2025年高考生物復(fù)習(xí)熱搜題速遞之生物技術(shù)與工程（2024年7月）

一,選擇題（共15小題）

1.某研究小組利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將綠色熒光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gta3基因一端，如圖1

所示。實(shí)驗(yàn)得到能正常表達(dá)兩種蛋白質(zhì)的雜合子雌雄小鼠各1只，交配以期獲得Gata3-GFP基因純合

子小鼠。為了鑒定交配獲得的4只新生小鼠的基因型，設(shè)計(jì)了引物1和引物2用于PCR擴(kuò)增，PCR產(chǎn)

物電泳結(jié)果如圖2所示。下列敘述不正確的是（〉

「啟動(dòng)子區(qū)|編碼區(qū)|非編碼區(qū)》

插入前y......|]

大片段

一自動(dòng)子區(qū)顯胎如虬蠲軟非編碼區(qū)

插入后?，......—~_3'小片段

5'

力物3|■物2

圖1圖2

A.翻譯時(shí)先合成Gala3蛋白，再合成GFP蛋白

B.Gala3基因的啟動(dòng)子可同時(shí)控制GFP基因的表達(dá)

C.若用引物1和引物3進(jìn)行PCR,不利于區(qū)分雜合子和純合子

D.2號(hào)條帶的小鼠是野生型，4號(hào)條帶的小鼠是Gata3-GFP基因純合子

2.某同學(xué)擬用限制酶（酶1、酶2、肺3和酶4）、DNA連接酎為工具，將目的基因（兩端含相應(yīng)限制酶

的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)）和質(zhì)粒進(jìn)行切割、連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。限制的的切割位點(diǎn)如圖所示，

下列分析合理的是（）

5'——GAATTC—3*5'——GGATCC—3*5'——CCCGGG—3'5'——AGATCT——3'

3'——CTTAAG——5'3'——CCTAGG-5*3'——GGGCCC—5'3'—TCTAGA-5,

titt

酶1前2陶3萌4

A.可選擇酶3切割質(zhì)粒和目的基因，再用E.coliDNA連接酣連接

B.可選擇隨2和睡4切割質(zhì)粒和目的基因，再用E.coliDNA連接能連接

C.可選擇酶2切割質(zhì)粒、酶4切割目的基因，再用E.coliDNA連接酶連接，連接后的片段仍能被酶2

和髀4切割

D.為「讓重組表達(dá)載體的構(gòu)建合理且高效，可用酶1和酶2切割質(zhì)粒和目的基因，再用T4DNA連接

酶連接

3.地膜的主要成分是聚乙烯，化學(xué)式是（C2H3）no殘留在土壤中的地膜難以被降解，為篩選出高效降解

地膜的細(xì)菌，研究人員進(jìn)行了如圖所示操作。下列說(shuō)法正確的是（）

A.覆蓋地膜的土壤在富集培養(yǎng)前需要進(jìn)行濕熱滅菌處理

B.X培養(yǎng)基以聚乙烯為唯一碳源，屬于選擇培養(yǎng)基

C.降解地膜最高效的是細(xì)菌①，可挑選①中的菌種接種到Y(jié)培養(yǎng)基上

D.Y培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，其pH一般調(diào)至中性或弱酸性

4.下列對(duì)發(fā)酵工程及其應(yīng)用的敘述，正確的有幾項(xiàng)（）

①發(fā)酵工程的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身

②發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是滅菌，特別是發(fā)酵罐必須進(jìn)行嚴(yán)格滅菌

③啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中，酒精的產(chǎn)生積累主要在后發(fā)酵階段完成

④生產(chǎn)檸檬酸需要篩選產(chǎn)酸量高的黑曲霉

⑤用單細(xì)胞蛋白制成的微生物飼料，可通過(guò)發(fā)酵工程從微生物細(xì)胞中提取

⑥可采用基因工程的方法將血紅蛋白基因轉(zhuǎn)入青霉菌中，提高其對(duì)氧的吸收和利用率

A.2項(xiàng)B.3項(xiàng)C.4項(xiàng)D.5項(xiàng)

5.用氨芳青霉素抗性基因（AmpR）、四環(huán)素抗性基因（TetR）作為標(biāo)記基因構(gòu)建的質(zhì)粒如圖所示。用含有

目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的質(zhì)粒，構(gòu)建重組質(zhì)粒，并轉(zhuǎn)化到受體菌中。下列敘述不

正確的是（）

A.若用HindHI酹切，通過(guò)篩選可得到兩種目的基因連入方向的重組質(zhì)粒

B.若用Pvul酶切，在含氨節(jié)青霉素的培養(yǎng)基上形成的菌落一定不含目的基因

C.若用SphI酶切，使用雙抗生素平板篩選即可獲得正確的重組質(zhì)粒

D.若用Seal酶切，可通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)鑒定重組質(zhì)粒構(gòu)建是否成功

6.關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定"（實(shí)驗(yàn)I）和“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定"（實(shí)驗(yàn)1【）的實(shí)驗(yàn)操作，下

列相關(guān)敘述正確的是（）

A.實(shí)驗(yàn)I中，取洋蔥研磨液的上清液，加入等體積冷酒精后析出粗提取的DNA

B.實(shí)驗(yàn)I中，將白色絲狀物直接加入二苯胺試劑中并進(jìn)行沸水浴，用于鑒定DNA

C.實(shí)驗(yàn)II中，PCR實(shí)驗(yàn)所需的微量移液器、槍頭、蒸儲(chǔ)水等必須進(jìn)行高壓滅菌處理

D.實(shí)驗(yàn)II中，采用瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物，加樣前應(yīng)先接通電源

7.黑豬具有耐粗飼、產(chǎn)仔率高、抗病力強(qiáng)等優(yōu)良特征，加之皮薄骨細(xì)、肉質(zhì)優(yōu)、口感佳，因此備受消費(fèi)

者喜愛(ài)。然而，由于黑豬生長(zhǎng)速度慢，幾臨瀕危，急需進(jìn)行種質(zhì)資源保護(hù)。體細(xì)胞核移植技術(shù)因具有繼

承親本完整性狀、實(shí)驗(yàn)周期短、保種效力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)而備受關(guān)注。如圖表示培育克隆豬的流程。下列敘述

錯(cuò)誤的是（）

A.甲豬卵母細(xì)胞去核前，需將其在體外培養(yǎng)至MH期，有助于細(xì)胞核全能性的表達(dá)

B.過(guò)程①可用電刺激或Ca2+載體等方法激活重構(gòu)胚，重構(gòu)胚具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛力

C.過(guò)程②表示胚胎移植，進(jìn)行該過(guò)程前需對(duì)代孕乙豬進(jìn)行同期發(fā)情處理，使生理狀態(tài)相似

D.幼仔豬細(xì)胞核遺傳物質(zhì)絕大部分來(lái)自黑豬，少部分來(lái)自甲豬

8.科學(xué)家為了提高某種果實(shí)的儲(chǔ)藏時(shí)間，從該植物體內(nèi)提取Ersl基因（乙烯受體基因），按照如圖示的流

程將Ersl基因重新導(dǎo)回該植物，使該植物原有Ersl基因的翻譯受到抑制。已知限制酶HpaI切割后為

平末端，XhoI和BamHI切割后露出的黏性末端堿基序列不同，據(jù)圖分析，提取的目的基因PCR時(shí)兩

端需添加的限制酹識(shí)別序列為（）

連接產(chǎn)物—＞農(nóng)桿菌一^植物細(xì)胞轉(zhuǎn)玨因植株

注：LB、RB分別為T(mén)-DNA的左邊界、右邊界

A.目的基因A端添加HpaI的識(shí)別序列，B端添加X(jué)hoI的識(shí)別序列

B.目的基因A端添加X(jué)hoI的識(shí)別序列，B端添加HpaI的識(shí)別序列

C.目的基因A端添加X(jué)hoI的識(shí)別序列，B端添加BamHI的識(shí)別序列

D.目的基因A端添加BamH1的識(shí)別序列，B端添加X(jué)ho1的識(shí)別序列

9.研究發(fā)現(xiàn)三特異性抗體可實(shí)現(xiàn)對(duì)小鼠多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞（MM）的選擇性殺傷，作用機(jī)理如圖所示。下

列敘述錯(cuò)誤的是（）

MM細(xì)胞T淋巴細(xì)胞

注：

一代表促進(jìn)

—1代表抑制

A.用單克隆抗體技術(shù)制備的三種抗體融合可得到三特異性抗體

B.篩選該三特異性抗體時(shí)需使用制備三特異性抗體時(shí)所使月的3種抗原蛋白

C.三特異性抗體通過(guò)T細(xì)胞的活化并釋放細(xì)胞因子提高對(duì)MM的殺傷力

D.三特異性抗體與CD28結(jié)合抑制T細(xì)胞的死亡從而使T細(xì)胞維持一定數(shù)量

10,雙層平板法是對(duì)噬菌體進(jìn)行計(jì)數(shù)的常用方法。具體做法是：在無(wú)菌培養(yǎng)皿中倒入瓊脂含量為2%的培

養(yǎng)基凝固成底層平板后，將瓊脂含量為1%的培養(yǎng)基熔化并冷卻至45?48℃,然后加入敏感指示菌和待

測(cè)噬菌體稀釋?xiě)乙旱幕旌弦?，充分混勻后立即倒入底層平板上形成雙層平板（如圖）。培養(yǎng)一段時(shí)間后，

在雙層培養(yǎng)基的上層會(huì)出現(xiàn)透亮無(wú)菌圓形空斑一一噬菌斑，根據(jù)噬菌斑的數(shù)目可計(jì)算原液中噬菌體的數(shù)

量。判斷下列正確的是（）

菌落聚集體

中?菌星

上層瓊脂

培養(yǎng)基

底層瓊脂

培界基

培養(yǎng)皿底

A.配置好的培養(yǎng)基滅菌后還需要添加緩沖液調(diào)節(jié)pH

B.利用雙層平板法*JT2噬菌體進(jìn)行計(jì)數(shù)，選用的敏感指示菌為酵母菌

C.倒上層平板時(shí)需將培養(yǎng)基冷卻到45?48°C最主要的原因是防止下層固體培養(yǎng)基被液態(tài)化

D.與底層平板相比，上層培養(yǎng)基中瓊脂濃度較低的好處是形成的噬菌斑較大，有利于計(jì)數(shù)

11.自然情況卜，牛的生育率很低，畜牧業(yè)生產(chǎn)上可通過(guò)如圖兩種途徑實(shí)現(xiàn)良種牛的快速大量繁殖。卜列

相關(guān)敘述正確的是（）

雄性牛精子一L受精卵一胚胎試管牛途徑1

卵母細(xì)胞/

雌性牛

雌性牛A典吝型/細(xì)胞核B

處理子宮

卵母細(xì)胞廠“七口

\無(wú)核卯

iR構(gòu)

胚途徑2

雌性牛C―"體細(xì)胞

A.胚胎移植前需要用外源促性腺激素對(duì)雌性牛A與雌性牛B做同期發(fā)情處理

B.途徑1和途徑2過(guò)程中都有胚胎的形成，均為有性生殖

C.途徑2獲得的克隆牛的遺傳性狀完全由雌性牛C決定

D.兩個(gè)途徑中從雌性牛A卵巢內(nèi)取得的卵母細(xì)胞都需要先為外培養(yǎng)至MII再進(jìn)行操作

12.當(dāng)水稻處于高Na+環(huán)境時(shí)，細(xì)胞膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SOS1可借助膜兩側(cè)的H+濃度梯度將Na卡排到細(xì)胞外。

某研究團(tuán)隊(duì)擬構(gòu)建S0S1基因和綠色熒光蛋白基因（GFP）的融合基因轉(zhuǎn)入水稻基因組，以期增強(qiáng)水稻

的抗鹽能力。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

GIGATCC

OOCjGGG

W………-氨基酸序列EcoRI

G|AAnC

（注：FPFPRP（表示引物，限制的的的切位點(diǎn)如圖）

A.水稻通過(guò)特運(yùn)蛋白SOS1以主動(dòng)運(yùn)輸?shù)姆绞綄a+運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞外

B.將SOSI基因插入到表達(dá)載體中不可選用限制酶SmaI和EcoRI

C.檢測(cè)GFP基因是否以正確方向連接到質(zhì)?？捎靡颋i和R2進(jìn)行擴(kuò)增

D.檢測(cè)F2和R2的擴(kuò)增結(jié)果能確定水稻是否為SOSI-GFP基因的純合子

13.一個(gè)抗原往往有多個(gè)不同的抗原決定簇，一個(gè)抗原決定簇只能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺

激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱(chēng)為多抗。為研究巨噬細(xì)胞的作用機(jī)制，科研人員制備了抗巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白

CD14的單克隆抗體，具體方法如圖。卜列說(shuō)法正確的是（）

A.注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對(duì)單抗純度的影響比對(duì)多抗純度的影響大

B.篩選能分泌多種抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞

C.細(xì)胞膜的流動(dòng)性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)

D.③是用鑒別培養(yǎng)基對(duì)融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選，獲得雜交瘤細(xì)胞

14.生物技術(shù)運(yùn)用于戰(zhàn)爭(zhēng)或恐怖活動(dòng)，則后果將更為可怕，下列關(guān)于生物武器及相關(guān)約定的闡述中，錯(cuò)誤

的是（）

A.生物武器與常規(guī)武器相比具有傳染性強(qiáng)、不易被發(fā)現(xiàn)、不受自然條件影響等特點(diǎn)

B.生物武器的類(lèi)型包括致病菌類(lèi)、病毒類(lèi)和生化毒劑類(lèi)等

C.轉(zhuǎn)基因微生物制成的生物武器具有目前人類(lèi)難以預(yù)防和治療的特點(diǎn)

D.我國(guó)對(duì)于生物武器，采取的態(tài)度是不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲(chǔ)存生物武器、并反對(duì)生物武器及其技術(shù)和

設(shè)備的擴(kuò)散

15.毛花貉猴桃為二倍體，果實(shí)大，維生素C含量高。軟棗貉猴桃為四倍體，極耐寒，在-4（rc下可安全

越冬。農(nóng)科所想利用如圖技術(shù)流程培育兼具這兩種猝猴桃優(yōu)點(diǎn)的新品種。下列敘述正確的是（）

6佗驕戕桃§e花環(huán)喉桃原生質(zhì)體雜種細(xì)胞f愈傷組織一叢芽f新品種

軟棗秣猴桃軟棗麻猴桃原牛.質(zhì)體/

A.新品種是通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得的

B.新品種的體細(xì)胞中含有三個(gè)染色體組

C.①處用相關(guān)酶的低滲溶液處理可獲得原生質(zhì)體

D.從愈傷組織到新品種的過(guò)程需要經(jīng)歷低溫篩選

二,解答題（共5小題）

16.生物合成基因簇（BGC）是一類(lèi)非常重要的基因集合類(lèi)型。普遍存在于各類(lèi)生物基因組中，并且發(fā)揮

著重要的代謝和調(diào)控作用。CRISPR/Cas介導(dǎo)的切割可以發(fā)生在任意的DNA位點(diǎn)。阿卡波糖為一種新

型口服降血糖藥，在腸道內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)性抑制葡萄糖或酶，可降低多糖的分解，減緩吸收。已知阿卡波糖生物

合成基因簇全長(zhǎng)大約41kb,克隆阿卡波糠生物合成基因簇過(guò)程如圖所示。回答下列問(wèn)題：

（1）現(xiàn)在常用技術(shù)快速特異性地?cái)U(kuò)增目的基因，利用該方法進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)所需的引物需要滿

足的條件是。

（2）圖1中Cas9酶能催化鍵水解，在構(gòu)建重組DNA時(shí)，通常選擇（填“改

造”或“未改造”）的質(zhì)粒作為載體，經(jīng)過(guò)酶處理后形成重組DNA。為提高獲得重組DNA的效率，下

列需要考慮的因素有（填序號(hào)）。

A.適宜的外界條件

B.目的基因簇和質(zhì)粒濃度

C.DNA連接酶活性

D.質(zhì)粒的純度

（3）酵母菌的純培養(yǎng)一般采月（填培養(yǎng)基名稱(chēng)）培養(yǎng)基。

（4）步驟④進(jìn)行篩選的方法是：o

17.我國(guó)科學(xué)家經(jīng)多年研究，篩選出高產(chǎn)紫杉醉的細(xì)胞，通過(guò)植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可獲得大量紫杉醉，實(shí)現(xiàn)

紫杉醇的工廠化生產(chǎn)。為提高紅豆杉細(xì)胞培養(yǎng)物中紫杉醇的產(chǎn)最，研究人員構(gòu)建紫杉醇合成關(guān)鍵的基因

（Bapt基因）的超表達(dá)載體，并將其導(dǎo)入紅豆杉細(xì)胞，其具體流程如下：

儀平〃［因

5,3'

1111jc

B111Y1111111D

315'

圖1

ponOHP

1

5'Tn(i111111113’5'TTlIIIIIIIII3,

.IIIlIlI.Jllll-

JVI11111I1,I111..1Jq3

A.OHPB.POH

圖3

(1)Bapt基因的獲取：提取紅豆杉的mRNA,并通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄得到其cDNA,利用PCR技術(shù)以圖1中的

cDNA片段為模板擴(kuò)增Bapt基因，擴(kuò)增的前提是,需要的引物有

(從A、B、C、D四種引物中選擇)。上述過(guò)程中，用1個(gè)圖1所示片段產(chǎn)生2個(gè)雙鏈等長(zhǎng)的子代Bapt

基因片段至少要經(jīng)過(guò)次循環(huán)。

(2)構(gòu)建Bapt基因的超表達(dá)載體并將其導(dǎo)入受體細(xì)胞：在超量表達(dá)Bapt基因載體的構(gòu)建中，所用DNA

片段和Ti質(zhì)粒的能切位點(diǎn)(注：圖中所示限制酶切割后形成的黏性末端各不相同)如圖2所示。強(qiáng)啟

動(dòng)子能被識(shí)別并結(jié)合，驅(qū)動(dòng)基因持續(xù)轉(zhuǎn)錄。Ti質(zhì)粒中的T-DNA在培育轉(zhuǎn)基因紅豆杉

中的作用是。為使DNA片段能定向插入T-DNA中，可用PCR技術(shù)在DNA

片段的兩端添加限制酶識(shí)別序列，M、N端添加的序列所對(duì)應(yīng)的限制酶分別是o

(3)構(gòu)建Bapt基因的超表達(dá)載體，需用到相應(yīng)限制酶和DNA連接酶，其中連接酶作用的底物為圖3

中的(填“A”或"B”或"A和B”)。

18.如圖1表示利用生物技術(shù)制備抗X的單克隆抗體的過(guò)程；圖2表示培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答

下列問(wèn)題:

提

取

小

克

隆

抗

體

8

胞①

重組細(xì)

犢牛

◎

母細(xì)胞

采集卵

圖2

,

小鼠

注入

抗原

定的

,將特

和

有

技術(shù)

生物

用的

程所

示過(guò)

圖I所

（1）

的是

其目

以上，

射3次

隔注

內(nèi)間

時(shí)間

一定

需在

的

細(xì)胞

交瘤

的雜

抗體

克隆

的單

泌抗X

能分

，獲得

胞融合

微瘤細(xì)

胞與骨

淋巳細(xì)

的B

理后

疫處

經(jīng)免

（2）將

過(guò)

是通

一次

，另

細(xì)胞

交瘤