主講人：楊雅蘭

副教授項(xiàng)目一原核微生物任務(wù)一：細(xì)菌的形態(tài)和大小微生物檢驗(yàn)廣東省精品在線開(kāi)放課程分析檢驗(yàn)技術(shù)資源庫(kù)AnalyticalTestingTechniquesRepository細(xì)菌任務(wù)一Projectone01

0203

1.4

食品中常見(jiàn)的細(xì)菌041.1細(xì)菌的形態(tài)和大小1.2細(xì)菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu)1.3細(xì)菌的繁殖與群體形態(tài)微生物檢驗(yàn)細(xì)菌的形態(tài)和大小1.1微生物檢驗(yàn)認(rèn)識(shí)細(xì)菌細(xì)菌是單細(xì)胞原核微生物，個(gè)體微小，形態(tài)簡(jiǎn)單，以二等分裂方式繁殖。在自然界中，細(xì)菌分布最廣、數(shù)量最多。微生物檢驗(yàn)1.1細(xì)菌的形態(tài)和大小球狀螺旋狀方形桿狀或梭狀桿狀星星形狀基本形態(tài)其他形態(tài)微生物檢驗(yàn)

1.球菌(coccus）菌體呈球形或近似球形,以典型的二分裂殖方式繁殖,分裂后產(chǎn)生的新細(xì)胞常保持一定的空間排列方式.根據(jù)細(xì)胞分裂的方向及分裂后的各子細(xì)胞的空間排列狀態(tài)不同,可將球菌分為以下幾種:單球菌、雙球菌、鏈球菌、四聯(lián)球菌、八疊球菌、葡萄球菌等。(一)細(xì)菌的形態(tài)和大小微生物檢驗(yàn)(1)單球菌

分裂后的細(xì)胞分散而單獨(dú)存在的球菌.如尿素微球菌(Micrococcusureae)1.球菌單球菌微生物檢驗(yàn)1.球菌

(2)雙球菌

分裂后兩個(gè)球菌成對(duì)排列的為雙球菌.

如肺炎雙球菌(Diplococcuspneumoniae)雙球菌微生物檢驗(yàn)1.球菌

(3)鏈球菌

分裂是沿一個(gè)平面進(jìn)行，分裂后細(xì)胞排列成鏈狀.如乳鏈球菌（Streptococcuslactis）鏈球菌微生物檢驗(yàn)1.球菌

(4)四聯(lián)球菌

分裂是沿兩個(gè)相垂直的平面進(jìn)行，分裂，分裂后每四個(gè)細(xì)胞在一起呈田字形.

如四聯(lián)微球菌（Micrococcustetragenus）四聯(lián)球菌微生物檢驗(yàn)1.球菌

(5)八疊球菌按三個(gè)互相垂直的平面進(jìn)行分裂后，每八個(gè)球菌在一起成立方體形.

如藤黃八疊球菌（Sarcinaureae)

八疊球菌微生物檢驗(yàn)1.球菌

(6)葡萄球菌分裂面不規(guī)則，多個(gè)球菌聚在一起，像一串串葡萄。如金黃色葡萄球菌（Staphylococcusaureus)

葡萄球菌微生物檢驗(yàn)2.桿菌短桿菌長(zhǎng)桿菌梭狀芽孢桿菌微生物檢驗(yàn)鏈狀桿菌單桿菌2.桿菌微生物檢驗(yàn)桿菌細(xì)胞兩端的形態(tài)特征2.桿菌微生物檢驗(yàn)一般情況下,同一種桿菌的寬度比較穩(wěn)定,但它的長(zhǎng)度經(jīng)常隨培養(yǎng)時(shí)間、培養(yǎng)條件的不同而有較大的變化。桿菌舉例：大腸桿菌（Escherichiacoli）枯草芽孢桿菌（Bacillussubtilis）北京棒桿菌（CorynebacteriunPekinensis）2.桿菌微生物檢驗(yàn)3、螺旋菌

螺旋狀的細(xì)菌稱(chēng)為螺旋菌。

根據(jù)其彎曲情況分為：

弧菌：螺旋不滿(mǎn)一圈，菌體呈弧形或逗號(hào)形

例：霍亂弧菌、逗號(hào)弧菌

螺旋菌：螺旋滿(mǎn)2—6環(huán)，螺旋狀

例：干酪螺菌

螺旋體：旋轉(zhuǎn)周數(shù)在6環(huán)以上，菌體柔軟。

例：梅毒密螺旋體(一)細(xì)菌的形態(tài)微生物檢驗(yàn)3、螺旋菌弧菌螺旋體螺旋菌微生物檢驗(yàn)

細(xì)菌的特殊形態(tài)微生物檢驗(yàn)細(xì)菌大小的測(cè)定：(1)測(cè)量：測(cè)微尺(2)長(zhǎng)度單位：微米(μm)(3)表示：球菌：直徑桿菌：寬×長(zhǎng)螺菌：寬、長(zhǎng)、螺距微生物檢驗(yàn)微生物檢驗(yàn)

菌名

直徑或?qū)挕灵L(zhǎng)/

（μm×μm

）乳鏈球菌金黃色葡萄球菌大腸桿菌枯草芽孢桿菌霍亂弧菌0.5~10.8~10.5×(1~3)(0.8~1.2)×(

1.2~3)(0.2~0.6)×(1~3)

細(xì)菌細(xì)胞的大小微生物檢驗(yàn)

細(xì)菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu)1.2微生物檢驗(yàn)一、細(xì)菌的細(xì)胞結(jié)構(gòu)12341234細(xì)胞壁細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)核質(zhì)體Capsule莢膜flagellum鞭毛Pili菌毛germ芽胞5內(nèi)含物Contents細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)細(xì)胞的特殊結(jié)構(gòu)cellwall

cellmembranecytoplasmNucleoplast微生物檢驗(yàn)微生物檢驗(yàn)細(xì)菌的基本結(jié)構(gòu)細(xì)胞壁是位于菌體的最外層，內(nèi)側(cè)緊貼細(xì)胞膜的一層無(wú)色透明，堅(jiān)韌而有彈性的結(jié)構(gòu)。細(xì)胞壁約占細(xì)胞干重的10%—25%。細(xì)胞壁保護(hù)細(xì)胞免受外力損傷,維持菌體外形協(xié)助鞭毛運(yùn)動(dòng)與胞膜一起完成細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換為正常細(xì)胞分裂所必需與細(xì)菌的抗原性．致病性和對(duì)噬菌體的敏感性密切相關(guān)。細(xì)胞壁的功能肽聚糖網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu)細(xì)胞壁基本骨架---肽聚糖微生物檢驗(yàn)細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)：細(xì)胞壁的基本骨架——肽聚糖

肽聚糖：是由N—乙酰胞壁酸（NAM）和N—乙酰葡糖胺（NAG）以及少數(shù)氨基酸短肽鏈組成的亞單位聚合而成的大分子復(fù)合體。肽聚糖單體：是由NAG、NAM、肽尾、肽橋構(gòu)成。②細(xì)胞壁的化學(xué)組成與結(jié)構(gòu)微生物檢驗(yàn)革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌肽聚糖單體革蘭氏陰性細(xì)菌肽聚糖單體細(xì)胞壁的基本骨架——肽聚糖微生物檢驗(yàn)細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁：由肽聚糖和磷壁酸組成

磷壁酸：占40%。G+菌所特有,其主鏈由數(shù)十個(gè)磷酸甘油或磷酸核糖醇組成,有的還有由D—Ala和還原糖組成的側(cè)鏈。

肽聚糖:占30~70%,不同菌種中肽聚糖(肽鏈)組分不同。微生物檢驗(yàn)細(xì)菌細(xì)胞壁的結(jié)構(gòu)革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁：分內(nèi)壁層和外壁層。

內(nèi)壁層：緊貼胞膜,僅由1—2層肽聚糖分子構(gòu)成,占細(xì)胞壁干重5—10%,無(wú)磷壁酸。外壁層：位于肽聚糖層的外部。脂多糖;

脂蛋白、

包括:蛋白質(zhì)層:基質(zhì)蛋白、

外壁蛋白;

磷脂.微生物檢驗(yàn)革蘭氏染色

革蘭染色法是微生物學(xué)中常用的一種染色方法，該染色法由丹麥醫(yī)生Gram于1884年首創(chuàng)，故名。微生物檢驗(yàn)通透性機(jī)制G+菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)致密，脂類(lèi)含量少，乙醇不易透入，反而可使細(xì)胞壁脫水形成一道屏障，阻止染料從細(xì)胞內(nèi)滲出；G-菌細(xì)胞壁較疏松，含脂類(lèi)物質(zhì)多，易被乙醇溶解，使其通透性增大，細(xì)胞內(nèi)的結(jié)晶紫―碘復(fù)合物易被溶解滲出易脫色?；瘜W(xué)機(jī)制G+菌細(xì)胞內(nèi)含大量核糖核酸鎂鹽，與結(jié)晶紫―碘復(fù)合物結(jié)合牢固，另外，其等電點(diǎn)較低，結(jié)合的堿性染料多而牢固，因而染成紫色。微生物檢驗(yàn)結(jié)晶紫初染全部紫色碘液媒染全部紫色乙醇脫色G-菌無(wú)色G+菌紫色

番紅復(fù)染

G-菌紅色

G+菌紫色革蘭染色各步驟時(shí)細(xì)菌的顏色革蘭染色操作步驟微生物檢驗(yàn)革蘭染色操作步驟

鏡檢涂片滴水取菌固定結(jié)晶紫（1min）水洗水洗碘液（1min）

乙醇脫色干燥水洗復(fù)染(1-2min)水洗（20-30S）微生物檢驗(yàn)革蘭染色操作步驟微生物檢驗(yàn)革蘭染色結(jié)果革蘭陰性桿菌革蘭陽(yáng)性鏈球菌微生物檢驗(yàn)革蘭染色結(jié)果微生物檢驗(yàn)涂片的厚薄涂片固定的時(shí)間脫色與染色時(shí)間細(xì)菌菌齡影響革蘭染色結(jié)果的因素微生物檢驗(yàn)可將細(xì)菌分為兩大類(lèi)，是對(duì)細(xì)菌進(jìn)行鑒定的最基本的檢驗(yàn)技術(shù)，可將細(xì)菌分為革蘭陽(yáng)性菌和革蘭陰性菌。兩類(lèi)細(xì)菌抗原性不同。致病性和對(duì)藥物的敏感性均不相同。革蘭染色的意義微生物檢驗(yàn)細(xì)菌細(xì)胞的特殊結(jié)構(gòu)——鞭毛鞭毛的化學(xué)組成：主要由鞭毛蛋白構(gòu)成，還含有少量的多糖、脂類(lèi)和核酸等。鞭毛起源于細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi)側(cè)的基粒。細(xì)胞質(zhì)區(qū)內(nèi)有一個(gè)顆粒狀小體，此小體為基粒，鞭毛自基粒長(zhǎng)出穿過(guò)細(xì)胞壁延伸到細(xì)胞外部。鞭毛的結(jié)構(gòu)：

鞭毛絲鞭毛

鞭毛鉤

基體鞭毛的觀察：電鏡特殊鞭毛染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察半固體穿刺培養(yǎng)從固體培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)判斷一般情況下：菌落形狀大，薄且不規(guī)則，邊緣極不平整，可能有鞭毛。菌落十分圓滑，邊緣平整且相對(duì)較厚，可能沒(méi)有鞭毛。具有鞭毛的細(xì)菌大多是弧菌、桿菌和個(gè)別球菌。微生物檢驗(yàn)鞭毛的著生方式周生微生物檢驗(yàn)菌毛芽胞莢膜細(xì)菌細(xì)胞的特殊結(jié)構(gòu)某些菌體表面存在的短而多的附屬物。纖毛比鞭毛更短、更細(xì)，且又直又硬。數(shù)量很多，不具有運(yùn)動(dòng)功能，但與菌的致病性．吸附等有關(guān)。

概念：某些菌生長(zhǎng)到一定階段，細(xì)胞內(nèi)形成一個(gè)圓形、橢圓形或卵圓形的內(nèi)生孢子，是對(duì)不良環(huán)境有較強(qiáng)抵抗力的休眠體許多細(xì)菌的最外表還覆蓋著一層多糖類(lèi)物質(zhì)，邊界明顯的稱(chēng)為莢膜(capsule)，如肺炎球菌，邊界不明顯的稱(chēng)為黏液層(slimelayer)，如葡萄球菌。莢膜對(duì)細(xì)菌的生存具有重要意義，細(xì)菌不僅可利用莢膜抵御不良環(huán)境;保護(hù)自身不受白細(xì)胞吞噬;而且能有選擇地黏附到特定的細(xì)菌表面上。微生物檢驗(yàn)?zāi)苄纬裳挎叩募?xì)菌種類(lèi)：在桿菌中能形成芽孢的種類(lèi)較多，在球菌和螺旋菌中只有少數(shù)菌種可形成芽孢。產(chǎn)生芽孢的幾個(gè)屬：芽孢桿菌屬梭狀芽孢桿菌屬芽孢乳桿菌屬生孢八疊球菌屬（其中的一個(gè)種）芽孢微生物檢驗(yàn)芽孢的形態(tài)及其在細(xì)胞中的位置：

A近中央

B末端

C中央微生物檢驗(yàn)

細(xì)菌芽孢的各種類(lèi)型微生物檢驗(yàn)芽孢的組成和結(jié)構(gòu)芽孢有多層結(jié)構(gòu)，主要包括孢外壁、芽孢衣、皮層和核心.芽孢的結(jié)構(gòu)芽孢的外壁層厚而致密，主要成分為脂蛋白，通透性差,不易著色。核心含有大量的DNA、RNA、蛋白質(zhì)酶等物質(zhì)，還含有2,6—吡啶二羧酸（DPA）,DPA是芽孢特有的成分。一般以DPA—Ca的形式存在。皮層主要含芽孢肽聚糖、DPA—Ca，皮層體積大，比較致密。芽孢平均含水量低,約40%.微生物檢驗(yàn)芽孢的特性:具有很強(qiáng)的抗熱、抗干燥、抗輻射、抗化學(xué)藥物能力。含水量低、壁厚而致密，通透性差,不易著色。新陳代謝幾乎停止，處于休眠狀態(tài)。一個(gè)芽孢萌發(fā)產(chǎn)生一個(gè)個(gè)體。芽孢的抗熱機(jī)制：目前尚不清楚，但可能與以下因素有關(guān)，如含水量低、壁厚而致密，芽孢中的酶分子量小，比較耐熱。微生物檢驗(yàn)四、細(xì)菌的繁殖和培養(yǎng)（一）繁殖一般為無(wú)性繁殖，二分裂法。同形裂殖：裂殖后形成的子細(xì)胞大小相等。異形裂殖：分裂產(chǎn)生兩個(gè)大小不等的子細(xì)胞。細(xì)菌分裂過(guò)程：①核分裂②形成橫隔壁③子細(xì)胞分離微生物檢驗(yàn)（二）群體形態(tài)1.固體培養(yǎng)菌落：在固體培養(yǎng)基上,由單個(gè)細(xì)胞繁殖形成的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體。菌苔:大量細(xì)胞密集生長(zhǎng),結(jié)果長(zhǎng)成的各“菌落”連接成一片。

(1)平板培養(yǎng)微生物檢驗(yàn)(2)固體斜面培養(yǎng)2.液體培養(yǎng)基