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文檔簡(jiǎn)介
一、工作簡(jiǎn)況
(一)任務(wù)來源與項(xiàng)目編號(hào)
為規(guī)范和統(tǒng)一實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩遺傳質(zhì)量控制的具體操作,建立實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤
山樹鼩遺傳質(zhì)量控制技術(shù)規(guī)范,結(jié)合目前尚無實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩遺傳質(zhì)量控制國(guó)
家標(biāo)準(zhǔn)及地方標(biāo)準(zhǔn),有必要制定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩遺傳質(zhì)量控制地方標(biāo)準(zhǔn)。
本標(biāo)準(zhǔn)由廣西壯族自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局下達(dá)的2021年第二批廣西地方標(biāo)
準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目:《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩第4部分:遺傳質(zhì)量控制》(序號(hào):
2021-2015)。
(二)主要起草單位
本標(biāo)準(zhǔn)由廣西中醫(yī)藥大學(xué)負(fù)責(zé)起草完成。
(三)主要起草人員名單
主要起草人員名單如下:
研制人員姓名職務(wù)/職稱專業(yè)所在單位
項(xiàng)目負(fù)責(zé)人冷靜教授免疫學(xué)廣西中醫(yī)藥大學(xué)
蘇傲蕾講師中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)廣西中醫(yī)藥大學(xué)
唐海波副研究員預(yù)防獸醫(yī)學(xué)廣西中醫(yī)藥大學(xué)
張麗峰副教授免疫學(xué)廣西中醫(yī)藥大學(xué)
黃正團(tuán)高級(jí)實(shí)驗(yàn)師動(dòng)物學(xué)廣西中醫(yī)藥大學(xué)
主要參加人員肖健教授免疫學(xué)廣西中醫(yī)藥大學(xué)
楊慶利研究員免疫學(xué)廣西中醫(yī)藥大學(xué)
運(yùn)晨霞教授免疫學(xué)廣西中醫(yī)藥大學(xué)
梁亮工程師微生物學(xué)廣西中醫(yī)藥大學(xué)
曹穎穎助理研究員預(yù)防獸醫(yī)學(xué)廣西中醫(yī)藥大學(xué)
二、編制標(biāo)準(zhǔn)意義
樹鼩目前劃歸為攀鼩目(Scandentia)樹鼩科(Tupaiidae)樹鼩屬。屬于國(guó)家保護(hù)
的有益的或者有重要經(jīng)濟(jì)、科學(xué)研究?jī)r(jià)值的陸生野生動(dòng)物。從解剖學(xué)分析,樹鼩
1
的免疫系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的組織形態(tài)特征與靈長(zhǎng)類高度相似。滇西樹
鼩全基因組測(cè)序已完成,通過與多個(gè)物種基因組比較分析進(jìn)一步證實(shí)了樹鼩與靈
長(zhǎng)類親緣關(guān)系最為接近。樹鼩與人類在生理機(jī)能、生化代謝和基因組等方面的相
似性遠(yuǎn)高于大鼠、小鼠、土撥鼠等常用嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。樹鼩的許多分子和細(xì)胞
結(jié)構(gòu)近似人類,同時(shí)樹鼩具有個(gè)體小,易于操作,性成熟時(shí)間比較短,飼養(yǎng)方法
簡(jiǎn)單且繁殖較快,價(jià)格相對(duì)便宜等優(yōu)點(diǎn)。此外樹鼩已被證實(shí)可感染多種人類相關(guān)
病毒,包括EB病毒、乙肝病毒及丙型肝炎病毒等。因此樹鼩有望代替靈長(zhǎng)類動(dòng)
物作為某些人類重大疾病研究的動(dòng)物模型,具有廣泛的應(yīng)用前景。
瑤山亞種(T.b.yaoshanensis)是廣西的一個(gè)特色物種資源,主要分布在廣
西金秀,是具有重要開發(fā)潛力的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物?,幧絹喎N樹鼩屬于樹鼩的一個(gè)亞種,
目前沒有關(guān)于瑤山樹鼩遺傳質(zhì)量控制方面的標(biāo)準(zhǔn),本項(xiàng)目解決了瑤山樹鼩規(guī)范化
繁殖生產(chǎn)控制管理,規(guī)定了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩遺傳分類及封閉群的遺傳質(zhì)量標(biāo)
準(zhǔn)。為瑤山樹鼩的遺傳質(zhì)量控制提供了標(biāo)準(zhǔn)。
三、標(biāo)準(zhǔn)編制及研究起草過程
(一)標(biāo)準(zhǔn)前期工作
2013年以來課題先后承擔(dān)相關(guān)課題:廣西科研條件建設(shè)與開發(fā)利用研究課
題《廣西瑤山亞種樹鼩資源實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究與開發(fā)基地》(編號(hào):廣西科技基礎(chǔ)
條件平臺(tái)建設(shè)14-91-03);《廣西瑤山亞種樹鼩近交系培育和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化的研
究》(編號(hào):桂科攻1347003-6)。課題開展了廣西瑤山亞種樹鼩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化培
育及種質(zhì)資源基地基礎(chǔ)建設(shè):建立規(guī)范化實(shí)驗(yàn)樹鼩飼養(yǎng)繁殖設(shè)施、設(shè)備,研究實(shí)
驗(yàn)瑤山亞種樹鼩實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化和資源保存技術(shù)和方法,建立資源基地。
(二)標(biāo)準(zhǔn)研究過程
廣西瑤山亞種樹鼩資源實(shí)驗(yàn)動(dòng)物化研究與開發(fā)基地立項(xiàng)建設(shè)以來,課題組收
集整理本基地及國(guó)內(nèi)外已有實(shí)驗(yàn)樹鼩質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、技術(shù)規(guī)程和相關(guān)技術(shù)資料。研究
分析國(guó)內(nèi)外各類標(biāo)準(zhǔn)制定的背景、指導(dǎo)原則、動(dòng)物等級(jí)劃分和質(zhì)量控制參數(shù)設(shè)置
的依據(jù),研究分析我國(guó)發(fā)布執(zhí)行的地方標(biāo)準(zhǔn)與現(xiàn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)架構(gòu)上的異
同點(diǎn),分析比較國(guó)內(nèi)國(guó)外標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)規(guī)程對(duì)實(shí)驗(yàn)樹鼩質(zhì)量控制要求的異同點(diǎn)。
收集整理我們基地及我國(guó)實(shí)驗(yàn)樹鼩已有研究成果,到實(shí)驗(yàn)樹鼩其它的生產(chǎn)機(jī)
構(gòu)和一些省市相關(guān)實(shí)驗(yàn)機(jī)構(gòu)(如云南的中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所、中國(guó)
科學(xué)院昆明動(dòng)物研究所)等進(jìn)行實(shí)地調(diào)研,開展廣西瑤山亞種樹鼩飼養(yǎng)管理、微
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生物學(xué)、寄生蟲學(xué)、遺傳學(xué)、病理學(xué)、配合飼料和環(huán)境條件等方面的各項(xiàng)指標(biāo)和
參數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)化研究,為標(biāo)準(zhǔn)制定提供數(shù)據(jù)。以實(shí)驗(yàn)瑤山亞種樹鼩的標(biāo)準(zhǔn)化為目的,
綜合大量基礎(chǔ)數(shù)據(jù)并結(jié)合實(shí)際操作中質(zhì)量控制方面存在的不足和近年來實(shí)驗(yàn)動(dòng)
物國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)在執(zhí)行過程中暴露出的問題,提出實(shí)驗(yàn)瑤山亞種樹鼩標(biāo)準(zhǔn)制定思路和
基本原則以及相關(guān)指標(biāo)和參數(shù)的設(shè)置范疇。
本課題通過收集、整理和研究,補(bǔ)充了影響實(shí)驗(yàn)樹鼩質(zhì)量的各種基礎(chǔ)數(shù)據(jù)的
工作基礎(chǔ)上,確定了制定標(biāo)準(zhǔn)的指導(dǎo)思想和基本原則。編制小組對(duì)取得的數(shù)據(jù)進(jìn)
行全面整理,根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,確定了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩的術(shù)語和定義、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
瑤山樹鼩的馴化、飼養(yǎng)、繁殖的方法及注意事項(xiàng),并在編制過程中咨詢了內(nèi)行專
家,對(duì)收到的反饋意見進(jìn)行分析、采納、修改,形成了本標(biāo)準(zhǔn)的研究稿。
四、標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)后到目前的工作進(jìn)展情況
《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩第4部分:遺傳質(zhì)量控制》于2021年10月立項(xiàng)進(jìn)行
制定,按照《廣西壯族自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)定》要求,課題組2021年10月
26日,確定廣西中醫(yī)藥大學(xué)副校長(zhǎng)冷靜教授為編制組的總負(fù)責(zé)人,同時(shí)成立了
標(biāo)準(zhǔn)編制小組,進(jìn)行了任務(wù)分工。并對(duì)本標(biāo)準(zhǔn)的研究稿反復(fù)研究討論,檢閱查新
國(guó)內(nèi)外的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)更新情況,并咨詢了中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院/北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生
物學(xué)研究所樹鼩種質(zhì)資源中心的代解杰和孫曉梅兩位研究員相關(guān)的樹鼩遺傳質(zhì)
量控制更新情況,兩位研究員對(duì)本標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行電話及書面的交流溝通與指導(dǎo)。提出
了標(biāo)準(zhǔn)研究稿中,出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩、實(shí)驗(yàn)瑤山樹鼩等概念混繞不清,指導(dǎo)
我們明確的其定義:整個(gè)標(biāo)準(zhǔn)都統(tǒng)一為瑤山樹鼩即可,瑤山樹鼩屬于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
建議我們大標(biāo)題名稱確定為《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩第4部分:遺傳質(zhì)量控制》,
但具體內(nèi)容定義寫瑤山樹鼩,不加實(shí)驗(yàn)動(dòng)物前綴即可。另外,也建議我們只寫封
閉群瑤山樹鼩的遺傳質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)即可,不涉及到近交系等資料信息,課題組認(rèn)真思
考后,做了對(duì)應(yīng)的修改與完善并形成了本標(biāo)準(zhǔn)的征求意見稿,并討論優(yōu)選了10
名國(guó)內(nèi)均為正高級(jí)的優(yōu)秀專家作為征求意見的對(duì)象,目前已發(fā)給或準(zhǔn)備發(fā)給國(guó)內(nèi)
的相關(guān)專家進(jìn)行函審。共得的10位專家的積極回應(yīng),答應(yīng)幫忙審閱,征集專家
意見正在順利推進(jìn)中。
五、意見征集情況及修改說明
準(zhǔn)備開始。
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六、標(biāo)準(zhǔn)審訂情況
尚未開始。
七、標(biāo)準(zhǔn)編寫原則及確定標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容的論據(jù)
(一)標(biāo)準(zhǔn)編寫原則
1.遵循《中華人民共和國(guó)標(biāo)準(zhǔn)化法》等法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)。
2.本標(biāo)準(zhǔn)的格式和編寫方法執(zhí)行GB/T1.1-2009的規(guī)定。
3.本標(biāo)準(zhǔn)的制定力求準(zhǔn)確、系統(tǒng),內(nèi)容與當(dāng)前云南省滇西樹鼩的遺傳質(zhì)量
控制地方標(biāo)準(zhǔn)緊密結(jié)合,同時(shí)根據(jù)瑤山樹鼩實(shí)際差異,對(duì)遺傳質(zhì)量控制中存在的
問題進(jìn)行修訂與改善,重視實(shí)際可操作性。
(二)標(biāo)準(zhǔn)編寫依據(jù)
1.制定本標(biāo)準(zhǔn)的目的是規(guī)范和統(tǒng)一實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩遺傳質(zhì)量控制的具體
操作,建立廣西瑤山亞種樹鼩資源基地。
2.本標(biāo)準(zhǔn)的編寫以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩遺傳質(zhì)量控制的高效性、安全性生產(chǎn)
高質(zhì)量的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩為基本依據(jù)。
八、標(biāo)準(zhǔn)主要技術(shù)內(nèi)容
(一)范圍
本標(biāo)準(zhǔn)列出了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物瑤山樹鼩遺傳分類、近交系及封閉群的遺傳質(zhì)量標(biāo)
準(zhǔn)。
(二)規(guī)范性引用文件
GB14923實(shí)驗(yàn)動(dòng)物哺乳類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的遺傳質(zhì)量控制
(三)主要技術(shù)內(nèi)容及其說明
1.野生瑤山亞種樹鼩來源:野生瑤山亞種樹鼩來源于產(chǎn)地-廣西金秀大瑤山。
瑤山亞種樹鼩生活習(xí)性:瑤山亞種樹鼩的外形非常像松鼠,善于攀緣樹木,
行動(dòng)很敏捷。多活動(dòng)于山地、平原谷地的森林或林緣灌木林地區(qū),也可見于村寨
附近的灌叢。樹鼩食性雜,以昆蟲為主食,其次是小型哺乳動(dòng)物和甜果。清晨和
傍晚是樹鼩覓食的高潮期,進(jìn)食時(shí),它們都會(huì)用前面的雙爪子抓住食物啃食,同
時(shí)發(fā)出清脆、快速的嗒吱聲,進(jìn)食后常常舔舐雙爪,表現(xiàn)出類似“洗臉”和“洗
手”的動(dòng)作。樹鼩體內(nèi)的分泌的尿液、唾液含有的氣味在領(lǐng)土行為上發(fā)揮著重要
的作用,雄樹鼩的體液物質(zhì)以及領(lǐng)土行為是由雄激素所產(chǎn)生控制的??s小生活空
間、增加同性別個(gè)體數(shù)量可使樹鼩應(yīng)激性增強(qiáng)而發(fā)生角斗,導(dǎo)致使其體重下降,
雄性樹鼩會(huì)出現(xiàn)性行為減退,血象、骨髓象各類細(xì)胞均升高。
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樹鼩易受驚,對(duì)環(huán)境非常敏感的動(dòng)物,外界環(huán)境發(fā)生刺激,樹鼩即刻處于高
度緊張狀態(tài)。如果這種緊張狀態(tài)延續(xù)時(shí),樹鼩體重會(huì)減輕,臭腺發(fā)育不正常,雄
性個(gè)體的睪丸會(huì)縮小,睪丸位置也會(huì)發(fā)生改變,甚至因衰竭而死亡。處于妊娠階
段的雌性樹鼩如果受到過度驚嚇,會(huì)引起流產(chǎn)、早產(chǎn)、難產(chǎn)。如果哺乳階段的雌
性樹鼩受到驚嚇,則極有可能造成乳腺分泌上的障礙,或拒絕哺乳,甚至因臭腺
功能的喪失而咬食仔樹鼩。
2.野生瑤山亞種樹鼩實(shí)驗(yàn)室馴化飼養(yǎng)籠:不銹鋼樹鼩籠(380*260*300mm),
每籠后面帶PVC休息箱(200*100*140mm),四層沖洗式(4*5套籠)。
3.實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)環(huán)境:普通開放環(huán)境動(dòng)物房,裝有空調(diào)和排風(fēng)扇,房間備用
除濕機(jī)??刂骗h(huán)境條件:成年瑤山樹鼩飼養(yǎng)室內(nèi)溫度控制在15~25℃,室內(nèi)濕
度控制在45~70%。天晴時(shí)可將窗口打開但必須確保紗窗關(guān)閉;若陰天則采用風(fēng)
機(jī)進(jìn)行間斷性通風(fēng);晚上關(guān)閉。每天150w日光燈人工光照12h(7:30~19:30)。
室內(nèi)禁止任何人為的響動(dòng),開關(guān)門必須最大限度的減少噪音。飼養(yǎng)員在室內(nèi)手機(jī)
調(diào)為振動(dòng)并且禁止接聽和撥打。注意觀察記錄樹鼩飼養(yǎng)房?jī)?nèi)的溫度、濕度、通風(fēng)
情況、氨濃度變化及飼養(yǎng)密度等。
4.馴化飼養(yǎng)
4.1個(gè)人防護(hù):野生瑤山樹鼩的病原微生物不確定性,為了飼養(yǎng)人員的安全,
因此飼養(yǎng)員必須做好個(gè)人防護(hù)。進(jìn)入工作區(qū)前必須穿戴好自己的防護(hù)裝備,其包
括工作服、頭套、口罩、一次性薄膜手套以及深筒水靴。
4.2飼養(yǎng)馴化過程:新野生瑤山樹鼩主要是蘋果等果蔬為主,新野生瑤山樹
鼩剛回來的第一周主要喂蘋果、梨、蘿卜、西瓜、黃瓜等果蔬,在飼料盒中添加
幾克飼料,第二周開始逐步增加飼料的量(大概每天每只10g左右),第三、
第四周也一樣逐步增加飼料的量,第五周過渡到飼料為主、果蔬為輔的日常飼養(yǎng)。
飼養(yǎng)馴化過程中特別注意環(huán)境安靜,同時(shí)密切觀察野生瑤山樹鼩的狀態(tài)和吃食狀
況,有特殊的情況要及時(shí)調(diào)整飼養(yǎng)馴化進(jìn)度。
4.3日常飼養(yǎng)管理
瑤山樹鼩日常飼養(yǎng):樹鼩基礎(chǔ)日糧是自由采食購自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物
研究所的配合飼料及蘋果、梨、蘿卜、西瓜、黃瓜等果蔬;飼喂時(shí)間早上8:00~
10:00,喂日常飼料(25g/只);下午14:30~15:00蘋果等果蔬(40g/只),
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15:00~15:30日常飼料(15g/只)。飼喂的量應(yīng)充分滿足每只瑤山樹鼩正常的新
陳代謝,切忌浪費(fèi),增加不必要的成本。定時(shí)定量給與樹鼩食物,盡量降低樹鼩
因飼喂時(shí)間和量不同所造成的應(yīng)激,以保障樹鼩正常的生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖。按需
供給純凈水,每天按時(shí)更換。
4.4日常衛(wèi)生管理
盛料槽必須保證清潔衛(wèi)生無污染而且用優(yōu)氯凈液浸泡清洗(2~3次/周)。蘋
果用高錳酸鉀液或優(yōu)氯凈液浸泡10分鐘后清洗干凈,切塊飼喂。每次喂飼料前
將剩余飼料倒出,加入新料(同時(shí)做食欲記錄);蘋果飼喂后若有剩余須撿出。
每天早上清掃糞便完成后飼喂;至少每周(最好每天)對(duì)地面進(jìn)行噴霧消毒一次;
每月對(duì)飼養(yǎng)房進(jìn)行徹底消毒一次。
4.5樹鼩飼養(yǎng)籠的清洗消毒
飼養(yǎng)人員每個(gè)月逐一對(duì)飼養(yǎng)籠至少進(jìn)行1次徹底的清洗消毒,在整個(gè)過程中
飼養(yǎng)人員必須穿戴好工作服、帽子、口罩、橡膠手套、深筒水靴以及防水衣。將
瑤山樹鼩轉(zhuǎn)移至清洗消毒好的飼養(yǎng)籠。工作人員相互配合將飼養(yǎng)籠取下并轉(zhuǎn)移至
清洗消毒室。對(duì)飼養(yǎng)籠進(jìn)行無死角的清洗。清洗完畢后將飼養(yǎng)籠放入消毒池浸泡
30分鐘以上。消毒液的配制:84消毒液按2%濃度配比后浸泡飼養(yǎng)籠,過氧乙酸
液0.5%濃度配比后浸泡飼養(yǎng)籠。飼養(yǎng)籠浸泡后再次用清水徹底清洗。最后將飼
養(yǎng)籠放至儲(chǔ)存間備用。飼養(yǎng)架于房間內(nèi)用抹布擦洗干凈后用三氯異氰尿酸按
1:1000~1:2000的濃度進(jìn)行噴霧消毒。
4.6篩選基礎(chǔ)種群
瑤山亞種種樹鼩選擇體況好無傷殘,被毛光亮,母樹鼩乳頭大且均勻,公樹
鼩睪丸明顯,另外還要注意不選擇有下列情況的樹鼩作為種用:被毛臟亂、無光
澤或脫毛的樹鼩;雌樹鼩體況過于消瘦或肥胖,體重偏離正常范圍(160g~210g)
的母樹鼩;骨盆腔狹窄的母樹鼩;雄樹鼩陰莖過短或隱睪的公樹鼩。
4.7結(jié)果與分析
4.7.1野生瑤山亞種樹鼩實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)的成活情況
2014~2016年期間,我們?cè)趶V西金秀大瑤山捕獲野生瑤山亞種樹鼩152只,
有6只是因?yàn)椴蹲交蛘哌\(yùn)輸圖中受傷,到實(shí)驗(yàn)很快死亡。剩余的146只經(jīng)過一個(gè)
多月的馴化飼養(yǎng),野生瑤山亞種樹鼩成活有135只:其中雄性67只、雌性68
只。野生瑤山亞種樹鼩成活率達(dá)到96%,經(jīng)過馴化飼養(yǎng)后的野生瑤山亞種樹鼩體
6
重穩(wěn)妥,基本極少出現(xiàn)死亡。
說明相對(duì)于野外,實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)提供的食物、環(huán)境能滿足瑤山亞種樹鼩的需求。
經(jīng)過4個(gè)月實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)馴化,野生樹鼩逐漸適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室喂食及飼養(yǎng)條件,整體體
重基本趨于平穩(wěn)。
4.7.2瑤山亞種種樹鼩基礎(chǔ)種群的篩選
瑤山亞種種樹鼩基礎(chǔ)種群的篩選是以建立瑤山亞種種樹鼩封閉群為建群目
標(biāo),2016年我們從野生馴化樹鼩篩選出瑤山亞種種樹鼩封閉群基礎(chǔ)種群數(shù)量為
152只,2017年3月抽樣檢測(cè)用了6只,2018年飼養(yǎng)過程中出現(xiàn)過疾病死亡11
只,2019新引入61只,目前種群規(guī)模為196只(雄性90只、雌性106只),
符合封閉群數(shù)量不能小于25對(duì)的要求;基礎(chǔ)種群足夠大可以有效地保持野生瑤
山亞種樹鼩遺傳的多樣性,能保存各種有價(jià)值或潛在有價(jià)值的基因,但成本投入
巨大;基礎(chǔ)種群者過小成本投入較小,但不排除有生物醫(yī)學(xué)價(jià)值的性狀隨著基因
的純和而被剔除。因此,基礎(chǔ)種群的大小應(yīng)綜合各種因素,建立最佳方案。
5實(shí)驗(yàn)瑤山亞種樹鼩的繁殖生長(zhǎng)的研究
5.1繁殖籠:8個(gè)不銹鋼樹鼩籠(400*550*600mm),每籠右側(cè)帶有一個(gè)PVC
材質(zhì)的休息箱(250*250*180mm),對(duì)待產(chǎn)的母樹鼩,在其巢箱內(nèi)放入高壓滅
菌過的稻草,供其做窩產(chǎn)仔及保溫。
5.2配種
根據(jù)籠子大小我們的瑤山樹鼩采用1:1的雌雄比例交配繁殖。選種好瑤山
樹鼩,把公樹鼩和母樹鼩從飼養(yǎng)籠一起移到繁殖籠中,母樹鼩懷孕后繁殖籠中待
產(chǎn),移走公樹鼩;2-6月份期間若是配對(duì)合籠一個(gè)月后不懷孕則拿出公母樹鼩單
獨(dú)飼養(yǎng),清理消毒繁殖籠1周后從新挑選公樹鼩和母樹鼩進(jìn)行配對(duì)籠,其余月份
期間則是配對(duì)合籠兩個(gè)月后不懷孕從新配種合籠。剛開始配種合籠時(shí)要密切觀察
有無異常表現(xiàn),若有異常,則應(yīng)及時(shí)采取妥善處理措施。選配不當(dāng)者及時(shí)調(diào)配,
對(duì)咬傷情況早發(fā)現(xiàn)、早治療,平時(shí)并向獸醫(yī)報(bào)告。
5.3懷孕檢查
雌雄瑤山樹鼩合籠后,每周按時(shí)稱重,若體重連續(xù)兩周增加10g以上,腹部
觸診可觸及腹部膨隆,初步判斷為母樹鼩懷孕。體重連續(xù)增加的母樹鼩,用手觸
摸檢查2-3次以確定母樹鼩懷孕妊娠,檢查發(fā)現(xiàn)出母樹鼩懷孕后雌雄分籠,留母
樹鼩在繁殖籠中待產(chǎn)。
5.4種樹鼩的飼養(yǎng)管理
7
在樹鼩日常飼養(yǎng)管理的基礎(chǔ)上,配種合籠、妊娠期和哺乳期樹鼩飼喂的基礎(chǔ)
飼料、蘋果等果蔬要根據(jù)個(gè)體差異酌情增加飼喂量。下午16:30~17:30增加飼喂
面包蟲5-10g/天。做好分娩前準(zhǔn)備,樹鼩懷孕期45d~50d,分娩前10天左右
應(yīng)將棉布或稻草放入暗盒。
5.5仔樹鼩的哺乳與管理
仔樹鼩的哺乳:仔樹鼩一般情況下由母樹鼩母乳哺乳幼產(chǎn),每天早晚2次
觀察幼仔情況,若發(fā)現(xiàn)幼仔爬出巢箱,及時(shí)將其放回,以防餓死或凍死;若發(fā)現(xiàn)
有母樹鼩咬死幼仔,則將被咬死的幼仔及時(shí)取出,并立即用清水洗消巢箱,注意
動(dòng)作輕柔,避免驚擾母樹鼩及其他幼仔;若母樹鼩母性不好,連續(xù)咬食幼仔,或
不哺育幼仔,則取出幼仔行母樹鼩被動(dòng)哺乳,并配合喂食配方奶。
仔樹鼩環(huán)境條件的管理:保證樹鼩幼仔成活的關(guān)鍵因素之一就是要全年保持
飼養(yǎng)室溫度在24~27℃,同時(shí)應(yīng)注意夜間保溫;重視飼養(yǎng)室的環(huán)境衛(wèi)生,每天
定時(shí)清潔、消毒籠具,按時(shí)更換、洗消喂食槽及飲水瓶;每天定時(shí)進(jìn)入飼養(yǎng)室喂
養(yǎng)、觀察,減少工作人員的驚擾,保持飼養(yǎng)室內(nèi)安靜。
5.6離乳及繁殖觀察記錄
一般出生40~45天可以離乳,個(gè)別的可以延長(zhǎng)到50天。離乳后離乳當(dāng)天母
仔分籠,可將母樹鼩返回原籠;同一窩仔樹鼩放在同一個(gè)籠中飼養(yǎng)。5~10天后
再將同一籠中的仔樹鼩分籠并編號(hào),進(jìn)行單籠單只飼養(yǎng)。
給所有樹鼩統(tǒng)一編號(hào),記錄雌樹鼩的配種合籠日期、生產(chǎn)日期、每胎產(chǎn)仔數(shù)、
哺育情況及時(shí)間、離乳成活數(shù)、后代雌雄數(shù)量及比例等,同時(shí)注意觀察其飲食情
況、母性好壞等,篩選出適合繁育的種樹鼩,注意在觀察時(shí)動(dòng)作輕柔、安靜,避
免驚擾樹鼩。
5.7結(jié)果與分析
5.7.1懷孕妊娠后母樹鼩體重和飲食的變化
懷孕妊娠后母樹鼩體重的變化:統(tǒng)計(jì)分析了12窩懷孕妊娠母樹鼩,體重最
多增加65.8g,最低25.9g,平均49.25g。懷孕妊娠前二周,體重變化不大,從
懷孕妊娠第三周起,樹鼩體重呈現(xiàn)明顯增加趨勢(shì),到生產(chǎn)前兩周,體重增加更為
顯著,產(chǎn)前一周避免驚擾樹鼩而影響其分娩不稱重。至分娩前最后一次稱重,最
重的215.3g,最輕的168.65g,平均189.68g。
懷孕妊娠后母樹鼩飲食的變化:懷孕的前兩周,孕期母樹鼩食量變化不大,
從第三周開始,孕期母樹鼩食量逐漸增加,產(chǎn)前母樹鼩食量下降。
8
5.7.2受孕和生產(chǎn)情況
經(jīng)過挑選種樹鼩,我們的瑤山種樹鼩配對(duì)合籠共53次,母樹鼩受孕13次,
母樹鼩配種受孕率24.53%,中途流產(chǎn)1只,未見死胎,順利分娩12胎,本試驗(yàn)
期總共產(chǎn)仔42只,每只雌樹鼩受孕1~3次,每窩產(chǎn)仔3~5只,平均3.5只。樹
鼩懷孕期為39~63d,平均46.5d,分娩時(shí)間不固定。出生存活率92.86%,離乳
存活率合計(jì)18只(42.86%,其中雄性8只、雌性10只)。結(jié)果表明瑤山亞種
樹鼩全年都可以配種繁殖,沒有明顯的季節(jié)影響,但是以4~6月繁殖最為集中,
一年可以繁殖三胎。
5.7.3哺乳期觀察結(jié)果:幼仔初生體重為(12.4±1.6)g,剛出生的小樹鼩全
身無毛,閉眼,皮膚呈粉紅色半透明狀,可見大部分內(nèi)臟器官,只會(huì)蠕動(dòng);第5~
6天皮膚變黑,有皺紋;第8~13天長(zhǎng)出黃褐色絨毛;第22~25天睜眼;第27~
30天爬到巢箱外找尋食物;第35~40天可離開母親獨(dú)立生活,此時(shí)可斷奶,分
籠獨(dú)自生活,幼仔離乳時(shí)最重的82.6g,最輕的51g,平均體重為68.67g。
5.7.4瑤山亞種樹鼩微衛(wèi)星DNA的序列特征及遺傳多樣性分析:篩選出16
對(duì)微衛(wèi)星座位,可用于瑤山亞種樹鼩的遺傳多樣性和遺傳變異的研究:有7個(gè)位
點(diǎn)TB2、TB10、TBC1、TBC3、TBC5、TG4和TG19在中緬樹鼩瑤山、滇西亞
種的種群中表現(xiàn)出不同的遺傳多樣性。它們能夠準(zhǔn)確地反映種系的遺傳結(jié)構(gòu)和種
系間的相互關(guān)系,對(duì)用于兩個(gè)亞種的鑒定具有重要意義;11個(gè)多態(tài)位點(diǎn)的研究
表明,分布于廣西金秀大瑤山地區(qū)
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