn)位采樣河段上游起點(diǎn)和下游終點(diǎn)的設(shè)置

河流分類上游起點(diǎn)與監(jiān)測點(diǎn)位的距離下游終點(diǎn)與監(jiān)測點(diǎn)位的距離Ld/m采樣河段長度L/m

可涉水河流5050100

不可涉水河流5005001(X)0

20x820x840x8

注：B為河1流寬度。

4.2.3參照點(diǎn)位及參照狀態(tài)

為開展水生生物評價(jià)，確定參照點(diǎn)位并建立參照狀態(tài)，方法如下：

a）參照點(diǎn)位法：在未受或幾乎未受人類活動干擾的區(qū)域布設(shè)參照點(diǎn)位，建立參照狀態(tài)。參照點(diǎn)位

的確定方法可參照SL/T793執(zhí)行；

b）最優(yōu)狀態(tài)法：若監(jiān)測區(qū)域受人類活動干擾時(shí)，選擇監(jiān)測區(qū)域內(nèi)可獲得的最優(yōu)狀態(tài)，也可選擇監(jiān)

測河段周圍或同一生態(tài)區(qū)域內(nèi)同類型河流中最優(yōu)狀態(tài)建立參照狀態(tài)；

c）歷史數(shù)據(jù)法：若可獲取監(jiān)測區(qū)域未受人類活動影響時(shí)的歷史數(shù)據(jù)，以歷史數(shù)據(jù)建立參照狀態(tài)；

d）期望狀態(tài)法：根據(jù)管理目標(biāo)確定修復(fù)后期望達(dá)到的狀態(tài)；

c）以上方法難以建立參照狀態(tài)時(shí)，采用專家經(jīng)驗(yàn)方法確定參照點(diǎn)位及參照狀態(tài)。

4.3監(jiān)測頻次和時(shí)間

4.3.1確定原則

根據(jù)監(jiān)測目的，結(jié)合河流水文、季節(jié)、生物群落的變化，在保證可獲取具有時(shí)間代表性樣品的前提

下，確定最低的監(jiān)測頻次和監(jiān)測時(shí)間。

4.3.2監(jiān)測頻次和時(shí)間

4.3.2.1監(jiān)測頻次可為多年一次、一年一次、一年多次。

4.322年內(nèi)監(jiān)測，可按月監(jiān)測、按季節(jié)監(jiān)測、也可按徑流量的年內(nèi)變化周期（如豐水期、平水期和

枯水期）監(jiān)測。

4.3.23根據(jù)水生生物的生命周期、生活史特征（如羽化期或繁殖期）、季節(jié)變化特征、監(jiān)測目的等

因素確定監(jiān)測時(shí)間。

4.3.2.4不同監(jiān)測點(diǎn)位宜在同一時(shí)期內(nèi)開展監(jiān)測，縮短不同點(diǎn)位監(jiān)測時(shí)間的跨度,確保監(jiān)測結(jié)果在時(shí)

間上的統(tǒng)一性。

4.325若在規(guī)定的監(jiān)測時(shí)間段內(nèi)河流水文氣象條件（如降雨集中期、冰凍期）不適宜采樣，可根據(jù)

實(shí)際情況調(diào)整采樣時(shí)間。

432.6受潮汐影響的河段，宜在退潮期采樣。

5監(jiān)測方法

5.1著生藻類

根據(jù)河流生境類型和著生藻類分布特征，選取適當(dāng)?shù)牟蓸釉O(shè)備和采樣方法，采集具有代表性的定量、

定性樣品，定性樣品宜充分采集各類基質(zhì)上的看生藻類。監(jiān)測方法參照附錄A執(zhí)行。

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5.2大型底棲無脊椎動物

根據(jù)河流生境類型和大型底棲無脊椎動物(簡稱底棲動物)分布特征，選取適當(dāng)?shù)牟蓸釉O(shè)售和采樣

方法，采集具有代表性的定量、定性樣品，宜充分采集各生境類型的底棲動物。監(jiān)測方法參照HJ710.8

執(zhí)行，長江流域按照長江流域水生態(tài)監(jiān)測方案執(zhí)行。測定結(jié)果參照附錄B計(jì)算。

5.3魚類

可參照HJ710.7和SC/T9102.3執(zhí)行。

5.4記錄

5.4.1記錄采樣設(shè)備、采樣方法、采樣量、采樣河段生境類型等信息。

5.4.2樣品種類鑒定記錄物種名稱、拉丁名、定性結(jié)果和定量結(jié)果等信息。

6質(zhì)量保證和質(zhì)量控制

6.1采樣前明確野外采樣負(fù)責(zé)人，并制定采樣計(jì)劃。里勃卜采樣負(fù)責(zé)人評估采樣計(jì)劃完整性、采樣點(diǎn)位

準(zhǔn)確性、采樣方案可行性和樣品采集效果。

6.2采樣前宜避免擾動生物類群，在定量采樣完成之后開展定性采樣。

6.3底棲動物、著生藻類和魚類的樣品采集過程和保存方法可分別參照HJ710.8、本標(biāo)準(zhǔn)附錄A、H.I710.7

和SC/T9102.3的相關(guān)要求執(zhí)行.

6.4采樣過程中接觸過生物樣品的采樣器具宜及時(shí)清洗，避免樣品沾污，必要時(shí)更換采樣器具。

6.5若優(yōu)勢種鑒定結(jié)果存疑，可請分類學(xué)專家確認(rèn)。

6.6新物種、新記錄種宜留存完整的樣品標(biāo)本，請分類學(xué)專家確認(rèn)后，永久保存。

6.7樣品鑒定和計(jì)數(shù)中宜抽取一定比例的樣品(如10%),由2名人員分別完成，評估結(jié)果的一致性。

7評價(jià)方法

7.1評價(jià)方法適用性

河流常用水生生物評價(jià)方法適用性見表2。

表2常用水生生物評價(jià)方法適用性

評價(jià)方法適用性生物類群

生物完整性指數(shù)著生藻類、底棲動物、

利用水生生物定性、定量監(jiān)測數(shù)據(jù),從生物完整性角度開展評價(jià)。

(IBI)魚類

生物監(jiān)測工作組記分利用底棲即物的定性監(jiān)測數(shù)據(jù)，依據(jù)不同底砌物類群對污染物的耐

底棲動物

(BMWP)受性或敏感性差異開展評價(jià)。

生物指數(shù)利用底棲旬物的定量監(jiān)測數(shù)據(jù)和各分類單元耐污值數(shù)據(jù)，依據(jù)不同底

底棲動物

(BI)棲動物類群對污染物的耐受性或敏感性差異開展評價(jià)。

生物學(xué)污染指數(shù)利用底棲動物的定量監(jiān)測數(shù)據(jù)，依據(jù)底棲動物指示類群的結(jié)構(gòu)特征開

底棲動物

(BP【)展評價(jià)。

綜合硅藻指數(shù)利用硅藤的定量監(jiān)測數(shù)據(jù)和各硅藻種類對環(huán)境的指示值及敏感值數(shù)

著生藻類

(CDI)據(jù)，依據(jù)不同硅藻種類對污染的指示性或敏感性差異開展評價(jià).

著生藻類、底棲動物、

香農(nóng)-維納多樣性指數(shù)利用水生生物定量監(jiān)測數(shù)據(jù)，從物種多樣性角度開展評價(jià).

(〃)魚類

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續(xù)表

評價(jià)方法適用性生物類群

依據(jù)生物群落或種群特征參數(shù)，基于監(jiān)測現(xiàn)狀值與期望值差異的方法著生藻類、底棲動物、

群落或種群特征參數(shù)

開展評價(jià)，如土著物種分類單元數(shù)、指示類雌構(gòu)組成等。魚類

7.2評價(jià)方法的選擇

根據(jù)評價(jià)目的，結(jié)合監(jiān)測區(qū)域的工作基礎(chǔ)、存在的問題及評價(jià)方法的適用性（7.1）,確定評價(jià)指

標(biāo)，選擇適用的評價(jià)方法。宜選用IBI方法，也可參照附錄C中C.3.2開展判別能力分析，采用對環(huán)境

壓力判別能力高的其他評價(jià)方法，分級評價(jià)根據(jù)附錄C中C.4.2建立分級評價(jià)等級，也可參照附錄D

表D.1。

7.3評價(jià)指數(shù)

7.3.1生物完整性指數(shù)（IBI）

生物完整性指數(shù)（IBI）方法包括以下內(nèi)容：

a）建立參照狀態(tài)；

b）建立候選參數(shù)清單；

c）篩選核心參數(shù)；

d）構(gòu)建生物完整性指數(shù)；

e）期正。

評價(jià)方法參見附錄C

7.3.2生物監(jiān)測工作組記分（biologicalmonitoringworkingparty,BMWP）

生物監(jiān)測工作組記分（BMWP）按照公式（1）計(jì)算：

N2.

BMWP=Z尸，⑴

1=1

式中：BMWP——生物監(jiān)測工作組記分；

M——科級分類單元數(shù)；

i-第i個(gè)科；

E一科i的記分,參見附錄匕

7.3.3生物指數(shù)（bioticindex,BI）

生物指數(shù)（BI）按照公式（2）計(jì)算：

BI=Z力（2）

式中：BI—生物指數(shù)；

M——物種數(shù)；

i——第/個(gè)物種；

——物種i的個(gè)體數(shù)；

N一生物個(gè)體總數(shù)；

——物種i的耐污值，參見附錄F。

5

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7.3.4生物學(xué)污染指數(shù)（biologcalpollutionindex,BPI）

生物學(xué)污染指數(shù)（BPI）按照公式（3）計(jì)算：

BPI=吆（川+2）（3）

lg（tn+2）+lg（/n+2）

式中：BPI——生物學(xué)污染指數(shù)；

小一寡毛類、蛭類和搖蚊幼蟲個(gè)體數(shù)；

2——為避免分子或分母出現(xiàn)0值而設(shè)置的常數(shù)；

m—多毛類、甲殼類、除搖蚊幼蟲以外的其他水生昆蟲的個(gè)體數(shù)；

——軟體動物個(gè)體數(shù)。

7.3.5綜合硅藻指數(shù)（comprehensivediatomindex,CDI）

以硅藻相對密度和環(huán)境敏感值的乘積為權(quán)重，按照公式（4）計(jì)算硅藻指示值的加權(quán)平均值（v）：

州

hl

式中：硅藻指示值的加權(quán)平均值（1~5）；

僅一3藻物種k的相對豐度（物種k個(gè)體數(shù)/總個(gè)體數(shù)）；

硅藻物種k對環(huán)境的敏感值（1~4）,參見附錄G；

VA一硅藻物種女對環(huán)境的指示值（1~5）,參見附錄Go

綜合硅藻指數(shù)（CDI）按照公式（5）計(jì)算：

CDI=G-l）x25(5)

式中：CDI——綜合硅藻指數(shù)；

v一硅藻指示值的加權(quán)平均值（1~5）；

1——為使CDI值的分布范圍轉(zhuǎn)換為0~100之間而設(shè)值的常數(shù)；

25——為使CDI值的分布范圍轉(zhuǎn)換為0~100之間而設(shè)值的常數(shù)。

7.3.6香農(nóng)-維納多樣性指數(shù)（Shannon-Wienerdiversityindex,H）

香農(nóng)-維納多樣性指數(shù)（H）按照公式（6）計(jì)算：

f）'Hi人..

(6)

式中：H—香農(nóng)-維納多樣性指數(shù)；

Ns——物種數(shù)；

i——第i個(gè)物種；

物種i的個(gè)體數(shù)；

N一生物個(gè)體總數(shù)。

7.3.7群落或種群特征參數(shù)

可采用土著物種分類單元數(shù),指示類群結(jié)構(gòu)特征等描述群落或種群特征的參數(shù)，基于監(jiān)測現(xiàn)狀值與

期望值差異的方法開展評價(jià)。

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附錄A

(資料性附錄)

著生藻類監(jiān)測方法

A.i試劑和材料

除非另有說明，分析時(shí)均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的分析純試劑，實(shí)驗(yàn)用水為新制備的去離子水或蒸儲水。

A.I.1濃硫酸：H(H2SO4)￡[95%,98%]。

A.I.2濃硝酸：MHNO)￡[65%,68%]。

A.1.3二甲苯：H<CXHIO)>99%,

A.1.4甲苯：H'(C7HX)>99%O

A.1.5無水乙醇：用C2H6。)>99.5%.

A-16顯微鏡浸沒油：瞪后1.515或轡月1.518,配透明玻璃滴棒。

A.L7封片膠：加拿大樹膠,/me[1.52,1.54]；或硅藻膠,/H>G[1.73,1.74].

A.1.8其他材料：硬質(zhì)毛刷、抹刀、刀片、培養(yǎng)皿等。

A.2儀器和設(shè)備

A.2.1硅藻計(jì)：一般配置25mmx76mm載玻片，有效附著面積滿足30cm?。

A.2.2采樣瓶：50ml、100ml、500ml聚乙烯瓶。

A23離心機(jī)：相對離心力可達(dá)lOOOxg(轉(zhuǎn)速3000r/min~4000r/min),配置50ml離心管支架。

A24微波消解儀：功率600W~1500W,可設(shè)定溫度、壓力梯度循環(huán)程序。

A.2.5正置或倒置生物顯微鏡：物鏡4x、10x、20x、40x.100x,目鏡10x,含微分干涉和相差

必能。

A.2.6載玻片：25mmx76mm。

A.2.7蓋玻片：25minx25mm。

注：載玻片和蓋玻片使用前使用濃鹽酸和乙醇浸泡。若條件允許，選擇可直接使用的載玻片或蓋玻片。

A.2.8一般實(shí)驗(yàn)室常用設(shè)備。

A.3樣品采集

A.3.1定量樣品采集

A.3.1.1可采用天然基質(zhì)或人工基質(zhì)采集著生藻類定量樣品。天然基質(zhì)可分為硬質(zhì)天然基質(zhì)和軟質(zhì)天

然基質(zhì)，人工基質(zhì)為硅藻計(jì)(A.2.1)。若水流湍急、流速大無法有效固定人工基質(zhì)，宜采集天然基質(zhì)

上的樣品。

A.3.1.2天然基質(zhì)法一般分為以下4種方法：

a)可在水體中選擇容易刮取和測量的硬質(zhì)天然基質(zhì)(如粗礫和樹木殘干等)，將采集的基質(zhì)放置

于漏斗中，從其表面選取至少100cm?的面積，用硬質(zhì)毛刷刷取基質(zhì)表面的智生藻類，以實(shí)驗(yàn)

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用水沖洗硬質(zhì)毛刷、漏斗及基質(zhì)表面，收集沖洗混合物于采樣瓶中（A.2.2）；

b）若基質(zhì)過大（如巨礫和基巖）無法從水體取出，使用硬質(zhì)毛刷、刀片或鏡子取基質(zhì)表面的著生

藻類，刮取面積至少100cm?，小心取出毛刷、刀片或攝子，以實(shí)驗(yàn)用水沖洗，收集沖洗混合

物于采樣瓶（A.2.2）；

c）如果采樣區(qū)內(nèi)無硬質(zhì)天然基質(zhì)，可選擇人工構(gòu)筑物上的隱定硬質(zhì)基質(zhì)（如橋墩、碼頭、堤壩處）；

d）無法采集硬質(zhì)基質(zhì)時(shí)，可使用注射器（或吸管）吸取100cmz面積的軟質(zhì)細(xì)顆粒底質(zhì)，收集至

樣品瓶中。也可將培養(yǎng)皿開口向下壓入松散基質(zhì)中，并在培養(yǎng)皿開口下邊緣用抹刀截取，將采

集到的軟質(zhì)細(xì)顆粒底質(zhì)從培養(yǎng)皿中取出，收集于采樣瓶（A.2.2）。

A.3.1.3人工基質(zhì)法：人工基質(zhì)宜放置在隱蔽處，避開通航、觀光河流的主河道，固定于距離水面

5cm-10cm處，每個(gè)采樣點(diǎn)至少放置3個(gè)硅藻計(jì)（A.2.I）,放置時(shí)間至少14d,定期觀察著生藻類的

附著生長情況。采樣結(jié)束后，取出硅藻計(jì)中的載玻片，用硬質(zhì)毛刷對著采樣瓶口刷取載玻片表面，以實(shí)

驗(yàn)用水沖洗硬質(zhì)毛刷和玻片，收集沖洗混合物于樣品瓶（A.2.2）.

注：若采樣河段不適宜采集著生藻類，可參照HJ1215、HJI216采集浮游植物定量樣品并分析。

A.3.2定性樣品采集

定性樣品宜在各類天然基質(zhì)表面采集，將所有樣品混合裝入采樣瓶.采集方法見A312在水牛

植物基質(zhì)（如苔醉、大型藻類、維管植物及根塊等生物體）表面采集樣品時(shí)，刮取表面滑膩的部分于采

樣瓶（A22）,加適量實(shí)驗(yàn)用水，

注：若采樣河段無適宜的天然基質(zhì)，可參照HJ1216、HJ1215采集浮游植物定性樣品并分析。

A.3.3樣品固定與保存

參照HJ1216中相關(guān)要求執(zhí)行。

A.4實(shí)驗(yàn)室分析

A.4.1定性樣品

A.4.1.1非硅藻樣品

藻類計(jì)數(shù)和種類鑒定可參照HJ1216中相關(guān)要求執(zhí)行。

A.4.I.2硅藻樣品

A.4.1.2.1預(yù)處理

預(yù)處理方式可采用濃酸消解法或微波硝酸消解法。

A.4.1.2.I.1濃酸消解法

操作步驟如下：

a）搖勻硅藻樣品，取5ml~10ml樣品放入50ml或100ml燒杯中，在通風(fēng)櫥內(nèi)，向燒杯中加

入5ml~10ml濃硫酸（A.1.1）或濃硝酸（A.1.2）,靜置反應(yīng)12h或電熱板加熱3h；

b）向燒杯中加入約20ml實(shí)驗(yàn)用水，靜置1h,去除上清液，重復(fù)4~6次直至樣品清澈。

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A.4.1.2.1.2微波硝酸消解法

操作步驟如下：

a）搖勻硅藻樣品，吸取5ml~10ml至離心管內(nèi)，3000r/min下離心5min,棄去上清液后將離

心管內(nèi)的沉淀物轉(zhuǎn)移至消解管內(nèi)。

注：如果采集的樣品中有水草、苔鮮等物質(zhì)，宜振蕩樣品瓶使附著的硅藻脫落。使用移液器吸取所需樣品后，再用

銀子取少許水草、苔薛等基質(zhì)加入消解管。

b）在消解管內(nèi)加入10ml濃硝酸，蓋好消解管的蓋，放入微波消解儀，消解程序如下：

1）5min~1（）min內(nèi)升溫至90℃,消解5min；

2）5min~10min內(nèi)升溫至140℃,消解5min；

3）2min內(nèi)升溫至160℃~17040f消解20min。

c）消解完成后，將樣品冷卻至室溫。

A.4.1.2.2樣品的洗滌

將預(yù)處理后的樣品在3000r；min下離心5min,棄去上清液。加入實(shí)驗(yàn)用水反復(fù)沖洗后再次離心，

重復(fù)5~7次，至懸液早中性。離心并棄夫上清液，在離心管內(nèi)加入約為樣品體積1/3的無水乙醇（A.I.5）,

分散混勻制成樣品懸液備用。

A.4.I.2.3永久封片制作

操作步驟如下：

a）用二甲苯（A.1.3）浸泡加拿大樹膠（A.1.7）或用甲苯（A.1.4）浸泡硅藻膠（A.I.7）,使樹膠

或硅藻膠變?yōu)轲こ頎钜后w；

b）將載玻片和蓋玻片洗凈'擦干，干燥備用；

c）振蕩裝有硅藻樣品的離心管，使硅藻樣品懸浮；

d）用移液器吸取適當(dāng)體積硅藻懸液，如100N~200印加在蓋玻片上，室溫干燥或置于電熱板上

溫?zé)岣稍?，溫度不宜過高；

e）在載玻片中間加2~4滴黏稠狀的封片膠（A.1.7）,將蓋玻片上涂有硅藻樣品的一面向下蓋在

封片膠上，宜使封片膠均勻擴(kuò)散到整張蓋玻片上；

f）于室溫下冷卻干燥或于電熱板上溫?zé)岣稍?，待完全冷卻,干燥后，刮去多余的樹膠即可鏡檢。

g）每個(gè)視野宜有10~15個(gè)硅藻個(gè)體,如果視野內(nèi)個(gè)體數(shù)過多或過少，重新調(diào)整取樣量，稀釋或

濃縮樣品后重新封片。

注：可參照各類封片膠的使用說明浸泡^口封片。

A.4.1.2.4種類鑒定

將硅藻封片置于10x100倍顯微鏡（A.2.5）下，滴加顯微鐐浸沒油（A.I.6）觀察，計(jì)數(shù)至少400

個(gè)細(xì)胞，鑒定至屬或種，優(yōu)勢種塔定到種。

注：光學(xué)顯微鏡下形態(tài)特征難以鑒定的種類，可通過掃描電子顯微鏡鑒定。

A.4.2定量樣品

A.4.2.1藻類預(yù)處理

取全部著生藻類樣品濃縮、沉淀后，用水定容至20ml~50向（根據(jù)不同樣品中生物個(gè)體的密度調(diào)

整定容體積），充分搖勻后，取0.1ml試樣置于浮游生物計(jì)數(shù)框中鑒定計(jì)數(shù)。

9

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A.4.2.2藻類鑒定

在10x40倍顯微鏡下，將藻類鑒定至屬或種，其中優(yōu)勢種須鑒定至種。如有大量硅藻出現(xiàn)，則參

照A.4.1.2處理。

A.4.2.3藻類計(jì)數(shù)

參照HJ1216中相關(guān)要求執(zhí)行。

A.4.2.4結(jié)果計(jì)算

采樣點(diǎn)位中著生藻類的密度按照公式（A.1）計(jì)算：

(A.1)

VoxAP

式中：M—單位面積上著生藻類的細(xì)胞數(shù)量，cells/cmz；

小一試樣中看生藻類的細(xì)胞數(shù)量，cells；

V?！R檢吸取試樣的體枳，ml；

V一卷生藻類樣品定容體積，ml；

4p------采樣面積，cm2。

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附錄B

（資料性附錄）

底棲動物測定結(jié)果計(jì)算

附錄B給出了底棲動物測定結(jié)果計(jì)算公式。底棲動物的密度按照公式（B.1）計(jì)算：

N產(chǎn)_xC_(B.1)

式中：M單位面積中底棲動物的個(gè)體數(shù)，個(gè)/m?；

AM-采樣面積，m2；

nb底棲動物總個(gè)體數(shù)，個(gè)；

樣品挑揀比例，％。

底棲動物的生物量按照公式（B.2）計(jì)算：

Mb—--(B.2)

Ir

式中：M—單位面積中底棲動物的生物量,g/m2；

Ai-米樣面積,；

m\r-底棲動物總生物量g；

樣品挑揀比例，％。

II

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附錄c

（資料性附錄）

IBI指數(shù)評價(jià)方法

C.1建立參照狀態(tài)

按照4.2.3建立評價(jià)區(qū)域的參照狀態(tài)。除參照點(diǎn)位以外的監(jiān)測點(diǎn)位歸為受損點(diǎn)位，以受損點(diǎn)位樣本

建立的狀態(tài)為''受損狀態(tài)二

C.2建立候選參數(shù)清單

選擇國內(nèi)外常用生物指數(shù)并結(jié)合監(jiān)測區(qū)域?qū)嶋H情況，建立候選參數(shù)清單，通常包括物種豐度、物

種多樣性組成、耐污能力、攝食類群和習(xí)性等5類生物指數(shù)。設(shè)定這些參數(shù)的預(yù)期壓力響應(yīng)趨勢。

C.3篩選核心參數(shù)

依次開展候選參數(shù)值分布的范圍分析、判別能力分析和冗余度分析，篩選核心參數(shù)。

C.3.1參數(shù)值分布范圍分析

分析候選參數(shù)值的分布范圍，剔除以下兩類參數(shù)：

a）分布范圍較小，對環(huán)境壓力的響應(yīng)區(qū)間較小，敏感度不足；

b）在參照點(diǎn)位樣本中，參數(shù)自身變化性過高。

C.3.2判別能力分析

采用箱線圖法，比較參照點(diǎn)位和受損點(diǎn)位參數(shù)值的四分位距（25%~75%分位數(shù)的范圍，俗稱箱

體），按照四分位距的重疊情況賦分：

a）四分位距無重疊（參見圖C.la）），賦分3；

b）四分位距部分重疊（參見圖C.lb））,但各自中位數(shù)都在對方四分位距范圍以外，賦分2；

c）只有1個(gè)中位數(shù)在對方四分位距范圍之內(nèi)（參見圖C.lc）和圖C.ld）），賦分1；

d）各自中位數(shù)均在對方四分位距范圍之內(nèi)（參見圖C.lc）），賦分0。

賦分22時(shí)，表明參數(shù)具有環(huán)境壓力判別能力，用于分析。

賦分<2時(shí)，表明參數(shù)的環(huán)境壓力判別能力不足，予以剔除

C.3.3冗余度分析

C.3.1、C.3.2篩選出的參數(shù)做相關(guān)性分析，在相關(guān)系數(shù)r>0.75的參數(shù)中,選擇保留信息量相對較

大和重要性較強(qiáng)的參數(shù)作為核心參數(shù)。

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中位數(shù)

圖c.i匚箱線圖賦分法示意圖

C.4構(gòu)建生物完整性指數(shù)

C.4.1

指數(shù)計(jì)算

采用比值法統(tǒng)一核心'參數(shù)的量綱。

與環(huán)境壓力負(fù)相關(guān)的核心參數(shù)（反向參數(shù)）統(tǒng)一量綱后的值（Is）按照公式（C.1）計(jì)算。

/-/Tx10（C.1）

=O/E-IT

式中：/s—核心'參數(shù)/統(tǒng)一量綱后的值；

I。~~核心參數(shù)/的實(shí)測值；

/T——核心參數(shù)I的臨界值，取核心參數(shù)/的5%分位數(shù)；

/-:——核。慘數(shù)/的期望值，取核心參數(shù)/的95%分位數(shù)；

10—為使/s的數(shù)值基本分布范圍轉(zhuǎn)換為0~10之間而設(shè)置的常數(shù)。

與環(huán)境壓力正相關(guān)的核心參數(shù)（正向參數(shù)）統(tǒng)一量綱后的值（人）按照公式（C.2）計(jì)算。

7-/0xlO（C.2）

/S=T/T_/E

式中：/s―核心參數(shù)/統(tǒng)一量綱后的值；

/T——核心參數(shù)/的臨界/直，取核心參數(shù)/的95%分位數(shù)；

/o—核心參數(shù)I的實(shí)測值；

h一核心參數(shù)I的期望情，取核心參數(shù)I的5%分位數(shù)

10—為使/s的數(shù)值基本分布范圍轉(zhuǎn)換為0~10之間而設(shè)置的常數(shù)。

若人＞10,按10計(jì)；若人＜0,按0計(jì)。

統(tǒng)一量綱后的核心參數(shù)分值之和與核心參數(shù)數(shù)量的比值即為1小值.

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C.4.2分級評價(jià)

可以采用以下2種方法劃分生物完整性指數(shù)評價(jià)等級：

a）參照點(diǎn)位IBI值的25%分位數(shù)法：大于25%分位數(shù)的一等代表狀態(tài)最優(yōu)，對小于25%分位數(shù)

的分布范圍4等分，分別代表不同的狀態(tài)；

b）所有點(diǎn)位IBI值的95%分位數(shù)法：以95%分位數(shù)為最佳值，對低于該值的分布范圍5等分，

分別代表不同的狀態(tài)，靠近95%分位數(shù)的一等分代表點(diǎn)位狀態(tài)最優(yōu)。

IBI評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)劃分等級為5級，由高到低分別為優(yōu)秀、良好、中等、較差、很差。

注：參照點(diǎn)位IBI值的25%分位數(shù)法宜用于可確定參照點(diǎn)位的情況，所有點(diǎn)位IBI值的95%分位數(shù)法宜用于難以

確定參照點(diǎn)位，采用最優(yōu)狀態(tài)法確定參照狀態(tài)的情況。

C.5驗(yàn)證

為檢驗(yàn)評價(jià)方法的有效性，建立參照點(diǎn)位和受損點(diǎn)位IBI值的箱線圖。當(dāng)賦分值琥時(shí)方法有效。

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附錄D

（資料性附錄）

水生生物評價(jià)分級參照值

水生生物評價(jià)分級參照值見表D.lo

表D.1水生生物評價(jià)分級參照值

分級優(yōu)秀良好中等較差很差

BMWP

BMW吃146三73<BMWP<11037<BMWP<73BMWP<37

（可涉水河流）110BMWP<146

BMWP

43<BMWP<65BMWP<22

（不可涉水河流）BMWP>8665<BM\VP<8622<BMWP<43

BIBI<3.93.9<BI<5.45.4<BI<7.07.0<Bl<8.5BI>8.5

BPIBPI<0.10.1<BPI<0.50.5<B?I<1.51.5<BPI<5BPI>5

CDICDI<3030<CDI<5050<CDI<6565<CDI<80CDI>80

H”>3.02.0<W<3.01.0<W<2,00<W<1.0H=0

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附錄E

（資料性附錄）

底棲動物BMWP科級記分列表

表EJ為底棲動物BMWP科級記分列表。

表E.1底棲動物BMWP科級記分列表

類群科記分

蜉據(jù)科Ephcrncridae,河花蜉科Potanianthidae,細(xì)裳蜉科Lcptophlcbiidac,扁蜉科

Hcpiagcmidac，短絲蜉科Siphlonuridac,古絲蜉科Siphluriscidae，長爪蜉科

蜉蠟?zāi)縀phemeroptera

Mcirciopodidae,褶緣蜉科Palingcniidac,多脈蜉科Polymiiarcyidae，徵蜉科

Prosopistomaiidae,寡脈螺科Oligoneuriidae，等蜉科konychidac,越南蜉科

Vietnaircllidae,晚蜉科Tcloganodidac

精科Perlidae,大Pteronarcyidae,綠木^4Chloroperlidae,卷植科Leuctridae,

稹翅目Plccoplcru網(wǎng)精科Perlodidae,黑演科Capniidae,扁特科Pcltoperlidae,刺禧科Styloperlidac,

帶植科Tacnioptcrygidae10

半翅目Hemiptera蓋蜻科Aphelocheiridae

原石蛾科Rhyacophilidae,石蛾科Phryganeidae,瘤石蛾科Goeridae,長角石城科

Leptoceridae,沼石蛾科Limnephilidae,舌石蛾科Glossosomatidae,鱗石蛾科

毛翅目TrichopteraLepidosiomatidae,細(xì)翅石蛾科Molannidae,擬石蛾科Phiyganopsychidae,毛石蛾

科Sericostomatidae,劍石蛾科Xiphocentronidae,齒角石蛾科Odontoceridae,烏石

蛾科Uenoidae,準(zhǔn)石蛾科Limnocentropodidae,鉤翅石蛾科Helicopsychidae,短石

蛾科Brachycentridae,貝石蛾科Beraeidae,螯石蛾科Hydrobiosidae

雙翅目Diplera幽蚊科Chaoboridac,網(wǎng)蚊科Blcpharoccricac

鞘翅目Coleoptera扁泥甲科Psephenidae

脈翅目Neuroptera水蛉科Sisyridae

簾蛤目Veneroida球期科Sphaeriidae

蜉蟠目Ephemeroptera小Ephemereliidae

殖翅目Plecoptera叉稹科Ncmouridae

角石蛾科Stenopsychidae,等翅石摭科Philopoiamidae,畸距石蛾科Dipseudopsidae,

毛翅目Trichoptera

弓石蛾科Arctopsychidae,枝石蛾科Calamoceratidae

雙翅目Diptera大蚊科Tipulidae8

鞘翅目Coleoptera溪泥甲科Elmidae,泥甲科Dryopidae,沼甲科Scirtidae,毛泥甲科Ptilodactylidae

廠翅目Mcgaloplcra齒蛉科Corydalidac

鱗翅目Lepidoptera螟蛾科Pyralidae

色螟科Calopterygidae，絲螺科Lestidae，麗！9科Amphipterygidae，溪境科

蜻蜓目OdonataEuphaeidae,綜螃科Synlestidae,蜓科Aeshmdae,春蜓科Gomphidae,大蜓科

Cordulegastridae,偽靖科Corduliidae,大靖科Macromiidae,蜻科Libellulidae

十足目Decapoda溪蟹科Potamidae,匙指蝦科Atyidae,長臂蝦科Palaetnonidae

中腹足目Mesogastropoda短溝蜷科Semisulcospiridae

貽貝目Mytiioida貽貝科Mytilidac

7

蜉端目Ephemeroptera細(xì)蜉科Caenidae,四節(jié)蜉科Baetidae,新蜉科Neoephemeridae

小石蛾科Hydroptilidae,徑石蛾科Ecnomidae,多距石蛾科Polycentropodidae,蝶

毛翅目Trichoptera

石蛾科Psychomyiidae

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續(xù)表

類群科記分

雙翅目Diptera擬網(wǎng)蚊科D